呂貴律

廣西天等縣馱堪鄉(xiāng)鄉(xiāng)村產(chǎn)業(yè)發(fā)展中心，廣西天等 532802

牛副結(jié)核病也稱為副結(jié)核性腸炎，是養(yǎng)牛業(yè)比較常見的一種傳染性疾病，在養(yǎng)牛行業(yè)廣泛流行，平均發(fā)病率20%左右[1]。該病的發(fā)生不僅能夠造成牛的感染，甚至還能感染人。因此，有效防控該病具有公共衛(wèi)生學(xué)意義。

1 病原簡介

牛副結(jié)核病的病原為副結(jié)核分枝桿菌，這是一種短小的桿菌，長度為0.5～1.5 μm，寬度為0.2～0.5 μm；不形成莢膜和芽孢，也沒有鞭毛，不能運動[2]。副結(jié)核分枝桿菌通過革蘭氏染液進行染色后呈紫色，為革蘭氏陽性。其對環(huán)境具有較強的抵抗力，通常在糞便或土壤中能夠存活超過1年，即使在日光的照射中也可以存活超過10 個月。菌體不耐熱，在60 ℃的環(huán)境溫度下30 min 就會失活。該菌通常有3 種型，分別為色素型副結(jié)核桿菌、羊副結(jié)核桿菌和牛型副結(jié)核桿菌，其中牛型副結(jié)核桿菌僅可引起牛的發(fā)病，羊副結(jié)核桿菌可以引起牛、羊發(fā)病。

2 流行病學(xué)

牛副結(jié)核病的傳染源是發(fā)病牛以及隱性感染帶菌牛。這些牛能通過分泌物和排泄物向體外排出大量病原，造成環(huán)境污染和飼料飲水的污染。病牛還可以通過乳汁分泌排出病原。該病的傳播方式為消化道感染，當(dāng)健康牛接觸到受污染的飼料和飲水時，病原會通過消化道途徑感染健康牛導(dǎo)致其發(fā)病。該病的易感動物較多，其中牛的易感性最高。不同品種、不同年齡和性別的牛均具有易感性，但其中犢牛的易感性最高，此外馬、羊、驢等動物也會被該菌所感染。

牛副結(jié)核病的發(fā)生沒有明顯的季節(jié)性，一年四季均可發(fā)生，但在春秋兩季發(fā)病率相對較高。該病的發(fā)生還與牛的狀態(tài)有一定的相關(guān)性，處于妊娠期的母牛和泌乳期的母牛易感性更高，當(dāng)環(huán)境條件變化較大時發(fā)病率也會上升。該病的發(fā)生，多呈散發(fā)或地方流行性；具有較長的潛伏期，通?？蛇_6～12個月。

3 臨床癥狀

病牛在發(fā)病初期會出現(xiàn)腹瀉，而后隨著病程的發(fā)展轉(zhuǎn)變?yōu)轭B固性腹瀉。尤其是當(dāng)病牛在飼喂青綠飼料后表現(xiàn)更加明顯。腹瀉的排泄物中可見有泡沫狀黏液覆蓋，并散發(fā)出惡臭氣味。病牛還表現(xiàn)為食欲下降、消瘦以及反芻次數(shù)減少。隨著病程的發(fā)展，病牛被毛粗亂，貧血，可視黏膜蒼白，病牛逐漸虛弱無力，臥地的牛常不能站立。病程較長的病牛表現(xiàn)為精神不振、身體虛弱以及毛發(fā)干枯，甚至?xí)^發(fā)前胃弛緩等疾病。如果該病發(fā)生后沒有及時進行治療，發(fā)病牛會因脫水而引起全身機能障礙，最終會因營養(yǎng)缺乏和臟器的衰竭而出現(xiàn)死亡。該病的病程長短、臨床癥狀表現(xiàn)輕重與病牛自身的狀態(tài)有相關(guān)性，甚至有時嚴(yán)重有時較輕。如不治療可以存活6個月至2年。

4 病理變化

對病死牛進行剖檢，主要病變集中在消化道內(nèi)。通常見結(jié)腸、空腸、盲腸和回腸等腸道黏膜增厚，為正常黏膜的2～19 倍，并且黏膜出現(xiàn)明顯皺褶。這些腸黏膜類似于腦回樣，柔軟不易平展，腸腔變得狹窄，外觀呈黃色或淡黃色。在皺褶突起部位可見有充血病變，且黏液變得混濁和黏稠；腸系膜水腫，腸系膜淋巴結(jié)也表現(xiàn)為明顯腫脹，切開后切面呈灰白色，質(zhì)地變軟，表面濕潤和隆起，還有大量的壞死灶和點狀出血。此外，在其他器官上也有一些病變，如肝臟輕微腫脹，外觀顏色淡化，失去原有光澤；肺臟小葉間質(zhì)變得寬大，在肺臟表面存在有少量淤血。病牛還出現(xiàn)血液顏色變淡，且不易出現(xiàn)凝固，皮下脂肪變性，呈現(xiàn)出膠凍樣，在病牛的胸腔和腹腔內(nèi)可見有大量清亮積液。

5 診斷方法

牛副結(jié)核病可以通過病原的分離培養(yǎng)、染色鏡檢來確診，在臨床上還可以采用副結(jié)核皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)來確診該病。

5.1 分離培養(yǎng)和染色鏡檢

取1～2 g 的糞便置于40 mL 生理鹽水中攪拌均勻，用紗布過濾，并在濾液中添加10%草酸水溶液和0.02%孔雀綠，置于37 ℃水中30 min，以3 000～5 000 r/min 離心。將離心30 min 后的沉渣接種于馬鈴薯培養(yǎng)基，于37 ℃恒溫培養(yǎng)，挑取單個菌落染色鏡檢。在鏡檢時可見有排列成堆或者成叢的短小桿菌，具有抗酸性著色，可以確診牛副結(jié)核病。

5.2 副結(jié)核皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)

本方法適用于臨床診斷，也是對牛副結(jié)核病診斷過程中應(yīng)用最早的方法，具有較高的靈敏度和特異性。通過在牛皮內(nèi)注射0.2 mL 副結(jié)核桿菌，在72 h 內(nèi)當(dāng)牛出現(xiàn)變態(tài)反應(yīng)時可以認(rèn)定為牛已感染副結(jié)核分枝桿菌。該病檢出率較高，可達94%，在臨床上可用于檢測沒有出現(xiàn)臨床癥狀的隱性感染牛。本方法應(yīng)用于發(fā)病前期，具有良好的診斷價值，但在發(fā)病后期進行診斷，則變態(tài)反應(yīng)會消失，而且在診斷中會受到其他分枝桿菌的影響，導(dǎo)致特異性下降。

5.3 血清學(xué)方法診斷

目前，應(yīng)用較廣的血清學(xué)方法主要是ELISA 方法，通過對全血中的干擾素-γ 的水平來進行診斷，這種方法具有高度敏感性，可用于在市場上進行流行病學(xué)調(diào)查，效果非常好。另外，應(yīng)用補體結(jié)合試驗和免疫瓊脂擴散試驗也具有良好的效果。

5.4 分子生物學(xué)技術(shù)

分子生物學(xué)技術(shù)通常是PCR 技術(shù)，常見的有多重PCR 和熒光探針PCR 技術(shù)。應(yīng)用這些技術(shù)能夠檢測出病料中存在的微量病原，具有非常高的特異性和靈敏度。

6 防控措施

6.1 預(yù)防措施

牛副結(jié)核病的預(yù)防需要通過加強飼養(yǎng)管理和疫苗免疫接種，通常給牛群接種滅活疫苗和弱毒疫苗，疫苗接種只適合于本病的疫區(qū)。牛在接種疫苗后，并不能夠保護其不發(fā)生感染和發(fā)病，甚至?xí)缮贁?shù)牛在接種疫苗后出現(xiàn)感染，且接種過疫苗的牛在進行皮試檢測時可能會出現(xiàn)交叉反應(yīng)的情況。

養(yǎng)殖場應(yīng)采取自繁自養(yǎng)的原則，避免從場外進行引種，尤其是要避免從疫區(qū)引種。引進的種牛要經(jīng)過嚴(yán)格的檢疫，在養(yǎng)殖場內(nèi)進行隔離觀察30 d后未發(fā)病，再經(jīng)過檢疫后確定不攜帶本病原，方可與牛群混合飼養(yǎng)。在飼養(yǎng)過程中，要加強環(huán)境衛(wèi)生和通風(fēng)換氣工作，還要增加牛的運動量，給牛群提供營養(yǎng)豐富、搭配合理的飼料及清潔的飲水，提升牛群的免疫力，減少發(fā)病。尤其是在飼喂的過程中，要避免給牛群飼喂發(fā)霉變質(zhì)的飼料。在飼料中添加一些礦物質(zhì)和多種維生素，提升病牛的體質(zhì)。在養(yǎng)殖過程中還要制定常規(guī)消毒計劃，定期對牛圈內(nèi)外墻壁、地面、器械以及其他物品和人員進行嚴(yán)格的消毒，以避免出現(xiàn)病原。通常是在牛場的入口設(shè)置消毒池，進入牛場的車輛必須通過消毒池才能夠進入，在經(jīng)過消毒池后，要通過噴灑的方式進行車身消毒。定期對牛舍外部的運動場進行消毒，通常是每個月1 次。牛舍內(nèi)要勤打掃，需要每天及時對舍內(nèi)的糞便進行清理，清理后的糞便不能隨意處理，應(yīng)定點堆放，并在堆放區(qū)內(nèi)通過堆肥發(fā)酵的方式進行處理，這樣可以將其中的病原微生物殺死。

定期對牛群進行檢疫，這樣可以及早發(fā)現(xiàn)牛群中存在的病牛和隱性牛，并盡早對病牛進行處理。通常是每年需要通過皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)和糞便中檢查病原菌的方式進行檢疫，檢疫的頻率為1年4 次。通過這樣的方式可以逐漸對牛群進行凈化，以達到防控牛副結(jié)核病的目的。

6.2 治療措施

通常對發(fā)病牛應(yīng)淘汰處理，不進行治療，但具有較高價值的病牛應(yīng)采取隔離用藥的方式進行治療。常見的治療用藥有氯苯吩嗪，異煙肼等，這些藥物能緩解臨床癥狀，但無法根治本??；也可以采用中醫(yī)的方式進行治療，常用藥物有大青葉、黃連、白頭翁、陳皮、豬苓、砂仁、澤瀉、厚樸、蒼術(shù)、老鸛草[3]。將這些藥物研磨成粉，用開水沖調(diào)后給病牛灌服，每天用藥1 次，連續(xù)用藥20 d。在用藥過程中，如果牛的糞便中含有大量黏液，并且具有明顯的惡臭味，可以在中藥配方中加入金銀花和連翹等各50 g，大黃和知母各30 g，可以起到良好的治療效果。如果病牛食欲下降，可以在原來配方的基礎(chǔ)上增加山楂和龍膽草等藥物，也能緩解食欲不振的癥狀。對于病牛出現(xiàn)脫水的情況，應(yīng)通過在配方中加入有車前子和木通、元參等藥物來治療和緩解癥狀。在治療時，可以應(yīng)用1%的生理鹽水來進行沖調(diào)，可以增加治療效果。

對于發(fā)生疫情的牛群，應(yīng)立即進行隔離診斷，如果確診為牛副結(jié)核病，則需要對整個牛群進行檢疫，并對疫情進行評估，對于有些病牛缺乏治療價值，應(yīng)及時對其進行淘汰處理。對于檢疫結(jié)果為陰性的牛，應(yīng)將其轉(zhuǎn)移圈舍，并對原來的圈舍進行徹底的消毒，將消毒后的圈舍空置，通常需要空置1年。