臧合英
(河南省獸藥飼料監(jiān)察所,河南 鄭州 450008)
獸藥在調(diào)節(jié)動物生理機能,治療、預防動物疫病,促進動物生長發(fā)育方面起著重要作用。但是在獸藥使用過程中,如果無視休藥期規(guī)定、不遵守食品安全法規(guī),肆意售賣屠宰動物,極易導致動物體內(nèi)殘留獸藥成分,而這勢必會對畜牧產(chǎn)品質(zhì)量及消費者健康造成不利影響。因此,為了保障畜牧產(chǎn)品質(zhì)量及消費者健康安全,必須針對飼料中常見獸藥做好檢測工作,熟練掌握獸藥檢測技術。
1.1 大環(huán)內(nèi)酯類藥物大環(huán)內(nèi)酯類藥物是一種弱堿性抗菌素,紅霉素是其中最具典型的代表。將其運用到動物養(yǎng)殖當中,不僅可以用作治療藥物,而且可以用作預防藥物,促進生長藥物,而這對動物養(yǎng)殖效益的提高是極為有利的。如果長期使用這類藥物,在動物器官和組織中積累到一定的濃度,會對動物腎臟器官造成嚴重危害。消費者如果食用這類藥物的高殘留動物產(chǎn)品,會出現(xiàn)毒性、致敏性反應,導致體內(nèi)菌群失調(diào)。
1.2 磺胺類藥物磺胺類藥物主要用于治療、預防細菌性傳染病。在動物養(yǎng)殖過程中,常被用于飼料添加劑的磺胺類藥物主要包括磺胺二甲基嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶等。但是據(jù)相關研究顯示,消費者如果長期食用含有磺胺類藥物殘留的動物產(chǎn)品,極易出現(xiàn)過敏反應。
1.3 四環(huán)素類藥物四環(huán)素類藥物屬于光譜抗生素的范疇,主要包括四環(huán)素、土霉素、金霉素等。在動物養(yǎng)殖過程中,四環(huán)素類藥物可以用作消毒劑、獸藥等,用于促進動物生長、防治動物腸道感染等。但是這類藥物極易造成食品殘留,導致病株出現(xiàn)耐藥性,而且積累到一定濃度,會導致消費者腸道菌群微生態(tài)平衡失調(diào),出現(xiàn)再生性貧血癥狀。
1.4 氯霉素類抗生素氯霉素類抗生素是一種光譜類抗生素,主要包括氟甲砜霉素、甲砜霉素、氯霉素等,常被應用于動物傳染病的預防及治療中。但是由于氯霉素類抗生素極易蓄積于人體及動物體內(nèi),導致人體或動物體出現(xiàn)嚴重的毒副作用,嚴重時甚至會導致人體或動物體造血功能受到抑制,所以包括我國在內(nèi)的諸多國家都將其列入禁用藥范疇。
1.5 頭孢菌素類藥物頭孢菌素類藥物屬于β-內(nèi)酰胺類抗生素,具有廣譜抗菌、過敏率低等優(yōu)勢。當前頭孢菌素類藥物有很多,按照其抗菌性能及發(fā)明順序,主要可以分為頭孢噻呋、頭孢克洛、頭孢拉定等。但是由于頭孢菌素類藥物具有較強的耐藥性,所以為了保障人類及動物安全,包括美國在內(nèi)的諸多國家都禁止在動物飼料中添加頭孢菌素類藥物。
1.6 硝基呋喃類藥物硝基呋喃類藥物是一種光譜抗菌類藥物,對大多數(shù)原蟲、真菌、革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌都能起到良好的殺滅作用。當前市面上比較常見的硝基呋喃類藥物主要有呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃唑酮四種。硝基呋喃類藥物由于具有良好的抗菌作用,并且價格低廉,所以廣泛的應用于蜂、水產(chǎn)、家畜、家禽等動物傳染病的治療及預防當中。但是由于此類藥物及其代謝產(chǎn)物可加大人體出現(xiàn)畸胎、癌癥等風險,所以許多國家都將其列入水產(chǎn)動物及畜禽動物飼料中禁止添加的獸藥。2005年我國農(nóng)業(yè)部頒布了560號令,正式將硝基呋喃類藥物納入動物飼料禁用藥范疇。
1.7 喹諾酮類藥物喹諾酮類藥物是一種人工合成的抗菌藥,也被稱為吡啶酮酸類藥物或吡酮酸類藥物。當前市面上常見的喹諾酮類藥物主要包括氟羅沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星等。此類藥物主要用于皮膚組織、呼吸道的革蘭氏陰菌感染,以及胃腸疾病、泌尿系統(tǒng)疾病的治療當中。喹諾酮類藥物屬于人畜通用藥物,不僅可以應用于動物疾病的治療,而且可以應用于人體治療,但是這種藥物在人體內(nèi)蓄積、殘留,會使人體產(chǎn)生較強的抗藥性,進而影響疫病后續(xù)治療。2005年美國將恩諾沙星列入禁用獸藥范疇。
1.8 β-興奮劑類藥物β-興奮劑類藥物也就是我們常說的“瘦肉精”,此類藥物具有減慢蛋白質(zhì)代謝分解、加速脂肪代謝分解的功效,進而可以起到降低動物機體脂肪含量,促進動物機體肌肉組織生長的目的。在動物飼料中適量添加β-興奮劑類藥物,可以提高動物增重量、瘦肉量以及飼料利用轉(zhuǎn)化率。當前市面上較為常見的β-興奮劑主要包括沙丁胺醇、萊克多巴胺、鹽酸克倫特羅藥。β-興奮劑類藥物對動物及人體的腎臟、肝臟等內(nèi)臟器官會產(chǎn)生較強的毒副作用。隨著β-興奮劑類藥物殘留事件的日益高發(fā),我國已經(jīng)β-興奮劑類藥物納入禁用獸藥范疇。
1.9 硝基咪唑類藥物硝基咪唑類藥物對原蟲及厭氧菌具有良好的殺滅作用,所以被廣泛添加在動物飼料當中用來抗菌、抗原蟲感染。除了抗菌和抗原蟲感染外,硝基咪唑類藥物還具有一定的促進動物機體生長的作用。當前市面上常見的硝基咪唑類藥物主要包括奧硝唑、替硝唑、地美硝唑等。此類藥物及其代謝物會導致包括人體在內(nèi)的諸多步入動物出現(xiàn)突變、畸形、癌癥等后果,并且具有一定的遺傳性,因此國際諸多國家都將硝基咪唑類藥物納入禁用藥的范疇。
2.1 分光光度法牛純青等曾采用分光光度法對飼料中泰樂菌素的含量進行鑒定,發(fā)現(xiàn)其濃度在5.0~50μg/mL時,其吸光度與濃度存在良好的線性關系。分光光度法雖然對實驗儀器要求較低,但是實驗操作較為繁瑣,檢測范圍較為有限,只能應用于青霉素、環(huán)丙沙星等少數(shù)幾種獸藥的檢測當中,并且檢測的精準度有限,極易出現(xiàn)檢測誤差。
2.2 微生物學法微生物學法也被稱管碟法,主要用于發(fā)酵抗生素含量檢測,這種檢測方法具有靈敏度高、用量少、檢測與原理一致等優(yōu)勢。顧欣等曾采用微生物學法對恩拉霉素在飼料中的含量進行了檢測,檢測發(fā)現(xiàn)這種檢測方法的最低檢測限度為0.5mg/kg。除了恩拉霉素可以用這種檢測方法檢測外,泰樂菌素、金霉素、林可霉素等都可以運用這種檢測方法檢測。這種檢測方法雖然應有諸多有限,但是由于對操作過程具有嚴苛的要求,一旦出現(xiàn)一個操作失誤或操作不當,會導致整組實驗失敗,從而導致其推廣應用仍較為局限。
2.3 免疫分析法免疫分析法是基于抗體抗原特異性結(jié)合而建立的一種檢測方法,可以廣泛應用于抗體、半抗、抗原的檢測當中。在飼料獸藥檢測中應用較廣的免疫分析法主要包括膠體膠體金免疫層析法和酶聯(lián)免疫吸附法。膠體金免疫層析法比較適用于少數(shù)樣品或單個樣品檢測;酶聯(lián)免疫吸附法比較適用于大規(guī)模樣品檢測。免疫分析法具有準確、靈活、快速、操作簡單、對儀器要求低等優(yōu)點,可以廣泛應用于飼料獸藥檢測當中。
2.4 薄層色譜法薄層色譜法操作簡單、對儀器要求較低、檢測成本較低,但是只能進行粗略檢測,無法定量檢測。韓鳳麗等采用薄膜色譜法對飼料中磺胺的含量進行了測定,檢測發(fā)現(xiàn)最低檢出率為0.05μg/mL。
2.5 氣相色譜法氣象色譜法屬于分離分析方法的范疇,雖然檢測成本高、檢測步驟繁瑣、需要運用的試劑較多,但是由于其檢測準確度高、檢出限低、精密度高、檢測較為靈敏,所以在我國具有較為廣泛的應用。當前我國主要運用氣相色譜法進行氯霉素類抗生素藥物的檢測,最低檢出限度為0.005mg/kg,能很好地滿足日常獸藥添加檢測需求。
2.6 高效毛細管電泳法高效毛細管電泳法是一種新興的檢測技術,該技術主要以毛細管為分離通道,以高壓電場為動力來源,根據(jù)樣品中各成分分配行為及淌度方面的差異,達成成分分離,并以此開展分析的方法。這種檢測技術具有選擇性強、適用范圍廣、分離效率高、分離速度快、試樣和溶劑消耗少等優(yōu)點。陳紅青曾運用此種檢測技術對飼料中的沙丁胺醇和鹽酸克倫特羅的含量進行檢測,最低檢測限度為0.03μg/kg和0.02μg/kg。
2.7 電化學分析法電化學分析法是在以被測物質(zhì)某些量與電量、電流、電導、電位之間的劑量關系為基礎,對被測物質(zhì)的成分進行定量、定性分析的方法。這種檢測方法具有檢測便捷、靈敏度高、選擇性強等優(yōu)勢,所以在生物活性成分,微量化合物檢測方面具有較為廣泛的應用。張寅艷等曾運用這種檢測技術對6種磺胺類藥物開展了檢測,最低檢測限度為0.08μg/mL。王偉宇等也曾運用這種檢測技術對β-興奮劑開展了檢測,最低檢出限度為2.06×107g/mL。
2.8 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法具有分辨率高、選擇性分析等優(yōu)勢,比較適合應用于穩(wěn)定性相對較差的化學藥物檢測,并且在檢測過程中還能進行蛋白質(zhì)序列測定及化學結(jié)構剖析。近年來有許多文獻記載了運用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測磺胺類藥物、苯丙咪唑類藥物、β-興奮劑類藥物、氟喹諾酮類藥物的報道。這種檢測技術具有檢出限度地、靈敏度高、定性效果好等優(yōu)點,但是由于其檢測步驟繁瑣、檢測成本高、檢測設備昂貴,導致這種檢測技術當前在國內(nèi)應用仍較為有限。
2.9 生物傳感器法生物傳感器是一種有轉(zhuǎn)換器和生物敏感部件構成,能夠?qū)ι锘钚晕镔|(zhì)或特定化學物質(zhì)具有可逆性和選擇性響應的裝置,具體而言主要包括微生物傳感器、組織傳感器、酶傳感器等。相較于傳統(tǒng)檢測技術,這種檢測技術具有適合現(xiàn)場檢測、高通量、易于操作、靈敏度高、選擇性好等優(yōu)勢。但是這種檢測技術當前在國內(nèi)尚處于探索階段,所以應用極為有限,但是英國食品環(huán)境研究院曾運用這種檢測技術對多種獸藥進行了有效檢測。
2.10 高效液相色譜法高效液相色譜法具有容易回收、進樣量少、靈敏度高、檢測速度快等優(yōu)勢,所以在獸醫(yī)檢測方面得到了廣泛應用。近來來相關行業(yè)標準及國家標準在制定時,也會運用高效液相色譜法。當前高效液相色譜法比較常用的檢測器主要包括熒光檢測器、二極管陣列檢測器、紫外光度檢測器等。這三種檢測器各有優(yōu)點,(1)熒光檢測器。熒光檢測器具有靈敏度高,選擇性強等優(yōu)勢。張素霞等曾運用熒光檢測器對萊克多巴胺藥物進行檢測,最低檢出限度為0.48μg/g;(2)紫外光度檢測器。紫外光度檢測器具有對不會對樣品造成損壞、靈敏度高、線性范圍快等優(yōu)勢。邸萬山等曾采用紫外光度檢測器對鹽酸克倫特羅藥物進行檢測,測定標準的偏差為0.13%;(3)二極管陣列檢測器。二極管陣列檢測器具有線性范圍寬、噪音低、靈敏度高、溫度和流速對其影響小等優(yōu)勢。曹鵬曾運用二極管陣列檢測器對4種硝基呋喃類藥物進行了檢測,最低檢出限度為0.5mg/kg。
為了促進動物生長,預防、治療動物疫病,飼料中會添加大量獸藥,這些獸藥如果消化不完全,會殘留在動物體內(nèi),對動物產(chǎn)品質(zhì)量乃至消費者健康造成不利影響。因此,為了降低獸藥對動物產(chǎn)品質(zhì)量乃至消費者健康的影響,必須對獸藥在飼料中添加的種類及劑量嚴格加以要求,并做好相應的檢測工作。