黃永堂，姚桂林 ，孫延林，鄭鴻燾，顧彩紅，樊亮

（1.高臺(tái)縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 甘肅張掖 734300；2.高臺(tái)縣宣化鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站 甘肅張掖 734300）

動(dòng)物斷奶腹瀉是養(yǎng)殖業(yè)頑癥痼疾，肉羊養(yǎng)殖補(bǔ)欄階段也是如此，特別是2014 年小反芻獸疫進(jìn)入內(nèi)地以后，二者互相作用，對(duì)肉羊養(yǎng)殖影響較為深切。2020 年以來，高臺(tái)縣肉羊養(yǎng)殖持續(xù)向好，羔羊價(jià)格持續(xù)走高，出現(xiàn)羔羊搶購(gòu)潮，羔羊斷奶日齡越發(fā)提前，養(yǎng)殖戶補(bǔ)欄育肥肉羊月齡最小的只有20 日齡，加之?dāng)嗄?、運(yùn)輸、混群及寒冷應(yīng)激等因素影響，導(dǎo)致育肥肉羊養(yǎng)殖戶補(bǔ)欄后，腹瀉發(fā)生情況較為普遍，發(fā)病率、死亡率較往年都有較大幅度增加。在此階段如果混合感染小反芻獸疫，會(huì)進(jìn)一步加劇病癥，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為探索和創(chuàng)新新補(bǔ)欄肉羊補(bǔ)欄至15d 內(nèi)的疾病防控措施，筆者根據(jù)高臺(tái)縣部分養(yǎng)殖戶實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)、個(gè)人臨床實(shí)踐及筆者所在單位開展的小劑量動(dòng)物疫苗不同免疫劑量對(duì)免疫效果影響試驗(yàn)，進(jìn)行了育肥肉羊補(bǔ)欄時(shí)緊急免疫注射小反芻獸疫疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗對(duì)補(bǔ)欄應(yīng)激階段疾病防控效果驗(yàn)證與研究。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

在高臺(tái)縣轄區(qū)隨機(jī)選擇1 個(gè)存欄量700 只左右，年周轉(zhuǎn)達(dá)到3,000 只的養(yǎng)羊場(chǎng)，在2021 年1 月、4 月分別選取1.5～2 月齡從市場(chǎng)收購(gòu)準(zhǔn)備入欄的疫苗免疫情況不明的健康羔羊40 只作為試驗(yàn)羊，免疫前對(duì)試驗(yàn)羊進(jìn)行小反芻獸疫基礎(chǔ)抗體滴度測(cè)定，所選試驗(yàn)羊布魯氏菌病抗體陰性的選擇為試驗(yàn)對(duì)象。

1.2 試驗(yàn)疫苗

1 月份試驗(yàn)疫苗為羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥三聯(lián)四防滅活疫苗，山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2 002005；小反芻獸疫活疫苗，新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2020004-2。4 月份試驗(yàn)疫苗為羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥三聯(lián)四防滅活疫苗，山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2 101002；小反芻獸疫活疫苗，新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2020032。

1.3 檢測(cè)試劑

小反芻獸疫病毒阻斷ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自青島立見生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)020 172003；暫無羊三聯(lián)四防抗體檢測(cè)試劑盒。

1.4 試驗(yàn)分組

1 月、4 月分別隨機(jī)選取從市場(chǎng)收購(gòu)準(zhǔn)備入欄的1.5～2 月齡羔羊40 只，隨機(jī)分成2 組，每組20 只，依次為實(shí)驗(yàn)組1～20 號(hào)、對(duì)照組20～40 號(hào)。

1.5 試驗(yàn)及免疫方法

1 月組：試驗(yàn)組在補(bǔ)欄卸車過程中進(jìn)行疫苗免疫，注射部位為左右頸部各注射一針。注射時(shí)嚴(yán)格消毒，規(guī)范操作。免疫劑量：羊三聯(lián)四防滅活疫苗5.0mL/只，小反芻獸疫活疫苗2 頭份/只。對(duì)照組不進(jìn)行任何免疫。

4 月組：試驗(yàn)組在補(bǔ)欄卸車過程中進(jìn)行疫苗免疫，注射部位為左右頸部各注射一針。注射時(shí)嚴(yán)格消毒，規(guī)范操作。免疫劑量：羊三聯(lián)四防滅活疫苗5.0mL/只，小反芻獸疫活疫苗3 頭份/只。對(duì)照組不進(jìn)行任何免疫。

1.6 飼養(yǎng)管理

按照露天正常飼養(yǎng)管理，與其他群體同等水平飼養(yǎng)管理即可。

1.7 臨床不良反應(yīng)觀察

試驗(yàn)組主要觀察補(bǔ)欄、低溫應(yīng)激與小反芻獸疫活疫苗，羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥三聯(lián)四防滅活疫苗聯(lián)合免疫注射疊加階段，羊只的精神狀況、采食、飲水是否正常和是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)等，同時(shí)分1～3d、4～7d、8～15d 兩個(gè)階段分別觀察腹瀉及其它疾病發(fā)生情況；對(duì)照組主要觀察補(bǔ)欄、低溫應(yīng)激階段羊只的精神狀況、采食、飲水是否正常和是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)等，同時(shí)分1～3d、4～7d、8～15d 兩個(gè)階段分別觀察腹瀉及其它疾病發(fā)生情況。

1.8 免疫抗體檢測(cè)

分別于免疫后7d、10d 和15d 經(jīng)頸靜脈采血，分離血清，用于小反芻獸疫免疫抗體檢測(cè)。小反芻獸疫免疫抗體檢測(cè)：采用阻斷ELISA 方法，具體操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)：PB＞50%，抗體陽性，PB≤50%，抗體陰性。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

臨床反應(yīng)及小反芻獸疫疫苗免疫抗體檢測(cè)按實(shí)際觀察和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，小反芻獸疫免疫抗體以抗體陽性率表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床觀察

1 月組：外界氣溫-11～-24℃，試驗(yàn)組疫苗注射后，試驗(yàn)組與對(duì)照組在3d 內(nèi)精神、體溫、采食、飲水等方面均未見明顯臨床癥狀。4～7d 內(nèi)腹瀉發(fā)生率具有明顯差異。8～15d 腹瀉發(fā)生率具有明顯差異（見表1）。

表1 臨床癥狀統(tǒng)計(jì)情況（1月組）

4 月組：外界氣溫3～16℃，試驗(yàn)組疫苗注射后，試驗(yàn)組與對(duì)照組在3d 內(nèi)精神、體溫、采食、飲水等方面均未見明顯臨床癥狀。4～7d 內(nèi)腹瀉發(fā)生率具有明顯差異。8～15d 腹瀉發(fā)生率具有明顯差異（見表2）。

表2 臨床癥狀統(tǒng)計(jì)情況（4月組）

2.2 小反芻獸疫免疫抗體產(chǎn)生情況

從表3 可以看出，每組試驗(yàn)在7d 時(shí)抗體水平都能達(dá)到最低群體保護(hù)率，2 頭份組，抗體陽性率在70%以上。3 頭份組，抗體陽性率可以達(dá)到80%以上。

表3 小反芻獸疫抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)情況

3 結(jié)論

育肥肉羊補(bǔ)欄時(shí)緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗，通過1 月氣溫極低與4 月氣溫正常情況下兩次臨床對(duì)比試驗(yàn)，對(duì)低溫與正常氣溫補(bǔ)欄應(yīng)激階段羊只影響，臨床癥狀差異不顯著，未見不良反應(yīng)加重現(xiàn)象。但對(duì)育肥肉羊補(bǔ)欄期間斷奶及應(yīng)激腹瀉有較好的預(yù)防作用，腹瀉發(fā)生率明顯下降，發(fā)生后治愈率也得到明顯提升。同時(shí)因提前進(jìn)行2～3 倍小反芻獸疫疫苗免疫，70%～80%以上補(bǔ)欄育肥肉羊7d 內(nèi)即可產(chǎn)生小反芻獸疫疫苗免疫抗體，可以在最短時(shí)間內(nèi)有效阻斷小反芻獸疫病毒的侵襲。同時(shí)加量免疫：①可以大幅度提升首次免疫抗體水平；②對(duì)不能做到全進(jìn)全出的育肥肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)起到了緊急免疫的作用，可以有效阻斷因羊只來源復(fù)雜而造成疫情蔓延的幾率，大大降低了補(bǔ)欄應(yīng)激階段疫病發(fā)生的幾率；③提前免疫，可以充分利用斷奶腹瀉發(fā)生的窗口期，使補(bǔ)欄羊只及時(shí)產(chǎn)生免疫抗體，降低腹瀉發(fā)生的幾率。

2020—2021 年，通過對(duì)高臺(tái)縣轄區(qū)內(nèi)新補(bǔ)欄育肥肉羊?qū)嵤坝嗜庋蜓a(bǔ)欄時(shí)緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗效果研究”試驗(yàn)及推廣，疫苗注射應(yīng)激反應(yīng)率基本可以忽略不計(jì)，但對(duì)腹瀉發(fā)生率有明顯的防控效果，小反芻獸疫免疫抗體血清抽樣檢測(cè)抗體合格率達(dá)90%以上。

育肥肉羊補(bǔ)欄時(shí)緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗對(duì)羊只的精神狀況、采食、飲水等沒有顯著影響，也沒有增加斷奶、運(yùn)輸、混群及寒冷應(yīng)激副反應(yīng)，通過綜合分析，可在實(shí)際工作中大規(guī)模推廣“育肥肉羊補(bǔ)欄時(shí)緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗”免疫操作程序，減少育肥肉羊補(bǔ)欄階段疾病發(fā)生，最大限度提升育肥肉羊養(yǎng)殖效益。

本次試驗(yàn)不足之處在于缺少羊三聯(lián)四防滅活疫苗免疫檢測(cè)試劑，項(xiàng)目實(shí)施中對(duì)羊三聯(lián)四防滅活疫苗的免疫效果未進(jìn)行評(píng)價(jià)，影響試驗(yàn)的完整性，建議我國(guó)科研工作者，能夠盡快開發(fā)相關(guān)檢測(cè)產(chǎn)品，為基層工作人員檢測(cè)提供產(chǎn)品保障。但根據(jù)筆者臨床實(shí)踐，在三聯(lián)四防滅活疫苗免疫后12d即可產(chǎn)生抗體，阻斷相關(guān)疾病傳播。

育肥肉羊補(bǔ)欄時(shí)緊急免疫注射疫苗種類，各地也可以根據(jù)本地疫病流行或威脅程度，把小反芻獸疫、羊痘、三聯(lián)四防、口蹄疫隨機(jī)聯(lián)合，統(tǒng)籌考慮，都可以取得較好的防控效果。但各地實(shí)際情況不一，在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，一定要先做好小群實(shí)驗(yàn)，取得本地?cái)?shù)據(jù)，確保安全應(yīng)用。