陳隆，景蕓蕓，鄔迎喜，張?zhí)N澤，薛亞飛

空軍軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，西安 710038

腦膠質(zhì)瘤是由于腦部或者髓膠質(zhì)細胞出現(xiàn)癌變而引發(fā)的顱腦原發(fā)腫瘤，起源于神經(jīng)上皮，亦稱之為神經(jīng)上皮腫瘤，此外，該病大多屬于惡性腫瘤，發(fā)病例數(shù)占顱腦腫瘤的36%~63%[1-2]。手術(shù)為當前治療腦膠質(zhì)瘤的首選方式，該治療方式可改善患者病情，但術(shù)后極易復發(fā)，病死率較高，且總生存期相對短，患者預后較差[3]。隨著細胞與生物分子研究的開展，腦膠質(zhì)瘤發(fā)生與轉(zhuǎn)移的分子機制及腫瘤治療新靶點引起了廣泛關(guān)注[4]。細胞質(zhì)多聚腺苷酸化元件結(jié)合蛋白4（cytoplasmic polyad-enylation element binding protein 4，CPEB4）、缺氧誘導因子-1（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1）在腫瘤組織中呈現(xiàn)異常表達，并與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切?；诖耍狙芯烤虲PEB4、HIF-1在腦膠質(zhì)瘤中的表達及對患者術(shù)后復發(fā)的預測作用進行探討分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2017年8月至2020年8月于空軍軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院行腫瘤切除術(shù)的腦膠質(zhì)瘤患者的病歷資料。納入標準：①經(jīng)病理檢查確診為腦膠質(zhì)瘤；②無遠處轉(zhuǎn)移；③術(shù)前未接受相關(guān)治療；④臨床資料完整。排除標準：①合并其他惡性腫瘤，器官衰竭嚴重；②合并精神疾病；③存在血液系統(tǒng)病變；④有免疫系統(tǒng)疾病或結(jié)締組織病變；⑤有腦膿腫等顱內(nèi)感染。根據(jù)納入、排除標準，共納入149例腦膠質(zhì)瘤患者，其中，男93例，女56例；年齡27~68歲，平均（46.37±6.42）歲；病理學分級[5]：Ⅰ級29例，Ⅱ級47例，Ⅲ級52例，Ⅳ級21例。收集149例腦膠質(zhì)瘤患者的腦膠質(zhì)瘤組織和癌旁正常組織。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

所有組織于手術(shù)切除后即使用10%甲醛固定，組織切片后脫蠟、水化。采用鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶免疫組化法檢測CPEB4、HIF-1的表達情況。兔抗人CPEB4多克隆抗體購自美國Sigma公司，鼠抗人HIF-l單克隆抗體購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司，試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)公司，具體方法嚴格按照說明書執(zhí)行。每批切片均用已知的CPEB4、HIF-1陽性組織切片作為陽性對照，以磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution，PBS）代替一抗作為陰性對照。一抗的稀釋比例皆為1∶200。

根據(jù)陽性細胞百分比及染色情況判定CPEB4、HIF-1的表達情況[6-7]。陽性細胞百分比：0分，無陽性細胞；1分，陽性細胞百分比為1%~25%；2分，陽性細胞百分比為26%~50%；3分，陽性細胞百分比＞50%。染色情況：0分，無色；1分，淡黃色；2分，棕黃色；3分，棕褐色?？偡譃樯鲜鰞身椩u分的乘積，≤3分為陰性表達，≥4分為陽性表達。

1.3 復發(fā)評估

經(jīng)回院復查、電話隨訪等方式了解患者術(shù)后復發(fā)（以腫瘤生長范圍與術(shù)前相比擴大或腫瘤在不同部位出現(xiàn)為復發(fā)）情況，時間為1年。

1.4 觀察指標

比較腦膠質(zhì)瘤組織與癌旁正常組織中CPEB4、HIF-1的表達情況，比較術(shù)后復發(fā)與未復發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者腦膠質(zhì)瘤組織中CPEB4、HIF-1的表達情況，分析影響腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復發(fā)的獨立危險因素。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；影響因素分析采用Logistic回歸分析；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組織中CPEB4、HIF-1表達情況的比較

腦膠質(zhì)瘤組織中CPEB4、HIF-1陽性表達率均明顯高于癌旁正常組織，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 腦膠質(zhì)瘤組織和癌旁正常組織中CPEB4、HIF-1表達情況的比較[n（%）]

2.2 術(shù)后復發(fā)與未復發(fā)患者腦膠質(zhì)瘤組織中CPEB4、HIF-1表達情況的比較

所有患者均成功完成隨訪，其中術(shù)后復發(fā)患者42例，未復發(fā)患者107例。術(shù)后復發(fā)患者腦膠質(zhì)瘤組織中CPEB4、HIF-1陽性表達率均高于未復發(fā)患者，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（表2）

表2 術(shù)后復發(fā)與未復發(fā)腦膠質(zhì)瘤患者腦膠質(zhì)瘤組織中CPEB4、HIF-1表達情況的比較[n（%）]

2.3 腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復發(fā)的影響因素分析

Logistic回歸分析顯示，腫瘤直徑≥5 cm、CPEB4陽性表達、HIF-1陽性表達均為腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復發(fā)的獨立危險因素（P＜0.05）。（表3）

表3 腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復發(fā)的影響因素分析

3 討論

腦膠質(zhì)瘤是由神經(jīng)外胚葉衍化而來的膠質(zhì)細胞腫瘤，有著較高的發(fā)病率，雖然目前臨床上通過手術(shù)能夠取得一定治療效果，但由于腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機制復雜，且與正常組織邊界不清晰，難以通過手術(shù)根治，患者易出現(xiàn)術(shù)后復發(fā)[8-9]。因此，對腦膠質(zhì)瘤的發(fā)病機制及靶點進行深入了解具有重要意義。據(jù)研究證實，腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展是許多蛋白、基因及細胞因子共同作用的結(jié)果，因此，探尋腦膠質(zhì)瘤的分子標志物成為目前治療腦膠質(zhì)瘤的研究方向[10]。

CPEB4屬于通過控制靶基因的多聚腺苷酸化來調(diào)節(jié)翻譯過程的PEB家族成員，是具有特異性序列的一類RNA結(jié)合蛋白，在多種惡性腫瘤中均有較高表達[11-12]。據(jù)相關(guān)研究指出，CPEB4與腫瘤細胞中的大部分mRNA相關(guān)，包括細胞周期蛋白、遷移基因、信號轉(zhuǎn)導元件等，與腫瘤發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切[13]。本研究結(jié)果顯示，腦膠質(zhì)瘤組織中CPEB4陽性表達率明顯高于癌旁正常組織，說明CPEB4在正常組織中無表達或者呈低表達，而在腦膠質(zhì)瘤組織中高表達。進一步對比發(fā)現(xiàn)，術(shù)后復發(fā)患者腦膠質(zhì)瘤組織中CPEB4陽性表達率明顯高于未復發(fā)患者，提示CPEB4的表達在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展過程中有著重要作用。分析其原因可能是由于CPEB4高表達可促進血管新生，使腫瘤細胞侵襲能力增強，同時其還與B細胞淋巴瘤-XL相互協(xié)同作用，以調(diào)控腫瘤血管新生及上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化過程，從而造成細胞凋亡受抑制，細胞發(fā)生惡變。但其具體效應還有待更深入的研究確認。

相關(guān)研究證實，缺氧與腦膠質(zhì)瘤細胞的生長、侵襲、轉(zhuǎn)移等生物學過程關(guān)系密切，其中HIF-1作為缺氧誘導的關(guān)鍵因子，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[14]。本研究結(jié)果中，腦膠質(zhì)瘤組織中HIF-1陽性表達率明顯高于癌旁正常組織，說明HIF-1在腦膠質(zhì)瘤組織中呈高表達狀態(tài)，這與既往文獻報道結(jié)果相一致[15]。同時，本研究結(jié)果顯示，術(shù)后復發(fā)患者腦膠質(zhì)瘤組織中HIF-1陽性表達率高于未復發(fā)患者，說明HIF-1的高表達與患者的預后有關(guān)。考慮HIF-1表達增強可能與腫瘤組織缺氧環(huán)境或者致癌基因突變、抑癌基因缺失有關(guān)，其對腦膠質(zhì)瘤的診療及預后判斷有一定臨床意義。經(jīng)Logistic回歸分析得出，腫瘤直徑≥5 cm、CPEB4陽性表達、HIF-1陽性表達均為腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復發(fā)的獨立危險因素，提示臨床治療中需加強對伴隨高危因素患者的干預，在治療后對患者進行針對性的預防有利于改善預后，延長患者生存時間。

綜上所述，CPEB4、HIF-1在腦膠質(zhì)瘤組織中陽性表達率均明顯增高，是影響腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復發(fā)的危險因素，臨床可通過檢測兩種指標為腦膠質(zhì)瘤患者的預后評估提供參考。