李紅燕 閆向民 張楊*

（1，新疆天山畜牧生物育種有限公司 831100；2，新疆畜牧科學(xué)院畜牧研究所 830000)

近年來，我國肉牛養(yǎng)殖業(yè)存在嚴(yán)重的供需不平衡現(xiàn)象。由于受非洲豬瘟影響，我國消費(fèi)者對肉牛需求量不斷上升。我國肉牛存欄量難以滿足市場的消費(fèi)需求。因此，為加大肉牛出欄量，保證肉品質(zhì)，養(yǎng)殖人員應(yīng)加強(qiáng)肉牛凍精改良技術(shù)，不斷提高凍精改良的受胎率，從而促進(jìn)我國肉牛養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展。

1 影響肉牛人工授精受胎率的因素

1.1 精子活力低

首先，凍精的精子活力低會(huì)導(dǎo)致母牛受胎率顯著下降。科學(xué)合理的輸精時(shí)間和操作是確保母牛受胎率的重要因素。母牛發(fā)情不規(guī)律、養(yǎng)殖人員輸精不規(guī)范、輸精時(shí)間不恰當(dāng)?shù)染蓪?dǎo)致母牛受胎率降低。除此之外，突然更換飼養(yǎng)環(huán)境會(huì)導(dǎo)致母牛出現(xiàn)環(huán)境應(yīng)激，影響排卵，進(jìn)而造成受胎率下降。

1.2 飼養(yǎng)管理差

肉牛飼養(yǎng)環(huán)境和衛(wèi)生條件較差、飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)瓤蓪?dǎo)致母牛消耗過多的營養(yǎng)。機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)可直接影響母牛受胎率。若母牛長期飼喂量不足，營養(yǎng)失衡，機(jī)體內(nèi)缺乏大量維生素、蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)后可造成卵巢機(jī)能減退，引發(fā)卵巢囊腫、變硬和靜止，進(jìn)而導(dǎo)致母牛發(fā)情不規(guī)律。部分母牛還會(huì)出現(xiàn)子宮頸口閉鎖，子宮發(fā)育不良等問題，從而導(dǎo)致受胎率下降[1]。

1.3 疾病因素

疾病是影響母牛受胎率的重要原因之一。母?；加嘘幍姥住⒆訉m內(nèi)膜炎或卵巢囊腫等生殖道疾病，可導(dǎo)致機(jī)體無法正常排卵、輸精，或?qū)е缕涫芫щy，受精后胚胎發(fā)育異常，進(jìn)而造成受胎率嚴(yán)重下降。

1.4 體質(zhì)

先天性體質(zhì)缺陷和后天性體質(zhì)缺陷的母牛受胎率較正常牛低。先天性體質(zhì)缺陷主要包括子宮發(fā)育不良、發(fā)育畸形、子宮頸口閉鎖、卵巢發(fā)育不良等。這些因素會(huì)直接導(dǎo)致母牛受胎率下降。后天性體質(zhì)缺失主要包括機(jī)體體況過肥或過瘦，從而造成母牛無法正常排卵，影響受胎率。

2 提升肉牛人工授精受胎率的技術(shù)措施

2.1 確保凍精精子活力和質(zhì)量

選擇凍精時(shí)應(yīng)在輸精前對其進(jìn)行認(rèn)真檢測，在確保其達(dá)到國標(biāo)要求后方可對母牛進(jìn)行輸精。精子活率是保證母牛受胎率的重要因素之一。精子活率高于0.3，畸形率低于20%，頂體完整率高于40%，可有效提高母牛受胎率。為避免凍精精子活力下降，相關(guān)人員應(yīng)加強(qiáng)對凍精的管理工作。日常應(yīng)將精液放置于-196℃的液氮罐中保存，同時(shí)定期檢查液氮。液氮罐應(yīng)放置于干燥、通風(fēng)、陰涼的環(huán)境中。當(dāng)液氮容量低于罐容量1/2 時(shí)應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充液氮。液氮罐內(nèi)液氮量最低不可低于罐容量的1/3，從而保證精液一直浸泡于液氮中，從而有效提高精子存活率。工作人員定期對液氮罐稱重，從而估計(jì)液氮罐內(nèi)液氮剩余量，或使用木棍測量剩余液氮量。人工授精前需將凍精解凍。凍精從液氮罐內(nèi)取出時(shí)動(dòng)作要迅速，時(shí)間控制在15s 以內(nèi)。若未在規(guī)定時(shí)間內(nèi)及時(shí)取出凍精，需將凍精重新放置于液氮中3s 以上，隨后再次取出。工作人員需將凍精放置于38℃的溫水中進(jìn)行解凍，解凍時(shí)間維持在15～20s 之間。解凍后檢查精子活力，當(dāng)精子活力達(dá)到60%以上時(shí)方可進(jìn)行人工授精。精子成活率低于60%時(shí)不符合輸精要求。凍精解凍完成后立即進(jìn)行人工授精，確保解凍后的精液在2h 內(nèi)使用，否則對精子存活率影響較大。另外，養(yǎng)殖場應(yīng)選擇正規(guī)供種單位提供的精液。同時(shí)，精液品種選擇應(yīng)符合當(dāng)?shù)厍闆r和市場需求。凍精質(zhì)量應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)。精液運(yùn)輸過程中應(yīng)輕拿輕放，防止出現(xiàn)劇烈碰撞導(dǎo)致液氮罐傾倒，造成精液無法全部浸沒在液氮內(nèi)，從而造成精液品質(zhì)下降。另外，應(yīng)保護(hù)好真空抽氣閥。運(yùn)輸過程中，運(yùn)輸車上應(yīng)鋪設(shè)具有一定厚度的軟墊子，并對其進(jìn)行固定。根據(jù)運(yùn)輸距離和運(yùn)輸條件使用木箱或紙箱將液氮罐進(jìn)行包裝，隨后將其牢牢固定在運(yùn)輸車輛上，避免出現(xiàn)顛簸和沖撞。

2.2 規(guī)范輸精操作

2.2.1 發(fā)情鑒定

做好母牛發(fā)情鑒定工作可有效提高母牛受胎率。不同品種的母牛發(fā)情周期不同，大多數(shù)母牛發(fā)情周期通常為21d，黃牛發(fā)情周期為18～24d，水牛發(fā)情周期為16～25d。母牛發(fā)情期可分為前期、中期和后期3 個(gè)階段。發(fā)情前期，母牛主要表現(xiàn)為興奮不安、鳴叫、食欲減退，排尿頻率增加，接受爬跨。用手按壓母牛后軀十字部位，母?？杀憩F(xiàn)為耳朵擺動(dòng)，回頭觀望等癥狀。此時(shí)觀察陰門可發(fā)現(xiàn)母牛陰門處稍有腫脹，陰門柔軟、松弛，褶皺變少。部分母牛陰門處有不透明的黏稠液體流出。發(fā)情中期，母牛表現(xiàn)出強(qiáng)烈的性沖動(dòng)，性格活躍，爬跨其他牛同時(shí)也接受其他牛爬跨。部分母牛尾部附著透明黏液，用手按壓后軀十字部位，母牛表現(xiàn)出尾巴高舉現(xiàn)象。發(fā)情后期的母牛拒絕其他牛爬跨。用手按壓后軀十字部位，母牛表現(xiàn)出明顯的拒絕和躲避，同時(shí)尾巴不上舉，尾部緊貼陰門。陰門部位逐漸干燥、褶皺，恢復(fù)原樣，陰道內(nèi)僅流出少量渾濁的白色黏液。母牛發(fā)情期通常持續(xù)1～1.5d，部分母牛發(fā)情期較短僅可持續(xù)12h。也有少量母牛發(fā)情期較長，可持續(xù)2～3d。母牛發(fā)情期間，養(yǎng)殖人員可通過直腸觸摸卵巢的方法檢查卵巢狀態(tài)。若發(fā)現(xiàn)卵泡增大，卵泡壁緊而薄，卵泡直徑超過1cm，波動(dòng)感明顯，表明此時(shí)為母牛發(fā)情盛期。該時(shí)期距離母牛排卵通常還有6～8h。該階段進(jìn)行人工輸精可大幅度提高母牛受胎率。

2.2.2 適時(shí)輸精

最佳輸精時(shí)間應(yīng)根據(jù)母牛發(fā)情行為、陰門腫脹情況及卵泡發(fā)育程度進(jìn)行綜合判定。母牛發(fā)情初期主要表現(xiàn)為站立不動(dòng)，同時(shí)接受其他牛爬跨。一旦母牛出現(xiàn)拒絕爬跨行為則表明發(fā)情即將終止，此時(shí)可進(jìn)行配種。部分母牛發(fā)情時(shí)還伴有不停地鳴叫行為。此時(shí)應(yīng)在母牛鳴叫結(jié)束時(shí)及時(shí)進(jìn)行配種。在母牛發(fā)情末期進(jìn)行輸精，受胎效果最佳。發(fā)情初期，陰門處流出的黏液為稀薄透明狀。隨著發(fā)情進(jìn)行，黏液會(huì)變?yōu)闇啙狃こ頎?。牽拉黏液可出現(xiàn)很長的絲且黏液不斷[2]。當(dāng)母牛陰道處流出的黏液線長約5cm 時(shí)，養(yǎng)殖人員可進(jìn)行第1 次輸精。隨后間隔8h 后再進(jìn)行第2 次輸精。該輸精方式可有效提高母牛受胎率。經(jīng)產(chǎn)母牛通常早上發(fā)情，下午或晚上輸精。下午或晚上發(fā)情的母牛可在第2 天早上輸精。對初次發(fā)情的母牛由于發(fā)情時(shí)間較長，可在發(fā)情第3 天輸精。

2.2.3 輸精技術(shù)

輸精前，輸精人員應(yīng)保證手指甲剪短且磨平。對使用細(xì)管凍精的養(yǎng)殖場，養(yǎng)殖人員應(yīng)垂直捏住解凍后的細(xì)管，隨后拍打細(xì)管，使細(xì)管內(nèi)的氣泡集中至一端。隨后將細(xì)管放置于輸精槍上，封口處向上。用剪刀剪掉一段封口處，剪口要求垂直平整，保持細(xì)管長于輸精槍1cm 左右。不可剪得過長，以免造成精液流到輸精槍內(nèi)導(dǎo)致輸精失敗。

輸精時(shí)，輸精人員應(yīng)在手上涂抹適量潤滑液，左手五指合攏成錐形，將左手臂緩慢伸入母牛肛門，隨后掏出直腸內(nèi)的糞便，用水沖洗干凈。輸精人員抓穩(wěn)母牛子宮頸，使用棉球?qū)⒛概ｊ庨T處擦干。然后工作人員右手持輸精槍，以45°斜向上的方向避開尿道口插入陰道內(nèi)，隨后平直向前直至子宮頸口，此時(shí)輸精人員可感到硬硬的感覺。最后，將輸精槍緩慢穿過子宮頸進(jìn)入子宮內(nèi)，保持輸精槍前低后高的狀態(tài)將精液注入[3]。精液注入時(shí)間通常持續(xù)8s。輸精完成后，工作人員應(yīng)緩慢退出輸精槍，同時(shí)，按壓子宮頸。最后，將左手臂退出母牛直腸。輸精結(jié)束后，養(yǎng)殖人員應(yīng)加強(qiáng)對母牛的飼養(yǎng)管理工作，防止母牛劇烈運(yùn)動(dòng)，有效提高母牛受胎率。

除采用直腸輸精技術(shù)外，養(yǎng)殖人員還可采用開殖器輸精技術(shù)。該方法是借助開殖器，將母牛陰道擴(kuò)大，借助手電筒等準(zhǔn)確找到母牛子宮頸口，隨后將輸精槍插入子宮頸1cm 左右，注入精液。最后，緩慢取出輸精槍和開殖器。取出過程應(yīng)盡量緩慢，避免劃傷母牛生殖道。該方法操作簡單，易于掌握，但輸精部位淺，容易造成母牛生殖道感染。

2.3 防止母牛產(chǎn)科疾病

日常養(yǎng)殖過程中，養(yǎng)殖人員應(yīng)加強(qiáng)對母牛的飼養(yǎng)管理水平。應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充鈣、磷、維生素、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)元素，同時(shí)飼喂適量的青綠飼料。嚴(yán)格控制母牛體型，避免其過肥或過瘦。母牛發(fā)情前，養(yǎng)殖人員應(yīng)增加日常光照量和運(yùn)動(dòng)量，同時(shí)注射適量的維生素A 和維生素D，保證母牛生殖機(jī)能旺盛，從而有利于后期卵子的順利排出。對于妊娠期奶牛，養(yǎng)殖人員應(yīng)根據(jù)妊娠階段及時(shí)調(diào)整日糧。妊娠初期應(yīng)注意飼料質(zhì)量。提高妊娠期及哺乳期母牛日糧中的精料占比，這對產(chǎn)后母牛發(fā)情、受胎有顯著提高作用。同時(shí)，還應(yīng)加強(qiáng)牛舍清理工作，定期進(jìn)行殺菌消毒，保證牛舍干凈衛(wèi)生。制定科學(xué)合理的免疫程序，防止母牛產(chǎn)科疾病的發(fā)生。對患有產(chǎn)科疾病的母牛，養(yǎng)殖人員應(yīng)加強(qiáng)疾病治療。

陰道炎是一種常見的母牛產(chǎn)科疾病。該病主要發(fā)生于年齡較小的母牛身上。由于母牛陰道免疫力低，配種不當(dāng)容易導(dǎo)致母牛生殖道出現(xiàn)創(chuàng)傷，進(jìn)而造成陰道感染。對于有陰道炎的母牛，養(yǎng)殖人員可使用0.1%的高錳酸鉀溶液沖洗陰道，隨后注入20mL 青霉素溶液進(jìn)行治療。

患有隱性子宮內(nèi)膜炎的母牛無明顯器質(zhì)性變化，卵泡發(fā)育正常，陰門處有渾濁的分泌物流出，但多次配種仍無法受孕。對隱性子宮內(nèi)膜炎的母牛在母牛輸精前需使用50mL 的生理鹽水、青霉素、鏈霉素對子宮進(jìn)行灌注治療。隨后進(jìn)行適時(shí)輸精可有效提高受胎率至70%以上。患有黏液性子宮內(nèi)膜炎的母牛主要表現(xiàn)為子宮變粗、體積增大、子宮壁變薄、彈性下降，陰門處流出大量黑色物質(zhì)，且陰門附近有結(jié)痂。治療母牛時(shí)，養(yǎng)殖人員可采用0.1%的高錳酸鉀溶液或0.02%的碘溶液進(jìn)行子宮清洗，每2 天清洗1 次。同時(shí)，還可選用中藥知母30g、黃柏30g、香附40g、故子40g、芡實(shí)40g 進(jìn)行煎煮，給病牛服用。每2 天服用1 次，連續(xù)服用3 次，可取得良好的治療效果。

卵巢囊腫分為卵泡囊腫和黃體囊腫兩大類?；悸雅菽夷[的母牛主要表現(xiàn)為發(fā)情異常?；键S體卵囊腫的母牛主要表現(xiàn)為不發(fā)情。對患有黃體囊腫的母?？赏ㄟ^肌肉注射前列腺素或氯前列烯醇進(jìn)行治療。對患有卵泡囊腫的母牛還可通過肌肉注射絨促性素、黃體酮和促黃體素釋放激素進(jìn)行治療。除此之外，對患卵巢囊腫的母牛還可采用人工擠破方式進(jìn)行治療。但該方式容易造成纖維化、粘連和出血。另外，該方法操作難度較高，在實(shí)際治療過程中不常應(yīng)用。

2.4 加強(qiáng)對相關(guān)從業(yè)人員的技術(shù)培訓(xùn)

相關(guān)部門應(yīng)定期舉辦肉牛人工授精技術(shù)培訓(xùn)。邀請行業(yè)專家進(jìn)行授課，或組建團(tuán)隊(duì)到先進(jìn)地區(qū)交流、觀摩，從而提高從業(yè)人員的專業(yè)素養(yǎng)和技能，使其充分掌握母牛發(fā)情規(guī)律、凍精解凍技術(shù)及輸精技術(shù)[4]。肉牛凍精改良技術(shù)操作難度較大、綜合性強(qiáng)、環(huán)節(jié)眾多，因此，技術(shù)人員在實(shí)際養(yǎng)殖過程中應(yīng)詳細(xì)記錄母牛配種記錄，同時(shí)記錄母牛發(fā)情時(shí)間、癥狀、輸精時(shí)間和輸精量，從而不斷積累經(jīng)驗(yàn)，確保在母牛最佳輸精時(shí)間進(jìn)行輸精，進(jìn)而有效提高母牛受胎率。同時(shí)，還應(yīng)加強(qiáng)專業(yè)團(tuán)隊(duì)對母牛不孕癥的研究。充分了解母牛不孕癥病因，從而提高工作人員的技術(shù)水平。對患有不孕癥的母牛及時(shí)進(jìn)行病因檢查及后期治療，從而幫助母?；謴?fù)繁殖性能，提高母牛利用年限。

2.5 嚴(yán)格消毒

工作人員應(yīng)保持室內(nèi)衛(wèi)生清潔，通風(fēng)良好，地面無粉塵、蚊蠅等。同時(shí)，定期使用0.1%的新潔爾滅溶液或紫外燈對環(huán)境進(jìn)行殺菌消毒。輸精前，操作人員應(yīng)對輸精槍、母牛外陰部及自身手臂進(jìn)行嚴(yán)格的殺菌消毒。通常可選用0.1%的新潔爾滅溶液或75%的乙醇溶液。對母牛外陰部及周圍區(qū)域進(jìn)行殺菌消毒后還應(yīng)使用無菌毛巾將其擦干。輸精器械在殺菌消毒后還應(yīng)使用生理鹽水進(jìn)行沖洗，避免消毒液刺激母牛生殖系統(tǒng)。

2.6 建立嚴(yán)格規(guī)范的配種記錄制度

冷配站工作人員應(yīng)加強(qiáng)對繁殖母牛調(diào)查統(tǒng)計(jì)工作。逐頭登記母牛鑒定情況、配種日期、凍精品種、母牛年齡、膘度、胎次等信息，便于后續(xù)的跟蹤調(diào)查。同時(shí)，及時(shí)處理難產(chǎn)、產(chǎn)死胎等情況。

3 小結(jié)

綜上所述，肉牛凍精改良技術(shù)是我國肉牛繁殖的重要技術(shù)之一，可提高肉牛凍精改良受胎率，有效促進(jìn)我國肉牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展。肉牛受胎率高低與輸精技術(shù)、飼養(yǎng)管理、疾病等因素相關(guān)。養(yǎng)殖過程中，為有效提高肉牛凍精改良受胎率，工作人員需做好日常飼養(yǎng)管理、規(guī)范輸精操作，提高母牛體質(zhì)等工作。