任明 保積英 賈晨陽 張尉華，4

(1青海大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科，青海 西寧 810001；2青海省人民醫(yī)院心內(nèi)科；3寶雞市中心醫(yī)院老年心腦血管病科；4吉林大學(xué)第一醫(yī)院心內(nèi)科)

高原的低氧氣候環(huán)境可直接影響人類的身體健康，對(duì)于人體的重要組織器官〔1～3〕、關(guān)鍵的調(diào)節(jié)分子及遺傳物質(zhì)〔4，5〕、腸道菌群的種類及數(shù)量均產(chǎn)生影響〔6～8〕，高原從各個(gè)方面影響人體的身體健康〔9，10〕。高原習(xí)服是機(jī)體適應(yīng)高原環(huán)境的過程，是機(jī)體為了適應(yīng)高原低氧低壓環(huán)境而發(fā)生的相應(yīng)變化〔11〕。平原人移居高原后會(huì)因海拔高度、暴露時(shí)間、氣候條件、登高速度、營(yíng)養(yǎng)狀況、個(gè)體差異等眾多因素的不同產(chǎn)生不同的適應(yīng)結(jié)果〔12〕。越來越多的研究認(rèn)為能量代謝對(duì)生活在高原低氧環(huán)境中的物種的生存起著重要作用〔13〕，認(rèn)為高原習(xí)服中物質(zhì)代謝及能量代謝的有效調(diào)節(jié)在高原習(xí)服過程中是最為關(guān)鍵的〔14～17〕。

肝臟中含有大量的參與脂肪酸代謝的酶類及其上游轉(zhuǎn)錄因子，乙酰輔酶A羧化酶(ACC)、棕櫚?；D(zhuǎn)移酶(CPT)分別是脂肪酸合成與氧化的關(guān)鍵酶〔18，19〕。AMP激活的蛋白激酶(AMPK)也是表達(dá)于肝臟中的一類蛋白激酶，參與脂肪酸代謝調(diào)控。ACC是AMPK的靶蛋白，AMPK被發(fā)現(xiàn)可以使ACC失活，從而使丙二酰輔酶(Malonyl)-A含量降低，使Malonyl-A對(duì)CPT-1的抑制作用減弱，使脂肪酸的β-氧化過程增強(qiáng)。脂肪酸代謝在缺氧環(huán)境中對(duì)碳水化合物起著很重要的補(bǔ)充作用〔20〕。研究證實(shí)，低氧刺激會(huì)激活A(yù)MPK，進(jìn)而對(duì)下游靶蛋白實(shí)現(xiàn)調(diào)控功能，最終維持機(jī)體能量平衡。在低氧環(huán)境下參與脂肪酸代謝的相關(guān)蛋白主要受到海拔高度及暴露時(shí)間的影響。本研究設(shè)置了低、中、高海拔及不同暴露時(shí)間，同時(shí)在以往實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上增加樣本含量，動(dòng)態(tài)觀察大鼠肝組織中參與肝臟脂肪酸相關(guān)指標(biāo)的水平變化，探討中高海拔地區(qū)不同暴露時(shí)間下肝臟脂肪酸代謝特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料 健康成年SPF級(jí)雄性SD大鼠110只，體質(zhì)量168～206 g，購(gòu)于西安站夢(mèng)生物科技有限公司。酶標(biāo)儀、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)儀、蛋白轉(zhuǎn)膜儀購(gòu)自Bio-Rad公司。凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)自上海天能有限公司。漩渦混合器購(gòu)自海門市其林貝爾儀器制造有限公司。RT-PCR儀購(gòu)自ABI公司。電泳儀購(gòu)自北京六一公司。電熱恒溫培養(yǎng)箱購(gòu)自上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司?；瘜W(xué)發(fā)光成像儀系統(tǒng)購(gòu)自上海勤翔科學(xué)儀器有限公司。大鼠酮體(KB)、游離脂肪酸(FFA)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成有限公司。重組Anti-CPT1A抗體、山羊抗兔IgG H&L、重組Anti-Acetyl Coenzyme A Carboxylase抗體、Anti-AMPK alpha 1抗體、Anti-低氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1 alpha抗體購(gòu)自Abcam公司。beta-Actin Loading Control antibody Mouse MAb購(gòu)自義翹神州有限公司。

1.2動(dòng)物分組與處理 根據(jù)飼養(yǎng)環(huán)境不同分為對(duì)照組(n=10)及中、高海拔組(中、高海拔組又分別分為1、3、7、15、30 d組5個(gè)亞組各10只)。對(duì)照組在西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)中心動(dòng)物房(海拔400 m)飼養(yǎng)30 d；中、高海拔1、3、7、15、30 d組分別在青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院高原醫(yī)學(xué)中心動(dòng)物房(海拔2 260 m)和瑪多縣人民醫(yī)院(海拔4 200 m)飼養(yǎng)1、3、7、15、30 d。各組大鼠居住和飲食條件均一致，室溫25℃，空氣流通，攝食及飲食自由，有專業(yè)人員給予定期消毒，飼養(yǎng)過程中無動(dòng)物死亡。飼養(yǎng)的各環(huán)節(jié)均遵循各動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心要求。本研究經(jīng)青海大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并按照國(guó)家衛(wèi)生部動(dòng)物管理?xiàng)l例進(jìn)行。大鼠分別在達(dá)到實(shí)驗(yàn)規(guī)定的暴露時(shí)間后，給予水合氯醛腹腔注射麻醉，從心臟抽取血液4 ml于抗凝管內(nèi)，用低溫高速離心機(jī)3 000 r/min離心10 min，取上清液于凍存管內(nèi)，置于-80℃冰箱內(nèi)；隨后取大鼠適量肝組織置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3血漿ALT、NEFA及肝組織中KB測(cè)定 采用ALT試劑盒、KB試劑盒和NEFA試劑盒分別檢測(cè)血漿中的ALT、NEFA及肝組織中的KB，嚴(yán)格按照試劑盒操作步驟進(jìn)行。

1.4AMPK、ACC-1、CPT-1、HIF-1α mRNA檢測(cè) 將肝組織在液氮急速冷凍后研磨成粉，取50 mg加入含有Trizol試劑1 ml的離心管中，混勻，室溫放置15 min以上。加入200 μl的氯仿，顛倒混勻后室溫放置5 min。4℃、12 000 r/min離心15 min。吸取上清至新的離心管中，加入等體積異丙醇混勻，-20℃放置60 min。4℃、12 000 r/min離心15 min去上清液。加入75%乙醇洗滌，4℃、12 000 r/min離心15 min去上清液，用RNase free的水溶解沉淀。核酸蛋白定量?jī)x檢測(cè)RNA濃度，瓊脂糖電泳檢測(cè)RNA完整性。取總RNA 800 ng，加入1 μl引物(0.1 μg/μl)、10 μl 2×TS Reaction Mix、1 μl TransScript@RT/RI Enzyme Mix、1 μl TransScript@RT/RI Enzyme Mix、加RNase-free水至總體積為20 μl。輕輕混勻，25℃反應(yīng)10 min，85℃反應(yīng)5 s取出。將合成cDNA置于-80℃保存，后續(xù)熒光定量檢測(cè)的樣本cDNA使用RNase-free Water按照1∶1稀釋進(jìn)行反應(yīng)。引物序列見表1。PCR體系包括Evagreen 2×qPCR Master Mix(10 μl)、上下游引物(各0.6 μl)、cDNA(2 μl)、無RNA酶水(6.8 μl)。PCR反應(yīng)條件：預(yù)變性95℃ 10 min；變性95℃，5 s，40個(gè)循環(huán)；退火/延伸60℃，30 s，40個(gè)循環(huán)。 待測(cè)基因引物序列β-Actin：正向5′-CCCATCTATGAGGGTTACGC-3′,反向5′-TTTAATGTCACGCACGATTTC-3′;ACC1：正向5′-TTGGACAACGCCTTCAC-3′,反向5′-GCAGCCCATTACTTCATCA-3′;CPT：正向5′-AGGTCGGAA GCCCATGTTGTA-3′,反向5′-GCTGTCATGCGCTGGAAGTC-3′;AMPK：正向5′-AACCTGAAAACGTCCTGCT-3′,反向5′-CGCTGCTCCAGATGTCTAC-3′;HIF：正向5′-GCATCTCCACCTTCTACCC-3′,反向5′-TCTTTCCTGCTCTGTCTGG-3′。

1.5AMPK、ACC-1、CPT-1、HIF-1α蛋白檢測(cè) 肝組織樣本研磨后，取100 mg加入到預(yù)冷的1.5 ml離心管中，加入400 μl RIPA裂解液，充分混勻，4℃放置60 min后，4℃下12 000 r/min離心15 min收集上清。二喹啉甲酸(BCA)測(cè)定蛋白濃度。樣本加入適量5×十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)上樣緩沖液(含β-巰基乙醇)，100℃沸水加熱處理5 min，使蛋白充分變性，12 000 r/min離心5 min，取上清備用。預(yù)染蛋白Marker 9 μl，樣品每孔上樣蛋白50 μg。電泳結(jié)束后，轉(zhuǎn)膜時(shí)采用恒壓轉(zhuǎn)膜，電壓100 V，使用0.45 μm的聚偏氟乙烯(PVDF)膜。AMPK、β-actin(內(nèi)參)轉(zhuǎn)膜時(shí)間為60 min，CPT-1、HIF-1α轉(zhuǎn)膜時(shí)間為90 min，ACC-1轉(zhuǎn)膜時(shí)間為150 min。使用含5%脫脂奶粉的封閉液，封閉轉(zhuǎn)印膜1 h，然后TBST洗3次，5 min/次。加一抗4℃孵育過夜后加入二抗，室溫孵育1 h，漂洗3次，將顯色液A液和B液混合，加2 ml至膜上，用ChemiScope mini化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè)、拍照。使用Quantity One軟件分析蛋白條帶灰度值，以目的蛋白條帶灰度值與內(nèi)參條帶灰度值比值表示目的蛋白相對(duì)表達(dá)量。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS23.0軟件進(jìn)行單因素方差分析、LSD-t或TamhaneT2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1不同海拔習(xí)服過程中大鼠血漿ALT及FFA含量 中海拔和高海拔暴露期間，各組血漿中ALT、FFA含量與對(duì)照組相比無顯著差異(P>0.05)。見表1。

2.2不同海拔習(xí)服過程中大鼠肝臟HIF-1α、AMPK、ACC1、CPT-1 mRNA表達(dá) 與對(duì)照組比較，HIF-1α mRNA在中、高海拔暴露的1、3、7、15 d顯著升高；與對(duì)照組比較，AMPK mRNA在中海拔暴露的1、3、7、30 d及高海拔暴露的1、3、7、15、30 d顯著降低；高海拔暴露第15天顯著低于中海拔暴露第15天；與對(duì)照組比較，ACC1 mRNA在中、高海拔暴露的1、3 d顯著升高，且高海拔暴露1、3 d顯著高于中海拔暴露1、3 d；與對(duì)照組比較，CPT-1 mRNA在中海拔暴露的3 d顯著升高，15 d顯著降低；在高海拔暴露的3 d顯著升高，第7、15天顯著降低；高海拔暴露3 d顯著高于中海拔的3 d，高海拔暴露7、15 d顯著低于中海拔7、15 d(P<0.05)。見表1。

表1 各組血漿ALT、FFA含量及AMPK、ACC-1、CPT-1、HIF-1α mRNA表達(dá)水平比較

2.3不同海拔習(xí)服過程中大鼠肝臟KB含量 與對(duì)照組比較，中海拔各組肝臟KB均無顯著差異(P>0.05)；高海拔3 d組KB含量顯著高于對(duì)照組及高海拔1 d組(P<0.05)；至暴露第7天開始恢復(fù)正常。見表2。

2.4不同海拔習(xí)服過程中大鼠肝臟HIF-1α、AMPK、ACC1、CPT-1蛋白表達(dá) 與對(duì)照組比較，HIF-1α蛋白在中海拔3 d顯著升高，高海拔暴露1、3 d顯著升高，且顯著高于中海拔組1、3 d；與對(duì)照組比較，AMPK蛋白在中海拔暴露3、7、15、30 d及高海拔暴露1、3、7、15、30 d顯著降低；高海拔暴露各組顯著低于中海拔各組；與對(duì)照組比較，ACC1蛋白在中海拔暴露3 d顯著升高，在高海拔暴露1、3 d顯著升高，且顯著高于中海拔暴露1、3 d；與對(duì)照組比較，CPT-1蛋白在中海拔暴露3 d顯著升高；在高海拔暴露3 d顯著升高，第7天開始降低，第15天顯著降低；高海拔暴露第7、15天顯著低于中海拔第7、15天(P<0.05)。見表2。

表2 各組肝臟組織中KB含量及AMPK、ACC-1、CPT-1、HIF-1α蛋白表達(dá)水平比較

3 討 論

高原低氧對(duì)能量代謝的影響主要表現(xiàn)為多種代謝產(chǎn)物和關(guān)鍵酶的顯著變化〔21〕，能量代謝對(duì)生活在高原低氧環(huán)境中的物種的生存起著重要作用，代謝調(diào)節(jié)能有效提高機(jī)體對(duì)低壓缺氧的適應(yīng)性反應(yīng)。在青藏高原可可西里自然保護(hù)區(qū)(4 630 m)和拉吉山腳(2 600 m)設(shè)陷阱捕獲了10只鼠兔，生活在海拔4 630 m的鼠兔體內(nèi)，涉及碳水化合物、脂肪、能量和氧化還原穩(wěn)態(tài)通路的幾種代謝物發(fā)生了顯著的改變〔22〕。并且有研究認(rèn)為新陳代謝的適應(yīng)，是人類進(jìn)化到高海拔生活的基礎(chǔ)〔23〕。越來越多的研究試圖確定高原適應(yīng)的遺傳基礎(chǔ)，并共同提出這種適應(yīng)是通過改變多個(gè)分子機(jī)制發(fā)生的，人們意識(shí)到適應(yīng)不僅涉及氧輸送的變化，而且還涉及在細(xì)胞水平上改變氧利用的代謝改變〔24〕。

高原低氧習(xí)服是機(jī)體是在低氧低壓環(huán)境下發(fā)生的可逆的適應(yīng)性變化〔11〕。適應(yīng)高原低氧的過程受到眾多因素的影響，而海拔高度和低氧暴露的時(shí)間是最重要的影響因素〔12〕。目前研究更多集中于高原習(xí)服過程中能量代謝模式的轉(zhuǎn)變，發(fā)現(xiàn)提高氧氣利用率可以更好適應(yīng)低氧環(huán)境〔4〕。

有學(xué)者研究顯示，慢性高原暴露(4 300 m，8 w)高脂飲食組與高原暴露正常飲食組的大鼠肝組織磷酸化(p)-AMPK表達(dá)明顯高于對(duì)照組，而與非高原暴露高脂飲食組比較差異無顯著性，證明低氧環(huán)境下會(huì)激活A(yù)MPK的活性〔25，26〕。本研究結(jié)果提示，低氧的存在會(huì)抑制AMPK的表達(dá)，且海拔越高抑制越明顯。而對(duì)于AMPK的磷酸化水平未予以評(píng)估。ACC-1作為AMPK的下游靶蛋白大量表達(dá)于肝臟，催化乙酰輔酶A為轉(zhuǎn)化為Malonyl-A。激活的AMPK通過磷酸化及基因表達(dá)調(diào)控ACC-1抑制脂肪酸合成代謝〔27〕。本研究結(jié)果提示，大鼠肝臟脂肪酸的合成在中海拔早期會(huì)有暫時(shí)的增強(qiáng)，以滿足更多的能量需求。在高海拔早期肝臟脂肪酸合成代謝可能增強(qiáng)，之后恢復(fù)至對(duì)照組水平。但AMPK一直呈低表達(dá)，提示在此過程ACC-1可能還受到其他系統(tǒng)的調(diào)控。同時(shí)同一暴露時(shí)間下海拔越高ACC1表達(dá)越高，脂肪酸的合成能力可能越強(qiáng)。CPT1是進(jìn)行β氧化的限速酶。CPT1活性受Malonyl-A抑制，從而抑制β氧化。酮體是肝臟中氧化分解的中間產(chǎn)物，通過觀察期變化水平間接了解脂肪酸氧化水平。本研究結(jié)果提示，中海拔地區(qū)由于低氧狀態(tài)很快被糾正，肝臟脂肪酸氧化代謝增強(qiáng)的持續(xù)時(shí)間短暫，并且程度較弱。早期高海拔組CPT1 mRNA表達(dá)及蛋白表達(dá)呈現(xiàn)一過性增，但與中海拔不同的是從暴露的第7天開始CPT1 mRNA表達(dá)及蛋白表達(dá)逐漸降低，至暴露15 d最低，至30 d又恢復(fù)對(duì)照組水平，呈現(xiàn)先升高后降低再恢復(fù)至對(duì)照組的趨勢(shì)。而肝臟酮體在高海拔急性期顯著升高，后期恢復(fù)對(duì)照水平。本研究結(jié)果提示，脂肪酸的氧化能力在中、高海拔早期可能升高，在中海拔很快就恢復(fù)到正常組水平，而在高海拔組中卻發(fā)現(xiàn)在高原暴露的第15天卻降至最低，但酮體的水平卻沒有發(fā)生這種變化。因此尚不能判斷CPT-1的這種變化是否代表脂肪酸的氧化過程。目前更多的研究發(fā)現(xiàn)過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)α，是CPT的上游調(diào)控因子〔8〕。夏爾巴人單倍型與骨骼肌PPARα及其靶點(diǎn)CPT1B表達(dá)降低有關(guān)，導(dǎo)致線粒體有氧氧化降低〔24〕。本研究未涉及該通路，以后可對(duì)低氧下肝臟組織中PPARα/CPT-1通路進(jìn)行深入研究。

關(guān)于脂肪酸代謝尤其是氧化代謝在低氧環(huán)境下的研究有很多，但都沒有統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)。一項(xiàng)模擬低氧的研究發(fā)現(xiàn)〔28〕，大黃魚在急性低氧應(yīng)激(96 h內(nèi))條件下，可能由于持續(xù)時(shí)間很短，肝臟對(duì)脂質(zhì)利用沒有顯著變化?？紤]到高原通常還伴有低溫，研究指出高原鼠兔在相同的體重下，冬季的消耗量比夏季低29.7%，使它們?cè)诙镜拇x范圍異常低。一項(xiàng)冷缺氧相關(guān)研究顯示，暴露1 d和暴露7 d大鼠的肌肉和肝臟中CPT1表達(dá)顯著減少，認(rèn)為脂肪酸代謝、氧化代謝水平降低可能是動(dòng)物低代謝狀態(tài)的原因〔29〕。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，將肝細(xì)胞暴露于1% O2可降低CPT1 mRNA表達(dá)，抑制氧化代謝，誘導(dǎo)小鼠肝臟脂肪積聚，而對(duì)脂肪酸的合成無顯著影響〔30〕。本研究結(jié)果提示，在中、高海拔低氧急性暴露下(3 d)，參與脂肪酸合成與氧化的關(guān)鍵酶表達(dá)均增加，但中、高海拔組由于缺氧狀態(tài)很快被糾正(HIF-1α很快恢復(fù)到非暴露水平)，持續(xù)時(shí)間短暫，隨后恢復(fù)到對(duì)照組水平。在短期低氧應(yīng)激期間，肝臟呼吸容量增強(qiáng)和脂質(zhì)代謝改變支持代謝穩(wěn)態(tài)。另外喜馬拉雅夏爾巴人是西藏后裔，非常適應(yīng)高海拔低壓缺氧的生活。與低地種群相比，組織氧輸送明顯增強(qiáng)，此外發(fā)現(xiàn)組織氧利用(即代謝適應(yīng))的差異同樣支持這種適應(yīng)，與低地人相比，夏爾巴人在骨骼肌活組織檢查中顯示出較低的脂肪酸氧化能力，同時(shí)提高了氧氣利用效率，改善了肌肉能量代謝，以及防止氧化應(yīng)激〔15〕。高原鼢鼠一生都生活在地下密封的洞穴中，氧氣非常的有限，與褐鼠相比，高原鼢鼠的能量代謝相關(guān)基因(如線粒體和脂肪酸β氧化)進(jìn)化速度加快〔31〕。以上實(shí)驗(yàn)均提示，在氧供應(yīng)不足的情況下機(jī)體內(nèi)的能量代謝過程錯(cuò)綜復(fù)雜，這個(gè)除了不同的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)導(dǎo)致的結(jié)果差異外，另外有文獻(xiàn)報(bào)道，即使在相同的海拔下，季節(jié)差異〔32〕、年齡性別差異及不同研究對(duì)象都會(huì)導(dǎo)致不同的結(jié)果〔29，33～35〕。宏基因組學(xué)預(yù)測(cè)顯示，高原鼠兔中大部分與新陳代謝(如能量代謝和脂質(zhì)代謝)有關(guān)的基因功能在冬季較少，從而降低能量需求〔10〕。另外高原環(huán)境具有多種混雜因素，高海拔環(huán)境并不是單獨(dú)研究缺氧生理反應(yīng)的理想環(huán)境〔36〕，如高海拔地區(qū)活動(dòng)或飲食的變化，未來的研究可將不同的低氧方案與可控的活動(dòng)/不活動(dòng)和飲食相結(jié)合。

也有研究支持的結(jié)果和本研究相似。在慢性暴露于模擬海拔5 500 m，2個(gè)月的大鼠，肝臟和骨骼肌中脂肪酸的氧化水平增加〔37〕。海拔4 300 m慢性暴露(8 w)，使AMPK活化，進(jìn)而使CPT1表達(dá)增加，糾正非酒精性脂肪肝的脂質(zhì)的形成〔9〕。一項(xiàng)研究通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)的方法，研究了布氏田鼠骨骼肌組織對(duì)低氧環(huán)境的反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)其通過加強(qiáng)磷酸戊糖途徑和線粒體的脂肪酸合成途徑來維持身體的能量供應(yīng)〔15〕。藏羊作為青藏高原適應(yīng)較好的物種，與漢羊相比，藏羊肝臟中脂肪酸氧化能力較強(qiáng)，以應(yīng)對(duì)青藏高原惡劣環(huán)境下的低能量攝入〔38〕。在高海拔地區(qū)，藏豬的能量代謝相關(guān)的代謝途徑(包括脂肪酸的氧化)不斷增加〔39〕。此外，惡性腫瘤會(huì)使體內(nèi)的脂肪酸持續(xù)合成，需要滿足能量需求，而ACC控制這一過程，從而研究提出ACC抑制劑有望用于腫瘤治療〔40〕。以上研究與本文得出相似結(jié)果，提示只要氧氣供應(yīng)不足，機(jī)體脂肪酸氧化會(huì)增強(qiáng)，因?yàn)檫@樣會(huì)產(chǎn)生更多的能量。另外，本研究發(fā)現(xiàn)肝臟內(nèi)CPT1蛋白表達(dá)變化趨勢(shì)與HIF-1α一致。一項(xiàng)腎透明細(xì)胞癌相關(guān)研究指出，CPT1A是HIF-1和HIF-2復(fù)合物的直接靶基因，并且在腫瘤細(xì)胞中被抑制，弱化脂肪酸的分解代謝，但在真實(shí)的高原暴露下兩者的關(guān)系有待深入研究。

綜上，中、高海拔地區(qū)與平原地區(qū)大鼠脂肪酸代謝存在差異。不同氧濃度下的脂肪酸代謝變化規(guī)律及機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，以后研究應(yīng)深入探討其分子機(jī)制，以便更好地適應(yīng)高原低氧環(huán)境。