崔 敏，林 宏，王青波

（1 北京新世紀(jì)兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科 北京 100045）

（2 北京市肛腸醫(yī)院檢驗(yàn)科 北京 100120）

食物不耐受與疾病的關(guān)系已經(jīng)得到醫(yī)學(xué)界廣泛關(guān)注。食物不耐受由IgG 抗體介導(dǎo)，具有發(fā)病遲緩、起病隱匿、無特異性等特點(diǎn)，食物不耐受可導(dǎo)致兒童出現(xiàn)嘔吐、急慢性腹痛、腹瀉等胃腸道癥狀，濕疹、蕁麻疹、血管神經(jīng)性水腫、其他皮疹等皮膚癥狀，哮喘、腺樣體肥大等呼吸道癥狀，頭痛、運(yùn)動(dòng)行為異常等神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，部分兒童在確診前存在發(fā)育不良的情況[1-2]?；诖耍狙芯繉?duì)疑似食物不耐受疾病血清樣本特異性抗體檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，初步了解兒童食物不耐受種類和特點(diǎn)，為疾病預(yù)防和兒童飲食計(jì)劃制定提供參考。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年1 月—2021 年12 月北京新世紀(jì)兒童醫(yī)院收治的食物不耐受896 例患兒。符合《赫爾辛基宣言》要求。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床有食物不耐受相關(guān)表現(xiàn)；②同一患者首次就診確診；③標(biāo)本留取符合要求；④檢測(cè)結(jié)果顯示IgG 抗體陽性；⑤符合醫(yī)院倫理委員會(huì)審查要求。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患兒有先天性疾??；②早產(chǎn)患兒；③使用免疫抑制劑治療患者；④近期使用血制品患者；⑤其他可能影響診斷判定的疾病。

1.2 方法

（1）標(biāo)本采集：患兒空腹至少4 h，取靜脈血3 ～4 mL，3 000 r/min 離心10 min，分離血清樣本進(jìn)行檢測(cè)，標(biāo)本的保存嚴(yán)格按照試劑說明書要求進(jìn)行。（2）試劑和方法：采用美國Biomeric 公司生產(chǎn)的食物特異性IgG 抗體（sIgG）檢測(cè)試劑盒，定性檢測(cè)血清中14 種食物：牛肉、雞肉、豬肉、鱈魚、玉米、螃蟹、蝦、雞蛋、牛奶、蘑菇、大米、小麥、大豆、西紅柿sIgG。首先制備濃度為50 U/mL、100 U/mL、200 U/mL、400 U/mL 的標(biāo)準(zhǔn)血清，將稀釋液（作為空白對(duì)照）、標(biāo)準(zhǔn)血清、陽性質(zhì)控和1:100稀釋的患者血清100 μL 分別加入反應(yīng)板相應(yīng)位置，封口膜封閉反應(yīng)板室溫（22 ～25 ℃）孵育1 h；用300 μL 清洗液清洗每個(gè)反應(yīng)孔3 次，將反應(yīng)板拍干；在每個(gè)反應(yīng)孔加入100 μL 結(jié)合物，室溫孵育30 min；清洗微孔板；在反應(yīng)孔加入100 μL 底物液，室溫孵育10 min；在每個(gè)反應(yīng)控加50 μL 終止液。用酶標(biāo)儀在450 nm 讀取各孔吸光度值，以標(biāo)準(zhǔn)血清濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線及每個(gè)反應(yīng)孔的吸光度值計(jì)算sIgG 水平。

1.3 觀察指標(biāo)

酶聯(lián)免疫法（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）檢測(cè)結(jié)果＜50 U/mL，判定結(jié)果為0 級(jí)陰性；檢測(cè)結(jié)果≥50 U/mL，結(jié)果判定為陽性，50 ～100 U/mL為1 級(jí)輕度敏感，100 ～200 U/mL 為2 級(jí)中度敏感，≥200 U/mL 為3 級(jí)高度敏感。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用（± s）表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)（n）和百分率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 食物不耐受檢測(cè)情況

896 份檢測(cè)血清中，875 份血清sIgG 陽性，陽性率97.7%?；純浩骄挲g（5.3±3.07），其中男性患者581例，平均年齡（5.3±3.07）歲；女性患兒294 例，平均年齡（4.9±3.07）。在所測(cè)定的14 種食物中，sIgG 陽性率由高到低依次為雞蛋、牛奶、小麥、西紅柿、大豆、大米、鱈魚、玉米、雞肉、蝦、螃蟹、蘑菇、豬肉、牛肉。雞蛋、牛奶sIgG 陽性率較高，均在80%以上，蘑菇、豬肉、牛肉的sIgG 陽性率低，在5%以下，見表1。

表1 875 例陽性標(biāo)本對(duì)不同食物sIgG 陽性檢測(cè)結(jié)果匯總

2.2 不同年齡、性別病例食物不耐受分布情況

將875 例病例分為3 組。嬰兒組：年齡＜1 歲，幼兒組：1 ≤年齡＜3 歲，兒童組：年齡≥3 歲。不同年齡段雞蛋、小麥、西紅柿、大豆、大米、玉米、蝦、牛肉sIgG 檢測(cè)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同年齡段病例牛奶、鱈魚、雞肉、蘑菇、螃蟹、豬肉sIgG 檢測(cè)結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；雞蛋、鱈魚、雞肉、蘑菇陽性率隨年齡增長呈增加趨勢(shì)，牛奶、西紅柿、大豆、小麥、大米、玉米、蝦、牛肉sIgG 陽性率隨著年齡的增長而下降，詳見表2。不同性別兒童中sIgG 陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表2 不同年齡組病例食物不耐受sIgG 結(jié)果比較[n（%）]

表3 不同性別病例食物不耐受結(jié)果比較[n（%）]

3.討論

當(dāng)前食物不耐受發(fā)病機(jī)制尚不明確，被廣為接受的觀點(diǎn)是食物不耐受是一種復(fù)雜的變態(tài)反應(yīng)性疾病，進(jìn)入機(jī)體的食物因消化酶的缺乏或消化酶分解能力不足，導(dǎo)致食物不能充分消化為小分子物質(zhì)，人體的免疫系統(tǒng)將進(jìn)入人體的某種或多種大分子食物當(dāng)成異物，從而針對(duì)這些物質(zhì)產(chǎn)生特異性IgG 抗體，IgG 抗體與食物顆粒形成免疫復(fù)合物，免疫復(fù)合物不能從體內(nèi)排除，長期積聚，從而引起機(jī)體發(fā)生炎性反應(yīng)，表現(xiàn)為相應(yīng)系統(tǒng)的疾病或癥狀，因表現(xiàn)隱匿，不易察覺。相關(guān)研究顯示，腸易激綜合征（irritable bowel syndrome, IBS）、炎性腸病（inflammatory bowel disease, IBD）、重度抑郁癥（major depressive disorder, MDD）、抽動(dòng)癥（tourette syndrome,TS）、強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis, AS）、濕疹及蕁麻疹等皮膚病與食物不耐受發(fā)生有關(guān)[3-7]。

不耐受食物通常是人們常食用的食物，本研究中的不耐受食物依次為雞蛋（88.46%）、牛奶（83.20%）、小麥（55.43%）、西紅柿（44.23%），不耐受發(fā)生率較低的是蘑菇（4.69%）、豬肉（2.86%）、牛肉（2.17%）。不同地區(qū)兒童食物不耐受發(fā)病相關(guān)報(bào)道結(jié)果并不一致[8-9]。這種情況的出現(xiàn)，一方面，由于不同地域人們飲食習(xí)慣有差異，另一方面，由于遺傳因素的影響，不同地區(qū)人群對(duì)不同食物的消化吸收能力不同。雞蛋和牛奶是主要不耐受食物，雞蛋富含優(yōu)質(zhì)蛋白，營養(yǎng)豐富，價(jià)格低廉，常作人們膳食中的主要營養(yǎng)物質(zhì)，雞蛋中的卵類黏蛋白和卵清蛋白、牛奶中的酪蛋白是引起食物不耐受的主要原因[10-11]。嬰幼兒輔食添加過程中，尤其要注意由少到多，由單一種類開始的原則。條件允許情況下，應(yīng)堅(jiān)持母乳喂養(yǎng)嬰兒，對(duì)于必須使用奶粉喂養(yǎng)而嬰兒表現(xiàn)為不耐受的，應(yīng)根據(jù)情況選擇深度水解奶粉或氨基酸奶粉等特殊配方奶粉。

本文結(jié)果顯示，不同性別兒童食物不耐受檢測(cè)結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。不同年齡段兒童對(duì)雞蛋、小麥、大豆、大米、玉米、蝦、牛肉比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。因接觸食物種類少，牛奶是嬰兒期主要不耐受食物，隨著輔食的添加，接觸的食物種類不斷豐富，一歲以后不耐受食物種類及陽性率隨之增加。雞蛋、鱈魚、雞肉、蘑菇陽性率隨年齡增長呈增加趨勢(shì)，牛奶、西紅柿、大豆、小麥、大米、玉米、蝦、牛肉sIgG 陽性率均隨著年齡的增長而下降[12]。既往研究表明，在兒童期不耐受檢測(cè)陽性率呈上升趨勢(shì)的食物，隨年齡增長呈下降趨勢(shì)，因嬰幼兒消化系統(tǒng)酶含量少，酶活性低，對(duì)淀粉、脂肪和蛋白質(zhì)消化功能差，隨年齡增長，消化系統(tǒng)功能不斷完善，對(duì)食物消化吸收能力亦逐漸增加。

食物不耐受發(fā)生具有多種食物引發(fā)，較少由單一食物引起的特點(diǎn)[13]。蛋白類食物通常是引起食物不耐受的主要原因，本文結(jié)果顯示，牛奶與雞蛋、牛肉，雞蛋與大豆常同時(shí)表現(xiàn)為不耐受，淀粉類的大米和玉米常同時(shí)不耐受。α-半乳糖（α-Gal）是哺乳動(dòng)物紅肉中的主要天然抗原[5]，對(duì)一種紅肉類食物表現(xiàn)為不耐受的患兒在添加其他肉類食物時(shí)應(yīng)注意觀察有無不適癥狀。螃蟹和蝦抗原有顯著的交叉反[14]；對(duì)一種甲殼類不耐受的患兒，應(yīng)注意其他甲殼類食物食入是否會(huì)產(chǎn)生不耐受。

食物不耐受發(fā)病隱匿，不易被發(fā)現(xiàn)，通過檢測(cè)sIgG，可以確定不耐受食物，及時(shí)規(guī)避不耐受食物，能有效避免免疫復(fù)合累積造成機(jī)體免疫系統(tǒng)超負(fù)荷而引起各器官系統(tǒng)癥狀。對(duì)于檢測(cè)結(jié)果顯示為0 級(jí)的食物可以正常食用，在不耐受食物少的情況下，所有檢測(cè)陽性的食物均忌食即可。如不耐受食物多，先將檢測(cè)級(jí)別為2 級(jí)和3 級(jí)的陽性食物忌食，檢測(cè)級(jí)別為1 級(jí)的食物輪替，如果忌食食物太多，則需在忌食同時(shí)改變烹調(diào)習(xí)慣或調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)。益生菌作為非特異性免疫調(diào)節(jié)因子可以激活免疫細(xì)胞，促進(jìn)B 細(xì)胞產(chǎn)生抗體，增強(qiáng)免疫功能。提升患者腸道黏膜的自身預(yù)防機(jī)制、刺激免疫球蛋白A（IgA）分泌，促使患者體內(nèi)炎性細(xì)胞因子水平升高，改善腸道功能，經(jīng)血清學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果診斷為有食物不耐受表現(xiàn)的患兒，可以適當(dāng)補(bǔ)充益生菌緩解兒科疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、消化系統(tǒng)疾病、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病的癥狀[15]。

嬰幼兒及兒童處于生長發(fā)育的階段，及時(shí)發(fā)現(xiàn)不耐受食物，制定科學(xué)的個(gè)人飲食計(jì)劃，對(duì)兒童生長發(fā)育和疾病的防治有重要意義。