徐曉美，李 穎，孫啟迪，徐小萬，衡 周，李 濤，王恒明

（1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所/廣東省蔬菜新技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510640；2.茂名市茂蔬種業(yè)科技有限公司，廣東 茂名 525000）

【研究意義】1 年生辣椒（Capsicum annuum）是5 個(gè)辣椒栽培種中最重要的栽培種，因其風(fēng)味多樣、營(yíng)養(yǎng)豐富，深受消費(fèi)者喜愛，同時(shí)既可鮮食又可加工，具有重要的產(chǎn)業(yè)價(jià)值。在廣東地區(qū)，辣椒是南菜北運(yùn)最重要的蔬菜，廣東省年辣椒播種面積達(dá)10 萬hm2左右，居全省蔬菜播種面積的第2 位。然而，因廣東地區(qū)高溫高濕，辣椒疫病病害嚴(yán)重，對(duì)辣椒生產(chǎn)造成重大損失，篩選抗疫病種質(zhì)材料、培育抗疫病辣椒品種是一條經(jīng)濟(jì)、環(huán)保且有效的途徑［1］。另外，種質(zhì)材料的遺傳多樣性是作物育種的前提，是種質(zhì)評(píng)價(jià)和利用的基礎(chǔ)，同時(shí)也為基因資源的發(fā)掘提供必要信息?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】辣椒疫病由辣椒 疫霉菌（Phytophthora capsiciLeonian）引起，是一種發(fā)病周期短、傳播速度快的土傳病害［2］。目前生產(chǎn)上對(duì)該病害的防治主要依賴化學(xué)藥劑，這不僅增加生產(chǎn)成本，同時(shí)也對(duì)環(huán)境造成污染。因此，選育抗病品種才是一條經(jīng)濟(jì)、環(huán)保且有效的途徑，而實(shí)現(xiàn)該途徑的第一步則是做好辣椒抗疫病種質(zhì)資源的鑒定和篩選。何烈干等［3］利用游動(dòng)孢子灌根法對(duì)208 份辣椒種質(zhì)材料進(jìn)行疫病抗性鑒定，篩選出高抗材料18 份、抗性材料23 份；關(guān)天舒等［4］利用相同樣方法在國(guó)內(nèi)外共217 份辣椒種質(zhì)材料中鑒定并篩選出高抗材料84 份、抗病材料57 份，兩者篩選結(jié)果差異較大。在種質(zhì)材料遺傳多樣性研究中，形態(tài)學(xué)分析可以直觀展示種質(zhì)材料特點(diǎn)，也是研究種質(zhì)多樣性及開展作物育種工作的基礎(chǔ)，但需要較長(zhǎng)的種植周期去觀察性狀間的差異，既費(fèi)時(shí)費(fèi)力，影響因素也較多。而基于物種DNA 序列的SSR（Simple Sequence Repeats）分子標(biāo)記是一種技術(shù)成熟、應(yīng)用廣泛的分子標(biāo)記技術(shù)［5］，具有數(shù)量豐富、分布廣、穩(wěn)定性好、等位基因多、共顯性遺傳等優(yōu)點(diǎn)［6］，已全面應(yīng)用于油菜［7］、水稻［8］、花生［9-10］、大豆［11］、大麥［12］等作物遺傳多樣性研究中。自2014 年辣椒基因組測(cè)序工作完成以來，在辣椒中開發(fā)SSR 分子標(biāo)記變得更加便捷，SSR 分子標(biāo)記在辣椒種質(zhì)資源遺傳多樣性研究中也陸續(xù)得到應(yīng)用［13-15］。Christov等［16］利用21 個(gè)SSR 分子標(biāo)記對(duì)176 份1 年生辣椒種質(zhì)材料進(jìn)行遺傳多樣性分析，篩選出44 份材料并構(gòu)建了一個(gè)迷你型核心種質(zhì)庫(kù)。Gu等［17］利用29 個(gè)SSR 標(biāo)記對(duì)我國(guó)蔬菜中期基因庫(kù)中的1 904 份辣椒種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析，最終選擇248 份覆蓋75.6% SSR 等位基因的材料作為核心種質(zhì)。Zhong等［18］利用33 個(gè)新開發(fā)的SSR 標(biāo)記對(duì)來源于25 個(gè)國(guó)家的147 個(gè)灌木狀辣椒（C.frutescens）材料進(jìn)行遺傳多樣性分析，并將其分為7 個(gè)大類群，聚類結(jié)果與材料來源具有一致性?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】相比國(guó)外的辣椒核心種質(zhì)，我國(guó)辣椒資源的種間材料不夠豐富，但在種內(nèi)存在一些特有的進(jìn)化和分化情況。全方位了解和保存這些資源，可為辣椒種質(zhì)資源進(jìn)化馴化、特異基因挖掘和辣椒育種改良等研究奠定基礎(chǔ)。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)辣椒種質(zhì)資源同時(shí)進(jìn)行疫病抗性評(píng)價(jià)和分子標(biāo)記遺傳多樣性分析的研究還未見報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】通過辣椒全基因組篩選到20 個(gè)SSR 分子標(biāo)記，對(duì)廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所辣椒課題組現(xiàn)存的96 份1 年生辣椒種質(zhì)材料進(jìn)行SSR 分子標(biāo)記遺傳多樣性分析，同時(shí)對(duì)疫病抗性、熟性、果色、果型和果實(shí)風(fēng)味5 個(gè)重要性狀進(jìn)行調(diào)查，旨在加深對(duì)種質(zhì)材料的了解并將核心種質(zhì)材料加以保存，以應(yīng)用于將來育種研究中。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)苯凡牧霞捌渲匾誀钫{(diào)查

96 份待測(cè)辣椒種質(zhì)材料均由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所辣椒課題組收集、創(chuàng)制的高世代純合種質(zhì)材料?？挂卟?duì)照CM334 和感疫病對(duì)照NMCA10399 均受贈(zèng)于美國(guó)墨西哥州立大學(xué)Paul W.Bosland 教授［19］。96 份材料均在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院鐘落潭實(shí)驗(yàn)基地種植，進(jìn)行常規(guī)化管理，并對(duì)其熟性、果色、果型和果實(shí)風(fēng)味4 個(gè)重要性狀進(jìn)行了初步調(diào)查和登記。熟性分為早熟、中熟和晚熟，其中始花節(jié)位10 節(jié)以下為早熟、10～14節(jié)為中熟、15 節(jié)及以上為晚熟；果色分為青熟果色和老熟果色，由肉眼觀察獲得；果型調(diào)查參照辣椒果實(shí)形態(tài)分類方法［20］，先測(cè)量果實(shí)橫徑和縱徑，再計(jì)算果型指數(shù)，進(jìn)而判斷果型；果實(shí)風(fēng)味定性分為甜、微辣、中辣、辣和極辣，由3 人同時(shí)生食品嘗鑒定獲得。

1.2 辣椒疫病抗性鑒評(píng)

1.2.1 待測(cè)辣椒苗培養(yǎng) 所有辣椒材料均播種于50 孔育苗盤中，每份材料播種25 孔，每孔播種3～5 粒種子，于植物培養(yǎng)室育苗。育苗基質(zhì)為蛭石∶草炭∶土壤=1 ∶2 ∶1，高溫滅菌30 min 后備用，育苗條件為26（±2）℃的溫度下光照14 h、黑暗10 h 交替進(jìn)行，濕度為70%，待幼苗長(zhǎng)至6片真葉時(shí)用于接種。

1.2.2 供試菌株培養(yǎng)及孢子液制備 辣椒疫霉菌Byl4 為本實(shí)驗(yàn)室分離獲得［21］，在固體V8 汁培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)基配制方法如下：200 mL V8 汁、3 g CaCO3和20 g 瓊脂，加水定容至1 000 mL，調(diào)節(jié)pH 至6.3，高溫滅菌30 min 后倒平板備用。將保存好的辣椒疫霉菌Byl4 接種于固體V8 汁培養(yǎng)基上，在恒溫箱中28 ℃黑暗條件下培養(yǎng)3～4 d 后轉(zhuǎn)移至室溫（26±2 ℃）下光照、黑暗各12 h 交替培養(yǎng)3～4 d。在培養(yǎng)皿中注入10 mL 無菌水，4 ℃放置30 min 后轉(zhuǎn)移到室溫（26±2 ℃）下放置30 min，誘導(dǎo)游動(dòng)孢子釋放。采用無菌毛筆刷洗、2 層紗布過濾，獲得游動(dòng)孢子懸浮液。采用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)濃度為1×104個(gè)/mL，備用。

1.2.3 接種及抗病性鑒評(píng) 接種前12 h 為待測(cè)辣椒植株充分澆水，使育苗基質(zhì)水分達(dá)到飽和狀態(tài)。采用注射器吸取孢子懸浮液均勻注射于辣椒植株附近約1 cm 處，接種量為5 mL/孔。接種后于28 ℃黑暗條件下保濕培養(yǎng)24 h，而后在植物培養(yǎng)室參照育苗條件正常培育，至感病對(duì)照全部發(fā)病時(shí)（5 d 左右）調(diào)查待測(cè)苗發(fā)病表型。植株發(fā)病程度分為7 個(gè)等級(jí)，0、1 等級(jí)為無任何病癥，視為抗病植株；2、3、5、7、9 等級(jí)為具有不同程度病癥，視為發(fā)病植株［22］，統(tǒng)計(jì)發(fā)病株數(shù)，計(jì)算發(fā)病率〔發(fā)病率（%）=發(fā)病株數(shù)/總種植株數(shù)×100〕。植株抗性等級(jí)劃分參考Pecchioni 等方法分為5 個(gè)等級(jí)：無感病植株為免疫，0＜發(fā)病率≤5%為高抗，5%＜發(fā)病率≤20%為抗病，20%＜發(fā)病率≤50%為感病，發(fā)病率高于50%為高感［23］。

1.3 分子標(biāo)記檢測(cè)

1.3.1 DNA 提取 采集6 片真葉期辣椒幼苗嫩葉，采用改良CTAB法［24］提取基因組DNA，并用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA 純度，采用NanoDrop2000 測(cè)量DNA 濃度，并統(tǒng)一調(diào)整DNA濃度至60 ng/μL，置于-20 ℃冰箱保存，備用。

1.3.2 分子標(biāo)記篩選及分子標(biāo)記檢測(cè) 在茄果類基因組數(shù)據(jù)庫(kù)網(wǎng)站（https://solgenomics.net/cview/map.pl?map_id=10）下載辣椒SSR 分子標(biāo)記引物序列，送生工生物工程股份有限公司合成。選取表現(xiàn)型差異大的10 份辣椒DNA 樣品用于分子標(biāo)記篩選，選出多態(tài)性好、條帶清晰且擴(kuò)增穩(wěn)定的SSR 標(biāo)記用于后續(xù)遺傳多樣性分析。PCR 擴(kuò)增體系為10 μL：2×TaqPCR MasterMix 5 μL、滅菌超純水2 μL、上游引物（10 μmol/L）0.5 μL、下游引物（10 μmol/L）0.5 μL、模板DNA 2 μL。PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?5 ℃預(yù)變性4 min；94 ℃變性40 s，60～55 ℃（每個(gè)循環(huán)降低1 ℃）退火30 s，72 ℃延伸30 s，35 個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。PCR 產(chǎn)物經(jīng)8.0%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，銀染顯色。

1.4 數(shù)據(jù)分析

整理并記錄所有條帶：先統(tǒng)計(jì)電泳圖等位基因，從上往下對(duì)等位基因數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)于不同泳道（樣品）下的條帶，在相應(yīng)等位基因上有條帶的記為“1”、沒有的記為“0”，由此獲得0～1 矩陣（每一行為一個(gè)泳道數(shù)據(jù)）。利用DataFormater 軟件［25］對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行格式轉(zhuǎn)換后，再利用Popgene32 軟件［26］進(jìn)行等位基因數(shù)（Na）、有效等位基因數(shù)（Ne）和Shannon 多樣性信息指數(shù)（I）等遺傳多樣性參數(shù)分析。另外，在統(tǒng)計(jì)軟件DPS［27］的遺傳聚類模塊下，基于Jiccard 方法將整理好的0～1 矩陣數(shù)據(jù)進(jìn)行材料間的遺傳距離計(jì)算，得到遺傳距離矩陣，利用MEGA6.0 軟件［28］以類平均法（UPGMA）進(jìn)行聚類分析，繪制聚類圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 辣椒種質(zhì)材料重要性狀調(diào)查及疫病抗性鑒定

對(duì)96 份辣椒種質(zhì)材料的熟性、果色、果型和果實(shí)風(fēng)味4 個(gè)性狀的調(diào)查顯示，在熟性方面，早熟、中熟和遲熟辣椒材料分別有19、49 和28份；在果色方面，青熟果色為綠色、紅熟果色為紅色的辣椒材料占絕大多數(shù)，多達(dá)75 份；在果型方面，有57 份材料為圓錐形，牛角形、羊角形、燈籠形、螺絲形、線形和長(zhǎng)柱形辣椒材料各有少量；在果實(shí)風(fēng)味方面，中辣材料占比較多、有40份，極辣、辣、微辣和甜的材料分別有17、11、14 和14 份（表1）。疫病抗性鑒定結(jié)果顯示，96 份材料中，免疫材料有1 份，是國(guó)外引進(jìn)的辣椒抗疫病資源；高抗材料有6 份，其中遲熟指天椒占3 份；抗病材料有24 份，占材料總數(shù)的25%；感病和高感材料分別有53 份和12 份，分別占材料總數(shù)的55%和13%，該調(diào)查數(shù)據(jù)與田間種植時(shí)疫病調(diào)查結(jié)果基本一致，只有編號(hào)10、28、45、54等4 份材料不一致，在田間均表現(xiàn)為抗?。ū?）。

表1 96 份辣椒種質(zhì)材料疫病抗性評(píng)價(jià)及重要性狀表型Table 1 Evaluation of Phytophthora disease resistance and phenotype of important traits of 96 pepper germplasm materials

2.2 SSR 分子標(biāo)記篩選及分析

利用表現(xiàn)型差異較大的10 份辣椒材料，從102 對(duì)SSR 引物中篩選出20 對(duì)擴(kuò)增穩(wěn)定、條帶清晰且多態(tài)性豐富的引物組合（圖1）。20 個(gè)SSR標(biāo)記較均勻地分布于辣椒12 條染色體上，除第10、12 染色體上沒有分布外，其他染色體上均有分布（表2）。

表2 20 對(duì)SSR 引物組信息Table 2 Information of 20 pairs of SSR primers

圖1 20 個(gè)SSR 分子標(biāo)記擴(kuò)增情況Fig.1 Amplification performance of 20 SSR molecular markers

以篩選出的20 對(duì)引物對(duì)96 份辣椒種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析，20 對(duì)引物共檢測(cè)出79 個(gè)等位基因（Na）位點(diǎn)，每對(duì)引物檢測(cè)到的等位基因數(shù)為2～9 個(gè)、平均為3.95 個(gè)，檢測(cè)到的有效等位基因數(shù)（Ne）共48.0740 個(gè)、平均為2.4037 個(gè)；Shannon 多樣性信息指數(shù)（I）在0.2992～1.9893之間、平均值為0.9513，表明標(biāo)記的遺傳多態(tài)性較高；檢測(cè)到的雜合度（Ho）在0～0.9792 之間，平均為0.1640；期望雜合度（He）在0.1622～0.8484之間，平均為0.5287；Nei’s 遺傳多樣性指數(shù)（H）在0.1614～0.8440 之間，平均為0.5259，表明材料間遺傳多樣性高（表3）。綜合分析顯示，篩選出的20 個(gè)SSR 分子標(biāo)記多態(tài)性良好，能夠有效分析遺傳多樣性。

表3 20 個(gè)SSR 分子標(biāo)記遺傳多樣性指數(shù)Table 3 Genetic diversity index of 20 SSR molecular markers

2.3 辣椒種質(zhì)材料的聚類分析

基于Jaccard 方法進(jìn)行遺傳距離計(jì)算，利用UPGMA 方法對(duì)96 份辣椒種質(zhì)材料進(jìn)行聚類分析，結(jié)果表明在遺傳距離0.37 處可以將供試材料分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等3 個(gè)大類群。第Ⅰ大類群所含個(gè)體數(shù)最少、僅3份，均是從美國(guó)引進(jìn)的辣椒種質(zhì)材料，其中編號(hào)78、79 的材料分別是已育成辣椒新品種金田1 號(hào)的父母本。第Ⅱ大類群包含14 份材料，其中編號(hào)74、75 兩份材料極其相似，遺傳距離僅為0.0062，兩者應(yīng)該是同一份材料的不同株系；在這14 份材料中，各有4 份材料是指天椒（編號(hào)74、75、80 和81）和甜椒（編號(hào)6、71、72 和73）類型，即這兩類果型、果實(shí)風(fēng)味等性狀表現(xiàn)出極大差異的材料聚在一起。第Ⅲ大類群所含個(gè)體數(shù)最多、共有79 份材料，在遺傳距離0.32 處又可將第Ⅲ大類群分為Ⅲa、Ⅲb 和Ⅲc 等3 個(gè)亞類群，3 個(gè)亞類群分別包含有16、12 和51 份材料。在Ⅲa 亞類群中，編號(hào)65 和68 兩份材料的遺傳距離極小、僅為0.0054；Ⅲb 亞類群中，編號(hào)87 和92 兩份材料的遺傳距離也僅為0.0081；在Ⅲc 亞類群中，編號(hào)69 和70，12 和49，1 和11，17 和45，以及3、25、32、36、39、40、43和44 這5 組材料的遺傳距離均接近于0（圖2），推測(cè)以上7 組材料均來源于同一材料的不同株系。

圖2 96 份辣椒種質(zhì)材料的遺傳多樣性聚類分析Fig.2 Cluster analysis of genetic diversity of 96 pepper germplasm materials

3 討論

種質(zhì)資源是遺傳育種的基礎(chǔ)，為應(yīng)對(duì)當(dāng)前全球氣候變化帶來的挑戰(zhàn)以及人們對(duì)農(nóng)產(chǎn)品數(shù)量需求的增加和品質(zhì)要求的不斷提高，收集豐富的作物種質(zhì)資源并建立資源庫(kù)是極為重要的一項(xiàng)工作。然而，數(shù)量龐大的作物種質(zhì)資源在保護(hù)和管理實(shí)踐中均面臨著問題，因此，建立一個(gè)核心基因庫(kù)，在保留作物種質(zhì)基因多樣性的同時(shí)盡可能去除重復(fù)或是遺傳關(guān)系相近的種質(zhì)資源是一條有效途徑。前人或基于表型數(shù)據(jù)、或基于基因型數(shù)據(jù)或是將以上兩者結(jié)合起來，構(gòu)建了核心種質(zhì)庫(kù)［29-31］。Gu等［17］利用29 對(duì)SSR 標(biāo)記對(duì)我國(guó)蔬菜中期基因庫(kù)中的1 904 份辣椒種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析，最終選擇248 份覆蓋75.6% SSR等位基因的材料作為核心種質(zhì)。Christov等［13］基于21 個(gè)SSR 標(biāo)記對(duì)176 份一年生辣椒種質(zhì)進(jìn)行

遺傳多樣性分析，并最終選出44 份核心材料構(gòu)建了一個(gè)迷你型核心基因庫(kù)。本研究通過從辣椒基因組上的102 個(gè)SSR 分子標(biāo)記中篩選出20 個(gè)擴(kuò)增穩(wěn)定、條帶清晰且多態(tài)性豐富的標(biāo)記對(duì)96 份辣椒資源進(jìn)行分析，結(jié)果顯示這20 個(gè)篩選出來的分子標(biāo)記遺傳多態(tài)性較高，可以用于辣椒種質(zhì)材料的遺傳多樣性分析。此外，分析結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，材料74 和75，65 和68，87 和92，69 和70，12和49，1 和11，17 和45，以及3、25、32、36、39、40、43和44這8組材料的遺傳距離均接近于0，表明它們之間親緣關(guān)系極近，在種質(zhì)保存時(shí)每組只保留其中一份即可。盡管如此，96 份辣椒種質(zhì)材料的平均Nei’s 遺傳多樣性指數(shù)為0.5259，表明材料間遺傳多樣性高，具有應(yīng)用于雜交育種的前景。

常見的辣椒疫病接種鑒定方法有離體葉片接種法、切莖接種法和游動(dòng)孢子液灌根接種法，以上3 種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，但灌根接種法因更接近于辣椒疫病在田間的發(fā)生過程，因此更接近于辣椒材料的真實(shí)抗性水平［32-33］，也最為常用。2011 年開始實(shí)施的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《辣椒抗疫病鑒定技術(shù)規(guī)程》（批準(zhǔn)號(hào)：NY/T 2060.1-2011，下稱“標(biāo)準(zhǔn)”）規(guī)定，接種前需用玻棒在距幼苗根莖約3 cm 處扎一孔，孔深3 cm 左右［34］，且表型鑒定采用分級(jí)，分別為0～5 級(jí)：0 級(jí)為無任何癥狀；1 級(jí)為幼苗根莖部稍有變黑，葉片不萎蔫或可恢復(fù)性萎蔫；2級(jí)為幼苗根莖部變黑達(dá)1～2 cm，葉片不可恢復(fù)性萎蔫，下部葉片偶有脫落；3 級(jí)為幼苗根莖部變黑超過1～2 cm，葉片明顯萎蔫或落葉明顯；4 級(jí)為幼苗根莖部變黑、皺縮，生長(zhǎng)點(diǎn)外部葉脫落或整株萎蔫；5 級(jí)為植株枯死。鑒定過程操作越繁瑣，通常越容易帶來誤差，如《標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定的“在距幼苗根莖約3 cm 處扎一孔”，以加快侵染速度的目的，完全可以通過增大疫霉菌游動(dòng)孢子液濃度來達(dá)到。另外，由于表型分級(jí)帶有“稍有”“偶有”等描述模糊的詞語，同時(shí)一個(gè)級(jí)別有好幾個(gè)病癥共存，造成表型鑒定復(fù)雜化且主觀性太強(qiáng)，影響表型鑒定的準(zhǔn)確性。因此，本研究在對(duì)96 份辣椒種質(zhì)材料進(jìn)行疫病鑒定時(shí)采用的是改良后的灌根接種法。一是加大接種液孢子總量，即由標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的3×103增加到5×104的量，該接種量也是通過本團(tuán)隊(duì)長(zhǎng)期摸索得出并沿用至今［21,35-37］。表型調(diào)查中植株表型分為兩種，即分為無任何癥狀的正常植株和有不同程度病癥的發(fā)病植株［22］，將表型調(diào)查簡(jiǎn)化，如此盡可能減少實(shí)驗(yàn)誤差，使疫病鑒定結(jié)果更接近于材料本身的真實(shí)水平。

4 結(jié)論

通過辣椒全基因組掃描篩選到20 個(gè)SSR 標(biāo)記，對(duì)96 個(gè)辣椒種質(zhì)材料進(jìn)行了遺傳多樣性分析，20 個(gè)SSR 標(biāo)記的Shannon 信息指數(shù)平均值為0.9513，表明所選用的20 個(gè)SSR 分子標(biāo)記遺傳多態(tài)性較高，能夠用于遺傳多樣性分析；Nei’s 遺傳多樣性指數(shù)平均值為0.5259，表明材料間遺傳多樣性高，但聚類分析顯示有8 組材料間的遺傳距離接近為0，即親緣關(guān)系極近。因此，綜合表明這96 份辣椒種質(zhì)材料來源豐富，但存在同質(zhì)材料，在種質(zhì)保存時(shí)可以適當(dāng)舍棄部分材料。另外，改良后的辣椒疫病灌根鑒定方法鑒評(píng)結(jié)果與材料在田間表現(xiàn)基本一致，可以用于辣椒疫病抗性評(píng)價(jià)。