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        胸腺依賴淋巴細(xì)胞亞群和自然殺傷細(xì)胞活性檢測(cè)在不同化療療效彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者中的表達(dá)分析

        2022-10-20 07:12:42李雯雯周章軍
        中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥 2022年27期
        關(guān)鍵詞:功能檢測(cè)

        李雯雯 周章軍

        廈門市海滄醫(yī)院血液科,福建廈門 361000

        彌漫大B 細(xì)胞淋巴瘤 (diffuse large B-cell lym phoma,DLBCL)是當(dāng)前臨床發(fā)病率最高的非霍奇金淋巴瘤。研究證實(shí),DLBCL 的發(fā)生、發(fā)展與患者細(xì)胞免疫功能狀態(tài)存在緊密關(guān)系。胸腺依賴淋巴細(xì)胞(以下簡(jiǎn)稱“T 淋巴細(xì)胞”)亞群所介導(dǎo)的細(xì)胞免疫在抗腫瘤免疫過(guò)程中發(fā)揮著免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤異常增殖等功能;自然殺傷(natural killer,NK)細(xì)胞則發(fā)揮免疫監(jiān)視、殺滅腫瘤細(xì)胞等功能。此前研究證實(shí):T 淋巴細(xì)胞亞群在DLBCL 患者中存在異常表達(dá),與患者疾病分期和化療療效反應(yīng)密切相關(guān)。但有關(guān)NK 細(xì)胞在DLBCL 患者治療中檢測(cè)價(jià)值的研究較少。基于此,本次研究針對(duì)T 淋巴細(xì)胞亞群和NK 細(xì)胞活性檢測(cè)結(jié)果在DLBCL 患者治療中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探討,分析上述指標(biāo)變化與療效的關(guān)系,為臨床診療提供參考。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        回顧性分析2017年1月至2021年1月在廈門市海滄醫(yī)院初診并接受化療,且取得一定療效反應(yīng)(療效達(dá)完全緩解或部分緩解)的80 例DLBCL 患者作為研究對(duì)象,其中男48 例,女32 例;年齡32~80歲,平均(58.24±8.51)歲;疾病分期:Ⅰ期8例,Ⅱ期21例,Ⅲ期30 例,Ⅳ期21 例。本組患者均依據(jù)中國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)淋巴瘤診療指南指導(dǎo)化療,方案包括R-CHOP(利妥昔單抗+環(huán)磷酰胺+多柔比星+長(zhǎng)春新堿+潑尼松)、R-CHOEP(利妥昔單抗+環(huán)磷酰胺+多柔比星+長(zhǎng)春新堿+依托泊苷+潑尼松)。依據(jù)淋巴瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(Lugano 標(biāo)準(zhǔn))將患者分為完全緩解組(n=44)和部分緩解組(n=36)。完全緩解組中,男25 例,女19例;年齡32~80 歲,平均(57.96±7.76)歲。部分緩解組中,男19 例,女17 例;年齡32~80 歲,平均(60.06±8.44)歲。選擇廈門市海滄醫(yī)院同期40 例體檢健康對(duì)象作為對(duì)照組。對(duì)照組中,男25 例,女15例;年齡30~80 歲,平均(59.56±8.22)歲。三組的性別、年齡比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)廈門市海滄醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批準(zhǔn)號(hào):LW-2022003)。

        納入標(biāo)準(zhǔn):①患者年齡≥18 歲;②DLBCL 組患者均完善淋巴結(jié)或組織病理檢查、免疫組化檢查,確診為DLBCL,患者診斷及分類符合WHO 2008 淋巴瘤新分類標(biāo)準(zhǔn)與Ann Arbor 臨床分期標(biāo)準(zhǔn)?;熀蟑熜гu(píng)估符合完全緩解、部分緩解標(biāo)準(zhǔn);③DLBCL 組患者均接受標(biāo)準(zhǔn)劑量的R-CHOP 或R-CHOEP 方案化療。

        排除標(biāo)準(zhǔn):①其他疾病引起的免疫功能障礙患者;②伴有自身免疫性疾病、嚴(yán)重感染性疾病、嚴(yán)重臟器功能不全患者;③合并其他腫瘤疾病患者。

        1.2 方法

        所有研究對(duì)象均使用流式細(xì)胞儀(Beckman 貝克曼公司生產(chǎn),型號(hào):DxFLEX)完成T 淋巴細(xì)胞亞群與NK 細(xì)胞活性檢測(cè),使用配套試劑。取空腹靜脈血樣5 ml 并置于提前處理過(guò)的抗凝管中標(biāo)記。將10 μl 單抗置于流式管中,與抗凝處理后的100 μl 外周血樣混合,使用微型振蕩器以2 800 r/min 速度混合均勻,靜置20 min;加入500 μl 溶血素后使用微型振蕩器混合均勻,靜置20 min;加入500 μl 磷酸鹽緩沖液,靜置10 min。使用流式細(xì)胞儀完成對(duì)患者T 淋巴細(xì)胞亞群與NK 細(xì)胞的檢測(cè),包括白細(xì)胞分化抗原(cluster of differentiation,CD)的CD3、CD4、CD8、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性。其中DLBCL 組患者檢測(cè)時(shí)間包括初治化療前,化療2、4 個(gè)周期后第10~14 天(骨髓抑制緩解后)。

        1.3 觀察指標(biāo)

        比較化療前、 化療2、4 個(gè)周期后完全緩解組、部分緩解組以及對(duì)照組CD3、CD4、CD8、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平的差異。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        2 結(jié)果

        2.1 三組化療前T 淋巴細(xì)胞亞群及NK 細(xì)胞活性檢測(cè)結(jié)果的比較

        化療前,完全緩解組、部分緩解組CD3、CD4、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平低于對(duì)照組,CD8水平高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。完全緩解組與部分緩解組CD3、CD4、CD8、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

        表1 三組化療前T 淋巴細(xì)胞亞群及NK 細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的比較(±s)

        2.2 完全緩解組患者化療前后T 淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性檢測(cè)結(jié)果的比較

        化療4 個(gè)周期后完全緩解組CD3、CD4、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平高于化療前及化療2 個(gè)周期后,CD8水平低于化療前及化療2 個(gè)周期后,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);化療前與化療2 個(gè)周期后完全緩解組CD3、CD4、CD8、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2)。

        表2 完全緩解組患者化療前后T 淋巴細(xì)胞亞群及NK 細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的比較(±s,n=44)

        2.3 部分緩解組化療前后患者T 淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性檢測(cè)結(jié)果的比較

        化療前、化療2、4 個(gè)周期后部分緩解組患者CD3、CD4、CD8、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表3)。

        表3 部分緩解組患者化療前后T 淋巴細(xì)胞亞群及NK 細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的比較(±s,n=36)

        3 討論

        DLBCL 是一組在臨床表現(xiàn)、預(yù)后等方面都具有極大差異性的惡性腫瘤。該病表現(xiàn)為腫瘤性的大B 淋巴細(xì)胞彌漫性增殖,正常淋巴細(xì)胞與組織功能受損,病情具有高度侵襲性,自然病程相對(duì)較短。而細(xì)胞免疫作為人體免疫系統(tǒng)的一項(xiàng)重要組成部分,主要通過(guò)對(duì)T 淋巴細(xì)胞各個(gè)亞群的調(diào)節(jié)以維持人體免疫內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性,已有諸多疾病被證實(shí)與T 淋巴細(xì)胞亞群失衡存在密切關(guān)系。T 淋巴細(xì)胞的數(shù)量和比例是反映細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo),在腫瘤的發(fā)病、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中都起著至關(guān)重要的作用,對(duì)治療反應(yīng)也有深遠(yuǎn)的影響。NK 細(xì)胞數(shù)量減少,活性降低,則會(huì)引起機(jī)的免疫功能下降,同樣是腫瘤進(jìn)展和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的一項(xiàng)重要原因。

        CD3細(xì)胞反映體內(nèi)總T 細(xì)胞水平,分為CD4T細(xì)胞和CD8T 細(xì)胞兩大亞群,CD4T 細(xì)胞在人體中主要發(fā)揮輔助誘導(dǎo)功能,能夠誘導(dǎo)其他免疫細(xì)胞增殖,具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖功能。研究證實(shí):CD4細(xì)胞參與激活體內(nèi)巨噬細(xì)胞、B 細(xì)胞、NK 細(xì)胞、 細(xì)胞毒性T 細(xì)胞等多種效應(yīng)細(xì)胞,并協(xié)同上述細(xì)胞共同發(fā)揮抗腫瘤功能;CD8T 細(xì)胞則對(duì)CD4細(xì)胞、B 細(xì)胞有抑制功能,能抑制細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)和體內(nèi)抗腫瘤抗體形成。因此人體內(nèi)CD8細(xì)胞水平與抗腫瘤免疫功能呈負(fù)相關(guān)性,CD8細(xì)胞水平升高即代表患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞處于持續(xù)增殖狀態(tài),疾病持續(xù)進(jìn)展。CD4/CD8值降低,T 淋巴細(xì)胞亞群失衡,即提示機(jī)體免疫功能低下,腫瘤增殖活躍。NK 細(xì)胞具有分泌多種免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子、產(chǎn)生直接細(xì)胞毒活性和介導(dǎo)抗體依賴的細(xì)胞毒作用,可殺滅體內(nèi)腫瘤細(xì)胞,發(fā)揮抗腫瘤活性。因此NK 細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)中防止細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要防線。

        本研究對(duì)DLBCL 患者和健康對(duì)象的T 淋巴細(xì)胞亞群與NK 細(xì)胞活性檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行研究分析,結(jié)果顯示T 淋巴細(xì)胞亞群和NK 細(xì)胞活性在DLBCL 患者中存在明顯表達(dá)異常。DLBCL 患者體內(nèi)T 淋巴細(xì)胞數(shù)量與比例失衡,NK 細(xì)胞活性下降,與其他學(xué)者研究結(jié)果相近;進(jìn)一步對(duì)疾病組不同療效反應(yīng)上述指標(biāo)表達(dá)水平進(jìn)行分析: 化療4 個(gè)周期后完全緩解組患者CD3、CD4、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平高于治療前,并且高于化療2 個(gè)周期后,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說(shuō)明經(jīng)過(guò)化療,隨疾病狀態(tài)的改善,患者免疫失衡得以糾正,體內(nèi)T 淋巴細(xì)胞數(shù)量和比例均有明顯改善,NK 細(xì)胞活性上升,展現(xiàn)出良好的治療效果。與其他研究結(jié)果相近。亦有研究顯示,疾病臨床分期與T 淋巴細(xì)胞亞群的CD3、CD8水平、CD4/CD8比例有相關(guān)性,并且隨著腫瘤分期的增加患者免疫抑制與紊亂更加明顯,腫瘤負(fù)荷越大,NK 細(xì)胞功能也越差。在本研究結(jié)果中部分緩解組較對(duì)照組指標(biāo)異常差異更明顯,但組內(nèi)比較化療前、化療2、4 個(gè)周期后部分緩解組患者CD3、CD4、CD8、CD4/CD8以及NK 細(xì)胞活性水平,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)??赡苁怯捎诒狙芯恐孝蟆羝诨颊邤?shù)量較多,腫瘤負(fù)荷更大,免疫紊亂狀態(tài)更難糾正。因此對(duì)DLBCL 患者而言,T 淋巴細(xì)胞亞群與NK 細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果能夠評(píng)估完全緩解患者的治療效果,但不能很好地預(yù)測(cè)部分緩解患者的治療效果。

        綜上所述,T 淋巴細(xì)胞亞群與NK 細(xì)胞活性檢測(cè),對(duì)DLBCL 患者的診斷及療效評(píng)估均有一定價(jià)值,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群、NK 細(xì)胞活性簡(jiǎn)便易行,可以在更多的患者中推廣應(yīng)用,能更好地評(píng)估患者免疫功能狀態(tài),并能在一定程度上預(yù)測(cè)療效反應(yīng),指導(dǎo)治療。

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