近日,中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所水產(chǎn)動(dòng)物種質(zhì)資源與遺傳育種團(tuán)隊(duì)在中華鱉性逆轉(zhuǎn)機(jī)制解析方面取得重要進(jìn)展。團(tuán)隊(duì)圍繞中華鱉性逆轉(zhuǎn)過(guò)程,通過(guò)Direct RNA全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組和二代轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行分析,揭示了RNA甲基化、small RNA等在性逆轉(zhuǎn)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。
團(tuán)隊(duì)前期利用外源激素雌二醇和甲基睪酮獲得了性逆轉(zhuǎn)偽雌性和偽雄性個(gè)體,并建立了中華鱉性別特異性分子標(biāo)記方法。在對(duì)中華鱉性逆轉(zhuǎn)過(guò)程研究中發(fā)現(xiàn),表觀遺傳發(fā)揮著不可或缺的作用。RNA甲基化是一種重要的表觀遺傳修飾,在調(diào)節(jié)基因表達(dá)以及與轉(zhuǎn)錄本的編輯、穩(wěn)定性和降解相關(guān)的過(guò)程中起著重要作用。Direct RNA全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組發(fā)現(xiàn)可變剪切數(shù)目和RNA甲基化(m5C和m6A)狀態(tài)在性逆轉(zhuǎn)過(guò)程中發(fā)生了顯著變化。相對(duì)于雄性個(gè)體,偽雌性個(gè)體可變剪切數(shù)目增多,RNA甲基化位點(diǎn)數(shù)目在CDS區(qū)域減少,3‘UTR區(qū)域增多;與雌性個(gè)體相比,偽雄性個(gè)體可變剪切數(shù)目減少,RNA甲基化位點(diǎn)數(shù)目在CDS區(qū)域增多,3‘UTR區(qū)域減少。與性別分化相關(guān)的甲基化差異基因定位到中華鱉不同的染色體上,m6A甲基化差異驗(yàn)證發(fā)現(xiàn),ODF2、PACS2、AK1和UBE2O等基因的m6A甲基化水平發(fā)生了顯著變化,參與調(diào)控了中華鱉的性逆轉(zhuǎn)過(guò)程。
團(tuán)隊(duì)在對(duì)雌性、雄性和偽雌3種不同類型中華鱉性腺轉(zhuǎn)錄組分析中發(fā)現(xiàn),SOX基因家族在性逆轉(zhuǎn)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。在發(fā)生差異的SOX基因家族中,包含3個(gè)雄性特異基因(SOX9,SOX12,SOX30)和3個(gè)雌性特異基因(SOX3,SOX11,SOX17)。其中雄性個(gè)體性腺中的SOX3在雌二醇處理后顯著上調(diào),SOX8和SOX9顯著下調(diào),顯示SOX基因家族與中華鱉的性逆轉(zhuǎn)過(guò)程密切相關(guān)。
團(tuán)隊(duì)通過(guò)對(duì)比不同類型中華鱉性腺組織中的small RNA的分布,發(fā)現(xiàn)性逆轉(zhuǎn)偽雌性個(gè)體中miRNA的數(shù)量明顯增多。預(yù)測(cè)得到12個(gè)與卵巢發(fā)育相關(guān)的miRNA,其中miR-25a-5p、miR-202-5p和miR-96-5p等miRNA與早期性腺分化、卵巢發(fā)育等重要的生物學(xué)過(guò)程存在直接或間接的靶向關(guān)系。中華鱉是我國(guó)重要的水生經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,2020年鱉類產(chǎn)量達(dá)到32.5萬(wàn)噸,產(chǎn)值高達(dá)200億元以上,市場(chǎng)需求旺盛。與龜類不同,中華鱉的性別決定類型屬于遺傳性別決定型ZW/ZZ,具有典型的雌雄異速生長(zhǎng)二態(tài)性,雄性個(gè)體生長(zhǎng)速度更快,經(jīng)濟(jì)價(jià)值更高。因此,深入研究中華鱉的性逆轉(zhuǎn)過(guò)程,對(duì)于開展全雄中華鱉育種具有重要意義,也有助于中華鱉養(yǎng)殖業(yè)高質(zhì)量的發(fā)展。
相關(guān)研究成果分別在Frontiersincellanddevelopmentalbiology、Biology、Genes等雜志上發(fā)表。