高 彬，田翠云，司增志，吉庭鋒，蔡愛軍，吉志新,4,5*，高桂生

(1.河北科技師范學(xué)院 農(nóng)學(xué)與生物科技學(xué)院，河北 秦皇島 066000；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 海洋學(xué)院，河北 秦皇島 066000；3.河北科技師范學(xué)院 海洋資源與環(huán)境學(xué)院，河北 秦皇島 066000；4.秦皇島市經(jīng)濟(jì)昆蟲開發(fā)利用工程技術(shù)研究中心，河北 秦皇島 066000；5.河北省特色動物種質(zhì)資源挖掘與創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 秦皇島 066000)

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，對水產(chǎn)飼料的重要蛋白源魚粉的需求也隨之急劇上升。我國魚粉主要靠國外進(jìn)口和大量捕撈鮮魚而獲得，魚粉成本的不斷上漲，讓本地的水產(chǎn)業(yè)在競爭上逐漸處于劣勢，魚粉成本增加和質(zhì)量問題已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的一個重要問題。因此，尋找動物性蛋白的替代物在水產(chǎn)養(yǎng)殖上是一個亟待解決的問題。

黑水虻(L.)，又稱亮斑扁角水虻，是雙翅目水虻科扁角水虻屬的一種昆蟲。黑水虻幼蟲、蛹及成蟲均含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪和多種氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)，黑水虻幼蟲粗蛋白和粗脂肪含量分別約為42%和35%。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，資源昆蟲養(yǎng)殖和利用已成為朝陽產(chǎn)業(yè)，黑水虻蟲粉作為重要動物蛋白源補(bǔ)充魚粉不足，已成為重要的發(fā)展方向之一。在南美白對蝦()飼料的篩選過程中，配方中動物蛋白的平衡是飼料達(dá)到最大利用率的重要前提。黑水虻蟲粉作為蛋白源添加到蝦飼料中具有蛋白營養(yǎng)高、低支出等優(yōu)勢，可提高動物自身抗病性和免疫力。目前，蝦飼料中將黑水虻蟲粉作為魚粉替代物的研究很少，將其用于提高水產(chǎn)養(yǎng)殖存活率及增強(qiáng)抗病方面的研究也較為缺乏。因此本試驗(yàn)旨在探究黑水虻蟲粉添加到南美白對蝦飼料中的可行性和替代量，為黑水虻蟲粉在南美白對蝦飼料中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試南美白對蝦 選用體長1～1.5 cm的南美白對蝦蝦苗，由秦皇島市海洋牧場增養(yǎng)殖有限公司提供。

1.1.2 供試飼料與飼養(yǎng)條件 選用以麥麩、面粉及食物廢物喂養(yǎng)的黑水虻幼蟲，在干燥箱中烘干后研磨成蟲粉備用，由植物保護(hù)實(shí)驗(yàn)室提供。飼料配方中基礎(chǔ)飼料含豆粕30%、水產(chǎn)復(fù)合多維1.1%、大豆卵磷脂2%、小麥粉15%、骨粉3%、食鹽(氯化鈉)0.3%、羧甲基纖維素鈉2%、玉米粉5%、甜菜堿0.6%、花生油3%和微晶纖維素3%，基礎(chǔ)飼料共占65%、黑水虻蟲粉及適量的魚粉占35%，經(jīng)過人工制成小顆粒用于投喂。在植保實(shí)驗(yàn)室中以60 cm×40 cm×80 cm的玻璃水缸進(jìn)行養(yǎng)殖，夏季高溫時為保證水體在適宜的溫度內(nèi)要經(jīng)常進(jìn)行通風(fēng)，并在水中加入冰塊。養(yǎng)殖用水為自然海水。

1.2 試驗(yàn)方法

本試驗(yàn)共設(shè)6個處理：A：基礎(chǔ)飼料65%+魚粉20%+蟲粉15%，B：基礎(chǔ)飼料65%+魚粉23%+蟲粉12%，C：基礎(chǔ)飼料65%+魚粉26%+蟲粉9%，D：基礎(chǔ)飼料65%+魚粉29%+蟲粉6%，E：基礎(chǔ)飼料65%+魚粉32%+蟲粉3%，CK：基礎(chǔ)飼料65%+魚粉35%。每個處理放置20尾南美白對蝦幼蝦，設(shè)3個重復(fù)。每次根據(jù)每缸南美白對蝦總體重的2%投喂自制蝦料。日投喂3次，喂食時間為7:30、17:30、22:00。飼喂8周后進(jìn)行測定。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 采樣過程和生長指標(biāo)的測定 采樣時間在飼料投喂兩小時之后，采樣時每缸每次撈取5尾活體南美白對蝦，置于裝有同樣水的大燒杯中，在電子天平上放置輕便的紙杯，去掉紙杯重量，將1尾南美白對蝦放在紙杯中，待數(shù)值平衡后讀數(shù)并記錄，迅速取出放進(jìn)原來的水中，確保南美白對蝦的存活率，取出第二頭南美白對蝦繼續(xù)稱量，直到5尾對蝦全部稱量完畢，測量體長用直尺直接在缸中測量。此過程重復(fù)3次，取其平均值。

數(shù)據(jù)分析利用 DPS 軟件，方差分析采用LSD法。

飼料系數(shù)=(-)，

式中：為初平均重，為末平均重，為總投飼量。

1.3.2 南美白對蝦蛋白質(zhì)含量的測定 參照略有改進(jìn)的考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測定蛋白質(zhì)含量。

1.3.3 超氧化物歧化酶(SOD)活性測定 參照略有改進(jìn)的氮藍(lán)四唑光化還原法(NBT)和李周直的方法。

1.3.4 過氧化物酶(POD)活性測定 參照略有改進(jìn)的愈創(chuàng)木酚比色法和李周直的方法。

1.3.5 過氧化氫(CAT)活性測定 參照略有改進(jìn)的紫外吸收法和李周直的方法。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加不同比例黑水虻蟲粉對南美白對蝦體重、體長的影響

由表1可知，南美白對蝦處理組與對照組的體重和體長之間沒有顯著性影響(>0.05)。

表1 添加不同比例黑水虻蟲粉對南美白對蝦體重、體長的影響

2.2 添加不同比例黑水虻蟲粉對南美白對蝦存活率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)含量的影響

由表2可知，A組南美白對蝦存活率極顯著高于對照組，D組存活率極顯著低于對照組(<0.01)，B、C、E組存活率與對照組相比沒有顯著性差異(>0.05)。A組和C組南美白對蝦飼料系數(shù)極顯著低于對照組(<0.01)，B、D、E組飼料系數(shù)極顯著高于對照組(<0.01)。各個處理組與對照組之間蛋白質(zhì)含量沒有顯著性差異(>0.05)。A組蛋白質(zhì)含量顯著低于B組(<0.05)。

表2 添加不同比例黑水虻蟲粉對南美白對蝦存活率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)含量的影響

2.3 添加不同比例黑水虻蟲粉對南美白對蝦SOD、POD、CAT酶活性的影響

由表3可知，A組SOD酶活性顯著高于對照組(<0.05)，B組SOD酶活性極顯著高于對照組(<0.01)，C、D、E組與對照組相比沒有顯著性差異(>0.05)。A、B、C、D、E組POD酶活性極顯著高于對照組(<0.01)，A組POD酶活性極顯著高于B、C、D、E組(<0.01)，B、C、D、E組POD酶活性沒有顯著性差異(>0.05)。A組CAT酶活性極顯著高于對照組(<0.01)，B、C、D、E組CAT酶活性與對照組相比沒有顯著性差異(>0.05)，A組CAT酶活性顯著高于B、C、E組(<0.05)，但A組與D組相比沒有顯著性差異(>0.05)。B、C、D、E組之間相比CAT酶活性沒有顯著性差異(>0.05)。

表3 添加不同比例黑水虻蟲粉對南美白對蝦SOD、POD、CAT酶活性的影響

3 討論

本文中添加15%黑水虻蟲粉和添加9%黑水虻蟲粉生長發(fā)育情況較其他處理組偏好，而且這兩組飼料系數(shù)顯著低于對照組。在蝦飼料中添加一定量的黑水虻蟲粉替代部分魚粉對南美白對蝦的蛋白質(zhì)含量沒有顯著影響，但隨著黑水虻蟲粉添加量的增加，南美白對蝦的保護(hù)酶活性也相應(yīng)增加，這與李森林在鯉魚的應(yīng)用，劉興等在錦鯉上的應(yīng)用結(jié)果相似，但是他們試驗(yàn)中蟲粉替代量遠(yuǎn)高于本試驗(yàn)，所以適宜的蟲粉添加量還待進(jìn)一步探討。此外，由于試驗(yàn)的飼料為非工業(yè)化生產(chǎn)，對黑水虻蟲粉利用率上是否存在影響，還需要在生產(chǎn)實(shí)踐中進(jìn)一步試驗(yàn)。所以該試驗(yàn)結(jié)果對生產(chǎn)實(shí)踐有指導(dǎo)意義，但是不能直接引用，還需要進(jìn)一步在實(shí)踐中檢驗(yàn)。