(三江侗族自治縣程村水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站(農(nóng)業(yè)農(nóng)村站)，廣西 三江 545501)

0 引言

禽流感病不僅會(huì)導(dǎo)致雞養(yǎng)殖戶或畜牧農(nóng)戶的雞群大量死亡，同時(shí)疾病還會(huì)在短時(shí)間發(fā)生大面積暴發(fā)流行，一方面會(huì)給雞養(yǎng)殖戶或畜牧農(nóng)戶帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失；另一方面也給人們的食品安全構(gòu)成一定的威脅，因此需要畜牧獸醫(yī)部門全面做好禽流感病防疫工作。給雞群注射禽流感滅活疫苗便是一種有效的禽流感病免疫防控手段，當(dāng)前，從我國當(dāng)前的雞群禽流感滅活疫苗免疫防控現(xiàn)狀來看，不少畜牧獸醫(yī)技術(shù)人員并未選擇合適的禽流感滅活疫苗開展雞群免疫防控工作，從而導(dǎo)致雞群免疫防控工作質(zhì)量不佳，基于此，就需要畜牧獸醫(yī)技術(shù)人員全面了解禽流感滅活疫苗相關(guān)的知識(shí)和使用技巧，并正確地將禽流感滅活疫苗用于雞群的免疫防控工作中，才能全面提升雞群免疫防控水平，從而才能最大限度地預(yù)防或減少雞群禽流感病的發(fā)生[1]。

1 滅活疫苗的定義及禽流感滅活疫苗品種分型

滅活疫苗也被稱為死疫苗，指的是采用甲醛或加熱等理化方法殺死大量人工培養(yǎng)的完整病原微物，使其喪失感染性和毒性而保持免疫原性，并結(jié)合相應(yīng)的佐劑而制成的疫苗，由于滅活疫苗主要是通過甲醛或加熱等理化方法和生產(chǎn)工藝制備疫苗，使得制備出的滅活疫苗僅含所需的抗原成分，將其接種到體內(nèi)后，可促進(jìn)接種體獲得體液免疫，且滅活疫苗還具有清除、中和病原微生物及其產(chǎn)生的毒素等多種作用，從而能達(dá)到良好的防疫作用。禽流感滅活疫苗主要是從接種雞中收集感染胚液，采用人工培養(yǎng)方法制成的可實(shí)現(xiàn)裂解的疫苗，再將該疫苗注射到雞體內(nèi)，可對(duì)雞自身免疫系統(tǒng)產(chǎn)生刺激，形成后天免疫，從而能有效預(yù)防流感發(fā)生。

H5、H7、H9 3種病毒均是雞群最常見的亞型病毒，且感染這些病毒可對(duì)雞群生命安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅，為防控這3種亞型病毒感染所致的禽流感發(fā)生，我國對(duì)H5和H7亞型禽流感采取了強(qiáng)制免疫措施。H9型禽流感在養(yǎng)禽業(yè)也廣泛流行，尤其可對(duì)肉雞產(chǎn)生嚴(yán)重的危害，且該病毒還會(huì)產(chǎn)生H7N9、H5N6、H10N8等多種新型病毒基因供體，故我國大部分養(yǎng)雞場(chǎng)均進(jìn)行了H9禽流感滅活疫苗的免疫。上述3個(gè)禽流感滅活疫苗亞型品種中，H5亞型禽流感滅活疫苗(N28株)系用A型禽流感病毒A/TUrkey/England/N28/73(H5N2株，簡(jiǎn)稱N28株)接種雞胚培養(yǎng)后，將感染胚液收集，采用甲醛溶液對(duì)感染胚液進(jìn)行滅活處理，然后加入礦物油佐劑乳化制成乳白色乳狀液疫苗，該疫苗能有效預(yù)防由H5亞型禽流感病毒引起的禽流感。雞群接種后，14日便可產(chǎn)生免疫力，免疫期可維持4個(gè)月。H7亞型禽流感滅活疫苗(H7-Re1株)主要是提取A/Anhui/01/2013 的H7N9亞型禽流感病毒株HA，將其與A/Netherland//03的H7N7亞型禽流感病毒毒株HA序列進(jìn)行合成，然后，在3’端和5’端引入酶切位點(diǎn)分別設(shè)計(jì)引物，再采用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)目的片段進(jìn)行擴(kuò)增，然后對(duì)相應(yīng)酶切位點(diǎn)采用1%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行回收，并進(jìn)行酶切、同源重組、轉(zhuǎn)染重組等所制備的重組禽流感滅活疫苗。一項(xiàng)關(guān)于H7亞型禽流感滅活疫苗的免疫效果研究結(jié)果顯示，該疫苗的免疫保護(hù)期較長(zhǎng)，接種后20周左右時(shí)，疫苗抗體能保持較高的水平。H9亞型禽流感滅活疫苗主要是通過提取傳染性支氣管炎病毒M41株、雞新城疫病毒La Sota株、減蛋綜合征NE4株、禽流感YBF003株，采用甲醛或加熱等理化方法制備的滅活疫苗，可用于傳染性支氣管炎、雞新城疫、減蛋綜合征和H9亞型禽流感等雞群疾病或疫病防控。

2 應(yīng)用各類禽流感滅活疫苗進(jìn)行雞群免疫防控的方法

2.1 H5亞型禽流感滅活疫苗免疫防控方法

H5亞型禽流感滅活疫苗需存儲(chǔ)在2℃～8℃環(huán)境中，且還需要避免該疫苗發(fā)生凍結(jié)，若疫苗凍結(jié)，嚴(yán)禁使用凍結(jié)的疫苗給雞群注射。該疫苗的有效期為12個(gè)月，接種前，獸醫(yī)技術(shù)人員應(yīng)仔細(xì)檢查疫苗的有效期，若疫苗超過有效期，應(yīng)禁止給雞群注射，另外，還需要檢查疫苗的狀態(tài)及是否混有雜質(zhì)異物，若疫苗出現(xiàn)破乳或苗中混有雜質(zhì)異物等現(xiàn)象，均須禁止給雞群注射，雞屠宰前28日內(nèi)禁止注射該疫苗。接種H5亞型禽流感滅活疫苗前，工作人員還須做好雞群接種準(zhǔn)備工作，將疫苗置于室溫環(huán)境中，使其升至室溫并充分搖勻，對(duì)注射時(shí)所用器具進(jìn)行嚴(yán)格消毒，對(duì)雞接種部位進(jìn)行局部消毒處理，一般選擇雞頸部中下1/3部位進(jìn)行皮下注射，也可選擇雞胸部進(jìn)行肌內(nèi)注射，于開產(chǎn)前14～21 d進(jìn)行免疫接種，2～5周齡雞群疫苗注射劑量為0.3 mL/只，5周齡以上雞群疫苗注射劑量為0.5 mL/只。

2.2 H7亞型禽流感滅活疫苗免疫防控方法

給雞群注射H7亞型禽流感滅活疫苗前，獸醫(yī)技術(shù)人員同樣需要全面檢查疫苗的外觀、性質(zhì)等，若發(fā)現(xiàn)疫苗出現(xiàn)破乳分層、異物、破損等現(xiàn)象，須避免給雞群注射，一般采用頸部皮下注射和胸部肌肉注射，免疫接種時(shí)間和雞群接種劑量同H5亞型禽流感滅活疫苗。

2.3 H9亞型禽流感滅活疫苗免疫防控方法

使用H9亞型禽流感滅活疫苗前，也需要將疫苗恢復(fù)至常溫，并充分搖勻后使用，且還需要對(duì)雞接種部位涂擦5%碘酒進(jìn)行消毒，采用頸部皮下注射或肌肉注射方式接種，開產(chǎn)前14～21 d進(jìn)行免疫接種，接種劑量為0.5 mL/只。

3 禽流感滅活疫苗對(duì)雞群的免疫防控效果

已有不少實(shí)踐證實(shí)，H5、H7、H9 3種禽流感滅活疫苗在雞群免疫防控中具有良好的應(yīng)用效果，有研究人員曾對(duì)江蘇省204個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)和16個(gè)種雞場(chǎng)進(jìn)行H5亞型高致病性禽流感免疫抗體監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示，江蘇省高致病性禽流感Re-5株平均免疫抗體合格率高達(dá)94.90%[2]。例如，有研究人員對(duì)遷西縣頤園雞場(chǎng)和龍順雞場(chǎng)267只雞接種H7亞型高致病性禽流感疫苗，結(jié)果顯示，接種雞均未發(fā)生禽流感，且無雞只死亡。H9亞型高致病性禽流感疫苗雖已被大部分雞場(chǎng)用于雞群免疫防控中，如粟永春等人對(duì)規(guī)模化種雞場(chǎng)采用禽流感H9亞型滅活疫苗進(jìn)行防控，結(jié)果顯示，雞群接種疫苗后，均產(chǎn)生較高的H9抗體，能達(dá)到防控禽流感H9亞型病毒感染雞群的目的[3]。但是，有研究指出，H9N2滅活疫苗并未效阻止禽流感疾病的流行[4]。且相關(guān)研究指出，即使在疫苗免疫雞后能夠產(chǎn)生高效價(jià)抗體水平(HI=12log2)，雞只也易被雞群中同居排毒雞傳播感染而染上呼吸道疫病疾病，提示H9N2滅活疫苗難以阻止H9N2流感病毒對(duì)上呼吸道的感染，同時(shí)也提示了現(xiàn)有禽流感滅活疫苗對(duì)雞群的免疫防控效果有限，這可能與雞只中呈現(xiàn)更高的復(fù)制能力以及在肺、腸外組織生長(zhǎng)的特性的流感病毒有關(guān)[5]。因此，需要獸醫(yī)技術(shù)人員及其他相關(guān)工作者積極探索和研發(fā)能夠激發(fā)細(xì)胞免疫或者黏膜的禽流感滅活疫苗，另外，還需要加強(qiáng)雞群防疫的體系建設(shè)，定期對(duì)雞養(yǎng)殖戶及農(nóng)戶進(jìn)行雞群疫病檢查，引導(dǎo)雞養(yǎng)殖戶及農(nóng)戶做好雞場(chǎng)衛(wèi)生管理等，才能有效預(yù)防雞群染上疫病，從而保證雞群健康的生長(zhǎng)。

4 結(jié)語

禽流感是近年來我國雞養(yǎng)殖業(yè)遇到的最嚴(yán)重的疫病災(zāi)害，對(duì)我國雞養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的影響。在雞養(yǎng)殖過程中，應(yīng)該重視禽流感的防控工作，可通過禽流感滅活疫苗提高雞群免疫力，降低疫病發(fā)生的概率。研究禽流感滅火疫苗防控情況，助推禽流感防控質(zhì)量提升。禽流感滅活疫苗是一種利用加熱或甲醛等理化方法將大量人工培養(yǎng)的完整病原微物殺死，使其喪失感染性和毒性而保持免疫原性，從而提高接種雞機(jī)體免疫力，進(jìn)而使其良好地抵御禽流感病毒侵襲的疫苗，目前，常用的禽流感滅活疫苗有H5、H7、H9 3種亞型，這3種的禽流感滅活疫苗亞型制備方法具有一定的差異，發(fā)揮的免疫作用也存在一定的差異，因此，在免疫防控中，需要獸醫(yī)技術(shù)人員根據(jù)雞群所需防控疾病類型的不同，選擇適當(dāng)?shù)那萘鞲袦缁钜呙鐚?duì)其進(jìn)行接種，且還需要全面掌握各類禽流感滅活疫苗接種時(shí)的注射事項(xiàng)，如疫苗使用前準(zhǔn)備工作、疫苗接種劑量，只有這樣，才能充分發(fā)揮禽流感滅活疫苗的免疫作用，從而最大限度地防控雞群禽流感病的發(fā)生，進(jìn)而推動(dòng)雞群健康生長(zhǎng)。