路明 陳哲

我國(guó)糖尿病患者例數(shù)約占全球糖尿病患者總例數(shù)的1/3[1]，糖尿病足為糖尿病最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，發(fā)病率高達(dá)糖尿病患者總例數(shù)的15%～20%，已患糖尿病足的患者有50%的風(fēng)險(xiǎn)面臨截肢，嚴(yán)重威脅患者的生存質(zhì)量甚至生命安全[2]。糖尿病足患者由于其自身抵抗力下降，加之血糖控制不佳，創(chuàng)口極易感染，較難愈合[3]。如何處置創(chuàng)面是關(guān)系到糖尿病足患者潰瘍預(yù)后的關(guān)鍵措施，目前國(guó)內(nèi)外共識(shí)是采用敷料控制滲出和感染，保持創(chuàng)口內(nèi)濕度及溫度，促進(jìn)創(chuàng)面愈合[4，5]。研究顯示[6，7]，納米銀敷料對(duì)于促進(jìn)糖尿病足創(chuàng)面愈合并抑制感染具有良好作用，但并不能達(dá)到理想效果。重組人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（rh-bFGF）已被證實(shí)可通過促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖分裂加速肉芽組織生長(zhǎng)，以達(dá)到促進(jìn)創(chuàng)口愈合的目的，對(duì)于燒傷、壓瘡、糖尿病足等多種創(chuàng)面的愈合具有積極作用[8～10]。目前，臨床中既可抗感染又直接促進(jìn)創(chuàng)面愈合的敷料較少，本研究團(tuán)隊(duì)自制納米銀+rh-bFGF抗菌輔料，擬觀察該敷料對(duì)糖尿病足大鼠創(chuàng)面愈合率、創(chuàng)面菌落數(shù)、創(chuàng)面新生血管數(shù)、血管生成相關(guān)因子及炎癥因子的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取清潔級(jí)雄性SD大鼠50只，12～14周齡，體重（220±10）g，購(gòu)自長(zhǎng)春億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)公司，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（吉）-2021-0004，飼養(yǎng)條件符合《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，晝夜比為1:1，飼養(yǎng)溫度為22℃～23℃。

1.2 藥品與實(shí)驗(yàn)試劑 納米銀醫(yī)用抗菌敷料[深圳愛杰特醫(yī)藥科技有限公司，粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第2640486號(hào)，規(guī)格10cm×15cm，納米銀含量0.4g/m2]；rh-bFGF（北京雙鷺?biāo)帢I(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字S20140009，規(guī)格25 000 IU/支）；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF-1）、血管生成素-Ⅰ（Ang-Ⅰ）、血管生成素-Ⅱ（Ang-Ⅱ）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-2（IL-2）、白介素-8（IL-8）ELISA試劑盒均購(gòu)自碧云天生物科技有限公司；磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）多抗、磷酸化哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）多抗、甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司，貨號(hào)分別為ab38449、ab109268、ab8245。PeriFlux 5000型激光多普勒血流儀（瑞典Perimed公司）；EM2245石蠟切片機(jī)（北京盛科信德科技公司）；光學(xué)顯微鏡（美國(guó)Swift Edu公司）；YT-MB96A全自動(dòng)酶標(biāo)儀（云唐科器公司）；Mini-Protean小型垂直板電泳和轉(zhuǎn)印系統(tǒng)（美國(guó)伯樂公司）。

1.3 自制納米銀+rh-bFGF抗菌敷料制作 自制納米銀+rh-bFGF抗菌敷料為6mm×10mm矩形，采用3層結(jié)構(gòu)，分別為繃帶層、基層及敷料層。繃帶層由無紡布及聚四氟乙烯微孔膜組成，在貼敷同時(shí)可保證防水性及透氣性，對(duì)創(chuàng)面無影響。基層由醫(yī)用紗布表面涂抹甲殼素避免稀釋藥物。敷料層每平方米含納米銀0.4g，含rh-bFGF 300IU，敷料四周設(shè)置防水密封膠，防水密封膠由醫(yī)用壓敏膠黏劑構(gòu)成。

1.4 分組及給藥 首先將50只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、納米銀組、rh-bFGF組及自制敷料組。對(duì)照組10只給予普通飼料常規(guī)喂養(yǎng)，其余40只給予高脂飼料喂養(yǎng)4周后，采用腹腔注射法，注射檸檬酸鈉35mg/kg，3d后檢測(cè)大鼠清晨空腹血糖，血糖≥16.7mmol/L為糖尿病大鼠成模標(biāo)準(zhǔn)。模型組符合標(biāo)準(zhǔn)9只，納米銀組符合標(biāo)準(zhǔn)8只，rhbFGF組符合標(biāo)準(zhǔn)8只，自制敷料組符合標(biāo)準(zhǔn)9只。將各組符合糖尿病標(biāo)準(zhǔn)大鼠進(jìn)行麻醉，充分消毒大鼠單側(cè)后肢，于足背部切除4mm×7mm矩形全層皮膚，以制備糖尿病足大鼠模型[11]。對(duì)照組大鼠同樣于足背部切除4mm×7mm矩形全層皮膚。對(duì)照組及模型組大鼠給予無菌紗布包扎，納米銀組給予6mm×10mm矩形納米銀抗菌敷料進(jìn)行創(chuàng)面貼敷，rh-bFGF組給予180IU/cm2rh-bFGF凝膠涂抹創(chuàng)面后無菌紗布包扎，自制敷料組給予自制敷料進(jìn)行貼敷。各組大鼠每日換藥1次，均貼敷14d。

1.5 創(chuàng)面情況觀察

1.5.1 創(chuàng)面愈合率評(píng)估 入組大鼠建立糖尿病足第2周末，對(duì)創(chuàng)面邊緣進(jìn)行測(cè)量并拍照，采用Image J圖像分析系統(tǒng)對(duì)創(chuàng)面面積進(jìn)行測(cè)量，并計(jì)算創(chuàng)面愈合率。創(chuàng)面愈合率=（建立模型第1天面積-建立模型第2周面積）/建立模型第1天面積×100%。

1.5.2 創(chuàng)面菌落數(shù)計(jì)算 入組大鼠建立糖尿病足第2周末評(píng)估創(chuàng)面后，將無菌試子單片覆蓋創(chuàng)面，待試子被滲透液浸透后進(jìn)行菌落培養(yǎng)，目標(biāo)菌株為金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌及銅綠假單胞菌。培養(yǎng)24h后，3種細(xì)菌菌落數(shù)相加則為最終創(chuàng)面菌落數(shù)。

1.5.3 創(chuàng)面血流量檢測(cè) 應(yīng)用PeriFlux 5000型激光多普勒血流儀對(duì)入組大鼠創(chuàng)面血流量進(jìn)行檢測(cè)，將探頭分別在創(chuàng)口中心及縱向兩端進(jìn)行超聲探查，每超聲點(diǎn)探查30s，保存圖像后錄入PowerLab Chart5 v5.2.2圖像分析軟件，最終3點(diǎn)平均血流量值為該大鼠創(chuàng)面血流量。

1.5.4 創(chuàng)面新生毛細(xì)血管數(shù)計(jì)算 入組大鼠建立糖尿病足第2周末取創(chuàng)面周邊肉芽組織，部分留用后續(xù)檢測(cè)，另一部分放入10%甲醛中固定1h，放入石蠟切片機(jī)，切片后經(jīng)脫臘、脫水、二甲苯透明、封固后，進(jìn)行HE染色，采用光學(xué)顯微鏡對(duì)切片進(jìn)行觀察并拍照，錄入MPIAS-400彩色病理圖圖文分析系統(tǒng)，計(jì)算新生毛細(xì)血管數(shù)。

隨著我國(guó)醫(yī)院體質(zhì)改革的不斷深化，按照國(guó)家的政策、方針，結(jié)合新醫(yī)改的方案制定更加科學(xué)、有效的精細(xì)化財(cái)務(wù)管理模式已然成為了促進(jìn)醫(yī)院長(zhǎng)久發(fā)展，確保經(jīng)濟(jì)效益，提高市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的重要部分。

1.6 ELISA檢測(cè) 入組大鼠建立糖尿病足第2周末抽取尾靜脈血0.5ml，分離血清后采用ELISA法檢測(cè)各組大鼠血清中VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ、IL-1β、IL-2及IL-8表達(dá)水平，檢測(cè)過程嚴(yán)格參照試劑盒說明書要求。

1.7 Western blot檢測(cè) 入組大鼠建立糖尿病足第2周末將各組大鼠部分肉芽組織混合后冷研磨，加入細(xì)胞裂解液并進(jìn)行蛋白預(yù)測(cè)，各組樣品參照蛋白比例分別上樣10μl，行5%或10% SDS-PAGE電泳，采用半濕法轉(zhuǎn)至PVDF膜，應(yīng)用脫脂奶粉拮抗非特異性抗體，再加入p-Akt、p-mTOR及GAPDH一抗（1:1 000），4℃封閉10h后加入二抗（1:500），最終放入暗室顯影，用凝膠圖像處理系統(tǒng)分析目的蛋白表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù)3次。目的蛋白相對(duì)表達(dá)量=目的蛋白灰度值/GAPDH灰度值。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用±s表示，采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠創(chuàng)面愈合率比較 與對(duì)照組相比，模型組大鼠創(chuàng)面愈合率降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，納米銀組、rh-bFGF組及自制敷料組創(chuàng)面愈合率均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與自制敷料組相比，納米銀組及rh-bFGF組創(chuàng)面愈合率降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 各組大鼠創(chuàng)面菌落數(shù)比較 與對(duì)照組相比，模型組創(chuàng)面菌落數(shù)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，納米銀組、rh-bFGF組及自制敷料組創(chuàng)面菌落數(shù)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與自制敷料組相比，rh-bFGF組創(chuàng)面菌落數(shù)升高（P＜0.05），而納米銀組則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。見表1。

表1 各組大鼠創(chuàng)面愈合率及菌落數(shù)比較（±s）

表1 各組大鼠創(chuàng)面愈合率及菌落數(shù)比較（±s）

注：與對(duì)照組相比，①P＜0.05；與模型組相比，②P＜0.05；與自制敷料組相比，③P＜0.05

組別 只數(shù) 創(chuàng)面愈合率（%） 菌落數(shù)（個(gè)）對(duì)照組 10 37.60±3.13 20.40±6.40模型組 9 17.89±1.83① 31.55±6.62①納米銀組 8 25.63±1.77②③ 15.75±2.25②rh-bFGF組 8 28.63±2.26②③ 25.50±3.74②③自制敷料組 9 33.33±2.92② 14.22±1.86②

2.3 各組大鼠創(chuàng)面血流量及新生血管數(shù)比較 與對(duì)照組相比，模型組大鼠創(chuàng)面血流量及新生血管數(shù)均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，納米銀組、rh-bFGF組及自制敷料組創(chuàng)面血流量及新生血管數(shù)均增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與自制敷料組相比，納米銀組及rh-bFGF組創(chuàng)面血流量及新生血管數(shù)均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠創(chuàng)面血流量及新生血管數(shù)比較（±s）

表2 各組大鼠創(chuàng)面血流量及新生血管數(shù)比較（±s）

注：與對(duì)照組相比，①P＜0.05；與模型組相比，②P＜0.05；與自制敷料組相比，③P＜0.05

組別 只數(shù) 血流量（ml/min） 新生血管數(shù)（個(gè)）對(duì)照組 10 139.32±6.09 19.70±2.31模型組 9 75.78±5.76① 5.78±1.20①納米銀組 8 112.38±10.27②③ 14.38±1.60②③rh-bFGF組 8 118.50±6.37②③ 15.63±0.92②③自制敷料組 9 133.11±12.20② 18.33±1.94②

2.4 各組大鼠創(chuàng)面肉芽組織血管生成相關(guān)因子比較與對(duì)照組相比，模型組大鼠血清VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ及Ang-Ⅱ水平均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，納米銀組、rh-bFGF組及自制敷料組VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ及Ang-Ⅱ水平均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與自制敷料組相比，納米銀組及rh-bFGF組VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ及Ang-Ⅱ水平均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 各組大鼠血清VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ及Ang-Ⅱ水平比較（±s，pg/ml）

表3 各組大鼠血清VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ及Ang-Ⅱ水平比較（±s，pg/ml）

注：與對(duì)照組相比，①P＜0.05；與模型組相比，②P＜0.05；與自制敷料組相比，③P＜0.05

組別 只數(shù) VEGF HIF-1 Ang-Ⅰ Ang-Ⅱ?qū)φ战M 10 265.30±17.64 518.9±19.85 869.00±86.96 386.50±20.53模型組 9 121.67±13.87① 255.67±23.36① 302.33±23.47① 248.33±24.18①納米銀組 8 175.88±12.18②③ 351.75±23.14②③ 654.25±38.10②③ 334.75±21.72②③rh-bFGF組 8 192.13±9.43②③ 375.25±25.72②③ 646.75±37.81②③ 321.00±18.06②③自制敷料組 9 253.33±21.74② 450.56±21.25② 751.11±50.94② 375.44±15.49②

2.5 各組大鼠炎癥因子比較 與對(duì)照組相比，模型組大鼠血清IL-1β、IL-2及IL-8水平均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，納米銀組、rh-bFGF組及自制敷料組IL-1β、IL-2及IL-8水平均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與自制敷料組相比，rh-bFGF組IL-1β、IL-2及IL-8水平升高（P＜0.05），而納米銀組IL-1β、IL-2及IL-8水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。見表4。

表4 各組大鼠血清IL-1β、IL-2及IL-8水平比較（±s，pg/ml）

表4 各組大鼠血清IL-1β、IL-2及IL-8水平比較（±s，pg/ml）

注：與對(duì)照組相比，①P＜0.05；與模型組相比，②P＜0.05；與自制敷料組相比，③P＜0.05

組別 只數(shù) IL-1β IL-2 IL-8對(duì)照組 10 3.67±0.31 116.20±7.39 154.90±10.10模型組 9 16.26±1.68① 186.56±12.76①473.11±27.08①納米銀組 8 8.41±0.68② 138.63±6.80② 245.13±13.50②rh-bFGF組 8 10.30±0.98②③153.75±11.44②③264.25±11.51②③自制敷料組 9 8.10±0.68② 138.22±12.78②243.44±10.09②

2.6 各組大鼠p-Akt、p-mTOR比較 與對(duì)照組相比，模型組大鼠創(chuàng)面肉芽組織中p-Akt、p-mTOR表達(dá)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比，納米銀組、rh-bFGF組、自制敷料組肉芽組織中p-Akt、p-mTOR表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與自制敷料組相比，納米銀組及rh-bFGF組肉芽組織中p-Akt、p-mTOR表達(dá)均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1、表5。

圖1 各組大鼠創(chuàng)面肉芽組織p-Akt、p-mTOR蛋白表達(dá)電泳圖

表5 各組大鼠創(chuàng)面肉芽組織p-Akt、p-mTOR蛋白表達(dá)（±s）

表5 各組大鼠創(chuàng)面肉芽組織p-Akt、p-mTOR蛋白表達(dá)（±s）

注：與對(duì)照組相比，①P＜0.05；與模型組相比，②P＜0.05；與自制敷料組相比，③P＜0.05

組別 p-Akt p-mTOR對(duì)照組 0.95±0.02 0.91±0.04模型組 0.26±0.02① 0.34±0.05①納米銀組 0.43±0.03②③ 0.61±0.05②③rh-bFGF組 0.61±0.03②③ 0.63±0.04②③自制敷料組 0.83±0.03② 0.83±0.04②

3 討論

糖尿病足發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜，由神經(jīng)病變、骨關(guān)節(jié)病變、血流動(dòng)力學(xué)改變、免疫失衡等多種病因共同導(dǎo)致，而該病一旦皮膚破潰，局部微生物迅速突破皮膚屏障，繼而引起皮下組織感染[12]。目前認(rèn)為，糖尿病患者血糖控制不佳，導(dǎo)致免疫功能紊亂，當(dāng)患者發(fā)生糖尿病足創(chuàng)面破潰時(shí)，創(chuàng)口的炎癥反應(yīng)程度較低，皮膚愈合緩慢，看似創(chuàng)面好轉(zhuǎn)，實(shí)則并未有效阻止感染，最終引發(fā)膿毒癥[13]。在糖尿病足創(chuàng)面治療中，控制感染和促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)是兩個(gè)重要因素[14，15]。納米銀已被證實(shí)可有效控制糖尿病足感染，當(dāng)納米銀顆粒直徑小于10nm時(shí)對(duì)細(xì)菌的毒性最強(qiáng)，可使細(xì)菌內(nèi)容物流出，達(dá)到滅菌目的[16]。另有研究證實(shí)，當(dāng)納米銀顆粒直徑為7～20nm時(shí)，可提高成纖維細(xì)胞抗氧化能力[17]。此外，rh-bFGF在創(chuàng)面治療中的生物學(xué)功能并不單一，其具有促進(jìn)血管新生及肉芽組織生長(zhǎng)、刺激成纖維細(xì)胞生成、穩(wěn)定新生皮膚結(jié)構(gòu)等作用[18]。目前，國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中并無納米銀與rh-bFGF在治療糖尿病足創(chuàng)面方面具有相互抑制作用的報(bào)道，且有研究證實(shí)兩種藥物在一定程度上具有協(xié)同作用，可促進(jìn)創(chuàng)面愈合[19]，因此，本研究團(tuán)隊(duì)自制納米銀+rh-bFGF抗菌敷料，并觀察自制敷料對(duì)糖尿病足大鼠創(chuàng)面愈合的作用。

本研究首先建立糖尿病足大鼠模型，以納米銀和rh-bFGF凝膠兩種藥物作為對(duì)照，觀察自制納米銀+rh-bFGF抗菌敷料對(duì)糖尿病足大鼠創(chuàng)面愈合率、創(chuàng)面菌落數(shù)的影響。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，模型組大鼠創(chuàng)面愈合率降低，創(chuàng)面菌落數(shù)增加，這可能是由于糖尿病大鼠血糖升高，抵抗力降低，局部血液循環(huán)較差，并且創(chuàng)面易滋生細(xì)菌，導(dǎo)致創(chuàng)面愈合能力降低。與模型組相比，納米銀組、rhbFGF組、自制敷料組大鼠創(chuàng)面愈合率明顯升高，且自制敷料組大鼠創(chuàng)面愈合率最佳，但自制敷料組與納米銀組創(chuàng)面菌落數(shù)無明顯差異，說明納米銀+rhbFGF并不能增加抗菌性，但二者聯(lián)合使用后創(chuàng)面愈合率明顯上升，其機(jī)制可能是納米銀與rh-bFGF聯(lián)合可產(chǎn)生協(xié)同作用，有助于創(chuàng)面愈合。

促進(jìn)血管再生與抑制炎癥是加快創(chuàng)面愈合的重要方法。VEGF和HIF-1均具有促毛細(xì)血管生成的作用，并且其表達(dá)越高，刺激血管新生作用越強(qiáng)[20]。Ang-Ⅰ及Ang-Ⅱ同為Ang家族編碼蛋白，雖然Ang-Ⅰ與Ang-Ⅱ存在部分拮抗作用，但二者總體來說均對(duì)創(chuàng)面血管的保護(hù)和再生具有積極作用，其中Ang-Ⅰ作用機(jī)制傾向于維持血管結(jié)構(gòu)，Ang-Ⅱ作用機(jī)制傾向于促進(jìn)血管再生[21]。IL-1β是重要的致炎因子；IL-2可活化T細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，具有激活巨噬細(xì)胞作用[22]。創(chuàng)面受損時(shí)刺激巨噬細(xì)胞及成纖維細(xì)胞分泌IL-8，繼而IL-8激活中性粒細(xì)胞，引發(fā)局部炎癥反應(yīng)，達(dá)到殺菌和細(xì)胞損傷的目的[23]。本研究結(jié)果顯示，模型組大鼠血清中血管再生相關(guān)因子VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ表達(dá)水平降低，炎癥因子IL-1β、IL-2、IL-8水平升高，說明糖尿病足大鼠由于其皮膚黏膜屏障缺失，引發(fā)細(xì)菌感染，激活炎癥反應(yīng)，抑制血管再生，這可能是模型組大鼠創(chuàng)面愈合率低的原因之一，而納米銀組、rh-bFGF組、自制敷料組VEGF、HIF-1、Ang-Ⅰ、Ang-Ⅱ水平升高，IL-1β、IL-2及IL-8水平降低，說明三種敷料均具有抗炎、促進(jìn)血管新生的作用。自制敷料組血管生成相關(guān)因子高于納米銀組、rh-bFGF組，自制敷料組炎癥因子水平低于rh-bFGF組，但與納米銀組無明顯差異，說明在促進(jìn)血管再生方面，納米銀與rh-bFGF具有協(xié)同作用，但聯(lián)合使用后并不能增強(qiáng)抗炎作用。

Akt/mTOR信號(hào)通路具有多重生物學(xué)功能，在人體的生理調(diào)節(jié)中起重要作用，其中Akt/mTOR信號(hào)的激活有助于組織損傷修復(fù)，刺激細(xì)胞增殖、分化、再上皮化與重塑[24]。已有研究證實(shí)，Akt/mTOR信號(hào)通路蛋白磷酸化的激活，有助于糖尿病足大鼠皮膚創(chuàng)面愈合[25]。本研究檢測(cè)各組大鼠創(chuàng)面肉芽組織中Akt及mTOR蛋白磷酸化水平，結(jié)果表明，模型組大鼠較對(duì)照組p-Akt、p-mTOR蛋白表達(dá)降低，納米銀組、rh-bFGF組、自制敷料組p-Akt、p-mTOR蛋白表達(dá)較模型組均增加，其中自制敷料組p-Akt、p-mTOR蛋白表達(dá)增加最為明顯，推測(cè)原因?yàn)樽灾萍{米銀+rh-bFGF抗菌敷料中納米銀、rhbFGF均具有一定促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用，二者聯(lián)合使用后加速血管新生與成纖維細(xì)胞增殖，這與創(chuàng)面愈合率及創(chuàng)面新生血管數(shù)結(jié)果相一致。

綜上所述，自制納米銀+rh-bFGF抗菌敷料可有效促進(jìn)糖尿病足大鼠創(chuàng)面愈合，其機(jī)制與抑制菌落生長(zhǎng)、促進(jìn)血管新生、抑制炎癥反應(yīng)有關(guān)。