張 琦 張克英 白世平 王建萍 曾秋鳳 彭煥偉 玄 玥 張 博 丁雪梅*

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，動物抗病營養(yǎng)教育部重點實驗室，成都 611130；2.安迪蘇生命科學(xué)制品(上海)有限公司，上海 201204)

腸道健康是影響家禽生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益的主要因素之一，也是可持續(xù)健康養(yǎng)殖的基礎(chǔ)。腸道作為動物抵抗外來異源物的首道屏障，在維持機體內(nèi)環(huán)境上發(fā)揮著重要作用。當(dāng)前，隨著“禁抗令”的頒布，綠色添加劑再次成為新寵，而在家禽飼糧使用的添加劑中，丁酸鈉是近年來的熱點。丁酸鈉是一種無污染、無有害殘留的飼料添加劑，其中丁酸是一種短鏈脂肪酸，也是丁酸鈉的有效成分。研究發(fā)現(xiàn)，短鏈脂肪酸及其鹽可以防止或限制禽類胃腸道中有害微生物和真菌的生長，從而有助于改善胃腸道pH，提高消化酶活性[1-2]。在動物生產(chǎn)中添加丁酸鹽及其衍生物，有利于胃腸道的生長發(fā)育，包括細(xì)胞增殖，從而促進(jìn)動物腸道健康[3]。丁酸鈉原粉具有刺激性奶酪酸敗性氣味，在無保護(hù)情況下，自由形態(tài)的丁酸鹽在家禽消化道通過細(xì)胞膜被吸收。因此，目前丁酸鈉原粉在家禽上的應(yīng)用受到了極大制約，而受保護(hù)的丁酸鹽可以到達(dá)消化系統(tǒng)后部，從而增強其作用效果[4-5]。包被丁酸鈉(coated sodium butyrate，CSB)通過智能微囊包被技術(shù)，對不同純度的丁酸鈉進(jìn)行二次包被，克服了普通丁酸鈉的缺陷，確保丁酸鈉充分發(fā)揮作用[4]。目前，國內(nèi)有關(guān)丁酸鈉對蛋雞的研究報道較少，特別是CSB。因此本試驗研究CSB對蛋雞生產(chǎn)性能以及胃腸道內(nèi)容物pH、消化酶活性、通透性、炎性因子和屏障相關(guān)基因表達(dá)的影響，為CSB在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗所用的CSB(棕櫚脂包被)純度為30%，由上海某生物科技有限公司提供。

1.2 試驗設(shè)計及飼糧

本試驗采用單因素試驗設(shè)計，將預(yù)試驗產(chǎn)蛋率無顯著差異(P>0.05)的800只健康的羅曼粉蛋雞(51周齡)分為4個組，每組10個重復(fù)，連續(xù)2籠為1個重復(fù)，每籠10只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，3個試驗組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加300、500和800 mg/kg CSB的飼糧。試驗期12周，整個試驗階段蛋雞自由飲水和采食，設(shè)置16 h光照和8 h黑暗，每天08:30和15:00分別飼喂蛋雞，每日10：00進(jìn)行人工撿蛋，定期打掃圈舍衛(wèi)生，常規(guī)接種。試驗采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，根據(jù)NRC(1994)和我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)配制粉狀飼糧?；A(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

續(xù)表1項目Items含量Content玉米蛋白粉Cornproteinmeal(55%CP)3.60顆粒石粉Grainylimestone6.20粉狀石粉Powderylimestone3.10磷酸氫鈣CaHPO41.56L-賴氨酸硫酸鹽L-Lys·H2SO4(70%)0.08DL-蛋氨酸DL-Met(99%)0.08統(tǒng)糠Unitebran1.46氯化鈉NaCl0.30氯化膽堿Cholinechloride(60%)0.10維生素預(yù)混料Vitaminpremix1)0.50礦物質(zhì)預(yù)混料Mineralpremix1)0.15合計Total100.00營養(yǎng)水平Nutrientlevels2)代謝能ME/(MJ/kg)11.21粗蛋白質(zhì)CP15.38鈣Ca4.00總磷TP0.57有效磷AP0.37可消化賴氨酸DLys0.73可消化蛋氨酸DMet0.34可消化蘇氨酸DThr0.58可消化色氨酸DTry0.16可消化蛋氨酸+可消化半胱氨酸DMet+DCys0.58

1.3 樣品采集

于蛋雞62周齡末，從每個重復(fù)中選取1只健康的蛋雞進(jìn)行采血(頸靜脈，3 mL)室溫靜置后離心(4 ℃，3 000 r/min，10 min)，分裝上清液，-20 ℃保存，用于血清D-乳酸含量和二胺氧化酶活性的測定。采集帶有內(nèi)容物的肌胃、十二指腸、空腸和回腸用于測定pH。腸道黏膜：取空腸和回腸道中后段，用提前滅菌好的剪刀將其剖開，生理鹽水洗掉食糜，濾紙吸干水分后，用載玻片小心刮取黏膜于滅菌凍存管中，放入液氮，采樣結(jié)束后置于-80 ℃保存，用于測定腸道相關(guān)基因的表達(dá)。無菌取十二指腸和空腸內(nèi)容物于凍存管，放入液氮，之后于-80 ℃保存，用于腸道消化酶活性的測定。

1.4 指標(biāo)測定

1.4.1 生產(chǎn)性能

試驗期間，每天根據(jù)重復(fù)來記錄試驗蛋雞的總產(chǎn)蛋數(shù)、雞蛋總重、合格蛋數(shù)[除去沙克蛋、軟蛋、破蛋、畸形蛋、臟蛋、大蛋(>75 g)、小蛋(<40 g)]及合格蛋重，每周結(jié)束后，將剩余料進(jìn)行稱重，以加料量和剩余量相減的差值為采食量，料蛋比、產(chǎn)蛋率、平均蛋重及合格蛋率等參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計方法》(NY/T 823—2004)計算。計算公式如下：

產(chǎn)蛋率(%)=100×(產(chǎn)蛋數(shù)/雞只數(shù))；合格蛋率(%)=100×(合格蛋數(shù)/總產(chǎn)蛋數(shù))；平均蛋重(g)=總蛋重/產(chǎn)蛋數(shù)；料蛋比=采食量/總蛋重；平均日采食量(g/只)=耗料量(g)/實際飼養(yǎng)日蛋雞只數(shù)的累加只數(shù)。

1.4.2 胃腸道內(nèi)容物pH

將帶有內(nèi)容物的肌胃、十二指腸、空腸和回腸中部剪開一個口，將pH計(德圖205型)的電極玻璃珠放到食糜表面，測定內(nèi)容物pH。

1.4.3 腸道消化酶活性

取十二指腸、空腸食糜0.2 g左右，加入冰冷的生理鹽水(生理鹽水體積∶食糜重量=9∶1)，勻漿制成10%的組織勻漿，離心取上清液。采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒測定淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性。

1.4.4 血清D-乳酸含量和二胺氧化酶活性的測定

取血清樣本(10 μL)，依次加入樣本稀釋液(40 μL)和辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體(100 μL)，封板膜封住反應(yīng)孔，恒溫箱溫育(37 ℃，1 h)，棄去液體，紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1 min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，反復(fù)洗板5次。各加入底物A和底物B(各50 μL)，避光孵育(37 ℃，15 min)，加入終止液(50 μL)，酶標(biāo)儀上測定樣本吸光度(OD)值(波長450 nm)。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒購自江蘇酶免實業(yè)有限公司。

1.4.5 腸道黏膜相關(guān)基因表達(dá)

1.4.5.1 總RNA的提取

稱取約50 mg樣品，加入1 mL Trizol試劑(TaKaRa，中國)，充分混勻裂解；然后加入0.2 mL氯仿振蕩混勻，室溫靜置5 min后12 000×g離心(4 ℃，15 min)；隨后轉(zhuǎn)移上清液于新的無菌離心管中，加入0.5 mL異丙醇混勻，室溫靜置10 min后12 000×g離心(4 ℃，10 min)，棄上清液，加入1 mL 75%乙醇[焦碳酸二乙酯(DEPC)水配制]洗滌沉淀；然后10 000×g離心(4 ℃，5 min)，棄上清液，室溫干燥3～5 min后，加入100 μL無酶水充分溶解RNA。

1.4.5.2 RNA檢測

利用核酸蛋白儀對RNA的濃度進(jìn)行測定，依據(jù)在260和280 nm處所得的OD比值來檢測提取的總RNA濃度和純度，根據(jù)比值用DEPC水將RNA濃度稀釋到同一水平。

1.4.5.3 反轉(zhuǎn)錄

按照Prime ScriptTMRT說明書進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，cDNA是反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。

1.4.5.4 引物設(shè)計

引物序列由生工生物工程(成都)有限公司合成，詳細(xì)序列見表2。

1.4.5.5 實時熒光定量PCR

使用ABI-7900HT Fast Real-Time PCR System(Applied Biosystems,美國)和SYBR Green PCR Mix(TaKaRa,中國)進(jìn)行實時熒光定量PCR反應(yīng)。PCR反應(yīng)體系為10 μL，包括5 μL SYBR Premix Ex TaqTM(2×)、上下游引物各1 μL、2 μL ddH2O和1 μL cDNA。反應(yīng)程序為：95 ℃ 30 s；95 ℃ 5 s，60 ℃ 34 s，40個循環(huán)；95 ℃ 15 s，65 ℃ 1 min，95 ℃ 15 s。以β-肌動蛋白(β-actin)為內(nèi)參基因，目的基因的mRNA相對表達(dá)量采用2-ΔΔCt計算，目的基因包括封閉蛋白-1(claudin-1，CLDN1)、閉鎖小帶蛋白-1(zonula occluden-1，ZO-1)、黏蛋白2(mucin 2，MUC2)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白細(xì)胞介素-10(interleukin-10，IL-10)和干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)。

表2 引物序列Table 2 Primer sequences

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)先經(jīng)Excel 2019進(jìn)行初步整理，然后采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，差異顯著時采用Turkey氏法進(jìn)行多重比較，用回歸曲線進(jìn)行線性和二次趨勢分析，試驗結(jié)果用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 CBS對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，與對照組相比，飼糧中添加不同水平CSB對蛋雞平均蛋重?zé)o顯著影響(P>0.05)；蛋雞第5～8周、第9～12周和第1～12周的產(chǎn)蛋率與飼糧中CSB添加水平呈顯著線性關(guān)系(P<0.05)；與對照組相比，飼糧中添加800 mg/kg CSB可顯著降低蛋雞第9～12周和第1～12周的料蛋比(P<0.05)；飼糧中添加不同水平CSB可線性提高蛋雞第5～8周的平均日采食量(P<0.05)；與300 mg/kg CSB添加組相比，飼糧中添加500和800 mg/kg CSB可顯著提高蛋雞第1～4周和第5～8周的合格蛋率(P<0.05)。

2.2 CSB對蛋雞胃腸道內(nèi)容物pH的影響

由表4可知，與對照組相比，飼糧中添加不同水平CSB對蛋雞肌胃pH無顯著影響(P>0.05)；蛋雞十二指腸和空腸pH與飼糧中CSB添加水平呈顯著線性關(guān)系(P<0.05)；與對照組相比，飼糧中添加800 mg/kg CSB可顯著降低蛋雞回腸pH(P<0.05)。

2.3 CSB對蛋雞腸道消化酶活性的影響

由表5可知，與對照組相比，飼糧中添加不同水平CSB對蛋雞十二指腸和空腸脂肪酶活性無顯著影響(P>0.05)；蛋雞十二指腸胰蛋白酶和淀粉酶活性與飼糧中CSB添加水平呈顯著線性關(guān)系(P<0.05)；與對照組相比，飼糧中添加不同水平CSB對蛋雞空腸胰蛋白酶和淀粉酶活性無顯著影響(P>0.05)。

2.4 CSB對蛋雞腸道通透性的影響

由表6可知，與對照組相比，飼糧中添加500和800 mg/kg CSB可顯著降低蛋雞血清D-乳酸含量(P<0.05)，飼糧中添加不同水平CSB對蛋雞血清二胺氧化酶活性無顯著影響(P>0.05)。

表3 CSB對蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 3 Effects of CSB on performance of laying hens

表4 CSB對蛋雞胃腸道內(nèi)容物pH的影響Table 4 Effects of CSB on pH in gastrointestinal contents of laying hens

表5 CSB對蛋雞腸道消化酶活性的影響Table 5 Effects of CSB on intestinal digestive enzyme activities of laying hens U/mg prot

表6 CSB對蛋雞腸道通透性的影響Table 6 Effects of CSB on intestinal permeability of laying hens

2.5 CSB對蛋雞腸道黏膜相關(guān)基因表達(dá)的影響

由表7可知，與對照組相比，飼糧中添加不同水平CSB均可顯著降低蛋雞空腸黏膜IL-1βmRNA相對表達(dá)量(P<0.05)，顯著提高空腸黏膜IL-10 mRNA相對表達(dá)量(P<0.05)；蛋雞回腸黏膜IL-1βmRNA相對表達(dá)量與飼糧中CSB添加水平呈顯著線性關(guān)系(P<0.05)；各組間蛋雞空腸黏膜IL-6和IFN-γmRNA相對表達(dá)量以及回腸黏膜IL-6、IFN-γ和IL-10 mRNA相對表達(dá)量無顯著差異(P>0.05)。

表7 CSB對蛋雞腸道黏膜炎性因子mRNA相對表達(dá)量的影響Table 7 Effects of CSB on mRNA relative expression levels of inflammatory factors in intestinal mucosa of laying hens

由表8可知，與對照組相比，飼糧中添加300和500 mg/kg CSB可顯著提高蛋雞空腸黏膜MUC2 mRNA相對表達(dá)量(P<0.05)；蛋雞空腸和回腸黏膜ZO-1 mRNA相對表達(dá)量以及回腸黏膜MUC2 mRNA相對表達(dá)量與飼糧中CSB添加水平呈顯著線性關(guān)系(P<0.05)；各組間蛋雞空腸和回腸黏膜CLDN1 mRNA相對表達(dá)量無顯著差異(P>0.05)。

表8 CSB對蛋雞腸道黏膜屏障相關(guān)基因mRNA相對表達(dá)量的影響Table 8 Effects of CSB on mRNA relative expression levels of intestinal mucosal barrier related genes in laying hens

3 討 論

3.1 CSB對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

生產(chǎn)性能是直接反映家禽營養(yǎng)狀況和健康程度的指標(biāo)之一。CSB作為一種新型的綠色添加劑，可以提高飼料的轉(zhuǎn)化效率和畜禽的生產(chǎn)性能，因此受到越來越多的關(guān)注。趙民等[6]研究發(fā)現(xiàn)，CSB可以提高種母雞產(chǎn)蛋率和合格蛋率，但對平均日采食量沒有顯著影響。張碩[7]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CSB降低了仙居蛋雞的料蛋比以及第31～60天和第61～90天的合格蛋率，還可以降低蛋雞第1～30天和第31～60天的平均日采食量。邢文杰[8]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CSB能夠顯著提高烏骨種母雞37～44周齡的平均日采食量和合格蛋率。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CSB可在一定程度上提高蛋雞產(chǎn)蛋率、合格蛋率和平均日采食量，并顯著降低蛋雞的料蛋比，這與前人的研究結(jié)果不盡相同。這可能與CSB的包被工藝有關(guān)，不同的包被工藝會影響丁酸的釋放；還有可能與試驗的飼養(yǎng)環(huán)境、CSB純度、飼糧組成和CSB的使用劑量等因素有關(guān)。

3.2 CSB對蛋雞胃腸道內(nèi)容物pH的影響

胃腸道是動物進(jìn)行消化、吸收的主要場所，動物體內(nèi)消化環(huán)境受pH影響。有益菌群的增殖、病原微生物的抑制和營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收都需要適度的酸性胃腸道環(huán)境，它們共同發(fā)揮著提高動物生長性能和飼料利用率、增強機體抗病能力的作用[9]。研究表明，飼糧中添加丁酸、丁酸鈉或CSB對蛋雞肌胃和小腸pH無顯著影響[10-11]。Elnesr等[12]研究發(fā)現(xiàn)，家禽飼糧中添加0.6%的丁酸鈉能降低胃腸道pH。郭傳珍等[13]研究發(fā)現(xiàn)，丁酸鈉在適宜劑量時，肉雞消化道的pH有一定程度的降低。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加800 mg/kg CSB顯著降低了蛋雞回腸pH，飼糧中添加CSB對蛋雞肌胃、十二指腸和空腸pH無顯著影響，但數(shù)值上與對照組相比均降低。這可能是因為CSB到達(dá)腸道后逐漸分解產(chǎn)生丁酸，然后進(jìn)一步解離成丁酸根離子和氫離子，從而降低了腸道pH。通過包被技術(shù)處理的CSB，使得丁酸緩慢釋放，并到達(dá)小腸后端發(fā)揮作用，這也是本試驗結(jié)果沒有發(fā)現(xiàn)CSB的添加會對蛋雞肌胃pH產(chǎn)生影響的原因。

3.3 CSB對蛋雞腸道消化酶活性的影響

消化酶活性的高低影響著畜禽對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力。消化酶活性降低，表明機體吸收功能受阻，會造成營養(yǎng)物質(zhì)浪費，飼養(yǎng)成本增加。消化酶活性一般采用十二指腸和空腸食糜酶的活性來反映，這是因為大部分酶活性物質(zhì)分布在小腸的十二指腸或空腸部分[14]。楊在賓等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加丁酸鈉或微囊丁酸鈉，肉仔雞腸道內(nèi)各種消化酶(淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶)活性均提高。鞠婷婷等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加500 mg/kg丁酸鈉和添加不同水平的CSB均能顯著提高肉雞十二指腸和空腸的消化酶活性，從而提高飼糧利用率。與上述研究結(jié)果不盡相同，在本試驗中，飼糧中添加CSB可以提高蛋雞十二指腸胰蛋白酶和淀粉酶活性，脂肪酶活性也有提高，但均無顯著差異。我們分析其可能原因是，CSB的添加會使腸道pH降低，從而激活蛋白酶原，并提高胰蛋白酶活性[17]；但影響消化酶活性的因素眾多，比如環(huán)境因素(溫度、濕度和酸堿度)會導(dǎo)致部分酶失活，丁酸鈉的處理工藝與其包被材料的不同也會影響CSB的作用。到目前為止，尚無關(guān)于丁酸鈉或CSB對蛋雞腸道食糜消化酶活性的影響，其原因還有待進(jìn)一步研究。

3.4 CSB對蛋雞腸道通透性的影響

腸道通透性會受到外來抗原、腸道微生物等影響，而腸道通透性又會影響動物的消化機能。二胺氧化酶是動物腸道細(xì)菌發(fā)酵的代謝終產(chǎn)物，由腸上皮細(xì)胞分泌，血清中D-乳酸含量和二胺氧化酶活性通常被用來反映腸道損傷或修復(fù)的程度及通透性變化情況[18-20]。動物腸黏膜屏障受損時，腸道通透性增大，血漿中D-乳酸含量提高，血漿中二胺氧化酶活性提高[21]。Dengler等[22]研究表明，丁酸鹽能夠在一定程度上改善動物腸道黏膜屏障功能。Zou等[23]研究發(fā)現(xiàn)，肉雞飼糧中添加300 mg/kg丁酸鈉可緩解葡聚糖硫酸鈉引起的血清D-乳酸含量升高。王可鑫等[20]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加200和300 mg/kg的CSB可顯著緩解注射脂多糖后斷奶羔羊血清D-乳酸含量和二胺氧化酶活性的升高。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加500和800 mg/kg CSB能顯著降低蛋雞血清D-乳酸含量。這可能是CSB能與細(xì)胞表面G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合，從而激活調(diào)控免疫反應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，最終維護(hù)腸道屏障功能[24]；還有可能是因為丁酸為腸黏膜提供了能量，促進(jìn)了腸黏膜上皮細(xì)胞的分化、增殖，使腸黏膜細(xì)胞的結(jié)構(gòu)維持正常，保持了細(xì)胞間的緊密連接，從而使得腸道通透性得到改善。

3.5 CSB對蛋雞腸道黏膜炎性因子和黏膜屏障相關(guān)基因表達(dá)的影響

腸道炎癥會對動物腸道通透性和上皮細(xì)胞功能完整性產(chǎn)生負(fù)面影響，所以腸道炎癥能直接反映腸道的健康程度。腸道黏膜屏障功能的受損、腸道炎癥的發(fā)生與IL-1β、IL-6和IFN-γ等細(xì)胞因子有關(guān)。IL-10主要是通過抑制輔助性T細(xì)胞(Th細(xì)胞)的活化及抑制IL-1β和IL-6 mRNA的表達(dá)來發(fā)揮免疫作用[25]。羅丹等[26]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CSB可降低肉雞空腸黏膜IL-1β和回腸黏膜IL-1β、IFN-γmRNA相對表達(dá)量。Wang等[27]研究發(fā)現(xiàn)，丁酸鈉可顯著降低斷奶仔豬空腸黏膜中IL-6 mRNA相對表達(dá)量，但對空腸黏膜中IFN-γmRNA相對表達(dá)量無顯著影響。Huang等[28]報道，飼糧中添加CSB對斷奶仔豬腸道黏膜中IL-1β和IFN-γ含量無顯著影響。Chen等[29]研究發(fā)現(xiàn)，給生長豬注射丁酸鈉可顯著降低回腸中IL-6 mRNA相對表達(dá)量。本試驗中，飼糧中添加CSB下調(diào)了蛋雞空腸黏膜IL-1βmRNA相對表達(dá)量，上調(diào)了空腸黏膜IL-10 mRNA相對表達(dá)量，與前人研究結(jié)果相似。其可能是因為丁酸作為組蛋白去乙?；敢种苿?，使得CSB在腸道解離為丁酸后，通過誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的分化來促進(jìn)IL-10的生成從而發(fā)揮抗炎作用[30]。

跨膜蛋白[閉合蛋白(occludin)、封閉蛋白(claudin)]和ZO-1組成的緊密連接在調(diào)節(jié)腸道通透性方面發(fā)揮著重要作用[31]，這些細(xì)胞間的連接保證了腸上皮結(jié)構(gòu)的完整和正常功能[32]。分泌型黏蛋白MUC2是腸上皮細(xì)胞分泌的一種高分子量糖蛋白，腸道黏膜屏障受損會導(dǎo)致MUC2表達(dá)量下調(diào)。De等[33]研究發(fā)現(xiàn)，丁酸可以通過增強結(jié)腸黏膜的屏障功能來維持腸黏膜的完整性。Peng等[34]研究發(fā)現(xiàn)，丁酸鹽通過對腸道緊密連接的促進(jìn)作用，在一定程度上改善了腸道黏膜屏障功能。Yang等[35]研究發(fā)現(xiàn)，包被有機酸可以提高肉雞空腸CLDN1 mRNA相對表達(dá)量。韓云勝[36]研究發(fā)現(xiàn)，丁酸梭菌上調(diào)了斷奶仔豬結(jié)腸ZO-1基因表達(dá)。Song等[37]研究發(fā)現(xiàn)，丁酸鈉可以上調(diào)肉雞腸道CLDN1和MUC2的表達(dá)。Tian等[38]研究表明，飼糧中添加丁酸鈉對草魚腸道MUC2的表達(dá)有上調(diào)的作用。本試驗中，蛋雞飼糧中添加CSB可以線性提高空腸和回腸黏膜中ZO-1以及回腸黏膜中MUC2 mRNA相對表達(dá)量，這與前人研究結(jié)果基本一致。這表明CSB的添加對蛋雞腸道屏障功能有促進(jìn)作用，有利于維持腸道健康。

4 結(jié) 論

飼糧中添加CSB可以提高蛋雞的產(chǎn)蛋率和合格蛋率，降低料蛋比、腸道pH和血清D-乳酸含量，提高腸道胰蛋白酶和脂肪酶活性，并能夠調(diào)節(jié)腸道黏膜炎性因子mRNA的表達(dá)，維持細(xì)胞間的緊密連接和增強蛋雞腸道黏膜屏障功能。