張夢(mèng)圓 司天桃 王克文 李文彩 李 文
新疆哈密市畜牧工作站,新疆哈密 839000
畜牧業(yè)是我國農(nóng)業(yè)的重要組成部分,在畜牧業(yè)的發(fā)展中牛養(yǎng)殖占有較大比例。近年來,我國逐漸控制小畜的數(shù)量,擴(kuò)大大畜的數(shù)量,養(yǎng)牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速,大量牛養(yǎng)殖基地成立,養(yǎng)殖規(guī)模逐步擴(kuò)大。在畜牧大省新疆、西藏、蒙古地區(qū),牛養(yǎng)殖已成為重要的經(jīng)濟(jì)來源,但隨著牛養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,牛傳染性疾病的發(fā)病率也呈現(xiàn)逐年升高趨勢(shì)。細(xì)菌性疾病是影響牛產(chǎn)業(yè)的一類傳染性疾病,該類疾病具有發(fā)病速度快、種類多、危害嚴(yán)重的特點(diǎn),如果不能及時(shí)有效地防控,會(huì)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。該類疾病中主要由沙門氏菌、大腸桿菌、巴氏桿菌等細(xì)菌引起,其中沙門氏桿菌病是腸道桿菌科的一個(gè)大屬,據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),現(xiàn)有67 種O 抗原和2 500 個(gè)以上血清型[1]。牛感染沙門氏菌臨床上主要特征是腹瀉和高熱,部分母牛還可能引發(fā)流產(chǎn)且犢牛死亡率一般5%~10%,最高可達(dá)75%。在規(guī)?;B(yǎng)牛場(chǎng)中,一旦發(fā)病會(huì)造成大規(guī)模的傳染,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
沙門氏菌屬是一大群寄生于腸道內(nèi)的革蘭氏陰性桿菌,染色均體短小,有鞭毛,能自主運(yùn)動(dòng),無莢膜,在普通培養(yǎng)基上生長良好,對(duì)干燥環(huán)境抵抗能力較強(qiáng),能在外界環(huán)境中存活長達(dá)數(shù)月,但高熱、直射陽光及常見的消毒劑如2%的火堿均能使其快速失活[2]。1880年Eberth 首先發(fā)現(xiàn)傷寒桿菌,1885年Salmon 分離到豬霍亂桿菌,由于Salmon 發(fā)現(xiàn)本屬細(xì)菌的時(shí)間較早,有重大的研究貢獻(xiàn),遂定名為沙門氏菌屬。
牛沙門氏桿菌病對(duì)犢牛的危險(xiǎn)較大,該病一般呈散發(fā)或地方性流行,一年四季均可發(fā)生,病牛和帶菌牛是該病的主要傳染源。病原體可隨糞便、尿液、乳汁以及流產(chǎn)的胎兒、胎衣和羊水排出體外,飼料和飲水受到污染后再經(jīng)消化道感染;交配或人工授精也是牛感染該病的一個(gè)重要感染途徑。當(dāng)牛存在營養(yǎng)不良、感染了其他疾病等不良因素,都會(huì)使牛自身的抵抗力下降,從而導(dǎo)致內(nèi)源性感染,特別是鼠副傷寒菌。此外,健康動(dòng)物的帶菌現(xiàn)象相當(dāng)普遍,當(dāng)飼養(yǎng)環(huán)境擁擠、衛(wèi)生條件差、氣候溫差多變、長途運(yùn)輸應(yīng)激刺激等或者感染了體表或體內(nèi)寄生蟲[3]等情況均能增大該病的發(fā)生和傳播率。
牛感染沙門氏菌主要表現(xiàn)為胃腸炎型、敗血癥型以及生殖系統(tǒng)炎癥型。
1)胃腸炎型是當(dāng)沙門氏桿菌入侵消化道,其可在腸道中大量繁殖,從而破壞腸道原有的菌群生態(tài)平衡,導(dǎo)致腹瀉。Boce 等[4]的研究表明,沙門氏菌的毒力決定其進(jìn)入宿主細(xì)胞和抵抗巨噬細(xì)胞消化、補(bǔ)體系統(tǒng)破壞的能力。菌體的特異性O(shè) 抗原能降低吞噬細(xì)胞敏感性和激活補(bǔ)體旁路途徑。內(nèi)毒素、腸毒素和細(xì)胞毒素協(xié)同作用,分別引起發(fā)熱、黏膜損傷和蛋白質(zhì)合成受阻。Stevens 等[5]的研究表明,腸道微生物群在沙門氏菌發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用,通常腸道微生物群會(huì)抵抗沙門氏菌并分泌一些代謝物。但由于不同動(dòng)物腸道的微生物群也有差異,因此需進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行研究。嚴(yán)重的腹瀉使腸黏膜受到破壞,引發(fā)炎癥并發(fā)熱,從而使體內(nèi)的生物酶活性受到破壞,影響牛的進(jìn)食和消化[6]。
2)敗血癥型是沙門氏菌順著破損的黏膜缺口侵入血液,進(jìn)一步引發(fā)菌血癥,從而產(chǎn)生內(nèi)毒素,內(nèi)毒素隨著血液到達(dá)各個(gè)組織器官,導(dǎo)致器官功能臟器受到損害。而此時(shí)血液中存在的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞會(huì)對(duì)侵入的病原進(jìn)行識(shí)別,并使機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,形成內(nèi)生性致熱源,導(dǎo)致下丘腦體溫調(diào)定點(diǎn)隨之升高,體內(nèi)大量產(chǎn)熱,體溫明顯上升,這會(huì)在一定程度上抑制沙門氏菌的繁殖。
3)生殖系統(tǒng)炎癥型主要是由于人工配種、助產(chǎn)時(shí)沒有對(duì)器械等進(jìn)行嚴(yán)格消毒以及母牛產(chǎn)后沒有加強(qiáng)抗感染及產(chǎn)后護(hù)理等引起生殖系統(tǒng)沙門氏菌感染,通常會(huì)使輸卵管、子宮以及卵巢等生殖器官出現(xiàn)炎癥,可能會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)、發(fā)情異常以及配種不成功等。
該病主要危害10~30日齡犢牛,主要表現(xiàn)發(fā)熱、食欲減退或者不肯采食、背毛逆亂、腹瀉,排出黃色稀糞,并帶有惡臭味,有時(shí)其中混有黏液或者血液。部分患病犢牛還會(huì)伴有呼吸困難、咳嗽或者關(guān)節(jié)炎。往往由于腹瀉而明顯脫水,病程通??沙掷m(xù)5~7 d,由于機(jī)體日漸衰竭而發(fā)生死亡。有時(shí)犢牛在剛出生時(shí)就已經(jīng)感染沙門氏菌,往往在出生后就表現(xiàn)出食欲不振,拒絕吮乳,精神萎靡,經(jīng)常臥地,最終由于極度衰竭而死。少數(shù)犢牛會(huì)出現(xiàn)急性死亡,發(fā)生敗血癥病變。該病的發(fā)病率可達(dá)20%~70%[7-8]。
成年牛通常為散發(fā),且呈良性經(jīng)過。病牛主要表現(xiàn)發(fā)熱,精神萎靡,腹瀉,有時(shí)排出混雜黏液、血絲或者散發(fā)惡臭味的糞便。病程持續(xù)較長時(shí),體型消瘦,出現(xiàn)脫水。
懷孕母牛多數(shù)發(fā)生流產(chǎn),特別是5~9 個(gè)月的胎兒。部分成年牛為帶菌者,隱性感染,可在其排泄物中檢測(cè)到沙門氏菌病原。有些隱性帶菌者或慢性感染的奶??赡軙?huì)發(fā)生沙門氏菌病性乳腺炎。
1)玻片染色:取病牛糞便或肝臟等組織,在玻片上涂抹后進(jìn)行革蘭氏染色,鏡檢,若看到兩端鈍圓的紅色短桿菌則可初步鑒定為沙門氏菌。
2)細(xì)菌培養(yǎng):在解剖過程中,取病牛的肝臟組織等分別接種在麥康凱和血瓊脂平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)。挑取在麥康凱培養(yǎng)基上生長出的無色透明表面光滑的小菌落;對(duì)血瓊脂培養(yǎng)基上生長半透明凸起的圓形小菌落進(jìn)行涂片,經(jīng)過革蘭氏染色后鏡檢,看到兩端鈍圓的紅色細(xì)長的小桿菌,則可以佐證病料玻片的結(jié)果,進(jìn)一步確定為沙門氏菌。在診斷是否為沙門氏菌時(shí),應(yīng)與大腸桿菌作區(qū)分,通常采用鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),若是沙門氏菌,則會(huì)出現(xiàn)無色的菌落,而大腸桿菌會(huì)出現(xiàn)粉紅色的菌落。
3)分子生物學(xué)鑒定:可對(duì)病料或培養(yǎng)的菌落提取核酸后,使用特定的引物進(jìn)行PCR 檢測(cè),測(cè)序比對(duì)或采用熒光抗體檢測(cè)等方法[9]。
沙門氏桿菌病的治療原則應(yīng)采取快速殺滅病原體、強(qiáng)心、補(bǔ)液、恢復(fù)胃腸功能等綜合治療方案[10]。值得注意的是,因?yàn)樯抽T氏桿菌常會(huì)出現(xiàn)耐藥菌株,應(yīng)與不同藥物交替使用。
當(dāng)病牛出現(xiàn)腹瀉,癥狀較輕,應(yīng)及時(shí)對(duì)癥治療,通常按照抗菌消炎和及時(shí)糾正水、電解質(zhì)丟失的原則進(jìn)行治療,可選用土霉素、鹽酸恩諾沙星和硫酸慶大霉素等廣譜抗生素等藥物,并同時(shí)滴注生理鹽水及葡萄糖等,避免嚴(yán)重脫水。在臨床治療嚴(yán)重腹瀉的病牛時(shí),可選用生理鹽水配酚磺乙胺,靜脈注射。若病牛出現(xiàn)呼吸困難的癥狀時(shí),可選用安鈉咖注射液進(jìn)行治療[11]。
沙門氏菌分布在牛的各個(gè)部位,當(dāng)牛機(jī)體健康時(shí),沙門氏菌與機(jī)體保持平衡,但當(dāng)牛群受到暴力驅(qū)趕、氣溫驟變、飼料發(fā)霉等因素刺激時(shí)[12],腸道菌群生態(tài)平衡被打破,導(dǎo)致沙門氏菌大量繁殖,發(fā)生該病。因此,要在飼養(yǎng)的過程中盡量保持飼養(yǎng)條件的穩(wěn)定,避免牛群應(yīng)激反應(yīng)。
沙門氏菌傳染性強(qiáng),要制定合理的養(yǎng)殖防疫規(guī)范,避免交叉感染。要保證新生犢牛吃到初乳,增強(qiáng)抵抗力。如有新引進(jìn)的牛,也應(yīng)先進(jìn)行隔離觀察,待檢測(cè)無疫病后再合群。如有發(fā)病牛,應(yīng)立即隔離治療,對(duì)其停留過的場(chǎng)地、圈舍和使用過的用具等進(jìn)行全面消毒。若有病死牛要進(jìn)行嚴(yán)格處理,可以選擇就地焚燒或者選擇合適的場(chǎng)地進(jìn)行銷毀工作。在處理后,應(yīng)嚴(yán)格、全面地對(duì)處理病死牛的地點(diǎn)、病死牛的牛舍和各種器皿等進(jìn)行徹底的消毒。
定期采集血液進(jìn)行血液檢測(cè),淘汰隱性患病牛。每年春秋兩季進(jìn)行免疫接種,可以使用牛沙門氏桿菌滅活疫苗[13]。疫苗肌肉注射,1 歲以下1 mL/頭,1歲以上牛2 mL/頭。為提高免疫效果,對(duì)1 歲以上的牛,在第1 次接種后10 d,可用相同劑量再接種1次。在已發(fā)生牛沙門氏桿菌的牛群中,可對(duì)2~10日齡的犢牛進(jìn)行接種,每頭牛1 mL,并對(duì)其抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
日常構(gòu)建科學(xué)的養(yǎng)殖管理理念是預(yù)防該病的重要方法之一,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,要保證飲水清潔衛(wèi)生,注意水溫不宜過涼,常通風(fēng),及時(shí)對(duì)糞便進(jìn)行清理,尤其是要防止鼠類、蠅類污染飼料和水源;在飼養(yǎng)過程中,要注意飼料的營養(yǎng)搭配,保證蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、礦物質(zhì)和微量元素的充足,從而有效提高機(jī)體抗病能力。與此同時(shí),養(yǎng)殖人員應(yīng)做好自身防護(hù),定期開展培訓(xùn),提高養(yǎng)殖技能。
沙門氏菌是一種全球的人畜共患病原體,不同的宿主會(huì)出現(xiàn)不同的臨床癥狀。目前,國內(nèi)外研究已明確宿主范圍、組織滴度或沙門氏菌腸動(dòng)脈血清的毒性及其變異相關(guān)的基因組特征。隨著生態(tài)環(huán)境的不斷變化,沙門氏菌也在機(jī)體內(nèi)不斷進(jìn)化。沙門氏菌與宿主相互作用的原理大多是參考其他菌株的研究,這些菌株可能無法反映養(yǎng)殖動(dòng)物的自然多樣性或流行病學(xué)趨勢(shì)。另外,絕大多數(shù)研究使用菌蛋白模型的感染或基于細(xì)胞的檢測(cè)來調(diào)查宿主-病原體相互作用。
目前,迫切需要通過了解沙門氏菌的自然宿主的發(fā)病機(jī)制,包括解釋病原體之間遺傳差異的影響?,F(xiàn)在大部分研究是從一些序列數(shù)據(jù)中預(yù)測(cè)沙門氏菌的侵入性潛力、宿主適應(yīng)和人畜共患風(fēng)險(xiǎn),以改進(jìn)疫情調(diào)查、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和控制策略,因此,養(yǎng)殖戶要樹立“養(yǎng)防結(jié)合,防重于治”的科學(xué)觀念,制定科學(xué)的養(yǎng)殖制度和管理辦法,充分了解不同致病菌的鑒別要點(diǎn)、臨床癥狀以及流行特點(diǎn),在流行高發(fā)期前,應(yīng)采取有效措施積極進(jìn)行針對(duì)性的防治和防控,做到“早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早診斷、早治療”,及時(shí)切斷致病原的傳播途徑,保護(hù)易感群體,避免疾病傳播流行及交叉感染,加強(qiáng)免疫接種。與此同時(shí),在日常養(yǎng)殖管理中,也要注意圈舍環(huán)境衛(wèi)生,養(yǎng)殖人員要做好個(gè)人防護(hù),從而提高養(yǎng)殖動(dòng)物的健康,保證食品安全水平。