孔重人 宋新然 魏廷育 王雨霏 王 震 李應(yīng)東 鹿志創(chuàng) 田甲申*

(1.遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院，大連市瀕危海洋哺乳動(dòng)物保護(hù)生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，大連，116023；2.大連圣亞旅游控股股份有限公司，大連，116023；3.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)教育部重要家畜疫病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，沈陽(yáng)，110866；4.葫蘆島市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法隊(duì)，葫蘆島，125099)

瓜頭鯨(Peponocephalaelectra)，隸屬于鯨目(Cetacea)，海豚科(Delphinidae)，瓜頭鯨屬(Peponocephala)，為我國(guó)二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物[1]，同時(shí)被CITES列為附錄Ⅱ物種[2]。瓜頭鯨主要分布于全球熱帶至亞熱帶水域，偶爾也會(huì)出現(xiàn)于高緯度地區(qū)，在我國(guó)常見(jiàn)于南海一帶。它們主要分布在300～2 000 m深度的水域中，經(jīng)常組成多達(dá)1 000頭的大群，這表明群體內(nèi)部具有很強(qiáng)的社會(huì)凝聚力[3]。瓜頭鯨是夜間捕食者，以各種中層魚(yú)類、魷魚(yú)和蝦為食。此外，瓜頭鯨會(huì)促進(jìn)熱帶貧營(yíng)養(yǎng)水域上層海鳥(niǎo)的覓食，具有重要的生態(tài)作用[4]。

大連位于遼東半島最南端，西臨渤海，東臨黃海，不僅是許多經(jīng)濟(jì)魚(yú)類和蝦類的棲息場(chǎng)所，還分布有斑海豹(Phocalargha)、東亞江豚(Neophocaenaasiaorientalissunameri)和小須鯨(Balaenopteraacutorostrata)等海洋哺乳動(dòng)物[5]。近幾十年來(lái)，報(bào)道了多起海洋哺乳動(dòng)物擱淺、救助或死亡事件[6-8]。Demaster等[9]推測(cè)，21世紀(jì)末，海洋哺乳動(dòng)物的現(xiàn)存種群數(shù)量和物種豐富度將減少，沿海種群和物種將受到比非沿海物種更大的負(fù)面影響。因此，有必要積極收集受到漁業(yè)和其他人為活動(dòng)影響的海洋哺乳動(dòng)物基礎(chǔ)生物學(xué)數(shù)據(jù)和種群診斷數(shù)據(jù)，為后續(xù)生物資源保護(hù)、恢復(fù)及生態(tài)保護(hù)提供基礎(chǔ)資料。本研究首次報(bào)道了瓜頭鯨在遼寧大連海域出現(xiàn)，通過(guò)積極救助和死亡后解剖、病理和死因分析，積累了較多的救助經(jīng)驗(yàn)和病理資料，對(duì)后續(xù)開(kāi)展擱淺海洋哺乳動(dòng)物的救助和疾病治療具有重要的借鑒價(jià)值和參考意義。

1 救助過(guò)程

1.1 救助轉(zhuǎn)運(yùn)

2021年9月6日中午，在大連市莊河栗子房海域發(fā)現(xiàn)1頭鯨魚(yú)擱淺在岸灘上。大連市海洋與漁業(yè)綜合行政執(zhí)法隊(duì)接到莊河市漁政部門報(bào)告后，立即組織遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院和大連圣亞海洋世界的救助人員趕赴現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行救助。通過(guò)外觀鑒定，確定為瓜頭鯨。經(jīng)初步檢查，瓜頭鯨未見(jiàn)明顯呼吸異常音，略有消瘦，背鰭、尾鰭有輕微摩擦傷，頭頸部有數(shù)道較淺、犁耙型傷口(疑為咬傷)，背鰭左后側(cè)有一疑似陳舊外傷(已愈合)，下頜有一直徑約4 cm的圓形堅(jiān)硬包塊，總體活力較好。本著“就地施救，就地放歸”的原則，將其于18：00在莊河港外海放歸入海。

9月9日10：00，該瓜頭鯨再次擱淺于大連市普蘭店皮口海域。救助人員到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行了初步檢查，發(fā)現(xiàn)其呼吸顯無(wú)力，活力下降且虛弱，決定即刻將其轉(zhuǎn)移至大連圣亞海洋世界進(jìn)一步救助。

1.2 救治過(guò)程

9月9日17：18，瓜頭鯨轉(zhuǎn)運(yùn)至大連圣亞海洋世界救助池內(nèi)。瓜頭鯨入水后有側(cè)翻，1人助游，沖撞池壁，4人池壁看護(hù)。20 min后游動(dòng)正常，多水中漂浮，水深升至1.4 m，救助人員撤離至岸上看護(hù)。18：40灌服液體1.5 L(內(nèi)含補(bǔ)液鹽、葡萄糖、硫糖鋁、護(hù)肝藥物)，呼吸音正常，但無(wú)力。20：00填喂鯖魚(yú)3條(0.5 kg)，添加維生素補(bǔ)充劑。全程看護(hù)，每5 min呼吸8～10次，多漂浮，未見(jiàn)側(cè)翻行為，水深1.4 m，大量排便3次，墨綠色。

9月10日09：00，對(duì)瓜頭鯨尾靜脈采血，血檢結(jié)果：肝損傷，營(yíng)養(yǎng)衰竭，白細(xì)胞數(shù)正常，但中性粒細(xì)胞百分比升高，同時(shí)纖維蛋白原、堿性磷酸酶和鐵因子異常，存在感染的可能；白蛋白、葡萄糖極低，極其虛弱；肝臟指標(biāo)升高，結(jié)合病理未見(jiàn)到明顯的炎性反應(yīng)，考慮為寄生蟲(chóng)導(dǎo)致。

呼吸孔采樣藥敏試驗(yàn)結(jié)果：豪氏變形菌(Proteushauseri)、大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)和超廣譜β內(nèi)酰胺酶呈陽(yáng)性。09：30對(duì)瓜頭鯨靜脈給予抗生素頭孢曲松鈉20 mg/kg(液體250 mL)；灌服液體1.5 L，內(nèi)含補(bǔ)液鹽2袋、50%葡萄糖20 mL、硫糖鋁1.5 g和水飛薊賓葡甲胺片15粒。

用藥情況說(shuō)明：一般救助的鯨豚類因本身疾病或虛弱，均會(huì)有感染癥出現(xiàn)，革蘭氏陰性菌感染較陽(yáng)性菌發(fā)病率高，給予頭孢曲松鈉預(yù)防性治療。野外救助的海洋哺乳動(dòng)物，寄生蟲(chóng)感染的概率較大，多會(huì)出現(xiàn)肝臟的寄生蟲(chóng)感染，給予護(hù)肝藥物，狀態(tài)好轉(zhuǎn)時(shí)給予驅(qū)蟲(chóng)藥物。救助動(dòng)物極易因長(zhǎng)時(shí)間無(wú)法攝食導(dǎo)致低血糖和脫水，瓜頭鯨表現(xiàn)虛弱，給予葡萄糖；結(jié)合血檢結(jié)果，應(yīng)大劑量的經(jīng)口補(bǔ)充葡萄糖。10：00填喂鯖魚(yú)1條，魷魚(yú)2條(0.6 kg)，添加多元復(fù)合維生素(維生素A、維生素C、維生素B族、維生素E)。11：40，每5 min瓜頭鯨呼吸15次，漂??；11：55，肛門大量排氣；12：47，出現(xiàn)呼吸急促，每5 min 68次；肌注腎上腺素(1 mol/L) 0.02 mg/kg，于13：27搶救無(wú)效死亡。

2 外部檢查和解剖檢查

2.1 外部檢查

瓜頭鯨，雄性，體長(zhǎng)231.4 cm，體重115 kg，外部形態(tài)測(cè)量結(jié)果見(jiàn)表1。頭后方及背鰭下方凹陷明顯，背鰭至尾鰭體側(cè)可見(jiàn)明顯的骨痕。尾鰭、背鰭有輕微摩擦傷，頭頸部少量疑似輕微咬傷?？谇火つぢ杂猩n白，牙齒細(xì)小、密集，齒根殘留少量淤泥，未見(jiàn)齒損傷。肛門殘留少量糞便，其他天然腔孔未見(jiàn)異常(圖1)。

表1 瓜頭鯨外形參數(shù)

圖1 瓜頭鯨外觀Fig.1 Appearance of the dead melon-headed whale

2.2 解剖檢查2.2.1 皮膚

胸部脂肪厚約1.8 cm，脂肪色較其他鯨豚蒼白，肌肉層厚約1.7 cm，肌肉深紅，身體消瘦，脂肪層及肌肉層明顯變薄，可見(jiàn)長(zhǎng)時(shí)間營(yíng)養(yǎng)不良；皮膚切開(kāi)后有淡黃綠色液體流出，呈滲出性素質(zhì)；腹部脂肪層與肌肉層有數(shù)個(gè)白色、卷曲的蟲(chóng)體(圖2A)。

圖2 瓜頭鯨剖檢結(jié)果Fig.2 Anatomy and examination results of the melon-headed whale

2.2.2 呼吸系統(tǒng)

喉內(nèi)見(jiàn)少量黏液，喉及氣管黏膜正常，氣管內(nèi)有較多白色泡沫樣液體；左肺長(zhǎng)、寬比33∶17，右肺長(zhǎng)、寬、厚比38∶15∶6，雙肺重3.6 kg，雙肺深紅，切面有少量暗紅色液體流出(圖2B)

2.2.3 消化系統(tǒng)

食道黏膜完整，第一胃內(nèi)殘存魷魚(yú)1條，蟹足若干(圖2C)，鯖魚(yú)殘?jiān)倭?，帶有魚(yú)線的魚(yú)鉤1個(gè)(圖2D)。存在2 cm×4 cm潰瘍面1個(gè)，1 cm×1 cm潰瘍面2個(gè)，潰瘍面均較深(圖2E)，其余胃黏膜正常；第二胃與第三胃交接處見(jiàn)大量長(zhǎng)約2 cm，紅褐色線蟲(chóng)吸附(圖2F，圖2G)，吸附區(qū)域呈現(xiàn)明顯的瘢痕及顏色改變。全腸段色正常，腸內(nèi)存在大量氣體，營(yíng)養(yǎng)衰竭導(dǎo)致胃腸功能紊亂，腸蠕動(dòng)異常，直腸近端有明顯的折疊，存在腸扭轉(zhuǎn)的可能，腸系膜未見(jiàn)異常(圖2H)。胃淋巴結(jié)內(nèi)有結(jié)節(jié)樣物1枚(2.6 cm×1.6 cm×1.2 cm)。肝臟重2.4 kg，縱面、橫面、厚比27.0∶28.0∶5.4，近圓形，大部色呈暗紅色，右側(cè)肝臟下緣呈白色纖維樣改變；邊緣質(zhì)地偏硬，局部切面略有外翻，有少量紅色液體流出(圖2I)。

2.2.4 免疫系統(tǒng)

脾臟呈直徑5 cm的圓餅狀，表面有數(shù)個(gè)、淡綠的突起及針尖狀出血，異常改變集中于一側(cè)(圖2J)。

2.2.5 泌尿系統(tǒng)

左腎重0.45 kg，長(zhǎng)、寬、厚比21.0∶8.9∶4.2，右腎未測(cè)量。左右附睪呈長(zhǎng)約25 cm的近圓柱狀，各重0.45 kg。左側(cè)附睪連接一近三角形腺體，表面呈暗紅色，出血嚴(yán)重；右側(cè)附睪連接腺體呈乳白色。右側(cè)附睪尾端、臨近腹壁和膀胱表面有數(shù)十個(gè)直徑約2.4 cm的球形包囊(圖2K)，包囊呈多層，切開(kāi)后極少量液體并伴有一巨大白色頭部和較長(zhǎng)尾部的寄生蟲(chóng)流出(圖2L)。

2.2.6 其他組織器官

膀胱處有灰白不整形組織14.0 cm×6.0 cm×5.5 cm，疑似膀胱大小6 cm×4 cm×4 cm，周邊見(jiàn)多處近球形囊腫，內(nèi)含大量清亮液，壁光滑菲?。还芮粯游?條，分別長(zhǎng)4.0、5.5 cm，直徑0.5 cm，其周邊各見(jiàn)1條較細(xì)管腔，長(zhǎng)分別為1.5、3.5 cm，直徑0.6 cm；條索樣物一堆1.0 cm×0.3 cm×0.1 cm。下頜腫物為灰褐灰白不整形組織(3.5 cm×3.3 cm×1.0 cm)，切面灰白質(zhì)硬。其他組織、器官未見(jiàn)肉眼可見(jiàn)病變。

2.3 病理分析

將瓜頭鯨肺、肝臟、膀胱、胃和脾等組織送至相關(guān)檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行病理分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：肺部肺泡腔擴(kuò)張，部分肺泡腔內(nèi)見(jiàn)蟲(chóng)體，間質(zhì)血管擴(kuò)張，充血明顯，伴出血；肝部淤血，肝細(xì)胞變性，血管內(nèi)見(jiàn)蟲(chóng)體；膀胱壁慢性炎癥，另見(jiàn)蟲(chóng)體，可能為寄生蟲(chóng)移行所導(dǎo)致；膀胱上附養(yǎng)物為精囊腺；胃慢性潰瘍，見(jiàn)異物巨細(xì)胞，可能為異物導(dǎo)致；胃淋巴結(jié)反應(yīng)性增生伴出血為胃慢性炎癥導(dǎo)致；脾部淤血，可能與肝臟病變，導(dǎo)致的血液回流受阻有關(guān)；下頜表皮鱗狀上皮增生，真皮膠原纖維及脂肪組織增生，部分真皮乳頭見(jiàn)慢性炎細(xì)胞浸潤(rùn)，海洋哺乳動(dòng)物因生活環(huán)境對(duì)外傷的愈合能力很強(qiáng)，上皮增生說(shuō)明下頜的外傷恢復(fù)較慢，可能與營(yíng)養(yǎng)及免疫力低下有關(guān)；陰莖后肌肉表面見(jiàn)腺體增生，寄生蟲(chóng)初步判定為異尖科線蟲(chóng)(Anisakissp.)。

2.4 寄生蟲(chóng)鑒定

利用線粒體COⅠ基因通用引物對(duì)保存的胃內(nèi)寄生蟲(chóng)樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增和測(cè)序。COⅠ基因666 bp(圖3)。DNA測(cè)序結(jié)果經(jīng)比對(duì)和聚類分析，發(fā)現(xiàn)其與派氏異尖線蟲(chóng)(Anisakispegreffii)最為接近，結(jié)合形態(tài)特征，確定所分離的線蟲(chóng)為派氏異尖線蟲(chóng)。

圖3 瓜頭鯨胃內(nèi)寄生蟲(chóng)COⅠ基因PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig.3 PCR amplification results of COⅠ genes from parasite in stomach 注：M.DL2000 DNA Marker；1.ITS2基因陰性對(duì)照；2～3.ITS2基因蟲(chóng)體1；4～5.ITS2基因蟲(chóng)體2；6～7.COⅠ基因陰性對(duì)照；8～9.COⅠ基因蟲(chóng)體1；10～11.COⅠ基因蟲(chóng)體2 Note：M，DL2000 DNA Marker.1，ITS2 gene negative control.2-3，ITS2 gene in parasite 1.4-5，ITS2 gene in parasite 2.6-7，COⅠ gene negative control.8-9，COⅠ gene in parasite 1.10-11，COⅠ gene in parasite 2

3 討論

瓜頭鯨主要分布于熱帶及亞熱帶海域，是一種群居性極強(qiáng)的鯨類。近30年來(lái)，有關(guān)瓜頭鯨擱淺的報(bào)道逐漸增加，擱淺地點(diǎn)的緯度也逐漸升高[10]，導(dǎo)致其擱淺的原因多種多樣。大量報(bào)道表明，瓜頭鯨易受到人為聲音的影響，如2008年，由于使用了高功率聲納，導(dǎo)致馬達(dá)加斯加西北海岸約100頭瓜頭鯨大規(guī)模擱淺，其中至少有75頭死亡[11]；2021年6—10月，在中國(guó)東部沿海也發(fā)現(xiàn)幾十頭瓜頭鯨擱淺，其中大多數(shù)個(gè)體都有嚴(yán)重的聽(tīng)力損傷，這種聽(tīng)力損傷可能是由于短暫且強(qiáng)烈的人為聲納或長(zhǎng)期的航運(yùn)噪音導(dǎo)致[12]。本次擱淺的瓜頭鯨系遼寧省首例，造成擱淺的原因也比較復(fù)雜。

在救助暫養(yǎng)期間，瓜頭鯨初次入水后有側(cè)翻和沖撞池壁行為，6 h后由于虛弱，出現(xiàn)漂浮、心跳和呼吸頻率迅速下降。死前呼吸困難、呼吸頻率急速上升，伴有肛門大量排氣，解剖后發(fā)現(xiàn)肺部氣管有大量白色泡狀液體，推測(cè)有急性肺炎癥狀。這與2008年在南卡羅來(lái)納州擱淺的瓜頭鯨尸檢結(jié)果[13]相似。通過(guò)生物學(xué)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)其脂肪層厚度略低于正常個(gè)體[14]。解剖后胃部有3處較為嚴(yán)重的潰瘍，推測(cè)可能因誤食魚(yú)鉤導(dǎo)致胃部潰瘍嚴(yán)重，破壞了第一胃的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)消化吸收困難。胃中大量食物未消化，消化機(jī)制紊亂，腸內(nèi)產(chǎn)氣旺盛，腸道排氣受阻，直腸折疊又發(fā)展成腸套疊的趨勢(shì)，導(dǎo)致死亡過(guò)程中大量氣體從肛門排出。此外，瓜頭鯨皮膚層伴有滲出性素質(zhì)，說(shuō)明體內(nèi)缺乏維生素E和硒[15]，它們是維護(hù)肌肉和外周血管系統(tǒng)構(gòu)造和功能的必須物質(zhì)[16]。一般營(yíng)養(yǎng)不良癥狀雖不明顯，但運(yùn)動(dòng)伴隨一定問(wèn)題如肢體不協(xié)調(diào)、肌無(wú)力等，瓜頭鯨在救助場(chǎng)內(nèi)水中通過(guò)人工助游后漂浮，極少游動(dòng)。

目前，海洋哺乳動(dòng)物體內(nèi)已被檢測(cè)出的寄生蟲(chóng)種類多達(dá)幾百種[17]。寄生蟲(chóng)奪取宿主大量養(yǎng)料，引起宿主營(yíng)養(yǎng)不良，對(duì)所寄生的部位及其附近的組織和器官產(chǎn)生損害或壓迫作用，其分泌物、排泄物對(duì)宿主有毒害作用[18]。此次大連海域擱淺死亡的瓜頭鯨在脂肪、肌肉、泌尿系統(tǒng)和胃內(nèi)均檢出寄生蟲(chóng)，胃內(nèi)吸附區(qū)域呈現(xiàn)明顯的瘢痕和顏色改變，推測(cè)瓜頭鯨擱淺原因和寄生蟲(chóng)引起的慢性消耗性疾病有關(guān)。由于未對(duì)頭部解剖和病例分析，無(wú)法確定腦部是否有寄生蟲(chóng)感染。此外，右側(cè)肝臟下側(cè)局部纖維化病變硬且伴有少量血液流出斷定為寄生蟲(chóng)移行寄生所導(dǎo)致，腹腔寄生(絳蟲(chóng))囊腫、胃腸道蠕蟲(chóng)病和與異尖線蟲(chóng)感染有關(guān)的潰瘍性胃炎也是鯨類尸體中常見(jiàn)的發(fā)現(xiàn)。

雖然本次未能成功完成救助，但通過(guò)本次救助和治療，積累了較為豐富的基礎(chǔ)生物學(xué)資料、病理數(shù)據(jù)和救助經(jīng)驗(yàn)，為后續(xù)開(kāi)展相關(guān)鯨豚類的救助和保護(hù)工作奠定了工作基礎(chǔ)。