王國洲 吳峰洋 于志凱 孔令昌 王俊峰 劉亞娟 陳寶江*

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，保定 071001；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)山區(qū)研究所，保定 071001；3.國家北方山區(qū)農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究中心，保定 071001；4.江蘇奕農(nóng)生物股份有限公司，宿遷 223600)

飼料全面禁抗以來，亟需開發(fā)能夠提高家兔生產(chǎn)性能，改善免疫力，緩解應(yīng)激的替抗產(chǎn)品，而益生菌制劑及其代謝產(chǎn)物的研發(fā)應(yīng)用為無抗養(yǎng)殖提供了可行途徑。酵母菌(yeast)屬于兼性厭氧微生物，菌體蛋白質(zhì)含量高，細胞中核酸、維生素和微量元素豐富，細胞壁具有多種生物活性物質(zhì)[1]，而酵母培養(yǎng)物(yeast culture)則是在特定工藝條件控制下由酵母菌在特定的培養(yǎng)基上經(jīng)過充分的厭氧發(fā)酵后形成的微生態(tài)制品，具備安全、高效、綠色無污染及營養(yǎng)物質(zhì)豐富等優(yōu)點。研究顯示，飼糧中添加酵母培養(yǎng)物可以提高畜禽的養(yǎng)分表觀消化率[2]、改善腸道健康和促進生長[3-5]，而且在提高機體免疫力和抗氧化能力方面也起到了積極作用[6-7]。凝結(jié)芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)作為益生菌，既能形成芽孢又能產(chǎn)生多種營養(yǎng)物質(zhì)及抑制有害菌的物質(zhì)如凝固素和L-乳酸，具有抗逆性強、耐胃酸、耐高溫、易保存和可定植等生物特性[8]。有研究證實，凝結(jié)芽孢桿菌可以促進動物生長，提高免疫力及抗氧化能力，改善腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)和增強腸道屏障功能[9-10]，且具有抑制腸道致病菌，刺激免疫器官發(fā)育的功能[11]。目前，酵母菌和凝結(jié)芽孢桿菌在畜禽生產(chǎn)中應(yīng)用報道較多，但在獺兔生產(chǎn)中應(yīng)用的研究鮮有報道，且在其他畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用多為單獨使用，兩者聯(lián)合發(fā)酵時，由于凝結(jié)芽孢桿菌好氧發(fā)酵，可以加速酵母菌厭氧發(fā)酵過程，保證底物發(fā)酵更徹底。因此，二者聯(lián)合發(fā)酵在理論上具有相互協(xié)同，效果疊加作用。本試驗擬研究酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔生長性能、養(yǎng)分表觀消化率、免疫力及抗氧化能力的影響，為其在兔生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物由某公司提供，是酵母菌和凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵而成，主要活性成分：酵母菌代謝產(chǎn)物(抑菌活性肽≥6.0%)、凝結(jié)芽孢桿菌(≥5×108CFU/g)、凝結(jié)芽孢桿菌代謝產(chǎn)物(凝固素含量0.8 mg/mL、L-乳酸含量5.5～8.5 g/kg)、葡聚糖(≥0.2%)、甘露聚糖(≥1.0%)。

1.2 試驗設(shè)計及基礎(chǔ)飼糧

選取體重相近的健康35日齡獺兔160只，隨機分為4組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)5只(單籠單只飼養(yǎng))。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.01%、0.02%和0.04%酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物?；A(chǔ)飼糧參照NRC(2012)[12]和谷子林等[13]推薦的家兔飼養(yǎng)標準進行配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物以粉劑的形式添加到基礎(chǔ)飼糧中，逐級稀釋，混合均勻，制成顆粒飼料。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗前兔舍和籠具徹底清理和消毒，采用3層階梯式飼養(yǎng)籠進行單籠單只飼養(yǎng)，對每只兔籠進行單獨編號。試驗期間自由采食和飲水，每天08:00和18:00各飼喂1次。預(yù)試期7 d，正試期56 d，試驗期間按照正常免疫程序接種。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能

在試驗期開始和結(jié)束時的清晨各試驗兔空腹稱重，獲得初始體重和終末體重，計算平均日增重(ADG)；準確記錄試驗期內(nèi)每個重復(fù)的采食量，計算平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)；記錄試驗期內(nèi)試驗兔腹瀉只日數(shù)(只日數(shù)：每只兔腹瀉的天數(shù)；腹瀉判斷：糞便不成球、稀軟，呈粥狀或水樣，后肢、肛門和尾部被毛被糞便污染[14-15])，計算腹瀉頻率。計算公式如下：

ADG(g/d)=(終末體重-初始體重)/試驗天數(shù)；ADFI(g/d)=總采食量/試驗天數(shù)；F/G=總采食量/總增重；腹瀉頻率(%)=[試驗期內(nèi)腹瀉只日數(shù)/(試驗天數(shù)×試驗只數(shù))]×100[15]。

1.4.2 養(yǎng)分表觀消化率

試驗期結(jié)束前7 d，每個組以重復(fù)為單位選擇8只接近平均體重的試驗兔，進行消化代謝試驗，采用全收糞法，記錄試驗兔每日采食量，收集全部糞便，稱重后分為2份，一份加10%鹽酸固氮，用于測定粗蛋白質(zhì)(CP)含量，另一份測定其他養(yǎng)分含量。糞樣烘干粉碎，放入樣品袋中備測。參照張麗英[16]的方法測定飼糧及糞中各養(yǎng)分含量。養(yǎng)分表觀消化率計算公式如下：

某養(yǎng)分表觀消化率(%)=100×(飼糧中該養(yǎng)分含量-糞中該養(yǎng)分含量)/飼糧中該養(yǎng)分含量。

1.4.3 血清免疫和抗氧化指標測定

試驗期第56天空腹稱重，每組挑選8只試驗兔(每個重復(fù)挑選1只)，每只試驗兔耳緣靜脈采血5 mL，3 500 r/min離心10 min，取上清液，-20 ℃保存?zhèn)錅y。采用酶聯(lián)免疫檢測(ELISA)試劑盒測定血清免疫和抗氧化指標，試劑盒購自北京博銳長遠科技有限公司，具體操作按照說明書步驟進行。所測血清免疫指標包括免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和白細胞介素-4(IL-4)含量，所測血清抗氧化指標包括谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及總抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量。

1.4.4 免疫器官指數(shù)和組織抗氧化指標測定

將采完血后的試驗兔屠宰，取胸腺、脾臟和圓小囊稱重，計算胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和圓小囊指數(shù)。計算公式如下：

臟器指數(shù)(g/kg)=臟器鮮重(g)/宰前活重(kg)。

取肝臟和空腸腸段，切割稱重，加入磷酸鹽緩沖液(PBS)，低溫研磨后離心，取上清液，-20 ℃保存?zhèn)錅y。采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒測定GSH-Px、SOD活性以及T-AOC和MDA含量，試劑盒購自北京博銳長遠科技有限公司，具體操作按照說明書步驟進行。

1.4.5 腸道消化酶活性

屠宰后，取空腸、回腸和盲腸食糜放入凍存管中，-80 ℃保存?zhèn)錅y。采用ELISA試劑盒測定空腸、回腸和盲腸α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和盲腸纖維素酶活性，試劑盒購自北京博銳長遠科技有限公司，具體操作按照說明書步驟進行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析，并采用Duncan氏法進行多重比較檢驗，結(jié)果采用“平均值±標準誤”表示，以P<0.05表示差異顯著，0.05≤P<0.10表示有趨勢[17-18]。

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔生長性能的影響

由表2可知，各組間初始體重差異不顯著(P>0.05)；0.01%、0.02%和0.04%添加組終末體重分別比對照組提高3.23%、4.95%和4.98%，呈提高趨勢(0.05≤P<0.10)；各添加組ADFI均高于對照組，但差異不顯著(P>0.05)；0.01%、0.02%和0.04%添加組ADG分別比對照組提高5.75%、8.18%和9.83%，且均差異顯著(P<0.05)，各添加組之間差異不顯著(P>0.05)；0.01%、0.02%和0.04%添加組F/G分別比對照組降低6.41%、6.01%和5.81%，呈降低趨勢(0.05≤P<0.10)。對照組腹瀉頻率為0.22%，0.02%添加組腹瀉頻率為0.09%，0.01%和0.04%添加組未出現(xiàn)腹瀉情況。

2.2 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表3可知，干物質(zhì)(DM)、總能(GE)和CP的表觀消化率以0.04%添加組最高，分別較對照組提高3.99、3.26和2.55個百分點，且差異顯著(P<0.05)，0.01%和0.02%添加組與對照組差異不顯著(P>0.05)；0.01%、0.02%和0.04%添加組鈣(Ca)表觀消化率分別較對照組提高5.77、5.09和13.46個百分點，且差異顯著(P<0.05)；各組間粗纖維(CF)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)、粗脂肪(EE)和磷(P)的表觀消化率差異不顯著(P>0.05)。

表2 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔生長性能的影響Table 2 Effects of combined yeast and Bacillus coagulans fermentation culture on growth performance of Rex rabbits

表3 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔養(yǎng)分表觀消化率的影響Table 3 Effects of combined yeast and Bacillus coagulans fermentation culture on nutrient apparent digestibility of Rex rabbits %

2.3 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔腸道消化酶活性的影響

由表4可知，0.01%和0.04%添加組空腸α-淀粉酶活性分別較對照組提高9.16%和9.85%，但差異未達顯著水平(P>0.05)；空腸脂肪酶和胰蛋白酶活性各組間均無顯著差異(P>0.05)。各添加組回腸α-淀粉酶和胰蛋白酶活性均高于對照組，但差異不顯著(P>0.05)；空腸脂肪酶活性各組之間均無顯著差異(P>0.05)。盲腸α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶和纖維素酶活性各組間均無顯著差異(P>0.05)。

2.4 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔免疫器官指數(shù)的影響

由表5可知，各組間胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和圓小囊指數(shù)均無顯著差異(P>0.05)。

表4 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔腸道消化酶活性的影響Table 4 Effects of combined yeast and Bacillus coagulans fermentation culture on intestinal enzyme activities of Rex rabbits

表5 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔免疫器官指數(shù)的影響Table 5 Effects of combined yeast and Bacillus coagulans fermentation culture on immune organ indexes of Rex rabbits g/kg

2.5 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔血清免疫指標的影響

由表6可知，0.01%、0.02%和0.04%添加組血清IgA含量分別較對照組提高36.75%、25.09%和29.90%，差異顯著(P<0.05)；0.04%添加組血清IgG含量較對照組提高12.03%，呈提高趨勢(0.05≤P<0.10)；各組間血清IgM含量差異不顯著(P>0.05)；各添加組血清IL-4含量均較對照組顯著提高(P<0.05)。

2.6 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔血清、肝臟和空腸抗氧化指標的影響

由表7可知，各組間血清、肝臟和空腸GSH-Px和SOD活性及T-AOC差異均不顯著(P>0.05)。各添加組血清和肝臟MDA含量均低于對照組，但差異不顯著(P>0.05)；0.02%和0.04%添加組空腸MDA含量分別較對照組降低9.98%和11.17%，呈降低趨勢(0.05≤P<0.10)。

3 討 論

3.1 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔生長性能的影響

動物的生長速度和飼料報酬是衡量動物生長性能的關(guān)鍵指標，同時還可以間接反映出飼料的營養(yǎng)價值。酵母培養(yǎng)物和凝結(jié)芽孢桿菌在促進動物機體生長發(fā)育、改善腸道健康、提高飼料報酬和增強機體免疫力等方面具有積極作用[19-21]。唐麗等[22]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加0.2%或0.3%的酵母培養(yǎng)物均能夠提高肉兔機體血糖濃度，以保證機體能量供給，促進肉兔生長發(fā)育。Shanmuganathan等[23]研究表明，添加酵母培養(yǎng)物可促進新西蘭兔對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，顯著提高ADG，降低F/G。孫強東等[24]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加1%的酵母培養(yǎng)物可顯著提高仔豬增重，降低F/G，有效降低腹瀉率，但效果不及抗生素。趙娜等[11]研究表明，飼糧中添加300 mg/kg凝結(jié)芽孢桿菌可顯著提高生長后期肉雞的日增重和采食量。Zhang等[25]研究發(fā)現(xiàn)，肉雞飼糧中添加5×109CFU/kg凝結(jié)芽孢桿菌可顯著提高ADG和42日齡體重，并提高飼料報酬。本試驗發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物顯著提高了獺兔的ADG，F(xiàn)/G呈降低趨勢，這與前人研究報道相一致。這可能是因為酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物兼具了酵母培養(yǎng)物和凝結(jié)芽孢桿菌兩者優(yōu)點，酵母培養(yǎng)物營養(yǎng)豐富，富含β-葡聚糖、甘露寡糖、氨基酸和維生素等，能夠為機體提供營養(yǎng)物質(zhì)、未知生長因子及多種免疫因子，在促進動物生長發(fā)育中也起到積極作用[26]；凝結(jié)芽孢桿菌代謝產(chǎn)生的多種營養(yǎng)物質(zhì)供機體吸收利用，如氨基酸、維生素、短鏈脂肪酸和促生長因子等[27]，酵母菌代謝產(chǎn)物中的抑菌活性肽能夠降低腸道有害菌數(shù)量級，凝結(jié)芽孢桿菌在腸道定植，消耗腸道中游離氧，創(chuàng)造低氧環(huán)境，抑制需氧型有害菌和腐敗微生物生長，在兩者共同作用下減少了有害菌對營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，從而達到促生長作用[28]。

表6 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔血清免疫指標的影響Table 6 Effects of combined yeast and Bacillus coagulans fermentation culture on serum immune indexes of Rex rabbits

表7 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔血清、肝臟和空腸抗氧化指標的影響Table 7 Effects of combined yeast and Bacillus coagulans fermentation culture on serum, liver and jejunum antioxidant indexes of Rex rabbits

本試驗中，各添加組腹瀉頻率均低于對照組。這可能是因為：一方面，酵母菌代謝產(chǎn)物抑菌活性肽和凝結(jié)芽孢桿菌代謝產(chǎn)生的凝固素可以破壞革蘭氏陽性和陰性致病菌細胞膜，起到抑菌作用，而抑菌活性肽還能夠加速受損腸道黏膜修復(fù)，使得腸道致病菌減少，腹瀉頻率降低[29]；另一方面，酵母細胞壁成分甘露寡糖可以結(jié)合革蘭氏陰性致病菌，減少致病菌在腸壁上的黏附和繁殖[30]。

3.2 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔養(yǎng)分表觀消化率及腸道消化酶活性的影響

飼糧中的營養(yǎng)物質(zhì)在動物小腸內(nèi)的消化方式為機械性消化(如腸道蠕動)和化學(xué)性消化(如消化酶)，2種方式共同作用于營養(yǎng)物質(zhì)的消化。Zhang等[31]研究發(fā)現(xiàn)，在蛋雞飼糧中添加0.3%的酵母培養(yǎng)物可提高十二指腸胰凝乳蛋白酶和ɑ-淀粉酶活性。賈曉滿等[32]研究表明，飼糧中添加0.4%～0.8%的酵母培養(yǎng)物可提高梅花鹿對CP、EE、NDF和ADF的表觀消化率。Zhen等[3]的研究表明，飼糧中添加0.8%的酵母培養(yǎng)物改善了肉雞對EE、Ca和P的消化率，且飼料轉(zhuǎn)化率也有所提高。Kim等[33]研究發(fā)現(xiàn)，凝結(jié)芽孢桿菌可產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，且芽孢體狀態(tài)具有耐胃酸和膽鹽的特性，在胃腸道環(huán)境中易生存。陳德林[34]研究報道，飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌可提高肉兔CP和EE的消化率。本試驗中，0.01%和0.02%添加組Ca的表觀消化率較對照組顯著提高，0.04%添加組DM、GE、CP和Ca的表觀消化率顯著高于對照組，與以上研究結(jié)果類似。分析以上結(jié)果原因，我們認為可能是酵母培養(yǎng)物所包含的氨基酸、有機酸、聚糖、寡糖和B族維生素等物質(zhì)改善了腸道微生態(tài)環(huán)境[26]，而凝結(jié)芽孢桿菌又可以促進腸道蠕動，加快飼料在腸道中消化[35]，酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物集兩者的共同功能，促進了獺兔對飼料的消化吸收。與對照組相比，各添加組空腸、回腸和盲腸中消化酶活性無顯著提高，與石琳等[36]和付天璽等[37]的研究結(jié)果類似。這可能是因為菌種和培養(yǎng)物的某些活性在實驗室內(nèi)給予合適條件才得以體現(xiàn)，而實際動物試驗中各種不利條件及胃腸道的復(fù)雜環(huán)境在一定程度上會抑制菌種和培養(yǎng)物理化特性的有效發(fā)揮。

3.3 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔免疫力的影響

免疫系統(tǒng)由免疫器官、免疫細胞和免疫活性物質(zhì)組成，是機體免疫機能的保障。酵母培養(yǎng)物不僅可以增強機體合成蛋白質(zhì)，還可以提高血清免疫球蛋白含量[38]。唐小懿[39]研究發(fā)現(xiàn)，蒙脫石-酵母培養(yǎng)復(fù)合物(鈣質(zhì)蒙脫石70%，酵母細胞培養(yǎng)物30%)能夠促進T淋巴細胞和單核-巨噬細胞增殖，提高血清IgA、IgG和IgM含量，增強仔豬機體免疫功能。邢冠潤等[40]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加不同濃度凝結(jié)芽孢桿菌可顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞血清中IgA、IgG和IL-4的含量，但對血清IgM含量無顯著影響；同時其表明，凝結(jié)芽孢桿菌的發(fā)酵上清液及細胞壁成分可調(diào)節(jié)細胞因子和增強細胞吞噬作用。Fu等[9]在斷奶仔豬飼糧中添加400 mg/kg凝結(jié)芽孢桿菌后增加了血清中補體3(C3)、溶菌酶(LZM)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的含量，使仔豬機體免疫應(yīng)答能力增強。本試驗中，各組間免疫器官指數(shù)均無顯著差異，表明酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物未對獺兔免疫器官發(fā)育造成不良影響；添加酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物顯著提高了獺兔血清中IgA和IL-4含量，0.04%添加組血清IgG含量較對照組呈提高趨勢，與以上研究結(jié)果相一致。分析認為，可能是酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物中的酵母多糖及凝結(jié)芽孢桿菌代謝產(chǎn)物促進了T淋巴細胞增殖，進而使IL-4產(chǎn)量增加，IL-4又進一步地促進B淋巴細胞增殖和分化，刺激B淋巴細胞合成和分泌抗體。

3.4 酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物對獺兔抗氧化能力的影響

GSH-Px、SOD活性和T-AOC高低是衡量機體抗氧化能力的重要指標，MDA是脂質(zhì)氧化終產(chǎn)物，對細胞形態(tài)、細胞膜及細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有損傷作用，因而測定MDA含量可反映機體脂質(zhì)過氧化程度，間接反映細胞損傷程度[41]。有研究發(fā)現(xiàn)，酵母培養(yǎng)物和蒙脫石-酵母培養(yǎng)復(fù)合物可以提高仔豬血清T-AOC、SOD和GSH-Px活性，降低血清MDA含量，增強機體抗氧化能力[24,39]。Cheng等[42]通過給熱應(yīng)激肉雞飼喂250 mg/kg的甘露寡糖(源自酵母細胞壁)，顯著降低了空腸MDA含量。張彩鳳[43]研究表明，飼糧中添加0.1%的乳酸菌和酵母菌復(fù)合制劑可顯著提高肉仔雞的血清T-AOC和GSH-Px活性，顯著降低血清MDA含量，增強機體抗氧化能力，降低機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度。凝結(jié)芽孢桿菌能夠通過提高回腸黏膜GSH-Px活性和降低脂質(zhì)氧化產(chǎn)物MDA含量，來減輕斷奶仔豬氧化應(yīng)激[44]。余魁等[10]研究表明，添加2.0×106CFU/g凝結(jié)芽孢桿菌可以顯著提高仔豬血漿SOD活性，且使MDA含量顯著降低。酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物是由酵母菌和凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵而成，在抗氧化作用上具有協(xié)同作用。本次試驗結(jié)果表明，飼糧中添加酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物，血清、肝臟和空腸的GSH-Px和SOD活性及T-AOC均無顯著變化，與上述研究結(jié)果不同，這可能與物種、養(yǎng)殖環(huán)境和管理差異等有關(guān)，有待進一步研究。本試驗中，各添加組血清和肝臟MDA含量均較對照組有所降低，0.02%和0.04%添加組空腸MDA含量較對照組呈降低趨勢，表明動物機體內(nèi)膜脂質(zhì)過氧化程度減輕。其原因可能是：一方面，酵母培養(yǎng)物中的酵母多糖及核酸物質(zhì)是一種高效的內(nèi)源性自由基清除劑和抗氧化劑，因此獺兔機體脂質(zhì)過氧化程度減輕；另一方面，凝結(jié)芽孢桿菌在腸道內(nèi)定植后，產(chǎn)生了能夠清除體內(nèi)羥自由基和超氧陰離子自由基的胞外多糖[45]。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物可以顯著提高獺兔的ADG，改善獺兔生長性能，降低腹瀉頻率，提高養(yǎng)分表觀消化率。

② 飼糧中添加酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物可顯著提高獺兔血清中IgA和IL-4含量。

③ 綜合分析，獺兔飼糧中酵母菌-凝結(jié)芽孢桿菌聯(lián)合發(fā)酵培養(yǎng)物適宜添加水平為0.02%～0.04%。