盛 敏，尼 博，趙勝杰*

1.河南省動物疫病預(yù)防控制中心，鄭州 450000；2.中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東 青島 266032

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV）引起的一種急性、烈性傳染病，主要感染豬、牛、羊等偶蹄動物[1]。FMD 是世界動物衛(wèi)生組織所列的必須上報的傳染病，在我國被列為一類傳染病?；疾游镏饕憩F(xiàn)為發(fā)熱、跛行，以口腔、鼻鏡、蹄部、乳房等部位皮膚或黏膜出現(xiàn)水泡和潰爛等癥狀為特征，幼畜可因壞死性心肌炎和出血性腸炎而急性死亡。疫苗免疫接種是當(dāng)前預(yù)防和控制口蹄疫的主要措施，目前廣泛使用的奶?？谔阋咭呙缰饕袦缁钜呙?、基因工程疫苗和合成肽疫苗等，其中以滅活疫苗使用最為廣泛[2]。對規(guī)模奶牛場而言，篩選優(yōu)質(zhì)可靠的口蹄疫疫苗對防控奶牛口蹄疫至關(guān)重要。筆者對河南省奶?？谔阋咭呙邕M行臨床安全性調(diào)查和免疫有效性調(diào)查，以期為奶?？谔阋咭呙绲脑u估和使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材 料

本研究共對7 家疫苗生產(chǎn)企業(yè)的9 個疫苗產(chǎn)品進行臨床免疫安全性調(diào)查和免疫有效性調(diào)查。對298 個奶牛場進行問卷調(diào)查，對7 321 份樣品進行O 型抗體檢測，對7 011 份樣品進行A 型抗體檢測。奶牛血清樣品均在免疫后21～31 d 采集。

1.2 方 法

1）疫苗臨床安全性調(diào)查。采用問卷調(diào)查的方式，從應(yīng)激減奶率、應(yīng)激反應(yīng)率、應(yīng)激發(fā)病率、應(yīng)激死亡率和應(yīng)激流產(chǎn)率5 個方面對7 家疫苗生產(chǎn)企業(yè)的9 個疫苗產(chǎn)品進行臨床免疫安全性調(diào)查。應(yīng)激減奶率=（免疫前3 d 產(chǎn)奶量－免疫后3 d 產(chǎn)奶量）/免疫前3 d 產(chǎn)奶量×100%，應(yīng)激反應(yīng)率=應(yīng)激反應(yīng)動物數(shù)/免疫動物數(shù)×100%，應(yīng)激發(fā)病率=應(yīng)激發(fā)病動物數(shù)/免疫動物數(shù)×100%，應(yīng)激死亡率=應(yīng)激死亡動物數(shù)/免疫動物數(shù)×100%，應(yīng)激流產(chǎn)率=應(yīng)激流產(chǎn)動物數(shù)/妊娠母畜數(shù)×100%。

2）疫苗免疫有效性調(diào)查。采集免疫后21～31 d奶牛血清樣品，進行口蹄疫O 型和A 型抗體檢測，通過統(tǒng)計O 型、A 型抗體個體合格率和場群合格率對疫苗免疫有效性進行評估?？谔阋逴 型抗體檢測采用酶聯(lián)免疫阻斷法，試劑盒購自洛陽萊普生信息科技有限公司，生產(chǎn)批號為TE210501、TE210802，檢測值為S/P 值，S/P 值≥0.4 為陽性，＜0.4 為陰性；口蹄疫A 型抗體檢測采用液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗，試劑盒購自蘭州獸研生物科技有限公司，生產(chǎn) 批 號 為 20210303103 -2、20210423103 -4 和20210802103-4，檢測值為抗體滴度，抗體滴度≥1∶128 為陽性，＜1∶64 為陰性，1∶90 為可疑。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

2021 年共對河南省298 個場次的規(guī)模奶牛場進行口蹄疫疫苗臨床免疫安全性調(diào)查，整體應(yīng)激減奶率為2.78%，應(yīng)激反應(yīng)率為0.38%，應(yīng)激發(fā)病率為0.05%，應(yīng)激死亡率為0，應(yīng)激流產(chǎn)率為0.14%。對7 321 份奶牛血清樣品進行O 型抗體檢測，平均個體合格率和場群合格率分別為90.74%和94.24%；對7 011 份奶牛血清樣品進行A 型抗體檢測，平均個體合格率和場群合格率分別為88.49%和97.54%。

2.2 疫苗臨床免疫安全性調(diào)查情況

1）不同類型疫苗臨床免疫安全性調(diào)查。2021 年河南省奶牛使用口蹄疫疫苗主要為O、A 二價苗和O、A 二價缺失苗，按疫苗類型對調(diào)查和檢測結(jié)果進行分析發(fā)現(xiàn)：O、A 二價苗與O、A 二價缺失苗應(yīng)激死亡率均為0，應(yīng)激減奶率無顯著差異，但O、A 二價苗應(yīng)激反應(yīng)率和應(yīng)激流產(chǎn)率顯著高于O、A 二價缺失苗（表1）。

表1 不同類型口蹄疫疫苗臨床免疫安全性調(diào)查結(jié)果 %

2）不同廠家疫苗臨床免疫安全性調(diào)查。本次調(diào)查共對來自A、B、C、D、E、F、G 共7 家疫苗生產(chǎn)企業(yè)的9 個疫苗產(chǎn)品進行臨床免疫安全性調(diào)查，發(fā)現(xiàn)7 個疫苗廠家應(yīng)激死亡率均為0，應(yīng)激減奶率介于1.07%～5.89%，應(yīng)激反應(yīng)率介于0.25%～0.65%，應(yīng)激發(fā)病率介于0.02%～0.21%，廠家C、G口蹄疫疫苗應(yīng)激流產(chǎn)率為0，其他廠家疫苗應(yīng)激流產(chǎn)率介于0.06%～1.33%（表2）。

表2 不同廠家口蹄疫疫苗臨床免疫安全性調(diào)查結(jié)果 %

3）不同毒株疫苗臨床免疫安全性調(diào)查。7 個廠家的9 種疫苗產(chǎn)品共有4 個毒株構(gòu)成，分別是O/HB/HK/99 株+AF/72 株、O/MYA98/BY/2010 株+Re-A/WH/09 株、OHM/02 株+AKT-Ⅲ株和O/rV-1 株+A/rV-2 株，按疫苗毒株對調(diào)查數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)：不同毒株疫苗應(yīng)激死亡率均為0，應(yīng)激減奶率介于2.24%～2.99%，應(yīng)激反應(yīng)率介于0.21%～0.51%，應(yīng)激發(fā)病率介于0.02%～0.08%，應(yīng)激流產(chǎn)率介于0.007%～0.020%（表3）。

表3 不同毒株口蹄疫疫苗臨床免疫安全性調(diào)查結(jié)果 %

2.3 疫苗免疫有效性調(diào)查情況

1）不同類型疫苗免疫有效性調(diào)查。2021 年河南省奶牛使用口蹄疫疫苗主要為O、A 二價苗和O、A二價缺失苗，按疫苗類型對抗體檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)：O、A 二價苗O 型抗體場群合格率高于O、A 二價缺失苗，但O 型抗體個體合格率、A 型抗體個體及場群合格率均顯著低于O、A 二價缺失苗（表4）。

表4 不同類型口蹄疫疫苗免疫有效性調(diào)查結(jié)果 %

2）不同廠家疫苗免疫有效性調(diào)查。共對A、B、C、D、E、F、G 7 個生產(chǎn)企業(yè)進行免疫有效性調(diào)查，不同廠家疫苗O 型抗體個體合格率介于89.47%～92.86%，場群合格率介于84.62%～100%，不同廠家疫苗A 型抗體個體合格率介于86.60%～93.42%，場群合格率介于93.18%～100%（表5）。

表5 不同廠家口蹄疫疫苗免疫有效性調(diào)查結(jié)果 %

3）不同毒株疫苗免疫有效性調(diào)查。對涉及的O/HB/HK/99 株+AF/72 株、O/MYA98/BY/2010株+Re-A/WH/09 株、OHM/02 株+AKT-Ⅲ株和O/rV-1 株+A/rV-2 株，按疫苗毒株對調(diào)查數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，4 種毒株疫苗O 型和A 型抗體個體合格率分別介于90.09%～93.75%、87.29%～93.92%，場群合格率分別介于86.49%～97.78%、96.00%～100%（表6）。

表6 不同毒株口蹄疫疫苗免疫有效性調(diào)查結(jié)果 %

3 討 論

從疫苗類型來看：臨床安全性方面，O、A 二價苗與O、A 二價缺失苗應(yīng)激死亡率均為0，應(yīng)激減奶率之間無顯著差異，O、A 二價苗應(yīng)激發(fā)病率略低，但應(yīng)激反應(yīng)率和應(yīng)激流產(chǎn)率顯著高于O、A 二價缺失苗；免疫有效性方面，O、A 二價苗O 型抗體場群合格率高于O、A 二價缺失苗，但O 型抗體個體合格率、A 型抗體個體及場群合格率均顯著低于O、A二價缺失苗。

從疫苗廠家來看：臨床安全性方面，7 個疫苗廠家應(yīng)激死亡率均為0，應(yīng)激反應(yīng)率由低到高依次為D、B、A、E、G、C、F，應(yīng)激發(fā)病率由低到高依次為D、A、B、C、E、F、G；廠家A、F 口蹄疫疫苗應(yīng)激減奶率顯著低于其他廠家，廠家C、G 口蹄疫疫苗應(yīng)激流產(chǎn)率為0，其他廠家疫苗應(yīng)激流產(chǎn)率之間無顯著差異，提示養(yǎng)殖場戶可針對免疫牛群生產(chǎn)階段選擇合適疫苗。免疫有效性方面，7 個廠家疫苗O 型和A 型抗體個體及場群合格率均在80%以上，C、D、F 3 個廠家O 型抗體場群合格率為100%，C、D、F、G 4 個廠家A 型抗體場群合格率為100%，不同廠家疫苗免疫保護效果均良好。

從疫苗毒株來看：免疫安全性方面，4 種毒株疫苗應(yīng)激減奶率和應(yīng)激死亡率無顯著差異，O/rV-1株+A/rV-2 株疫苗應(yīng)激反應(yīng)率和應(yīng)激流產(chǎn)率均為最低，O/MYA98/BY/2010 株+Re-A/WH/09 株疫苗應(yīng)激發(fā)病率最低。免疫有效性方面，4 種毒株疫苗O 型和A 型抗體個體及場群合格率均在80%以上，其中O/rV-1 株+A/rV-2 株疫苗O 型和A 型抗體個體合格率均為最高，OHM/02 株+AKT-Ⅲ株疫苗均為最低。

疫苗安全性和有效性受多方面因素的影響，包括疫苗生產(chǎn)工藝、免疫操作和動物健康狀態(tài)等。養(yǎng)殖場（戶）應(yīng)盡量選用大型疫苗廠家生產(chǎn)的疫苗，以降低疫苗生產(chǎn)工藝因素的影響。同時，應(yīng)對免疫家畜進行健康檢查，保證動物在接受免疫時處于健康狀態(tài)，盡可能避免因動物自身狀態(tài)引起過度的免疫應(yīng)激反應(yīng)。此外，應(yīng)按照使用說明書正確使用疫苗，規(guī)范操作，避免人為應(yīng)激因素的產(chǎn)生[3]?？傮w來看，2021 河南省常用奶?？谔阋咭呙缗R床安全性和免疫有效性良好，應(yīng)激反應(yīng)率、應(yīng)激發(fā)病率等免疫副反應(yīng)均處于較低水平，免疫抗體個體合格率和場群合格率均在80%以上。

4 結(jié) 論

從應(yīng)激減奶率、應(yīng)激反應(yīng)率、應(yīng)激發(fā)病率、應(yīng)激死亡率和應(yīng)激流產(chǎn)率5 個方面對7 家疫苗生產(chǎn)企業(yè)的9 個疫苗產(chǎn)品進行臨床免疫安全性調(diào)查的結(jié)果顯示，不同類型、廠家和毒株疫苗臨床免疫安全性有所差異，疫苗總體安全性良好。對所采集的奶牛血清樣品進行口蹄疫O 型和A 型抗體檢測，對疫苗免疫有效性進行了評估，不同類型、廠家、毒株疫苗免疫抗體個體合格率和場群合格率均在80%以上，疫苗免疫效果良好。