唐慧，潘延樂(lè)，鄧夢(mèng)玲*，王穎旺

（1.宜賓學(xué)院 四川宜賓 644000；2.翠屏區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 四川宜賓 644000）

口蹄疫（foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（FMDV）感染引起的偶蹄動(dòng)物的急性、熱性和遠(yuǎn)距離快速傳播的烈性傳染病，被列為我國(guó)一類傳染病的首位。FMDV 現(xiàn)有3 種歐洲型（A、O、C）、3 種非洲型（SAT1、SAT2、SAT3）、1 種亞洲型（Asia1）共7 個(gè)血清型。其中，A 型和O 型在我國(guó)流行最為廣泛。目前，對(duì)于該病的防控主要依靠疫苗免疫，但由于動(dòng)物疾病常呈現(xiàn)混合感染、病原變異、免疫抑制、免疫程序不科學(xué)等原因，導(dǎo)致免疫失敗的情況屢見(jiàn)不鮮。檢測(cè)疫苗免疫抗體水平是評(píng)價(jià)免疫效力、制定免疫程序和疫病防控方案的重要依據(jù)。

翠屏區(qū)隸屬于四川省宜賓市，是宜賓市主要的畜牧養(yǎng)殖區(qū)域，2020 年全區(qū)出欄生豬43.38 萬(wàn)頭，增長(zhǎng)7.6%；牛出欄0.61 萬(wàn)頭，增長(zhǎng)7.1%；羊出欄2.24 萬(wàn)只，增長(zhǎng)3.2%。為掌握當(dāng)前豬、牛、羊口蹄疫疫苗免疫抗體水平，及時(shí)杜絕疫情隱患，本研究采用液相阻斷ELISA 試驗(yàn)對(duì)轄區(qū)內(nèi)的14 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）的豬、牛、羊采取簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣的方法，進(jìn)行口蹄疫抗體水平檢測(cè)，對(duì)口蹄疫疫苗的免疫效果進(jìn)行評(píng)估，為后期該病的基層防控工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品

2019—2021 年春秋季動(dòng)物強(qiáng)制免疫后，村級(jí)動(dòng)物防疫員對(duì)翠屏區(qū)14 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）（本文用字母代替）的不同的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）進(jìn)行隨機(jī)抽樣，共采集豬血清1,564 份、牛血清396 份、羊血清588 份。

1.2 試劑及儀器設(shè)備

口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自廣東省深圳市康百得生物科技有限公司。主要設(shè)備有恒溫培養(yǎng)箱（GKP-01，37±1℃），湖北黃石恒豐醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)品；酶標(biāo)儀（HBS-1096A）、96 孔全自動(dòng)洗板機(jī)（HBS-4009）均為南京德鐵實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司產(chǎn)品；微量振蕩器（W220-A），常州市金壇醫(yī)療公司產(chǎn)品；移液器。

1.3 檢測(cè)方法及結(jié)果判定

1）檢測(cè)方法嚴(yán)格按照O 型口蹄疫液相阻斷ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2）結(jié)果判定陰性對(duì)照孔OD 值≥0.5，陽(yáng)性對(duì)照孔PI≥60%實(shí)驗(yàn)有效；樣品阻斷率PI≥50%，判為口蹄疫病毒抗體陽(yáng)性，PI＜50%，判為口蹄疫病毒抗體陰性。

2 結(jié)果

對(duì)翠屏區(qū)2019—2021 年轄區(qū)內(nèi)的14 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）的口蹄疫抗體進(jìn)行檢測(cè)，并統(tǒng)計(jì)分析，檢測(cè)樣品數(shù)量見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示，翠屏區(qū)2019—2021 年豬、牛、羊O 型口蹄疫抗體平均免疫合格率分別為91.41%、92.01%、94.76%，合格率均在80%以上，符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的相關(guān)要求。其中，2019 和2021 年的豬、牛、羊O 型口蹄疫免疫抗體合格率均達(dá)到90%以上，而2020 年的牛、羊O 型口蹄疫抗體合格率大于80%，具體見(jiàn)圖2。

圖1 翠屏區(qū)2019—2021 年血清樣品數(shù)

圖2 翠屏區(qū)2019—2021 年口蹄疫抗體合格率

2.1 豬O 型口蹄疫抗體合格率

從采集的1,564 份豬血清樣品中檢測(cè)出O 型口蹄疫抗體免疫合格樣品數(shù)量為1,486 份，即翠屏區(qū)豬O 型口蹄疫抗體免疫總體合格率為95.01%，其中2019 年只有L 組抗體免疫合格率為100%，2020 年有B、F、G、H、I、K 組抗體免疫合格率為100%，2021 年抗體免疫合格率為100%的有A、B、C、D、E、F、H、I、J、K、L 組，見(jiàn)表1。

表1 2019—2021年翠屏區(qū)各鎮(zhèn)、街道豬O型口蹄疫抗體合格率統(tǒng)計(jì)表

表2 2019—2021年翠屏區(qū)豬O型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2019—2021 年共計(jì)檢測(cè)規(guī)模場(chǎng)樣品1,359 份，合格數(shù)1,317份，合格率為96.91%，散養(yǎng)戶共計(jì)檢測(cè)樣品205 份，合格數(shù)為169份，合格率為82.44%。

2.2 牛O 型口蹄疫抗體合格率

從采集的396 份牛血清樣品中檢測(cè)出O 型口蹄疫抗體免疫合格樣品數(shù)量為362 份，即翠屏區(qū)牛O 型口蹄疫抗體免疫總體合格率為91.41%，其中2019 年F、G、K 組抗體免疫合格率均為100%，2020 年F、I 組抗體免疫合格率為100%，2021 年A、F、G、H、L 抗體免疫合格率為100%，其他組的抗體免疫合格率見(jiàn)表3。

表3 2019—2021年翠屏區(qū)各鎮(zhèn)、街道牛O型口蹄疫抗體合格率統(tǒng)計(jì)表

2019—2021 年共計(jì)檢測(cè)規(guī)模場(chǎng)樣品323 份，合格數(shù)297 份，合格率為91.95%，散養(yǎng)戶共計(jì)檢測(cè)樣品73 份，合格數(shù)為65 份，合格率為89.04%。

表4 2019—2021年翠屏區(qū)牛O型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 羊O 型口蹄疫抗體合格率

從采集的588 份羊血清樣品中檢測(cè)出O 型口蹄疫抗體免疫合格樣品數(shù)量為541 份，即翠屏區(qū)羊O 型口蹄疫抗體免疫總體合格率為92.01%，其中2019 年D、E、F、G、L、M、N 組抗體免疫合格率為100%，2020 年未見(jiàn)抗體免疫合格率為100%的組，2021 年C、F、L、M、N組抗體免疫合格率為100%，見(jiàn)表5。

表5 2019—2021年翠屏區(qū)各鎮(zhèn)、街道羊O型口蹄疫抗體合格率統(tǒng)計(jì)表

2019—2021 年共計(jì)檢測(cè)規(guī)模場(chǎng)樣品468 份，合格數(shù)433 份，合格率為92.52%，散養(yǎng)戶共計(jì)檢測(cè)樣品120 份，合格數(shù)為108 份，合格率為90.00%。

3 討論

翠屏區(qū)2019—2021 年口蹄疫抗體免疫合格率均高于80%，高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的抗體合格率70%，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的抗體水平普遍較散養(yǎng)戶高。主要原因是規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)主的圈舍建設(shè)、管理技術(shù)及防疫水平更為規(guī)范和科學(xué)，養(yǎng)殖設(shè)備也更為先進(jìn)，并且規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)配備有自己的駐場(chǎng)獸醫(yī)，對(duì)免疫監(jiān)測(cè)程序不斷優(yōu)化，能有效提高免疫工作的效率，在對(duì)樣品的采集和保存方面更嚴(yán)格，保證了血清的質(zhì)量。

某些組抗體水平相對(duì)較低，原因可能是鄉(xiāng)鎮(zhèn)干部及養(yǎng)殖戶的疫情防范意識(shí)薄弱，擔(dān)心疫苗對(duì)家畜產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，未按照國(guó)家制定的免疫制度進(jìn)行疫苗免疫；飼養(yǎng)管理不當(dāng)，飼料種類單一、品種不良，日糧搭配不合理；家畜圈舍環(huán)境衛(wèi)生較差，消毒制度不健全，外來(lái)人員等未進(jìn)行嚴(yán)格管控和消毒，冬春季未采取適當(dāng)措施進(jìn)行保溫等，導(dǎo)致畜禽機(jī)體抵抗力低下，易患?。徊糠执宸绬T缺乏專業(yè)知識(shí)和專業(yè)素養(yǎng)；未按照規(guī)定的免疫程序進(jìn)行免疫。所以，需要加強(qiáng)對(duì)防疫人員專業(yè)知識(shí)和技術(shù)操作培訓(xùn)，與此同時(shí)，還應(yīng)加強(qiáng)養(yǎng)殖方面的飼養(yǎng)管理和圈舍衛(wèi)生，增強(qiáng)畜群抵抗力，做好生物安全防控，從而有效預(yù)防和控制口蹄疫疫情的發(fā)生。

表6 2019—2021年翠屏區(qū)羊O型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

本次實(shí)驗(yàn)僅代表隨機(jī)抽檢疫苗的免疫情況。牛O 型口蹄疫滅活苗、牛羊O-A 二價(jià)滅活疫苗、豬O 型口蹄疫滅活苗在免疫后，免疫后O 型口蹄疫抗體合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上要求，對(duì)A 型口蹄疫疫苗的免疫效果評(píng)價(jià)不在本文中描述。牛、羊O 型口蹄疫的抗體合格率先降低后升高，牛O 型口蹄疫的抗體合格率漲幅較羊的大，豬O 型口蹄疫抗體合格率保持穩(wěn)步上升的趨勢(shì)，表明O 型口蹄疫免疫抗體合格率不穩(wěn)定，疫情防控形勢(shì)依然嚴(yán)峻。可能跟養(yǎng)殖場(chǎng)免疫程序制定不科學(xué)、操作不規(guī)范、其他免疫抑制病等相關(guān)。

疫苗免疫是預(yù)防重大動(dòng)物疫病的重要手段，而免疫效果不僅與疫苗質(zhì)量、免疫程序、接種方法、接種劑量、接種時(shí)間等有關(guān)，同時(shí)也與飼養(yǎng)管理及營(yíng)養(yǎng)供給密不可分。近年來(lái)，口蹄疫給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失，為防止疫病對(duì)生產(chǎn)發(fā)展的影響，各鎮(zhèn)、街道需加大宣傳力度、人員培訓(xùn)及資金投入，做好每年的春、秋季動(dòng)物集中免疫和日常補(bǔ)免工作，保障O型口蹄疫免疫密度，確保免疫質(zhì)量。與此同時(shí)，養(yǎng)殖單位也需提高防控意識(shí)，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，發(fā)現(xiàn)疫情立即上報(bào)并隔離，按國(guó)家相關(guān)規(guī)定處置疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)的易感動(dòng)物，撲殺并無(wú)害化處理易感動(dòng)物，防止疫情發(fā)生。