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        LncRNA MT1JP在肺腺癌中的表達及臨床意義

        2022-11-13 12:21:54卞春安林超宇田曉奇
        現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生 2022年21期
        關鍵詞:腺癌引物肺癌

        卞春安,林超宇,田曉奇

        (南京醫(yī)科大學第四附屬醫(yī)院胸外科,江蘇 南京 210031)

        2021年美國癌癥年報報道,肺癌已連續(xù)10余年占據(jù)全球癌癥發(fā)病率及死亡率的榜首,其中以非小細胞肺癌中的肺腺癌類型發(fā)病率上升最為顯著,目前其已成為發(fā)病率最高的肺癌病理類型[1-3]。伴隨著分子生物學日新月異的進展,目前肺腺癌的相關驅(qū)動基因及長鏈非編碼RNA(lncRNA)的相關實驗和臨床試驗進展迅速,但肺腺癌的總體生存率仍然較低,尤其是中晚期肺癌患者的5年生存率不到15%[4-6]。晚期肺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是影響患者生存時間的關鍵因素,但目前明確的發(fā)病和侵襲轉(zhuǎn)移機制仍然不明確[7-8]。因此,為了使肺腺癌患者能夠得到早期診斷和精準化、個體化治療,改善患者的生存質(zhì)量、延長患者的生存期,不斷篩查新的生物標志物和作用靶點就顯得十分重要。

        近年來,作為表觀遺傳學重要方向的lncRNA越來越引起人們的重視。研究發(fā)現(xiàn),lncRNA能夠?qū)Χ鄠€系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生發(fā)展起到促癌或抑癌作用,通過表觀遺傳學等機制直接或間接參與對癌細胞的生長、浸潤與轉(zhuǎn)移等多種惡性生物學行為的分子調(diào)控[9-11]。隨著對lncRNA更深入的研究,科學家發(fā)現(xiàn)其在惡性腫瘤的早期診斷及臨床靶向治療方面具有巨大的潛力。因此,積極深入探索lncRNA在肺腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其分子調(diào)控機制,對進一步提高我國肺腺癌的診治水平具有重要意義。

        LncRNA MT1JP是一種新發(fā)現(xiàn)的lncRNA,在肝癌、胃癌、結(jié)腸癌中低表達,且起著抑癌的作用[12-15],但其在肺腺癌組織中表達情況如何,對肺腺癌生物學功能的影響如何,尚鮮見相關報道。本研究著重探討lncRNA MT1JP在肺腺癌組織中的表達情況,研究其與患者臨床病理特征的關系,以期為肺腺癌的診治提供新的方向。

        1 資料與方法

        1.1一般資料 本研究回顧性分析2019年1月至2021年12月在南京醫(yī)科大學第四附屬醫(yī)院胸外科經(jīng)手術病理確診的43例肺腺癌患者的病歷資料。其中男26例,女17例;年齡34~74歲,平均55.3歲。所有患者術前均未經(jīng)過放化療、靶向治療、免疫治療等其他治療,術前相關檢查未見明顯的心、肝、肺、腎功能障礙,遠處轉(zhuǎn)移或其他影響疾病預后的嚴重疾病。本研究所采用的肺腺癌組織標本及其配對的癌旁組織標本從體內(nèi)取出后在10 min內(nèi)迅速凍存到液氮中,以用于后續(xù)總RNA的提取實驗。肺腺癌樣本在采集前均向患者說明情況并簽訂了知情同意書,并獲得了醫(yī)院倫理委員會的批準。術后定期對患者進行隨訪,隨訪時間為患者死亡或隨訪截止日。

        1.2方法 采用實時熒光聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)法檢測lncRNA MT1JP在肺腺癌組織及其癌旁組織中的表達水平。將保存的組織樣本從液氮中取出后,立即和液氮一起放在研缽中進行研磨,利用Trizol法提取總RNA,使用NanoDrop ND-1000進行RNA濃度和純度的測定,用RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒將選取的OD260/OD280值接近2.0的RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA。利用Primer5.0設計引物。LncRNA MT1JP的正義引物為5′-TCGAAATGGACCCCAACTA-3′,反義引物為5′-TGCACTTCTCCGACGTCC-3′;β-actin的正義引物為5′-GTGGCCGAGGACTTTGATTG-3′,反義引物為5′-CCTGTAACAACGCATCTCATATT-3′。根據(jù)PCR試劑盒說明配置反應體系,每組設置3個重復,反應條件按照引物不同退火溫度給予相應程序設置。以β-actin為參照基因,采用2-△△Ct法計算lncRNA MT1JP的相對表達水平。

        2 結(jié) 果

        2.1肺腺癌組織與癌旁組織中l(wèi)ncRNA MT1JP表達水平比較 肺腺癌組織中l(wèi)ncRNA MT1JP相對表達水平明顯低于對應的癌旁組織,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖1。

        2.2LncRNA MT1JP在肺腺癌組織中的表達與臨床病理特征的關系 不同腫瘤大小、術后TNM分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移患者lncRNA MT1JP在肺腺癌組織中的表達水平比較,差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=5.562、11.667、7.525,P<0.05),見表1。

        表1 LncRNA MT1JP在肺腺癌組織中的表達患者臨床病理參數(shù)情況[n(%)]

        續(xù)表1 LncRNA MT1JP在肺腺癌組織中的表達患者臨床病理參數(shù)情況[n(%)]

        3 討 論

        隨著環(huán)境污染的加劇和社會生活壓力的增大,世界和中國的腫瘤發(fā)病譜也隨之改變,肺癌已經(jīng)成為目前世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤,嚴重危脅人民生命健康安全[16]。有研究顯示,以肺腺癌為主的非小細胞肺癌的預后無明顯改善[17-19]。直到近年來薄層CT的廣泛使用使得更多的早期肺癌被發(fā)現(xiàn)并得以早期干預治療,以及許多針對EGFR、KARS等肺腺癌驅(qū)動基因的靶向治療藥物的研發(fā)成功,大大地改善了肺腺癌患者的預后[20-21]。但對于中晚期肺腺癌患者而言,術后容易復發(fā)轉(zhuǎn)移,總體預后不佳[22]。肺腺癌的發(fā)生發(fā)展涉及多步驟、多階段的演化,包括多種基因的異常表達和表觀遺傳學的變化[23]。LncRNA在肺腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要的作用[24],對深入研究肺腺癌的發(fā)病機制、及早診治具有重要意義。

        LncRNA MT1JP是一種新發(fā)現(xiàn)的lncRNA,在膀胱癌、肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌中低表達,且起著抑癌的作用[25-26]。有研究表明,lncRNA MT1JP通過與TIAR相互作用來調(diào)節(jié)P53信號通路發(fā)揮抑癌作用[27]。祁海燕等[28]發(fā)現(xiàn)lncRNA MT1JP可能通過上調(diào)P53表達抑制葡萄膜黑色素瘤細胞的轉(zhuǎn)移和侵襲。國內(nèi)馬吉勇等[29]研究表明,lncRNA MT1JP可能是通過mRNA-423-3p/Bim 軸途徑在肺腺癌中發(fā)揮抑癌作用的,即通過下調(diào)mRNA-423-3p的表達激活上調(diào)抑癌基因Bim的表達,間接抑制了肺腺癌的發(fā)生發(fā)展。本研究結(jié)果表明,肺腺癌組織中l(wèi)ncRNA MT1JP相對表達水平明顯低于對應的癌旁組織,推測lncRNA MT1JP的表達缺失可能與肺腺癌的惡性生物學行為有關。另外,lncRNA MT1JP在肺腺癌中的低表達與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期等臨床病例特征具有明顯的相關性。LncRNA MT1JP在肺腺癌中具體確切的調(diào)控機制有待于后期進一步的實驗研究。

        綜上所述,lncRNA MT1JP在肺腺癌組織中相對低表達,并且與患者腫瘤的惡性生物學行為有關。LncRNA MT1JP可能參與了肺腺癌的發(fā)生發(fā)展,有望成為肺腺癌診斷和預后判斷的新靶點。

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