安 琪,王新剛

(1.長春市口腔醫(yī)院 牙體牙髓科，吉林 長春130051;2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院,吉林 長春130033)

慢性牙周炎主要發(fā)病原因為牙齦長期炎癥向深部牙組織進展[1-2]。相關(guān)研究顯示牙齦炎可逐漸轉(zhuǎn)化為牙周炎，加強對該病進行早期診斷，這對逆轉(zhuǎn)治療結(jié)局有十分重要的意義[3]。齦溝液(GCF)檢測可以對牙周組織的病理、生理學(xué)狀態(tài)進行評估[4]?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)可將胞外基質(zhì)進行降解，是一種可對牙周組織產(chǎn)生破壞的蛋白溶解酶，多由炎性滲出細胞(如中性多核白細胞、炎性狀態(tài)下的成纖細胞等)分泌[5]。臨床實驗學(xué)研究表明MMP-8約為GCF中膠原酶蛋白總量的80%，且牙周疾病活動性越強，牙周疾病點位MMP-8濃度顯著升高[6]。MMP抑制劑(TIMP)可對患者機體MMP水平及其活性具有調(diào)節(jié)作用，其中TIMP-1的調(diào)節(jié)作用最強，可與大多數(shù)MMP之間相結(jié)合[7]。本研究主要探討齦溝液中MMP-8水平及MMP-8/TIMP-1比值在牙周炎癥中的臨床價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料及方法

1.1 一般資料根據(jù)美國牙周病分類研討會(1999年)提出的慢性牙周炎的相關(guān)診斷標(biāo)準，對牙周相關(guān)指數(shù)進行記錄，并將2018年7月至2019年7月長春市口腔醫(yī)院的75例受試者分為牙周健康組(n=29)、慢性齦緣炎組(n=24)及慢性牙周炎組(n=22)。每名受試者均選取一顆第一或者第二磨牙作為受試牙，其中慢性牙周炎患者每牙選擇牙槽骨吸收量最大點作為受試牙位。3組受試者在性別、年齡方面的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)。

1.2 納入及排除標(biāo)準納入標(biāo)準：(1)均符合慢性牙周炎的相關(guān)診斷標(biāo)準；(2)均為首次確診以及住院之前未接受過自主治療者；(3)治療依從性較好，對本研究方案知情；(4)均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。排除標(biāo)準：(1)排除慢性咽喉炎等口腔局部炎性疾病者；(2)住院前3個月之內(nèi)既往接受過免疫抑制劑或抗生素治療者；(3)孕產(chǎn)婦；(4)不愿接受本研究方案者。

1.3 GCF的采集本研究應(yīng)用濾紙條法對GCF進行收集，使用電子天平對事先裁剪好的規(guī)格為0.2 cm×1 cm的Whatman 3號濾紙條進行稱重。選擇合適的牙位，將上述規(guī)格的濾紙條插入到被選牙位的近中頰側(cè)齦溝之中，過0.5 min將濾紙條取出，將其置入Eppendorf管之中。1 min之后重復(fù)上述操作，將兩次取樣的濾紙條置入同一Eppendorf管之中，進行稱重，然后將其置于-20℃的冰箱中進行保存，待測。

1.4 GCF中MMP-8及TIMP-1檢測方法采用雙抗體夾心ABC-Elisa法對GCF中MMP-8及TIMP-1水平進行檢測，實驗中所使用的試劑盒及試劑均購自于上海鈺博生物科技有限公司。

1.5 觀察指標(biāo)包括：(1)比較3組GCF體積；(2)比較3組GCF中MMP-8、TIMP-1水平及MMP-8/TIMP-1比值；(3)分析GCF中MMP-8水平與表征牙周相關(guān)指標(biāo)[菌斑指數(shù)(PI)、出血指數(shù)(BI)、探診深度(PD)及附著喪失(AL)]之間的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 3組GCF體積對比隨著被采牙位炎癥程度增加，GCF體積隨之而增加，P<0.05。見表1。

表1 3組GCF體積比較

2.2 3組GCF中MMP-8、TIMP-1水平及MMP-8/TIMP-1比值對比隨著被采牙位炎癥程度增加，3組受試者GCF中的MMP-8水平隨之而顯著升高(P<0.05)，3組受試者GCF中的TIMP-1水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，3組MMP-8/TIMP-1比值隨之而增大(P<0.05)，見表2。

表2 3組GCF中MMP-8、TIMP-1水平及MMP-8/TIMP-1比值比較

2.3 3組PI、BI、PD、AL比較3組患者PI、BI、PD和AL比較，慢性牙周炎組>齦緣炎組>對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表3。

表3 3組PLI、BI、PD、AL比較

2.4 3組GCF中MMP-8水平與表征牙周相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性分析經(jīng)Pearson秩相關(guān)性檢驗分析，GCF中MMP-8水平與表征牙周相關(guān)指標(biāo)(PI、BI、PD及AL)存在顯著的正相關(guān)性。見表4。

表4 3組GCF中MMP-8水平與表征牙周相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性

3 討論

研究表明宿主炎性介質(zhì)可對牙周炎引起的牙周組織破壞具有介導(dǎo)作用，即牙周炎可使得破壞牙周組織的炎性細胞因子水平顯著上升[8]。MMPs作為一種有效降解胞外基質(zhì)的蛋白溶解酶，在牙周組織破壞過程中扮演著十分重要的作用，主要是對牙周支持組織產(chǎn)生降解破壞作用，并參與牙周組織附著喪失及牙槽骨吸收過程。多種MMPs均參與到牙周炎癥進展過程[9]。Rathnayake等[10]指出，隨著牙周炎發(fā)病程度增大，GCF中的MMP-8水平也隨之升高，且顯著高于正常牙周組織GCF中濃度(P<0.05)。Marcaccini 等[11]研究結(jié)果顯示：慢性牙周炎患者GCF中的MMP-8水平要顯著高于牙周正?；颊?P<0.05)。本研究結(jié)果也顯示隨著被采牙位炎癥程度增加，3組受試者GCF中的MMP-8水平隨之升高(P<0.05)，此結(jié)果提示當(dāng)牙周出現(xiàn)炎癥時，會促使GCF中的MMP-8水平顯著升高，且隨著炎癥程度增大，MMP-8水平也增加。

從表2可看出，3組受試者GCF中的TIMP-1水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。TIMP-1作為MMP-8的抑制劑，其對MMP-8有抑制作用，近年來在牙周疾病發(fā)病機理的研究中也成為一個熱點。TIMPs與MMPs之間的平衡，能夠?qū)Π饣|(zhì)的重塑起到調(diào)節(jié)效果，若二者失衡，則會引起組織的吸收。相關(guān)文獻報道[12]，在健康牙周組織中，TIMP-1水平較高，但在牙周組織早期炎性病變時，TIMP-1水平則較低。然而，也有與之相反的結(jié)論，即在牙周組織發(fā)生炎癥時，TIMP-1則處于較高水平，從而有效抑制MMPs對牙周組織的破壞作用[13-15]。Marcaccini等[11]通過研究發(fā)現(xiàn)慢性牙周炎患者GCF中的TIMP-1與牙周正常者差異無統(tǒng)計學(xué)意義，然而慢性牙周炎與牙周正常者MMP-8/TIMP-1比值存在顯著的統(tǒng)計學(xué)意義，并推論MMP-8水平上升為引起上述比值失衡的主要原因。本研究中3組受試者GCF中的TIMP-1水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，隨著牙周病變程度的加大，3組MMP-8/TIMP-1比值隨之增大(P<0.05)。

關(guān)于GCF中MMP-8水平與主要牙周指標(biāo)間的相關(guān)性，有研究結(jié)果顯示[16]，慢性牙周炎患者在經(jīng)相關(guān)治療后，GCF中的MMP-8水平顯著降低，且同PI、BI、PD及AL等牙周相關(guān)指標(biāo)之間存在一定的關(guān)聯(lián)性。臨床上，一般將PI、BI、PD及AL等指標(biāo)作為評價牙周狀況的重要指標(biāo)，隨著牙齦炎癥癥狀的加重，牙周指數(shù)明顯增大。有研究證實[17]，在通過有效的牙周治療之后牙周炎患者的齦溝液中 MMP-8、水平會明顯降低，而本研究結(jié)果顯示，隨著牙周炎癥程度增大，牙周臨床指數(shù)也會增大，患者GCF中的MMP-8水平也會隨之而升高，經(jīng)Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，GCF中MMP-8水平與上述牙周指標(biāo)之間存在正相關(guān)性。提示GCF中的MMP-8水平與牙周嚴重程度有很大關(guān)系，可作為評估牙周組織破壞程度的指標(biāo)。

綜上所述，隨著牙周炎嚴重程度的增加，GCF中的MMP-8/TIMP-1比值隨之而增加，因此，該比值對牙周炎的臨床診斷具有重要的指導(dǎo)價值。