李先斌，陳金山，苗志國，徐 剛

（1.新鄉(xiāng)縣小冀鎮(zhèn)政府農(nóng)業(yè)農(nóng)村辦，河南 新鄉(xiāng) 453003；2.河南科技學(xué)院；3.河南興旺動物醫(yī)院）

豬副嗜血桿菌?。℉PS）是由豬副嗜血桿菌引起的一種以豬多發(fā)性纖維性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎為特征的接觸性細菌傳染病［1］。該疾病帶有較強的傳染性特點，由此帶給養(yǎng)殖行業(yè)的威脅較大，對豬群的生長發(fā)育極其不利［2］。目前，該病呈世界性分布，其發(fā)生呈遞增趨勢，以高發(fā)病率和高死亡率為特征，影響豬生產(chǎn)的各個階段，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴(yán)重損失［3］。該試驗根據(jù)豬副嗜血桿菌病的流行病學(xué)特點、臨床癥狀和病理變化，對新鄉(xiāng)某豬場的病豬進行診斷和治療，經(jīng)過深入分析和研究，很大程度上提高了豬副嗜血桿菌病的治愈率，為獸醫(yī)臨床工作者提供參考，以期能夠為廣大養(yǎng)殖戶提供更切實有效的治療方案，從最大程度上減輕養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟損失。

1 材料與方法

1.1 藥品和材料

1.1.1 試驗藥品

注射用氨芐西林鈉、氟尼辛葡甲胺注射液、穿心蓮注射液、恩諾沙星注射液、硫酸卡那霉素注射液、雙黃連注射液。

1.1.2 病例來源

新鄉(xiāng)某豬場，建于2008年，現(xiàn)存欄1 500頭，其中能繁母豬120頭，后備母豬30頭，哺乳豬400頭，保育及育肥豬950 頭，日常完成對豬瘟病毒、藍耳病毒、圓環(huán)病毒、偽狂犬病毒、口蹄疫病毒等疫苗的常規(guī)化防疫，飼喂方式為全價顆粒飼料自由采食。2021 年2 月上旬有100 頭豬出現(xiàn)臨床異?，F(xiàn)象，病豬主要表現(xiàn)精神沉郁、采食量下降，甚至厭食、喘氣，有的病豬出現(xiàn)腹部發(fā)紺、關(guān)節(jié)腫大，跛行等現(xiàn)象。

1.1.3 試驗器材及試劑

普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、巧克力瓊脂培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基、TSA培養(yǎng)基、顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱、接種環(huán)、金黃色葡萄球菌（河南科技學(xué)院實驗室提供）、鮮豬血液。

各種細菌生化反應(yīng)管：H2S、果糖、蔗糖、木糖、接觸酶、氧化酶、脲酶、葡萄糖、精氨酸水解酶（河南科技學(xué)院實驗室提供）。

染色試劑：亞甲基藍染色液、革蘭碘液、草酸銨結(jié)晶紫液、95%酒精、石碳酸復(fù)紅、二甲苯、香柏油（河南科技學(xué)院實驗室提供）。

1.2 方法

1.2.1 流行病學(xué)調(diào)查

調(diào)查場內(nèi)病豬的整體活動情況、飼養(yǎng)管理情況、病豬年齡、發(fā)病率、死亡率、本場免疫程序、發(fā)病豬用藥情況，并進行詳細記錄。

1.2.2 臨床癥狀

采用臨床基本檢查法、整體檢查法、一般檢查法和系統(tǒng)檢查法，詳細記錄發(fā)病豬的臨床癥狀。

1.2.3 剖檢病變

對死亡和治療失敗的5 頭病死豬進行剖檢，觀察其心、肺、肝、脾、胸腔、腹腔、淋巴結(jié)等病理變化，并做詳細剖檢記錄。

1.2.4 實驗室檢查

1.2.4.1 細菌的分離與純化

采集明顯的病變組織，心臟、肺臟、脾臟、肝臟及關(guān)節(jié)液。無菌條件下在病變典型處取樣，接種于TSA 培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)恒溫48 h。再挑取灰白或透明、光滑呈露珠樣的菌落接種于另一培養(yǎng)基（同上述），37 ℃培養(yǎng)48 h。將疑似致病菌的菌落進行革蘭氏染色，然后進行鏡檢。鏡檢可見革蘭氏陰性短桿菌，有的單個存在，有的連在一起；亞甲基藍染色呈兩極濃染。

1.2.4.2 細菌培養(yǎng)特性

在無菌條件下將可疑致病菌接種于普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、巧克力瓊脂培養(yǎng)基、SS 培養(yǎng)基、0.5%新生羔羊血清TSA培養(yǎng)基、鮮血培養(yǎng)基上，恒溫箱中37 ℃培養(yǎng)48 h，查看結(jié)果。

1.2.4.3 衛(wèi)星試驗

取可疑菌分別接種于兩個TSA培養(yǎng)基上，再取金黃色葡萄球菌平行劃線于其中一個培養(yǎng)基，對照的不再做任何處理，均置于恒溫箱中37 ℃培養(yǎng)，48 h后觀察結(jié)果。

1.2.4.4 細菌的生化鑒定

無菌條件下，將分離到的可疑菌接種于各種生化反應(yīng)管。接種好的生化管置于恒溫箱中37 ℃培養(yǎng)，48 h 后取出觀察生化反應(yīng)情況。

1.2.5 治療試驗

1.2.5.1 分組及治療方法

病豬實驗室檢測呈陽性，然后隨機分為4組，其中有1組對照組。分組與治療方法如下：

第1組：病豬10頭，添加電解多維、葡萄糖自由飲水。之后注射用氨芐西林鈉和氟尼辛葡甲胺注射液稀釋混合后，0.1ml/kg頸部肌肉注射，1 d 1次，連續(xù)使用5 d。

第2組：病豬10頭，添加電解多維、葡萄糖自由飲水。之后穿心蓮注射液0.2 ml/kg，恩諾沙星注射液0.2 ml/kg，頸部肌肉注射，1 d 1次，連續(xù)使用5 d。

第3組：病豬10頭，添加電解多維、葡萄糖自由飲水。之后硫酸卡那霉素注射液0.2 ml/kg，雙黃連注射液0.2 ml/kg，頸部肌肉注射，1 d 1次，連續(xù)使用5 d。

第4組：病豬10頭，添加電解多維、葡萄糖自由飲水，不做任何藥物治療，單獨隔離飼喂。

1.2.5.2 判定標(biāo)準(zhǔn)

病豬判斷標(biāo)準(zhǔn)：病豬精神沉郁，食欲下降甚至廢絕，被毛粗亂無光澤。咳嗽，喘氣，腹式呼吸，體溫升高，關(guān)節(jié)腫大、跛行，有些病豬見腹圍明顯增大。

痊愈判斷標(biāo)準(zhǔn)：用藥后精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，跛行明顯減輕，眼睛明亮有神。呼吸勻稱，體溫和食欲恢復(fù)正常，皮膚紅潤，排糞、排尿正常。

2 結(jié)果

2.1 流行病學(xué)調(diào)查

通過對新鄉(xiāng)某豬場豬副嗜血桿菌病調(diào)查結(jié)果顯示，自2021年2月12日至3月20日，豬場部分豬體溫升高、食欲下降、行走緩慢、呼吸困難，有的豬無明顯癥狀突然死亡。斷奶豬發(fā)病48 頭，以食欲下降、關(guān)節(jié)腫脹、跛行為主要特征；哺乳豬發(fā)病29 頭，以眼瞼皮下水腫、鼻腔膿狀分泌物多為主要特征；育肥豬發(fā)病18頭，以高熱、腹式呼吸、共濟失調(diào)為主要特征；成年母豬發(fā)病5頭，以四肢無力、被毛粗亂、咳嗽為主要特征。該豬場衛(wèi)生條件較差，防疫不規(guī)范，未能對母豬及4周齡仔豬進行疫苗接種。通風(fēng)不良，飼養(yǎng)密度大，發(fā)病豬未進行及時隔離、消毒和治療，期間共死亡8頭，致死率為8.0%。

豬是天然宿主，病豬和帶菌豬是主要的傳染源，主要傳播途徑是通過呼吸道，也可以經(jīng)消化道傳播。該病一年四季均可發(fā)生，但早春及深秋氣溫變化波動大時易誘發(fā)。豬副嗜血桿菌病可影響豬生長的各個階段，該病菌一般多繼發(fā)于其他呼吸道細菌病和病毒病，引起豬群呼吸道綜合征，也被視為條件性致病菌。各年齡段發(fā)病率統(tǒng)計情況見表1。

表1 豬副嗜血桿菌病各年齡段發(fā)病率 單位：頭、%

2.2 臨床癥狀

該病的發(fā)生與環(huán)境變化、應(yīng)激有密切聯(lián)系，而且多為繼發(fā)病和混合感染病。臨床上主要表現(xiàn)為最急性型、急性型、慢性型3種類型。

最急性型常不見明顯癥狀，突然死亡。

急性型一般先發(fā)于體況良好的豬，精神不振，食欲下降，被毛粗亂，發(fā)熱（40.5 ℃～42 ℃），反應(yīng)遲鈍，咳嗽，喘氣，腹式呼吸明顯。可視黏膜、腹部皮膚、耳梢發(fā)紺。個別豬鼻腔有膿性分泌物，發(fā)生關(guān)節(jié)炎時，多見跗關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)腫大，不愿行走，站立困難，強行驅(qū)趕時病豬尖叫、跛行。有些可見腹圍明顯變大（如圖1），穿刺有大量淡黃色液體流出。臨死前多側(cè)臥或四肢呈劃水樣。公豬跛行，性行為減弱或消失；母豬生產(chǎn)力下降，妊娠母豬可發(fā)生流產(chǎn)。

慢性型多由急性型轉(zhuǎn)化而來，主要表現(xiàn)食欲下降，被毛粗亂，皮膚發(fā)白，四肢無力或跛行，生長發(fā)育不良。個別咳嗽，喘氣，呼吸困難（如圖2）。

2.3 病理變化

病死豬通常體表可見大面積瘀血，嚴(yán)重時可見背部、耳部、四肢末梢發(fā)紺。胸腔、腹腔可見大量積液，并有大量纖維素性滲出物，出現(xiàn)粘連。心包液增多，早期淡黃色嚴(yán)重時呈現(xiàn)乳白色奶酪樣甚至豆腐渣樣滲出物，隨著心臟的波動可以在外表形成一層白色絨毛，俗稱“絨毛心”。心冠脂肪呈膠凍樣，心肌有出血點。肺臟水腫、出血、瘀血、間質(zhì)增寬、邊緣變鈍，肺表面覆蓋有大量的纖維素性滲出物，嚴(yán)重時肺臟與胸腔發(fā)生粘連。肝臟瘀血腫大，質(zhì)地變脆，切面外翻，表面常有纖維素性滲出物覆蓋。腎被膜混濁，脾臟有時也覆蓋有纖維素性滲出物。關(guān)節(jié)炎時可見關(guān)節(jié)腫大，觸診有波動感，多見于腕關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)，關(guān)節(jié)囊腫大，關(guān)節(jié)液增多。淋巴結(jié)腫大，切面出血。腦膜炎時可見軟腦膜充血、出血、瘀血等。

2.4 實驗室診斷結(jié)果

在麥康凱培養(yǎng)基、SS 培養(yǎng)基不生長；鮮血培養(yǎng)基、巧克力培養(yǎng)基生長不良；TSA培養(yǎng)基生長良好。金黃色葡萄球菌旁生長良好，菌株、菌落大，遠離的則稀少，甚至不生長，出現(xiàn)明顯“衛(wèi)星現(xiàn)象”。生化結(jié)果見表2。

表2 分離出來的菌株生化鑒定結(jié)果

2.5 治療結(jié)果

自由飲用電解多維及葡萄糖水支持療法，以及其他藥物分組治療結(jié)果如表3。

表3 分組治療結(jié)果統(tǒng)計 單位：頭、%

由表3可以看出：選用不同藥物對豬副嗜血桿菌病治療效果影響差異極顯著（P＜0.01）。第1 組采用注射用氨芐西林鈉和氟尼辛葡甲胺注射液的治療效果最好，治愈率達到80.0%。用過藥后病豬精神明顯好轉(zhuǎn)，皮毛光亮，采食量逐漸增多，體況開始變好，體溫正常，呼吸勻稱。

3 討論

3.1 綜合防控

豬副嗜血桿菌病在斷奶仔豬、保育豬的發(fā)病率明顯高于其他階段豬，主要由斷奶應(yīng)激和轉(zhuǎn)群應(yīng)激引起高發(fā)病率［4］。該病防治必須采取綜合性措施，特別是做好斷奶和轉(zhuǎn)群應(yīng)激的預(yù)防工作。生產(chǎn)實踐中，要因地制宜、分階段采取針對性措施，來預(yù)防該病的發(fā)生。

3.2 消毒措施

豬舍地面經(jīng)常保持清潔干燥，做好防寒保暖或防暑工作；食槽、飲水槽經(jīng)常刷洗，保持清潔［5］。對豬舍內(nèi)外徹底消毒;母豬產(chǎn)子前，應(yīng)將產(chǎn)房、產(chǎn)床徹底大消毒，對母豬乳房、外陰部也應(yīng)進行消毒處理;做好小豬斷奶、轉(zhuǎn)群應(yīng)激的預(yù)防工作，減少不必要的刺激，是預(yù)防該病的一個重要環(huán)節(jié)，電解多維飲水5～7 d；豬群發(fā)生該病時，應(yīng)立即隔離病豬，并用消毒液對豬舍、環(huán)境、用具、運輸工具等進行徹底消毒［6］。尚未發(fā)病的豬應(yīng)隔離飼養(yǎng)，并緊急注射疫苗。

3.3 免疫計劃

做好疫苗預(yù)防工作，增強豬只特異性免疫力［7］。也可用該場豬副嗜血桿菌病例分離的毒株，經(jīng)分離、鑒定后，制成菌苗用于預(yù)防該病，?？墒盏捷^好效果;禁止從發(fā)病豬場進豬，并且引進前要對引種場做必要調(diào)查;制定合理及時的用藥計劃，增強機體抵抗力。

通過臨床檢查、病理剖檢、實驗室檢測，最后確診為豬副嗜血桿菌病，進行分組藥物治療后，得知該病對氨芐西林鈉和氟尼辛葡甲胺注射液敏感，治愈率達到80.0%。在進行藥物治療的同時，要加強病豬的護理工作，改善飼養(yǎng)環(huán)境，只有這樣才能使該病取得良好的治療效果［8］。