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        老年慢性心力衰竭患者血清miR-223、NLRP3水平與心肌重構(gòu)及心功能的相關(guān)性

        2022-10-19 02:59:36劉艷史偉東
        海南醫(yī)學(xué) 2022年19期
        關(guān)鍵詞:心功能血清水平

        劉艷,史偉東

        1.寶雞市人民醫(yī)院老年病科,陜西 寶雞 721000;2.寶雞市人民醫(yī)院心內(nèi)科,陜西 寶雞 721000

        慢性心力衰竭(chronic cardiac failure,CHF)是各種心血管疾病發(fā)展的嚴重階段,在老年人群中發(fā)病率很高,有反復(fù)發(fā)作、多次住院、病情不斷惡化、死亡率高等特點[1]。早期CHF患者3~6個月再住院率高達27%~47%[2]。Nod樣受體蛋白3(NOD-like receptor 3,NLRP3)炎性體是一種多蛋白復(fù)合物,其介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)是重要的一類炎癥參與者[3]。李丹等[4]研究發(fā)現(xiàn),NLRP3炎癥復(fù)合體可能參與炎癥性、自身免疫性及腫瘤等疾病的發(fā)展進程。近來研究提示,冠心病患者血清NLRP3水平明顯升高,患者病情嚴重程度與NLRP3水平呈正相關(guān)[5]。微小RNA-233(microRNA-223,miR-223)是一種短鏈RNA,含有21個核苷酸。miR-223在血管平滑肌細胞中高表達,可通過引起平滑肌細胞增殖影響血管再狹窄的發(fā)生[6]。研究發(fā)現(xiàn),miR-223與NLRP3之間有調(diào)控關(guān)系,miR-223能靶向NLRP3調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞中炎性小體的激活和凋亡[7]?;诖?,本研究主要探討老年CHF患者血清miR-223、NLRP3水平與心肌重構(gòu)及心功能的相關(guān)性。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料選擇2019年1月至2020年12月在寶雞市人民醫(yī)院治療的100例老年CHF患者作為研究對象(觀察組)。納入標準:(1)符合CHF患者的診斷標準[8];(2)知情同意并簽署知情同意書者;(3)臨床資料完整者。排除標準:(1)腫瘤患者;(2)惡性血液病患者;(3)肝、腎功能不全者;(4)有精神疾病史者。所有患者按照紐約心臟病學(xué)會[9](NYHA)心功能分級分為心功能Ⅱ級組(35例)、心功能Ⅲ級組(30例)及心功能Ⅳ級組(35例)。另選擇同期在我院體檢的健康者100例作為對照組。兩組受檢者的一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性,見表1。本研究經(jīng)本院倫理委員會審核通過。

        表1 兩組受檢者的一般資料比較(±s)

        表1 兩組受檢者的一般資料比較(±s)

        注:1 mmHg=0.133 kPa。

        組別觀察組對照組t/χ2值P值例數(shù)100 100年齡(歲)67.57±6.78 66.93±6.84 0.665 0.507男/女(例)54/46 51/49 0.180 0.671收縮壓(mmHg)161.34±18.21 158.18±17.37 0.955 0.341舒張壓(mmHg)89.03±12.82 88.12±14.56 0.362 0.718心率(次/min)79.46±10.87 80.07±11.24 0.299 0.766體質(zhì)量指數(shù)(kg/m2)22.69±7.21 23.42±7.08 0.551 0.583

        1.2 觀察指標與檢測方法

        1.2.1 心肌重構(gòu)參數(shù)和心功能指標所有患者均采用德國西門子Acuson Sequoia512型彩色多普勒超聲心動圖檢查儀進行心臟檢查,由經(jīng)驗豐富的醫(yī)師于呼氣狀態(tài)下選擇連續(xù)3個心動周期的平均值。依據(jù)《心腔定量測量指南》[10]行經(jīng)胸超聲心動圖檢查,包括:左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左室后壁厚度(LVPWT)、室間隔厚度(IVST)、左室舒張末期容量(LVESV)、左室收縮末期容量(LVEDV)等。計算相對室壁厚度(end-diastolic relative wall thickness,RWT)=(LVPWT+IVST)/LVEDD。根據(jù)Devereux和Reichek方程[11-12]計算心肌重構(gòu)參數(shù)-左室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)、左室重構(gòu)指數(shù)(LVRI)。LVMI=左心室心肌重量(LVM)/體表面積(BSA),其中LVM=1.04×[(IVST+LVPWT+LVEDD)×3-LVEDD×3]-13.6,BSA=0.006 1×身高+0.012 8×體質(zhì)量-0.152 9;LVRI=LVM/LVEDV。計算心功能指標-左室射血分數(shù)(LVEF),計算公式為:LVEF(%)=(LVESV-LVEDV)/LVESV×100%;利用脈沖波多普勒技術(shù)檢測心輸出量(CO)。

        1.2.2 血清miR-223水平采集研究對象(觀察組入院24 h內(nèi),對照組體檢時)空腹外周靜脈血5 mL,離心后提取血清。使用RNA提取試劑盒提取總RNA,測定其濃度及純度(A260/A280比值為2.0),逆轉(zhuǎn)錄成cDNA;采用qRT-PCR法檢測血清miR-223的表達情況,反應(yīng)條件:94℃變性,30 s;60℃退火,30 s;72℃延伸,30 s;反應(yīng)設(shè)置35個循環(huán),各3個復(fù)孔。反應(yīng)體系共20 μL,具體為:2×Taq PCR混合液10 μL、正向和反向引物各0.5 μL、cDNA 1 μL、ddH2O 8 μL。以U6為內(nèi)參基因,引物序列如表2所示。實驗結(jié)果采用2-ΔΔCt法進行miR-223基因表達量相對定量分析。

        表2 qRT-PCR引物序列

        1.2.3 血清NLRP3水平采用ELISA法檢測血清NLRP3水平,具體操作步驟按照人NLRP3 ELISA試劑盒(ab274401,Abcam公司)說明書進行。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS25.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,兩組間比較采用t檢驗,多組間比較采用方差分析;計數(shù)資料比較采用χ2檢驗;使用Pearson相關(guān)性分析CHF患者miR-223、NLRP3與心肌重構(gòu)參數(shù)及心功能指標之間的相關(guān)性。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組受檢者的血清miR-223、NLRP3水平比較觀察組患者的血清miR-223、NLRP3水平明顯高于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表3。

        表3 兩組受檢者的血清miR-223、NLRP3水平比較(±s)

        組別觀察組對照組t值P值例數(shù)100 100 miR-223 1.37±0.38 0.21±0.01 30.516 0.001 NLRP3(ng/mL)1.57±0.12 0.34±0.06 91.679 0.001

        2.2 兩組受檢者的心肌重構(gòu)參數(shù)比較觀察組患者的心肌重構(gòu)參數(shù)LVPWT、LVMI明顯高于對照組,LVRI明顯低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表4。

        表4 兩組受檢者的心肌重構(gòu)參數(shù)比較(±s)

        表4 兩組受檢者的心肌重構(gòu)參數(shù)比較(±s)

        組別觀察組對照組t值P值例數(shù)100 100 LVPWT(mm)10.37±0.23 7.67±0.63 40.258 0.001 LVMI(g/m2)139.67±8.36 90.34±3.06 55.412 0.001 LVRI(g/mL)0.88±0.04 1.27±0.84 4.638 0.001

        2.3 兩組受檢者的心功能指標比較觀察組患者的心功能指標CO、LVEF明顯低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表5。

        表5 兩組受檢者的心功能指標比較(±s)

        表5 兩組受檢者的心功能指標比較(±s)

        組別觀察組對照組t值P值例數(shù)100 100 CO(mL/min)5.69±1.78 7.83±2.34 7.279 0.001 LVEF(%)47.13±6.43 54.07±4.94 8.559 0.001

        2.4 三組患者血清miR-223、NLRP3水平、心肌重構(gòu)參數(shù)及心功能指標比較三組患者的血清miR-223、NLRP3水平、心肌重構(gòu)參數(shù)及心功能指標比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其中心功能Ⅳ級組患者的miR-223、NLRP3、LVPWT、LVMI明顯高于心功能Ⅲ級組和心功能Ⅱ級組,心功能Ⅲ級組患者的miR-223、NLRP3、LVPWT、LVMI明顯高于心功能Ⅱ級組;心功能Ⅳ級組患者的LVRI、CO、LVEF明顯低于心功能Ⅲ級組和心功能Ⅱ級組,心功能Ⅲ級組患者的LVRI、CO、LVEF明顯低于心功能Ⅱ級組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表6。

        表6 三組患者血清miR-223、NLRP3水平、心肌重構(gòu)參數(shù)及心功能指標比較(±s)

        表6 三組患者血清miR-223、NLRP3水平、心肌重構(gòu)參數(shù)及心功能指標比較(±s)

        注:與心功能Ⅱ級組比較,aP<0.05;與心功能Ⅲ級組比較,bP<0.05。

        組別心功能Ⅱ級組心功能Ⅲ級組心功能Ⅳ級組F值P值例數(shù)35 30 35 miR-223 1.24±0.16 1.52±0.28a 1.69±0.21ab 37.678 0.001 NLRP3(ng/mL)1.19±0.13 1.53±0.41a 1.70±0.24ab 30.794 0.001 LVPWT(mm)8.74±1.46 9.12±1.27a 10.49±1.35ab 15.721 0.001 LVMI(g/m2)84.69±8.13 128.36±8.41a 142.07±8.24ab 457.555 0.001 LVRI(g/mL)1.04±0.16 0.93±0.08a 0.87±0.21ab 9.848 0.001 CO(mL/min)6.77±1.69 5.12±1.37a 4.99±1.58ab 13.863 0.001 LVEF(%)51.69±5.08 45.36±6.39a 39.07±7.04ab 36.079 0.001

        2.5 CHF患者miR-223、NLRP3與心肌重構(gòu)參數(shù)及心功能指標的相關(guān)性經(jīng)Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯 示,CHF患者miR-223、NLRP3水平 與LVPWT、LVMI均呈明顯正相關(guān)(P<0.05),與LVRI、CO、LVEF均呈明顯負相關(guān)(P<0.05),而miR-223與NLRP3呈正相關(guān)(P<0.05),見表7。

        表7 CHF患者miR-223、NLRP3與心肌重構(gòu)參數(shù)及心功能指標的相關(guān)性

        3 討論

        CHF主要表現(xiàn)為自主神經(jīng)系統(tǒng)功能失調(diào),患者出現(xiàn)交感神經(jīng)激活、副交感神經(jīng)活性下降等,且這種改變在老年患者中更加明顯,是老年人最常見的臨床綜合征之一[13]。CHF的發(fā)生率隨年齡而上升,普通人群中65歲以下CHF發(fā)生率約為1%,65歲以上約為5%,75歲以上高達10%。由于老年CHF發(fā)病率及病死率高,5年存活率與惡性腫瘤相仿[14]?;颊呱钯|(zhì)量下降、醫(yī)療費用高,且年齡的增長使老年人腎功能減退,進而導(dǎo)致CHF預(yù)后惡化,也限制了某些CHF藥物應(yīng)用,老年人肌肉組織減少,血清藥物水平升高,容易出現(xiàn)不良反應(yīng)[15]。因此研究老年CHF疾病的發(fā)生、發(fā)展已成為熱門的臨床課題,對疾病的防治具有積極意義。

        心肌重構(gòu)是心肌細胞對機體損傷的一種適應(yīng)性反應(yīng)。LVPWT、LVEDD指標分別反映左心房壁、左心室的厚度,LVMI、LVRI指標則反映患者心肌重構(gòu)的整體程度,CO、LVEF反映患者心臟功能[16]。CHF發(fā)生時患者心功能受損,左心室輸出血液無法滿足機體循環(huán)需求,導(dǎo)致神經(jīng)、內(nèi)分泌等多個系統(tǒng)出現(xiàn)代償性變化,間接造成細胞信號異常、炎性因子浸潤、心肌細胞外膠原異常沉積等,最終引起患者心肌重構(gòu)[17]。miRNA是一類由22~25個核苷酸組成的單鏈非編碼RNA,參與機體多種生物學(xué)功能及基因表達的調(diào)節(jié)[18]。有研究證實,心肌重構(gòu)小鼠血清miR-223水平明顯上調(diào),與動脈粥樣硬化有關(guān)[19]。miR-223在血管平滑肌細胞中表達升高,與平滑肌細胞增殖及血管再狹窄的發(fā)生有關(guān)[6],最終造成患者出現(xiàn)心功能障礙。CHF患者心功能分級越高,心肌重構(gòu)越嚴重。本研究發(fā)現(xiàn),觀察組血清miR-223水平較對照組高,心功能Ⅳ級組患者miR-223水平顯著高于心功能Ⅲ級組和心功能Ⅱ級組,且心功能Ⅲ級組高于心功能Ⅱ級組,說明CHF患者心功能分級越高,血清miR-223水平也越高。上述結(jié)果提示miR-223可能通過影響CHF患者心肌重構(gòu)參與老年CHF病程的進展,檢測miR-223表達對評估CHF患者病情有一定幫助。此外,本研究中CHF患者miR-223水平與LVPWT、LVMI均呈明顯正相關(guān),與LVRI、CO、LVEF均呈明顯負相關(guān),進一步提示CHF患者miR-223水平與心肌重構(gòu)和心功能密切相關(guān)。

        NLRP3作為NLRP蛋白家族中的代表,可識別胞壁酰二肽、三磷酸腺甘、內(nèi)毒素和細胞裂解產(chǎn)物等,被激活后的NLRP3炎性體通過信號通路引起炎癥反應(yīng)[20]。研究表明,NLRP3高表達可導(dǎo)致自身免疫性疾病、炎癥性疾病等的發(fā)生發(fā)展[4]。本研究結(jié)果顯示,觀察組血清NLRP3、LVPWT、LVMI均高于對照組,LVRI低于對照組,提示NLRP3與CHF患者心室重構(gòu)有一定相關(guān)性。進一步研究發(fā)現(xiàn),心功能Ⅳ級組CHF患者NLRP3水平顯著高于心功能Ⅲ級組和心功能Ⅱ級組,且心功能Ⅲ級組顯著高于心功能Ⅱ級組,說明血清NLRP3水平隨心功能分級升高而逐漸升高。本研究還發(fā)現(xiàn),CHF患者血清NLRP3水平與LVPWT、LVMI均呈明顯正相關(guān),與LVRI、CO、LVEF均呈明顯負相關(guān),且miR-223與NLRP3呈正相關(guān),說明血清NLRP3水平異常表達可能影響患者心功能以及心肌重構(gòu)。

        綜上所述,老年CHF患者血清miR-223、NLRP3水平明顯升高,與心肌重構(gòu)和心功能密切相關(guān),有望成為早期評估老年CHF病情進展的血清標志物。

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