任 薇，杜建平，夏能能，阮文佳，曾 靜，吳偉梅

（廣東省第二中醫(yī)院（廣東省中醫(yī)藥工程技術研究院），廣東 廣州 510095）

根據《中華人民共和國中醫(yī)藥法》（2016年12月25 日通過），道地中藥材，是指經過中醫(yī)臨床長期應用優(yōu)選出來的，產在特定地域，與其他地區(qū)所產同種中藥材相比，品質和療效更好，且質量穩(wěn)定，具有較高知名度的中藥材。道地藥材是優(yōu)質中藥材的代名詞。巴戟天是我國著名的四大南藥之一，為茜草科巴戟屬植物巴戟天（Morinda officinalisHow.）的干燥根，味甘、辛，性微溫；具有補腎陽、強筋骨、祛風濕之功效，主治陽痿遺精、宮冷不孕、月經不調、少腹冷痛、風濕痹痛、筋骨痿軟。巴戟天自然分布于廣東、廣西、福建、海南等省區(qū)的熱帶和亞熱帶地區(qū)，以廣東為道地產區(qū)且為栽培主產區(qū)，目前廣東德慶縣為巴戟天最主要產地，且建立了規(guī)?；a種植基地。2017 年《廣東省嶺南中藥材保護條例》將符合廣東道地特征的中藥材經過統(tǒng)一遴選，公布了第一批保護的嶺南中藥材種類目錄，巴戟天即為首批納入保護的品種之一。本研究基于文獻對巴戟天道地性的科學內涵進行總結闡述。

1 巴戟天產地變遷的考證

巴戟天始載于《神農本草經》：“主大風邪氣，陰痿不起；強筋骨，安五臟，補中，增志，益氣。生巴郡及下邳山谷”。巴戟天之“巴”即指巴郡，即今四川、重慶范圍。本草經與現今藥典所載巴戟天藥效相同，產地卻相差巨大。從秦漢的本草經至清末的文獻記錄中，基本都認為巴戟天產于蜀地者優(yōu)，《蜀都賦》有記載“巴菽巴戟，靈壽桃枝”。《本草經集注》、《千金翼方》、《本草圖經》等著作也均指出巴戟天產于巴蜀及附近地區(qū)。直至清末，鄭肖巖在其著作《偽藥條辨》（1901）中稱“巴戟天，產蜀地者佳”；曹炳章在鄭肖巖的基礎上編著《增訂偽藥條辨》（1927）中換了個說法：“巴戟肉，廣東出者，肉厚，骨細，色紫，心白黑色者佳”，這是廣東第一次記載成為巴戟天的道地產區(qū)，而后的文獻中也多稱贊廣東出產的巴戟天。

除了產地變遷外，中藥巴戟天的基源植物也頗有爭議，經多人考證，從秦漢到清末的兩千多年里，巴戟天藥材的原植物可能包括六個科的11 種植物[1-4]，直到1958 年侯寬昭[5]對廣州藥材市場銷售的巴戟天進行了鑒定，發(fā)現其原植物為一個茜草科的新種，侯寬昭教授將其命名為Morinda officinalisHow.，而后《中國藥典》（1963 年版）首次收載巴戟天，將基源植物定為Morinda officinalisHow.，此后，巴戟天的基源才逐步統(tǒng)一，其產地也轉移到嶺南地區(qū)。由此可見現在所用的巴戟天是從清末才開始使用并發(fā)展至今的新品種，在臨床使用過程中，迅速形成了以廣東德慶高要為道地產區(qū)的大宗南藥品種。

2 基于化學成分對巴戟天道地性的內涵闡釋

目前，從巴戟天藥材中分離得到的主要化學成分有蒽醌類、環(huán)烯醚萜類、糖類、氨基酸、有機酸類、黃酮類及微量元素等。不同產地的巴戟天其主要化學成分的含量具有一定差異。

2.1 蒽醌類

巴戟天中的蒽醌類化合物有34種，母核主要為單蒽醌母核，如大黃素型和茜草素型。茜草素型蒽醌中含量較高的是1-甲氧基-2-羥基蒽醌、1，2-二甲氧基-3-羥基蒽醌、甲基異茜草素-1-甲醚、1，3-二甲基-2-甲氧基蒽醌和甲基異茜草素，這5 種成分骨架相似，僅取代基不同。史輯等[6]對來自廣東、廣西、福建等不同產地的巴戟天藥材樣品中這5 種茜草素型蒽醌類成分的含量進行了檢測，發(fā)現總體差異較大，廣西百色的樣品中茜草素型蒽醌的含量最高，而福建永定、廣東韶關的樣品中最低。廣西及福建的巴戟天中，1-甲氧基-2-羥基蒽醌、1，2-二甲氧基-3-羥基蒽醌的含量較高，而甲基異茜草素-1-甲醚和甲基異茜草素、1，3-二甲基-2-甲氧基蒽醌的含量較低；但廣東德慶、福建南靖、廣東普寧、廣西蒼梧的藥材卻相反，甲基異茜草素-1-甲醚和甲基異茜草素的含量較高。提示巴戟天種植產地的環(huán)境因素包括溫度、濕度、土壤、光照時間等對巴戟天中活性成分的含量有較大影響。吳凌鳳[7]對五華、德慶、南靖、欽州、玉林、郁南、肇慶等5個不同產地的大黃素甲醚進行檢測，結果表明，不同產地的巴戟天藥材中大黃素甲醚的含量是有一定差距的，以玉林產地的含量為最高，其次為欽州，而南靖的含量最低。

2.2 環(huán)烯醚萜苷類

該類成分是巴戟天中主要的一類成分，目前包括7種，如水晶蘭苷、四乙酰車葉草苷、Morindolide、Moroficinaloside、Asperuloside、車葉草苷酸等[8]。李正磊[9]對采自于廣東省高要、德慶和郁南巴戟天主產區(qū)種植的20份樣品及產于福建省南靖和永定的3份樣品中總環(huán)烯醚萜進行檢測，結果顯示，雖然23個樣品的總環(huán)烯醚萜含量均在20%～30%之間，但同一市不同縣及同一縣不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)所產巴戟天總環(huán)烯醚萜仍存在差異，含量最高的是采自廣東省云浮市郁南縣歷洞鎮(zhèn)石門村的巴戟天樣品，總環(huán)烯醚萜含量為30.6%。福建省4 個不同生長年限樣品含量測定結果顯示，巴戟天總環(huán)烯醚萜累積隨著年限增長呈先上升然后又下降的趨勢。提示這可能與巴戟天生長的土質、海拔高度、陽光照射時間等有關。劉瑾[10]研究發(fā)現，廣東、廣西、海南等不同產地的樣品中水晶蘭苷含量差異大，野生品的水晶蘭苷含量：海南（平均）＜廣東＜廣西。栽培品的水晶蘭苷含量：福建＜廣東＜廣西。廣東為巴戟天道地產區(qū)，其氣候、溫度等生態(tài)因子都較適合巴戟天生長，且管理較好，因此水晶蘭苷較高；而廣西氣候與廣東類似，也較適宜巴戟天生長，且在調查中發(fā)現廣西種植巴戟天的種苗，主要來自于廣東德慶地區(qū)，這可能是廣西樣品中水晶蘭苷含量高的主要原因；海南屬于熱帶季風氣候，年日照時數在1750～2650 h 之間，且大部分地區(qū)年日照時數高于2000 h，與巴戟天生長前期需蔭蔽相違背，巴戟天的適宜生長日照時數在2000 h 之內，影響巴戟天的生長，可能是海南巴戟天藥材中水晶蘭苷含量較低的原因。

2.3 糖類

巴戟天中糖類普遍含量在10%～25%，包括單糖、低聚糖類及多糖類化合物，如耐斯糖、菊淀粉系列的六聚糖和七聚糖等。此外，還含有豐富的果糖和蔗糖以及一些多糖類化合物。

郝慶秀等[11]建立了巴戟天低聚糖成分快速鑒定的超高效液相色譜串聯四級桿飛行時間質譜，鑒定了19 個巴戟天低聚糖成分。Yang Zhenmin 等[12]采用ESI-MS／MS 鑒定了巴戟天中的多個菊淀粉類多糖。陳忠等[13]對廣東不同地域及海南的巴戟天有效成分比較發(fā)現，粗脂肪含量和多糖的含量廣東德慶地區(qū)產巴戟天最高，而海南巴戟天的蒽醌等有效成風的含量高于廣東地區(qū)巴戟天，提示不同地域巴戟天的藥理特性存在差異。林勵等[14]對廣東省內5個不同產地巴戟天研究發(fā)現，廣東河源、高要地區(qū)的巴戟天醇溶性糖含量較高，廣東新豐、德慶產巴戟天的多糖含量較高。宋建華[15]通過水提醇沉發(fā)研究發(fā)現，在廣東、福建、還囊三種產地的巴戟天中，多糖的含量在一定程度上存在差別，廣東巴戟天中多糖含量為2.37%，得率為3.97%，海南巴戟天多糖含量為2.16%，得率為2.92%，福建巴戟天中多糖含量為1.59%，得率為3.24%，源產地為廣東肇慶的巴戟天中多糖含量優(yōu)于海南及福建產巴戟天。朱露林[16]通過采集不同產地及不同種植年限、采收時間的19 批巴戟天新鮮樣品和2 批野生巴戟天樣品及2 批商品藥材進行含量測定研究，發(fā)現巴戟天肉質根中寡糖類成分的含量存在較大差異。不同地區(qū)土壤、光照、降水、氣候等環(huán)境因素不同，影響寡糖類成分在肉質根的積累過程，從而導致巴戟天藥材的質量差異。同一產地不同種植年限的巴戟天寡糖類成分含量之間也存在顯著的差異。福建巴戟天樣品結果顯示，隨著種植時間增長，寡糖增加呈先增后降的趨勢，廣東巴戟天寡糖含量也有此趨勢。不同產地的巴戟天中蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、蔗果五糖含量以廣東產地含量最高，蔗果六糖和蔗果七糖以福建含量最高，而總含量以3 年生廣東高要含量最高，為（394.68±19.14）mg/g，其次是6 年生福建南靖為（342.31±43.88）mg/g，且寡糖含量具有隨種植時間的增加而降低的趨勢。

3 不同產地巴戟天的重金屬殘留

中藥材的種植是一系列復雜的過程，容易受到種植生態(tài)環(huán)境的影響，不同的產地有不同的自然生態(tài)環(huán)境，土壤、空氣、水等重金屬的含量差異非常大，對中藥材中的重金屬含量有直接關系；農藥及化肥的使用也會導致中藥重金屬含量上升。對重金屬殘留的限定也是評價中藥安全性的指標之一。徐科[17]采用微波消解處理樣品，通過電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS）同時測定清遠和肇慶產巴戟天Pb、Cd、Hg、Cu、As 的含量，結果顯示清遠產巴戟天鉛元素含量在3.71～13.79mg/kg 之間，鎘元素含量在0.15～0.36mg/kg 之間，汞元素含量在0.04～0.31mg/kg 之間，銅元素含量在6.79～9.23mg/kg 之間，砷元素含量在0.25～1.86mg/kg 之間；肇慶產巴戟天鉛元素含量在4.21～15.21mg/kg 之間，鎘元素含量在0.15～0.24mg/kg 之間，汞元素含量在0.02～1.29mg/kg 之間，銅元素含量在6.00～13.13mg/kg 之間，砷元素含量在0.11～0.54mg/kg 之間。清遠和肇慶的巴戟天鉛元素和銅元素的含量最大，砷、鎘、汞含有量相對較低；兩地野生巴戟天重金屬含量均超標，且不合格批次主要是鉛元素和汞元素含量超標。

4 基于藥物功效對巴戟天道地性的內涵闡釋

近年來，人們結合中醫(yī)藥學理論對藥物中微量元素進行了廣泛的臨床及實踐研究，發(fā)現中藥的藥效與所含微量元素及各種微量元素含量比值有一定關聯；巴戟天低聚糖已被證實具有抗癡呆、保護神經細胞、抗抑郁、提高學習記憶能力、保護心血管系統(tǒng)、抗骨質疏松、增強免疫力及性功能等多種藥理作用，還具有抗氧化應激、改善創(chuàng)傷后應激障礙和抑制破骨細胞分化等作用。其中抗癡呆、保護神經細胞、抗抑郁、提高學習記憶能力等保護神經系統(tǒng)的藥理作用與巴戟天補腎、主骨、益腦的傳統(tǒng)功效相對應，是目前研究的熱點，因此在國內外產生了較多的相關藥理作用機制研究[20]。

丁平[18]的研究指出，不同產地巴戟天中均含有人體必需的微量元素鐵、鋅、錳、銅等，其中鐵、錳含量明顯高于其他微量元素，巴戟天對錳有很強富集作用，而廣東產巴戟天的錳含量最高。微量元素作為巴戟天發(fā)揮臨床療效的物質基礎之一，與其補肝腎、強筋骨、祛風濕等功效密切相關。

冉志芳[19]采用電感耦合等離子體質譜法（ICPMS）、石墨爐原子吸收分光光度法（JFAAS）、原子熒光法（AFS）檢測不同產地巴戟天藥材中Mg、Fe 等10 種微量元素的含量，并對其進行主成分分析和聚類分析，結果發(fā)現不同產地巴戟天藥材中Mg、Fe、Zn、Mn 元素含量較為豐富，均值分別達（1 058.60±16.67）、（484.73±13.74）、（24.64±8.93）、（314.90±27.89）mg/kg；主成分分析表明，Zn、Mg、Fe、Cr、Se、Ni為巴戟天微量元素的特征元素，且不同產地巴戟天藥材的綜合評價表明，綜合排名前三的產地分別是廣西蒼梧梨埠鎮(zhèn)、廣東郁南歷洞鎮(zhèn)、福建永定龍?zhí)舵?zhèn)。聚類分析顯示，地理位置相近的產地均能較好的聚為一類，表明巴戟天藥材中微量元素的含量存在明顯的地域性特征，16 個不同產地主要被分成四大類：廣東郁南河口鎮(zhèn)（GYN-1），廣東郁南宋桂鎮(zhèn)（GYN-2），廣西蒼梧梨埠鎮(zhèn)（GCW-2），廣西蒼梧六堡鎮(zhèn)（GCW-3），廣西蒼梧木雙鎮(zhèn)（GCW-4），廣西蒼梧石橋鎮(zhèn)（GCW-1）聚為一類；廣東德慶高良鎮(zhèn)（GDQ-1），廣東郁南千官鎮(zhèn)（GYN-4），廣東郁南歷洞鎮(zhèn)（GYN-5）聚為一類；廣東德慶鳳村鎮(zhèn)（GDQ-2），廣東德慶永豐鎮(zhèn)（GDQ-3），廣東高要河臺鎮(zhèn)（GGY-1），廣東郁南大方鎮(zhèn)（GYN-3），廣西蒼梧岑溪水汶鎮(zhèn)（GCX-1）聚為一類；福建永定龍?zhí)舵?zhèn)（MYD-1），福建永定峰市鎮(zhèn)（MYD-2）聚為一類。這為巴戟天的道地性特征研究提供了基礎數據。

何艷[21]研究了不同產地的鹽制巴戟天補腎助陽功效強弱，結果表明，不同產地和規(guī)格的鹽巴戟天均能有效改善小鼠的體質量、毛色、活動能力、尿量等陽虛癥狀，降低血肌酐和尿素氮含量，腎陽虛模型組服用鹽巴戟天可以降低腺嘌呤誘導的腎陽虛小鼠模型體內血肌酐和尿素氮，升高17-OH-CS 和睪酮及T3 和T4 水平，說明鹽巴戟天可以通過改善上述三大軸的作用產生補腎助陽功效，其中廣東精選鹽巴戟天作用較福建永定精選鹽巴戟天對上述部分指標的改善作用更為明顯，但二者在補腎助陽功效上沒有明顯的差異，均有較好的作用。病理切片觀察顯示，不同產地和規(guī)格的鹽巴戟天可明顯抑制由腺嘌呤所致的初級精母細胞和成熟精子數量減少，改善睪丸曲細精管的形態(tài)，增加精子數量，促進生精細胞的分化、發(fā)育、成熟，使成熟精子的數目增多。

冉志芳[22]以PTK787 誘導的節(jié)間血管損傷斑馬魚為模型，研究來自廣東、廣西和福建等12 個不同產地巴戟天提取物對對斑馬魚破損節(jié)間血管生成數、生成長度和相對生成率的影響，分析不同產地巴戟天在促血管生成上的差異性。結果發(fā)現巴戟天提取物對斑馬魚破損節(jié)間血管的生長具有修復促進作用，且廣東高要、廣東郁南等地巴戟天提取物促斑馬魚血管生長效果明顯優(yōu)于其他產區(qū)，節(jié)間血管生成數平均達到9 條，生成長度平均在448～504μm，相對生成率達7.9%～8.86%，促血管生成效果明顯優(yōu)于其他產地。廣東德慶（GDQ-2），福建永定（MYD-1）和廣東郁南（GYN-1）等地巴戟天表現出較好的促血管生成效果，血管生成數平均7條，生成長度平均在264～337μm，血管相對生成率達1.29%～2.38%。聚類分析結果顯示，12 個不同產地巴戟天被聚為四大類，廣東德慶與廣東高要，廣西蒼梧與廣西岑溪，廣東郁南與廣西蒼梧等地理位置相近的產地均能較好的聚到一起。提示不同產地巴戟天在促血管生成上表現出明顯的地域性差異，而且廣東高要、廣東郁南等地巴戟天促血管生成效果較為突出。

5 基于分子生物學技術對巴戟天道地性的內涵闡釋

分子生物學在揭示道地藥材本質的研究有很重要的作用。DNA 分子標記不受環(huán)境因素和植物生長發(fā)育時期的影響，不受樣品形態(tài)、基因表達與否的限制,實驗所需樣品用量少，是研究道地藥材的遺傳多態(tài)性的主要方法，RAPD、ISSR、5S-rRNA、SSR 微衛(wèi)星等都是較為常用的分子標記研究技術。近年來植物核基因組和葉綠體基因組中的分子序列廣泛的應用于道地藥材分子鑒別及道地性形成的研究中。

核糖體rDNA 內轉錄間隔區(qū)（ITS）作為一種遺傳標記，被廣泛應用于中藥材鑒定、遺傳多樣性、親緣關系等方面的研究。通過對不同產地巴戟天核糖體rDNAITS 序列分析發(fā)現，巴戟天群體間的親緣關系與地理分布呈現較好的相關性。蔡苗苗[23]應用高通量測序技術對巴戟天的葉綠體基因組進行了組裝、注釋和分析，每個樣品得到了約3 G的原始序列數據，共包含180 M 的測序片段。通過對不同產地巴戟天葉綠體基因組的變異情況進行比較，發(fā)現葉綠體基因組中不同區(qū)域和不同數量的單堿基突變或插缺失突變是巴戟天藥材產生道地性的主要原因。與參考基因相比，廣東巴戟天群體葉綠體基因組相同，堿基差異數和遺傳距離為0；福建巴戟天群體葉綠體基因組堿基差異數為4～16個，遺傳距離為0.026～0.126；廣西巴戟天群體和海南巴戟天群體葉綠體基因組差異主要為集中在大單拷貝區(qū)的單堿基突變和插入缺失突變，葉綠體基因組堿基差異數為71～81 個，遺傳距離為0.470～0.536。該研究從基因水平上證明了廣東巴戟天種源穩(wěn)定，廣東巴戟天群體葉綠體基因變異少，顯示出廣東為巴戟天道地產區(qū)具有科學性。

劉瑾[24]基于序列分析探討巴戟天道地藥材形成的內在原因，研究選取巴戟天核基因組內轉錄間隔區(qū)ITS 序列,葉綠體基因組matK、非編碼區(qū)trnL-F 序列進行直接PCR測序,并進行群體遺傳研究.結果表明巴戟天ITS序列可用于研究巴戟天道地性藥材形成的分子機制,可以較好的區(qū)分廣西及海南的巴戟天居群,同時群體遺傳結果分析結果表明了同一省份間巴戟天樣品遺傳分化程度低、基因交流多、遺傳差異??；而四省份間廣東與福建樣品遺傳距離最小,分化少,遺傳差異小,而海南及廣西與其余省份的遺傳距離均較遠、分化程度高、遺傳變異大。對單倍型分析可以得到廣東巴戟天可能為巴戟天的祖先群,與廣東作為道地產區(qū)的地位相一致。

6 基于指紋圖譜對巴戟天道地性的內涵闡釋

不同產地的巴戟天不僅存在多種類型，而且化學成分如水晶蘭苷、寡糖的含量及蒽醌類成分的指紋圖譜等均存在較大差異[25-26]。廖慧君[27]建立了巴戟天寡糖的高效薄層色譜（HPTLC）指紋圖譜，并對不同產地巴戟天藥材、炮制飲片、混偽品及含巴戟天藥材的復方制劑中寡糖成分進行分析比較，通過HPTLC 指紋圖譜考察，炮制后巴戟天寡糖成分出現質與量的改變；來源于廣東、福建、廣西、海南等不同產地的巴戟天藥材無明顯差異。崔妮[28]等研究不同產地巴戟天不同炮制品蒽醌類化合物的HPLC指紋圖譜，分別指認了巴戟天、巴戟肉、鹽巴戟天中5個色譜峰，制巴戟天中6個色譜峰，且不同產地巴戟天質量差異顯著。吳凌鳳等[29]建立巴戟天藥材中蒽醌類成分HPLC 指紋圖譜的分析方法，分析不同產地巴戟天及野生藥材與栽培品種蒽醌類成分的差異。劉曉涵[14]建立巴戟天中糖類化學成分HPLC 指紋圖譜的分析方法,研究不同產地的巴戟天藥材的質量，研究發(fā)現不同產地巴戟天藥材中糖類化合物化學組成相似, 且均以果糖和蔗糖為主要的色譜峰,但相對比例有明顯的差異。果糖質量分數在所分析的藥材中均較高,但在不同來源的藥材中差異很大；以廣西產巴戟天果糖質量分數最高，廣東高要產者果糖最低；從指紋圖譜相似度來看，也正是這兩者與其余8 批藥材出現了顯著差異。

7 總結

中藥道地性是中藥藥性的重要組成部分，是中藥材的專屬特征，其形成秉承遺傳之變化，秉受環(huán)境之異同，體現了“性-效”關系，是產生臨床療效差異的藥物屬性。道地藥材作為優(yōu)質藥材的傳統(tǒng)代名詞，是道地性理論的載體，充分體現中醫(yī)藥理論內涵。中藥道地性理論反映了中醫(yī)對藥物與自然關系的認識，是對中藥材質量認識的傳統(tǒng)理念和控制模式。當前，人們對藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣，道地或非道地的評價從以往的經驗鑒別為主，過渡到以關注化學成分特征為主，但這些獨特性“指標”成分的形成規(guī)律、質量與療效關聯性，尚需深入研究，從而將道地性理論科學價值與道地藥材療效優(yōu)勢得到充分發(fā)揮。中藥道地性科學內涵的揭示和評價體系的建立、道地藥材資源可持續(xù)發(fā)展已成為中藥學學科的重要課題，開展中藥道地性研究是保障中藥材質量和中醫(yī)藥臨床療效的關鍵。

巴戟天是生長在熱帶、南亞熱帶濕地雨林的藤本植物，其生長需要滿足“前陰后陽,上陽下陰”的特點，由于巴戟天對于環(huán)境有特定的要求,所以巴戟天在我國主要分布于廣東、廣西、福建、海南四省。近年來不少學者從巴戟天的化學成分、藥效物質基礎、藥理特性、以及基于核糖體rDNAITS 序列變異等分子機制方面探討了不同產地巴戟天的地域性差異，不同產地的巴戟天的化學成分含量有所不同，不同地域巴戟天的藥理特性也存在差異，為巴戟天道地藥材品質評價提供了數據基礎，對探討、豐富巴戟天道地性科學內涵提供了客觀證據。