安蔚 梁昊岳 孔曉冬

1天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院保健醫(yī)療部（老年醫(yī)學(xué)科），天津市老年病學(xué)研究所（天津 300052）；2中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液學(xué)研究所），實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家血液系統(tǒng)疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心，細(xì)胞生態(tài)海河實(shí)驗(yàn)室（天津 300020）

近年來(lái)腎臟疾病比例逐年升高［1］，已成為全球性重要公共衛(wèi)生問(wèn)題之一，一項(xiàng)30年（1990-2019）的調(diào)查研究顯示，在全球范圍內(nèi)，亞洲的慢性腎臟?。╟hronic kidney disease，CKD）患病率最高，2019年新增CKD 病例980 萬(wàn)例，其中763 024 例死于CKD 及其并發(fā)癥，1990-2019年間，CKD 患病率增長(zhǎng)一倍，從2.024 億增至4.312 億，造成巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［2］。早期發(fā)現(xiàn)及有效防治腎臟疾病對(duì)于改善患病人群后期生存質(zhì)量具有重大意義。如何早期發(fā)現(xiàn)并及時(shí)干預(yù)保護(hù)老年人腎功能仍然是目前臨床中急需解決的問(wèn)題。腎臟生理結(jié)構(gòu)復(fù)雜、腎臟疾病發(fā)病機(jī)制及病因多樣性、早期腎臟疾病臨床癥狀特異性差等因素導(dǎo)致腎臟疾病早期診斷仍然存在困難。目前腎臟疾病診斷的輔助檢查主要包括血液化驗(yàn)、尿液化驗(yàn)、影像學(xué)檢查以及“金標(biāo)準(zhǔn)”腎臟活檢，外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)分析［3］、MRI 等對(duì)于診斷腎臟疾病的價(jià)值也在不斷上升［4］。但是上述輔助檢查存在價(jià)格昂貴、操作繁瑣、敏感性及特異性不足等缺點(diǎn)，仍需探索新的診斷手段以期早期診斷腎臟疾病。

近年來(lái)，拉曼光譜技術(shù)（Raman spectroscopy，RS）在檢測(cè)新的生物標(biāo)記物方面頗具潛力，可協(xié)助臨床篩查疾病的易感性和發(fā)病率。與傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比，其具有非侵入性、所需樣本量小、化學(xué)試劑消耗量少等優(yōu)點(diǎn)。拉曼光譜技術(shù)目前已實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng)檢測(cè)血液、尿液、腦脊液、唾液等生物標(biāo)本，可用于活體內(nèi)的微創(chuàng)、實(shí)時(shí)組織監(jiān)測(cè)，輔助臨床診斷神經(jīng)退行性疾?。ㄈ绨柎暮Ｄ?、帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化癥等）［5-6］、傳染性疾病（如瘧疾、非洲錐蟲(chóng)病、新冠病毒等）［7-8］、腫瘤性疾?。ㄈ缒X癌、卵巢癌、膀胱癌、皮膚癌、胃腸道癌、肺癌等）［9-10］的診斷。既往有研究將RS 技術(shù)與算法模型相結(jié)合，測(cè)定腎病患者血清中尿素和肌酐的濃度、尿液中的尿素、肌酐、尿蛋白及葡萄糖含量，表明RS 技術(shù)可無(wú)創(chuàng)監(jiān)測(cè)某些特定的腎功能指標(biāo)，從而達(dá)到早期篩查腎臟疾病的目的［11］。SAATKAMP 等［12］應(yīng)用RS 技術(shù)結(jié)合PLS（部分最小二乘法）模型檢測(cè)尿液中尿素和肌酐的濃度，發(fā)現(xiàn)無(wú)腎臟疾病患者尿液樣本的拉曼光譜，峰值分別為527、1 006、1 160 /cm 處（指示尿素的存在）以及681、846、908 /cm 處（指示肌酐的存在），使用該模型估計(jì)糖尿病和高血壓患者的尿素和肌酐濃度發(fā)現(xiàn)，此類(lèi)人群檢測(cè)指標(biāo)較健康受試者明顯較低。上述研究表明RS 技術(shù)對(duì)于腎臟疾病鑒別診斷具有一定實(shí)用性及巨大潛力。因此，關(guān)于RS 技術(shù)在腎臟疾病鑒別診斷方面的探索，是本文重點(diǎn)闡述的內(nèi)容，本文主要從急性腎損傷（acute kidney injury，AKI）、慢性腎臟疾病（chronic kidney disease，CKD）、繼發(fā)性腎病、其他類(lèi)型腎病等幾方面重點(diǎn)論述RS 技術(shù)原理、技術(shù)優(yōu)勢(shì)、局限性、最新應(yīng)用前景等。

1 RS 技術(shù)與AKI

1928年，C.V RAMAN 首次報(bào)道了一種分子對(duì)光的非彈性散射現(xiàn)象，并以他的名字將這種現(xiàn)象命名為“拉曼效應(yīng)”，這種散射輻射稱(chēng)為“拉曼散射”。拉曼光譜技術(shù)，即測(cè)量拉曼散射輻射，通過(guò)使用單色光源（通常為激光）來(lái)檢測(cè)從樣品非彈性散射的光子，從而提供關(guān)于化學(xué)鍵和分子結(jié)構(gòu)的信息，并且每個(gè)分子都會(huì)產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)特的“光譜指紋”［13］，生物分子的拉曼光譜包含豐富且復(fù)雜的信息，一般情況下需使用多元統(tǒng)計(jì)方法降低此類(lèi)復(fù)雜數(shù)據(jù)集的維數(shù)來(lái)突出這些光譜差異，并能夠提取重要生物信息，從而實(shí)現(xiàn)主成分分析以協(xié)助診斷和分類(lèi)。利用RS 技術(shù)原理對(duì)生物標(biāo)本進(jìn)行分析，提取生物信息，近年來(lái)在腎臟疾病鑒別診斷領(lǐng)域成為熱點(diǎn)。

KDIGO 指南對(duì)AKI 的定義［14］是出現(xiàn)以下情況的任意一種：48 h內(nèi)血清肌酐（serum creatinine，SCr）升高≥26.5 μmol/L；或已知或認(rèn)定在過(guò)去7 d 內(nèi)SCr升高≥基線值的1.5 倍；或6 h 尿量＜0.5 mL/（kg·h）。臨床中AKI 患者發(fā)生CKD、終末期腎病（end stage renal disease，ESRD）風(fēng)險(xiǎn)性增加，因此早期診治顯得尤為重要。目前AKI 診斷標(biāo)準(zhǔn)基于SCr 和（或）尿量的改變，但由于腎損傷發(fā)生在肌酐升高之前，因此血清肌酐對(duì)于預(yù)測(cè)AKI 仍有一定限制，仍需要更加準(zhǔn)確的生物標(biāo)志物來(lái)預(yù)測(cè)AKI。既往的研究表明，術(shù)前胱抑素C［15］、術(shù)前白蛋白/肌酐比值［16］可預(yù)測(cè)圍手術(shù)期AKI 的發(fā)生；尿中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)沉積蛋白（NGAL）、血漿NGAL 和尿白細(xì)胞介素-18（IL-18）與成人心臟手術(shù)患者AKI 的發(fā)生和不良預(yù)后相關(guān)［17］；尿中IL-18、胱抑素C、腎損傷分子1（KIM 1）和肝型脂肪酸結(jié)合蛋白的濃度也可預(yù)測(cè)內(nèi)源性AKI［18］。

最新的傅里葉變換RS 技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)［19］，腎缺血再灌注后伴隨的生理穩(wěn)態(tài)變化，可以顯示出特征性的振動(dòng)光譜變化。酪氨酸、色氨酸、胱氨酸/半胱氨酸、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、膠原蛋白Ⅲ是與振動(dòng)變化相關(guān)的代謝產(chǎn)物，這些譜帶可能成為與腎損傷患者心臟病發(fā)展相關(guān)的分子標(biāo)記物，在檢測(cè)與急性至慢性腎損傷進(jìn)展相關(guān)的分子標(biāo)記和死亡預(yù)測(cè)因子方面具有一定臨床意義。相比于常規(guī)檢測(cè)技術(shù)，拉曼光譜技術(shù)具有無(wú)創(chuàng)、標(biāo)本較易獲取、可實(shí)時(shí)反映機(jī)體情況等優(yōu)勢(shì)，對(duì)于疾病早期篩查階段具有重大臨床意義。但目前對(duì)于急性腎損傷方面的拉曼光譜臨床研究仍不夠完善，同時(shí)仍未確定明確的生物標(biāo)志物來(lái)特定反應(yīng)急性腎臟損傷，未來(lái)應(yīng)繼續(xù)提高拉曼光譜技術(shù)對(duì)于急性腎損傷標(biāo)志物識(shí)別的敏感性及特異性，發(fā)現(xiàn)更多指向急性腎損傷的拉曼光譜峰位，從而更好的輔助臨床診斷、篩查，更早發(fā)現(xiàn)腎臟損傷。

2 RS 技術(shù)與CKD

慢性腎臟疾病是世界范圍內(nèi)主要的非傳染性疾病之一，在不同的國(guó)家，它影響著5%～13%的總?cè)丝冢?0］。CKD 是指腎臟損害或腎小球?yàn)V過(guò)率（GFR）下降持續(xù)3 個(gè)月及以上，并根據(jù)病因、GFR和蛋白尿標(biāo)準(zhǔn)（CGA 分類(lèi)）進(jìn)行分類(lèi)，其中GFR 可以通過(guò)尿液和血液中過(guò)濾標(biāo)記物的血漿清除率來(lái)評(píng)估，CKD 的診斷主要基于血清肌酐的測(cè)量和相應(yīng)的估算的腎小球?yàn)V過(guò)率（estimated GFR，eGFR）的計(jì)算。既往的研究證明，老年人群查體時(shí)增加尿白蛋白、尿肌酐、血尿酸的定量檢測(cè)，有助于腎臟損傷早期階段CKD 的篩查［21］。CKD 可能生物標(biāo)志物包括eGFR、NGAL、胱抑素C、不對(duì)稱(chēng)二甲基精氨酸（ADMA）、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白（L-FABP）、血尿素氮（BUN）、白蛋白排泄率（AER）等，近年來(lái)有研究表明可溶性尿激酶型纖溶酶原激活劑受體（suPAR）、腫瘤壞死因子受體（TNF-R）、表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、半乳糖凝集素3（Galectin-3）等可用作CKD 早期診斷的生物標(biāo)志物［22］，但由于CKD 通常起病隱匿，早期診斷仍然存在挑戰(zhàn)，因此需要更敏感、更簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法。

近期的研究［23］表明，RS 技術(shù)對(duì)于SCr、BUN、血清胱抑素C 的陽(yáng)性檢出率均明顯高于常規(guī)腎功能檢查，說(shuō)明RS技術(shù)可用于CKD的診斷。KAMINSKA等［24］首次證實(shí)尿液細(xì)胞外囊泡（UEV）的RS 特征可作為區(qū)分健康受試者和患有不同階段CKD 的糖尿病患者的生物標(biāo)記物；ZONG 等［20］研究發(fā)現(xiàn)，檢測(cè)CKD 組和健康對(duì)照組的血清標(biāo)本時(shí)，約1 094、1 290、1 398 /cm 處的SERS 峰僅出現(xiàn)在CKD 患者中，而在健康對(duì)照組中未發(fā)現(xiàn)特別顯著的峰，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)CKD 患者在724、1 328、1 450 /cm 處的SERS 峰值強(qiáng)度高于健康對(duì)照組，而對(duì)照組在641、811、890、1 132、1 210、1 655 /cm 處的SERS 峰值強(qiáng)度高于CKD 患者；檢測(cè)尿液標(biāo)本時(shí)，健康對(duì)照組在640、724、1 137、1 343/cm 處的SERS 峰強(qiáng)度高于CKD 患者，而在1 079、1 185、1 287、1 383 /cm 處的SERS 峰強(qiáng)度增加在CKD 患者中更加明顯。這些尿液光譜的標(biāo)記峰位代表了其主要成分（例如尿素、肌酐、肌酸、酮體、磷酸鹽、含氮化合物等），他們的研究表明血清和尿液樣本的SERS 分析與PCA-LDA（主成分分析-線性判別分析）方法相結(jié)合，對(duì)于快速評(píng)估CKD 分期具有良好的潛力。熊聲賀等［23］通過(guò)研究慢性腎病人群與健康人群拉曼光譜血清對(duì)比，CKD 組在544、724、933、1 004、1 368、1 442、1 607 /cm 處平均特征峰值強(qiáng)度均明顯低于健康對(duì)照組，而在1 127、1 219 /cm 處特征峰值強(qiáng)度均明顯高于健康對(duì)照組。

慢性腎衰竭（chronic renal failure，CRF）是CKD持續(xù)進(jìn)展后的結(jié)局，是終末期腎臟損害的一個(gè)階段，表現(xiàn)為代謝產(chǎn)物潴留和水、電解質(zhì)及酸堿失衡以及各系統(tǒng)癥狀，最終可發(fā)展為尿毒癥。CHEN 等［25］的研究表明，健康對(duì)照組和CRF 患者組的拉曼光譜都存在酰胺Ⅲ（1 230～1 282/cm）、磷脂（1 447/cm）和蛋白質(zhì)（1 585/cm），但在CRF 患者光譜中發(fā)現(xiàn)磷脂（1 447/cm）和蛋白質(zhì)（1 585、1 615、1 654/cm）的拉曼峰相對(duì)強(qiáng)度高于正常腎功能的對(duì)照組。WANG等［26］還發(fā)現(xiàn)血清拉曼光譜結(jié)合分類(lèi)算法可以快速準(zhǔn)確地診斷和區(qū)分甲狀腺異?；颊?、慢性腎功能衰竭患者和健康個(gè)體：慢性腎功能衰竭患者的類(lèi)胡蘿卜素水平（1 006、1 157、1 515 /cm）高于甲狀腺功能異?；颊吆徒】祩€(gè)體。此外，GAO 等［27］將血清拉曼光譜和卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)（CNN）相結(jié)合，發(fā)現(xiàn)CRF 患者和正常人的血液拉曼光譜在1 003/cm等處均有高強(qiáng)度峰值，但正常人的峰值強(qiáng)度明顯高于CRF患者；CRF患者光譜在957、1 193、1 210/cm處的峰值強(qiáng)度均不同程度低于正常人，而在1 445、1 655/cm處的峰值強(qiáng)度略高于正常人。BRATCHENKO 等［28］通過(guò)拉曼光譜技術(shù)結(jié)合PLS-DA（偏最小二乘法）模型，表明利用拉曼光譜進(jìn)行皮膚分析可能用于識(shí)別腎衰竭。上述研究成果說(shuō)明血清拉曼光譜技術(shù)可能成為臨床輔助診斷CRF 工具，從而早期發(fā)現(xiàn)CRF。

上述研究結(jié)果表明，CKD、CRF 患者與健康人之間的血液、尿液等生物標(biāo)本通過(guò)RS 技術(shù)分析后可呈現(xiàn)特定差異，為早期發(fā)現(xiàn)腎臟病變提供了新的技術(shù)手段，與臨床上常用的傳統(tǒng)輔助化驗(yàn)檢查及有創(chuàng)操作相比，其表現(xiàn)出更高的準(zhǔn)確性、所需樣本量少、重復(fù)操作性高等優(yōu)勢(shì)，不足之處在于關(guān)于慢性腎臟病的相關(guān)研究數(shù)據(jù)尚不完善，尚未建立系統(tǒng)的RS 技術(shù)篩查體系，未來(lái)應(yīng)繼續(xù)完善RS 技術(shù)在相關(guān)方面的研究，利用RS 技術(shù)優(yōu)勢(shì)，實(shí)現(xiàn)更加快速、高效地評(píng)估患者腎功能，發(fā)展為非侵入性輔助診斷、快速篩查的技術(shù)手段。

3 RS技術(shù)與繼發(fā)性腎?。╯econdary nephrosis）

繼發(fā)性腎病指腎外疾病，特別是全身性、系統(tǒng)性疾病導(dǎo)致的腎損害。雖然全身性疾病引發(fā)的腎損害有一定的交叉，但仍然可以根據(jù)全身性疾病進(jìn)行分類(lèi)。全身性疾病見(jiàn)于糖尿病、高血壓、自身免疫性疾病、淀粉樣變、腫瘤、感染及某些遺傳性疾病等。在我國(guó)，糖尿病腎病及高血壓腎病是終末期腎病的主要病因［29］。

3.1 糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）DN 是終末期腎病最常見(jiàn)的病因［30］，其基本病理特征是腎小管間質(zhì)病變、腎小球基底膜增厚、系膜基質(zhì)積聚和結(jié)節(jié)性腎小球硬化［31］，主要臨床表現(xiàn)為不同程度蛋白尿及腎功能的進(jìn)行性減退，DN 的診斷標(biāo)準(zhǔn)包括腎功能下降、糖尿病視網(wǎng)膜病變、尿白蛋白與肌酐比值升高以及腎小球?yàn)V過(guò)率降低［32］。隨著糖尿病發(fā)病率的上升，DN 已成為中國(guó)CKD 的第一大病因［33］，其中大多數(shù)DN 由2 型糖尿病發(fā)展而來(lái)。但DN 的預(yù)防和治療仍然面臨著挑戰(zhàn)，其中一個(gè)困難就是疾病初期，在蛋白尿出現(xiàn)之前已發(fā)生早期腎損害［34］，而無(wú)任何臨床表現(xiàn)。如何在無(wú)癥狀階段發(fā)現(xiàn)早期糖尿病腎臟損害，是臨床中需要解決的問(wèn)題。FLORES-GUERRERO 等［35］通過(guò)拉曼光譜檢測(cè)2 型糖尿病患者尿液標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)尿液中的肌酐、尿素、水和白蛋白等物質(zhì)在拉曼光譜中有其對(duì)應(yīng)的拉曼峰，其中1 450 /cm 處的拉曼信號(hào)強(qiáng)度增加，對(duì)應(yīng)于尿白蛋白濃度的升高，此方法可發(fā)現(xiàn)糖尿病患者低濃度的尿蛋白排泄增多，可應(yīng)用于篩查早期糖尿病腎病；HUANG 等［11］首次將SERS 與PDA 芯片相結(jié)合，用于檢測(cè)尿液中的微量白蛋白，以上研究表明拉曼光譜技術(shù)應(yīng)用于篩查糖尿病腎病的可行性。

3.2 高尿酸血癥（hyperuricemia，HUA）相關(guān)腎病 高尿酸血癥相關(guān)腎病在臨床上分為急性和慢性高尿酸性腎病及尿酸性腎結(jié)石。急性尿酸性腎病一般都有明確的誘因，可表現(xiàn)為少尿性腎功能衰竭。尿酸是嘌呤在肝臟內(nèi)進(jìn)行一系列代謝后的終產(chǎn)物，一般是由細(xì)胞代謝分解的核酸、嘌呤類(lèi)化合物及食物中的嘌呤產(chǎn)生，最后經(jīng)腎臟排出體外。慢性腎臟病中合并無(wú)癥狀HUA 的發(fā)生率逐年升高［36］，高尿酸血癥可繼發(fā)于腎臟疾病，并可進(jìn)一步加重腎臟疾病的發(fā)展，可導(dǎo)致高尿酸腎損害（包括急性和慢性高尿酸血癥性腎病及尿酸性腎結(jié)石）［37］，因此早期發(fā)現(xiàn)高尿酸血癥可減輕高尿酸腎損害。高尿酸血癥是指人體內(nèi)嘌呤代謝異常而引起血尿酸升高的一種代謝綜合征。根據(jù)《中國(guó)高尿酸血癥及痛風(fēng)診療指南（2019）》［38］，高尿酸血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)為：無(wú)論男女性別，非同日2 次測(cè)量血尿酸水平超過(guò)420 μmol/L。目前臨床上常用的尿酸檢測(cè)方法為磷鎢酸還原法和尿酸酶—過(guò)氧化物酶偶聯(lián)法等，但是上述方法存在操作繁瑣等諸多不足，因此需要更加簡(jiǎn)便的方法測(cè)定尿酸水平。有研究表明［39］，通過(guò)利用高效液相色譜法、吸光度下降法、毛細(xì)管電泳法及流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法等嘗試檢測(cè)尿液中尿酸含量后，發(fā)現(xiàn)上述方法具有前處理步驟復(fù)雜、儀器設(shè)備要求高、成本高等缺點(diǎn)，因而不適用于臨床。還發(fā)現(xiàn)將150 nm 的金納米粒子作為基底，利用表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)在0.01～0.5 mmol/L 范圍內(nèi)對(duì)尿液中的尿酸含量進(jìn)行定量分析，可以高效、便捷地測(cè)定尿液中尿酸。此外，已有大量研究應(yīng)用拉曼光譜技術(shù)監(jiān)測(cè)尿酸水平，并取得了一定進(jìn)展。HERNANDEZ 等［40］通過(guò)將電化學(xué)表面氧化增強(qiáng)拉曼散射（EC-SOERS）與平行因子分析（PARAFAC）模型的相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了在相關(guān)復(fù)雜樣品中測(cè)定尿酸；WANG 等［41］研究發(fā)現(xiàn)采用銀碳點(diǎn)納米復(fù)合材料作為SERS 基底時(shí)，在1 605/cm 處可以檢測(cè)到oxTMB（氧化3，3′，5，5′-四甲基聯(lián)苯胺，UA 還原后的產(chǎn)物）的SERS 信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)檢測(cè)尿酸的目的；ALULA 等［42］首次采用ZnO/Fe3O4制備SERS 襯底，這種材料穩(wěn)定且靈敏，可應(yīng)用于測(cè)定尿液中的尿酸，且無(wú)需對(duì)尿標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，從而簡(jiǎn)化了尿酸測(cè)定過(guò)程。上述研究證實(shí)拉曼光譜技術(shù)可用于尿酸的快速檢測(cè)，為快速、簡(jiǎn)便檢測(cè)尿酸提供了可能。

3.3 ANCA 相關(guān)性腎小球腎炎（ANCA-associated glomerulonephritis，AAGN） 抗中性粒細(xì)胞胞漿自身抗體（antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）相關(guān)血管炎是一種自身免疫疾病，可累及全身多個(gè)臟器，當(dāng)累及腎臟時(shí)可出現(xiàn)蛋白尿、血尿、高血壓等臨床癥狀，腎活檢是診斷血管炎腎病的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但由于病程的反復(fù)性，需要更為簡(jiǎn)便、安全的輔助檢查手段進(jìn)行復(fù)查或早期篩查。MORRIS等［43］利用拉曼光譜技術(shù)對(duì)AAGN 患者尿液標(biāo)本進(jìn)行光譜數(shù)據(jù)分析，發(fā)現(xiàn)光譜數(shù)據(jù)能夠高度準(zhǔn)確地區(qū)分慢性損傷和活動(dòng)性疾病的組織學(xué)病變，從而確定疾病是否處于活動(dòng)期，為AAGN 的診斷與篩查提供了新的方向。

綜上，拉曼光譜技術(shù)在幾種常見(jiàn)的繼發(fā)性腎病方面已有一定探索，并表現(xiàn)出無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)，同時(shí)可以減少實(shí)驗(yàn)室一次性耗材的使用，是更可持續(xù)發(fā)展的技術(shù)手段。不足之處在于，目前RS 技術(shù)尚不能同時(shí)檢測(cè)尿液中的多種蛋白質(zhì)，而且由于設(shè)備昂貴等問(wèn)題，難以大規(guī)模投入臨床。同時(shí)，目前未檢索到關(guān)于RS 技術(shù)在高血壓腎病方面的探索，未來(lái)應(yīng)繼續(xù)探索RS 檢測(cè)技術(shù)在血管相關(guān)性腎病方面的研究，如腎動(dòng)脈狹窄相關(guān)腎病等，完善檢測(cè)尿液中的多種蛋白質(zhì)的方法，進(jìn)一步降低技術(shù)操作成本，使RS 技術(shù)在臨床推廣成為可能。

4 RS 技術(shù)與其他類(lèi)型腎病

腎臟疾病包含種類(lèi)眾多，除上述已經(jīng)提到的研究進(jìn)展外，拉曼光譜技術(shù)在其他腎臟疾病方面也有所發(fā)展。研究表明，RS 技術(shù)結(jié)合多變量分析可用于診斷急性腎炎小鼠［44］；MULLER-DEILE 等［45］發(fā)現(xiàn)，RS 能夠在血清和組織水平上分析出復(fù)發(fā)性特發(fā)性局灶節(jié)段性腎小球硬化（FSGS）的“分子指紋”，并揭示與患者血清質(zhì)譜相對(duì)應(yīng)的代謝組學(xué)變化，他們發(fā)現(xiàn)FSGS 組與健康對(duì)照組的拉曼峰在對(duì)應(yīng)于膜結(jié)合磷脂酰膽堿、苯丙氨酸、磷脂、脂肪酸和鞘磷脂的波長(zhǎng)處存在最顯著差異，RS 不僅可以檢測(cè)到血清的血脂異常，還可以檢測(cè)到組織水平上的脂質(zhì)譜變化；HE 等［46］建立了基于光學(xué)拉曼光譜的支持向量機(jī)（SVM）模型來(lái)完成腎細(xì)胞癌的診斷，此外一篇Meta 分析表明［47］，RS 對(duì)腎癌的總體診斷敏感性為0.96，特異性為0.91。

綜上，既往研究證明RS 技術(shù)應(yīng)用于診斷腎病方面的潛力，與傳統(tǒng)技術(shù)手段相比，RS 數(shù)據(jù)提供了豐富的信息，且能一定程度上定量反映物質(zhì)濃度，但由于RS 機(jī)器操作較為復(fù)雜且檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，因而對(duì)操作人員有較高技術(shù)要求，同時(shí)光譜數(shù)據(jù)信息量大，需結(jié)合算法分析模型簡(jiǎn)化數(shù)據(jù)，這就使檢驗(yàn)過(guò)程變得較為復(fù)雜，未來(lái)研究可簡(jiǎn)化操作步驟，提高操作易行性，簡(jiǎn)化算法模型，從而使拉曼光譜技術(shù)更加廣泛應(yīng)用于臨床。

5 結(jié)論與展望

拉曼光譜技術(shù)在腎臟疾病鑒別診斷中已取得一定進(jìn)展，表現(xiàn)出非侵入性、所需樣本量少、重復(fù)操作性高等優(yōu)點(diǎn)，但目前拉曼光譜技術(shù)在大多數(shù)腎臟疾病診斷方面仍處于探索階段，多局限于實(shí)驗(yàn)室研究階段，相關(guān)研究數(shù)據(jù)尚不完善，尚未建立系統(tǒng)的拉曼光譜技術(shù)篩查體系，同時(shí)仍存在設(shè)備要求嚴(yán)格、成本高等問(wèn)題，應(yīng)繼續(xù)完善拉曼光譜技術(shù)在腎臟疾病方面的研究，完善疾病相關(guān)光譜峰位等信息，進(jìn)一步輔助臨床診斷。

本課題組在共聚焦拉曼光譜技術(shù)用于血液系統(tǒng)疾病以及神經(jīng)退行性疾病的鑒別診斷方面已進(jìn)行了一定探索［48-51］。近期本課題組研究發(fā)現(xiàn)，拉曼光譜技術(shù)結(jié)合OPLS-DA 模型（正交偏最小二乘判別分析），可實(shí)現(xiàn)利用骨髓上清液標(biāo)本檢測(cè)不同類(lèi)型的急性白血?。╝cute leukemia，AL），并可將AL 患者的生化參數(shù)與AL 的分類(lèi)及預(yù)后聯(lián)系起來(lái)，具有簡(jiǎn)便、無(wú)創(chuàng)且具有高靈敏度和特異性等優(yōu)勢(shì)［52］。目前本課題組正在研究利用拉曼光譜技術(shù)檢測(cè)尿液標(biāo)本，結(jié)合尿微量白蛋白肌酐比值等生化指標(biāo)，以期快速、簡(jiǎn)便發(fā)現(xiàn)早期腎臟病變。未來(lái)將繼續(xù)完善RS 技術(shù)，增加標(biāo)本檢測(cè)速度，簡(jiǎn)化設(shè)備，發(fā)展居家便攜式儀器以監(jiān)測(cè)特定指標(biāo)，同時(shí)不斷提高其診斷疾病的準(zhǔn)確性、敏感性、特異性，降低其應(yīng)用成本，使之成為更好的輔助檢查工具。不斷發(fā)展RS 技術(shù)與臨床相結(jié)合，發(fā)掘拉曼光譜技術(shù)在腎臟疾病鑒別診斷的潛能，對(duì)于早期診斷腎臟疾病、改善腎臟患者預(yù)后，進(jìn)而減輕后期疾病的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)具有重大意義。