王千窈，陳一丹，陳耀欽，葉高涵，姜 斌

(溫州科技職業(yè)學院，浙江 溫州 325000)

犬戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)引起的肝臟急性病毒性疾病，該病是一種重要的人畜共患病[1]。戊型肝炎作為重要的人畜共患病，犬在該病的傳播過程中具有重要的作用，但人們對這種疾病的情況沒有足夠重視。根據研究表明，犬戊型肝炎在我國多個地區(qū)均有流行，并且有逐漸蔓延的趨勢，對動物和人類健康造成嚴重威脅[2-4]。

1 流行病學

目前，對于廣泛造成人類和哺乳動物感染的HEV，屬于戊型肝炎病毒科正戊型肝炎病毒屬A種的一種單股正鏈RNA病毒[5]。HEV只有一種血清型，但基于HEV核苷酸序列的系統(tǒng)進化分析可以將其分為8種基因型，其中基因1型和2型僅見于人類患者，主要流行于亞州，非洲和拉丁美洲；基因3、4型在全球范圍內廣泛流行，屬于人畜共患病病毒；基因5、6型僅在野豬中發(fā)現；基因7、8型分別在單峰駱駝和雙峰駱駝中發(fā)現[6]。早期我國境內主要的HEV流行型為基因1型，現轉變?yōu)槿双F共患病的基因4型[7-8]，并且研究證實動物與人群中流行的基因4型病毒具有較高的同源性[7]。

HEV作為一種可經消化道感染的病毒，糞-口傳播是其主要的傳播途徑[9]。病毒進入消化道后，在肝臟中大量增值并隨膽汁進入腸道，最后隨糞便排出體外[10]。易感動物因接觸糞便污染的食物和水源等而感染，形成循環(huán)傳播的形式。據報道，戊型肝炎在衛(wèi)生和經濟較差的發(fā)展中國家呈廣泛散發(fā)、并時有爆發(fā)模式；在發(fā)達國家中呈散發(fā)模式，主要為動物源性感染為主[11-13]。英國犬HEV抗體血清流行率為0.8%[14]，荷蘭為18.52%[1]，韓國為28.2%[15]，中國不同地區(qū)為12%～48.15%[3,16-18]。研究發(fā)現，HEV在犬身上的感染較為普遍，特別是對于流浪犬和管理較差的家養(yǎng)犬，病毒感染率更高，調查數據表明犬 HEV的發(fā)生和管理有著密切的關系[19]。因此與感染犬只密切接觸的人員更加具有被感染的風險。研究發(fā)現，與普通人群相比，經常接觸犬的獸醫(yī)和養(yǎng)犬場工作人員抗HEV抗體陽性率明顯更高[2,20]。

2 臨床癥狀

感染HEV的不同動物出現的潛伏期、臨床癥狀和疾病發(fā)展過程不盡相同。犬只感染HEV通常是一種急性、自限性疾病。通常感染犬表現為非特異性癥狀或亞臨床感染狀態(tài)，癥狀不明顯。出現臨床癥狀的動物可見消瘦、精神不振、食欲降低或不食，黃疸等；可能伴有肝臟腫大，肝區(qū)觸診疼痛，腹圍增大且有波動感的腹水癥狀，嚴重患犬出現消化道出血等并發(fā)癥。

人感染戊型肝炎潛伏期平均為40 d(10-60 d)。兒童多為亞臨床狀態(tài)，癥狀不明顯。成人感染的臨床癥狀為：發(fā)病急，多伴有發(fā)熱、乏力、嘔吐、惡心、上腹疼痛，常見膽汁淤積，并伴發(fā)黃疸，多數見肝腫大。感染孕婦病情嚴重，易發(fā)展為肝功能衰竭，尤其妊娠晚期病死率高，可見流產和死胎[21]。

3 診斷方法

犬感染HEV后，病毒進入肝臟后大量增殖，在免疫系統(tǒng)和HEV的共同作用下損傷肝細胞，從而導致代謝和消化系統(tǒng)的障礙而引起相關的肝臟病理和血液生化檢查的變化。盡管犬體內的病毒復制機制尚不清楚，但是有研究證明犬肝細胞可以支持基因3型HEV完成整個感染周期[19]。

由于犬感染HEV后通常表現為亞臨床癥狀，血清生化檢查和肝臟病理變化也不具有特異性。因此使用實驗室病原診斷方法對于該病的診斷具有重要的意義。實驗室病原診斷方法中的ELISA 方法和 RT-PCR方法，具有操作方便、檢測速度快且準確率較高的優(yōu)點[22]。因此成為常用的犬戊型肝炎的病原診斷方法。

3.1血液生化檢查 HEV進入肝臟細胞導致細胞裂解或破損，此時肝細胞生化酶大量進入血液，血液生化檢測可見谷丙轉氨酶(ALT)和谷草轉氨酶(AST) 兩項指標高于正常值。同時，大量的肝細胞破損導致膽紅素代謝障礙可見直接膽紅素(DBil)和間接膽紅素(IBil)升高；膽汁代謝障礙可使堿性磷酸酶(ALP)升高。伴有嚴重并發(fā)癥的患犬肝功能嚴重受損，可見白蛋白(ALB)顯著降低，引發(fā)血液膠體滲透壓下降并伴發(fā)漏出性腹水。

3.2病理變化 犬感染HEV后，病毒對肝細胞造成明顯的損傷并出現明顯的纖維化趨勢。光鏡檢查發(fā)現肝細胞發(fā)生病毒性肝炎的常見病理變化，包括單核細胞、淋巴細胞等炎性細胞浸潤、肝細胞氣球樣病變、肝細胞變性，匯管區(qū)膽管增生、纖維結締組織增生[23]。長期大量的纖維組織增生導致肝硬化的發(fā)生。電鏡檢查可見，肝細胞內細胞器發(fā)生異常變化，包括內質網擴張，線粒體破壞，糖原減少，偶見HEV病毒顆粒存在于胞漿基質中[24]。

3.3酶聯免疫吸附試驗(ELISA) 酶聯免疫吸附試驗(ELISA)是目前用于檢測血清中HEV抗體最常用的方法。ELISA檢測方法有兩種，分別為適用于檢測抗原的夾心ELISA法和適用于檢測IgG或IgM抗體的間接ELISA方法[22]。兩種方法中，間接ELISA檢測方法使用更為廣泛。在人類HEV感染的病例中，檢測血清中的IgM，IgG抗體為診斷急性戊型肝炎的重要指標。第二代間接ELISA檢測方法使用ORF2和ORF3的表達產物作為抗原，用于急性戊型肝炎的檢測。使用商品化的人戊型肝炎抗體檢測試劑盒能使檢測變的更加方便和快速。目前國內外有多種商品化的間接ELISA試劑盒用于戊型肝炎的抗體檢測，但專用于檢測動物血清中抗體的較少。研究表面，使用ORF2的表達產物作為抗原的商品化試劑盒，可以用于犬和豬戊型肝炎抗體的檢測[17,25]。

3.4RT-PCR RT-PCR法也是目前檢測HEV的一種常用方法。該方法可以用于檢測血清和糞便樣本中的HEV RNA，具有靈敏度高，特異性強、操作方便、快速等優(yōu)點。目前，采用簡并引物擴增的方法，可以建立基因1-4型HEV的檢測。該方法在檢測HEV感染的同時還可以對HEV基因進行分型，更加有利于流行病學的研究。同時，對于國內主要流行的基因1型和基因4型HEV，采用特殊的簡并引物擴增的方法，可以有效的提高檢測的靈敏性[26]。

4 防治措施

由于犬戊型肝炎是一種重要的人畜共患病，因此對于該病的防治不僅是要保證動物健康，而且具有重大的公共衛(wèi)生學意義。犬戊型肝炎的防治工作，應當從傳染病流行病學的幾個關鍵環(huán)節(jié)來進行，包括控制好傳染源，切斷傳播途徑和加強免疫。

4.1控制好傳染源 家養(yǎng)寵物犬與人類的密切接觸，可能作為一種人感染HEV的潛在傳染源[27]。寵物犬感染HEV后多數沒有臨床表現，容易被忽視，因此更加具有潛在傳播HEV的危險。寵物主人應加強寵物的犬戊型肝炎的監(jiān)測，對患病動物采取消毒、隔離和治療手段，可以有效的防治犬戊型肝炎的傳播。

研究表明，流浪犬HEV感染率明顯高于家養(yǎng)的寵物犬[28]。因此，建議政府應加強對流浪犬的監(jiān)管，以減少犬戊型肝炎病毒的傳播。養(yǎng)犬家庭加強寵物犬的飼養(yǎng)管理，減少與流浪動物的接觸。同時獸醫(yī)監(jiān)管部門應監(jiān)測當地犬戊型肝炎的發(fā)病情況，并以病原學檢測為主，以便做好分析和預警。

4.2切斷傳播途徑 HEV主要通過糞-口途徑進入消化道感染動物，排泄物是造成糞-口途徑感染的主要傳染源。因此，對于寵物犬的科學規(guī)范管理能有效的切斷病毒的傳播。寵物主人需要做到訓練寵物犬不隨意排便，并能及時清理排泄物不對環(huán)境造成污染；為寵物飼喂合格的商品化犬糧，不飼喂生食或不合格動物內臟可以有效的減少感染。寵物主人和動物密切接觸人員要有良好的個人衛(wèi)生習慣并盡量不食用生食。

對于存在有流浪犬感染HEV散發(fā)的區(qū)域，發(fā)現感染的動物以后，應當及時采取措施。對感染動物及動物產品等進行隔離、消毒或無害化處理。同時做好環(huán)境、水源等方面的消毒工作，避免因此造成HEV的廣泛性傳播。

4.3加強免疫 盡管目前還沒有研制出動物HEV的成熟的疫苗制品，但是廈門大學研制的HEV239疫苗已經于2012年在國內上市[11]，可以有效的預防人戊型肝炎的發(fā)生。作為一種重要的人畜共患性疾病，動物HEV疫苗的研制對于戊型肝炎的防控有重大意義。加快動物HEV的研制和生產，盡早實現疫苗的廣泛接種，能切實有效地降低戊型肝炎造成的疾病負擔和公共衛(wèi)生安全風險[29-30]。

5 結論

戊型肝炎作為一種重要的人畜共患性疾病，多項研究表明可以在犬體內檢測到HEV抗體存在，提示犬可能是人類感染HEV的動物傳染源[15,31-33]。我國是一個戊型肝炎高發(fā)國家，在全國各省、市、自治區(qū)均有戊型肝炎病例發(fā)現[7,20,34]。隨著我國寵物經濟的發(fā)展，寵物犬通常被認為是家庭中的一員并且與人類密切接觸，增加了戊型肝炎的傳播風險。所以犬戊型肝炎的流行和防控效果會對公共衛(wèi)生安全造成顯著的影響。對于犬戊型肝炎必須采取綜合防控的措施，建立完善的流浪犬管理體系，持續(xù)監(jiān)測寵物和與動物密切接觸人員的HEV感染情況，以了解與戊型肝炎病毒傳播有關的公共衛(wèi)生問題。人和動物應保持良好的衛(wèi)生習慣，獸醫(yī)和與動物密切接觸的工作人員應做好自身防護工作，做好免疫預防。另外，應該加強對于犬戊型肝炎的流行病學和防控措施的研究，從而更好地防控該病，減少人畜傳播的可能，消除公共衛(wèi)生安全風險。