張 婷 王 卓 郭肖蘭 李光玉 徐 超*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，長春130112；2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，青島266109)

繁殖期母體新陳代謝增強(qiáng)，對能量和氧的需求增加，容易產(chǎn)生過多自由基，導(dǎo)致機(jī)體氧化系統(tǒng)與抗氧化系統(tǒng)失衡，引發(fā)氧化應(yīng)激[1]。研究發(fā)現(xiàn)，妊娠期的氧化應(yīng)激會導(dǎo)致母體胎盤血管功能紊亂，引發(fā)胎盤血流減少，造成胎兒生長受限[2-3]。硒是動物飼料常用的抗氧化劑。硒可通過胎盤和乳汁傳遞給后代，因此繁殖期母畜硒的攝入不僅影響其自身繁殖性能，還影響后代的生長發(fā)育。外源硒主要分為無機(jī)硒和有機(jī)硒，有機(jī)硒的效果往往優(yōu)于無機(jī)硒。Hu等[4]研究發(fā)現(xiàn)，與無機(jī)硒相比，妊娠后期母豬飼糧中添加有機(jī)硒可提高初生仔豬窩重及斷奶體重。Zhan等[5]報道，妊娠期和泌乳期母豬飼糧中添加硒代蛋氨酸可顯著提高仔豬從出生到斷奶的平均日增重。目前國內(nèi)外關(guān)于繁殖期水貂硒營養(yǎng)的報道較少。NRC(1982)[6]推薦水貂飼糧硒添加水平為0.1 mg/kg。張婷等[7]飼喂育成期水貂干粉飼料，發(fā)現(xiàn)同時添加0.2 mg/kg硒和200 mg/kg維生素E具有促生長作用。水貂飼糧中往往含有高比例的魚類及禽類副產(chǎn)品，因含有較高水平的不飽和脂肪酸，容易發(fā)生氧化。前人研究發(fā)現(xiàn)，長期飼喂水貂氧化的脂肪，會導(dǎo)致其采食量下降，生長性能降低[8]。因此，本試驗以繁殖期雌性水貂為研究對象，探討不同硒源對其繁殖性能及后代生長性能的影響，為繁殖期水貂合理應(yīng)用硒源，提高生產(chǎn)水平提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

亞硒酸鈉(純度為44.7%)、酵母硒(硒濃度為2 000 mg/kg)、硒代蛋氨酸(純度為99%)均為市售?；A(chǔ)飼糧為鮮飼料，由吉林省某農(nóng)業(yè)公司配制。水貂選自農(nóng)業(yè)部長白山野生生物資源重點野外科學(xué)觀測實驗站。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

選取80只配種期初產(chǎn)母貂，隨機(jī)分成4組，每組20個重復(fù)，每個重復(fù)1只。對照組(CN組)飼喂基礎(chǔ)飼糧(硒含量0.18 mg/kg)，試驗組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.2 mg/kg(以硒計)亞硒酸鈉(SS組)、酵母硒(SY組)和硒代蛋氨酸(Se-Met組)。試驗期130 d?；A(chǔ)飼糧以黃花魚、雞雜、雞骨架、膨化玉米等為主要原料，同時添加由礦物質(zhì)、維生素等組成的營養(yǎng)性添加劑制成，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平分別見表1和表2。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成(飼喂基礎(chǔ))

表2 基礎(chǔ)飼糧營養(yǎng)水平

試驗開始后每天飼喂2次，早上飼喂總量的40%，下午飼喂總量的60%，共300 g，并根據(jù)采食情況適當(dāng)調(diào)整。于2018年3月3日開始對水貂實施人工放對配種，采用“1+1+8”周期復(fù)配方式(即第1天初配、第2天連配、第9天復(fù)配的配種方式)。由專人記錄各組水貂配種、產(chǎn)仔及仔貂生長等數(shù)據(jù)。

1.2.2 樣品采集

選擇產(chǎn)仔日期接近的母貂及其后代，分別于2018年5月20日和2018年6月10日進(jìn)行采血。每組選取8只母貂，斷指采血4 mL于促凝管中，靜置待血清析出后4 500 r/min、4 ℃離心10 min，收集血清，置于-80 ℃冰箱中保存。從采血的8只母貂的后代中挑選2只雄性仔貂，斷指采血2 mL于促凝管中，血清析出方法及保存方式同母貂。

1.2.3 測定指標(biāo)及方法

飼糧粗蛋白質(zhì)含量采用全自動凱氏定氮儀(FOSS，美國)進(jìn)行測定，方法參照GB/T 6432—2018；粗脂肪含量采用脂肪提取儀(BUCHI，瑞士)進(jìn)行測定，方法參照GB/T 6433—2006；鈣含量采用乙二胺四乙酸(EDTA)絡(luò)合滴定法進(jìn)行測定，方法參照GB/T 6436—2018；磷含量采用釩鉬酸銨比色法測定，方法參照GB/T 6437—2018；硒含量采用原子熒光光度計(AFS-9130，北京)進(jìn)行測定，方法參照李明遠(yuǎn)[9]。

采用還原型谷胱甘肽(GSH)消耗法測定血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性，采用黃嘌呤氧化法測定血清總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性，采用硫代巴比妥酸法測定血清丙二醛(MDA)含量，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。血清活性氧(ROS)、甲狀腺素(T4)、三碘甲腺原氨酸(T3)、生長激素(GH)和胰島素樣生長因子-1(IGF-1)含量采用微孔板分光光度計(Biotek，美國)進(jìn)行測定，試劑盒購自上海雙贏生物科技有限公司。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2003進(jìn)行初步整理，采用SAS 8.0軟件中GLM程序進(jìn)行統(tǒng)計分析，多重比較采用Duncan氏法。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.01為差異極顯著，P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。

2 結(jié) 果

2.1 不同硒源對水貂繁殖性能及其后代生長性能的影響

由表3可知，Se-Met組和SY組仔貂21日齡體重顯著高于CN組(P<0.05)，但與SS組差異不顯著(P>0.05)；Se-Met組和SY組仔貂42日齡體重顯著高于CN組和SS組(P<0.05)。各組之間母貂窩產(chǎn)仔數(shù)及仔貂初生窩重、初生體重、7日齡體重、35日齡體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。

表3 不同硒源對水貂繁殖性能及其后代生長性能的影響

2.2 不同硒源對泌乳期水貂血清硒含量及抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，SY組母貂血清GSH-Px活性顯著高于CN組和SS組(P<0.05)，但與Se-Met組差異不顯著(P>0.05)；Se-Met組母貂血清ROS含量極顯著低于CN組和SS組(P<0.01)，但與SY組差異不顯著(P>0.05)。各組之間母貂血清T-SOD活性及硒、MDA含量無顯著差異(P>0.05)。

表4 不同硒源對泌乳期水貂血清硒含量及抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 不同硒源對斷奶水貂血清硒及抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，SY組和Se-Met組仔貂血清硒含量顯著高于CN組和SS組(P<0.05)；SY組和Se-Met組仔貂血清GSH-Px活性顯著高于CN組(P<0.05)，但與SS組差異不顯著(P>0.05)。各組之間仔貂血清T-SOD活性及MDA、ROS含量無顯著差異(P>0.05)。

表5 不同硒源對斷奶水貂血清硒及抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 不同硒源對斷奶水貂血清激素含量的影響

由表6可知，各組之間仔貂血清T3、T4、GH和IGF-1含量差異不顯著(P>0.05)。

表6 不同硒源對斷奶水貂血清激素含量的影響

3 討 論

3.1 不同硒源對雌性水貂繁殖性能及仔貂生長性能的影響

動物的繁殖性能主要受遺傳因素決定，但也受營養(yǎng)因素調(diào)控。硒作為抗氧化劑，能保護(hù)卵母細(xì)胞、著床前的胚胎以及卵巢組織免受氧化應(yīng)激的損傷，進(jìn)而改善雌性動物繁殖性能[10-11]。有關(guān)不同硒源對畜禽繁殖性能影響的報道眾多，但結(jié)論不一。本研究結(jié)果顯示，各組母貂窩產(chǎn)仔數(shù)以及仔貂初生窩重、初生體重差異不顯著，說明不同硒源對母貂繁殖性能無顯著影響，這與Ma等[12]在豬和Gunter等[13]在牛上的研究結(jié)果一致。這可能與動物種類和胎次有關(guān)。在醫(yī)學(xué)上的研究表明，相較于高胎次母親，初產(chǎn)母親機(jī)體氧化應(yīng)激水平低而臍帶血和血漿抗氧化能力高[14]。本試驗研究對象均為初產(chǎn)水貂，基礎(chǔ)飼糧中含有的硒和維生素E作為抗氧化劑可能滿足了母貂維持體內(nèi)氧化-抗氧化體系動態(tài)平衡的需要。

硒可通過胎盤和乳汁傳遞給后代，因此沉積到胚胎組織器官中的硒可通過影響后代的代謝來調(diào)節(jié)其生長發(fā)育。Hu等[4]研究表明，在妊娠后期和哺乳期母豬飼糧中補(bǔ)充硒代蛋氨酸可提高初乳和常乳中硒含量，進(jìn)而提高仔豬斷奶體重。本研究結(jié)果表明，母貂飼糧中添加酵母硒或硒代蛋氨酸均可顯著提高仔貂21和42日齡體重。水貂出生至21日齡以母乳為食，21日齡以后逐漸采食母貂飼糧。在奶牛上的研究顯示，補(bǔ)充有機(jī)硒可提高乳汁產(chǎn)量[15]。劉可園等[16]報道，硒可提高藍(lán)狐對飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的消化率。據(jù)此推測，飼糧中添加酵母硒或硒代蛋氨酸可能通過促進(jìn)母貂泌乳和仔貂對飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收而提高21～42日齡仔貂生長性能。具體原因還需通過試驗進(jìn)一步驗證。

3.2 不同硒源對泌乳期水貂血清硒及抗氧化指標(biāo)的影響

研究發(fā)現(xiàn)，不同硒源在動物腸道內(nèi)吸收方式不同。亞硒酸鈉等無機(jī)硒主要以被動擴(kuò)散形式在小腸內(nèi)被吸收，而酵母硒等有機(jī)硒可通過與蛋氨酸吸收類似的途徑被主動吸收[17]。相比于無機(jī)硒，有機(jī)硒中大部分硒可進(jìn)入肝臟中參與硒蛋白的合成，增加機(jī)體內(nèi)總硒的貯存量，進(jìn)而發(fā)揮其較強(qiáng)的抗氧化作用。Yoon等[18]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加酵母硒可提高妊娠期母豬血清硒含量。Payne等[19]在肉雞上的研究結(jié)果顯示，與亞硒酸鈉相比，飼糧中添加酵母硒可顯著提高血漿硒含量。本研究結(jié)果表明，飼糧中添加不同硒源對母貂血清硒含量無顯著影響，但與CN組相比，SY組和Se-Met組母貂血清硒含量分別提高了13.04%和17.39%，這與朱翱翔等[20]在育成期湖羊上的報道一致。有研究認(rèn)為，組織和血液中的硒可互相轉(zhuǎn)換，保證血液硒含量處于一種穩(wěn)態(tài)平衡。本試驗中，CN組母貂可能通過動用組織中沉積的硒來維持一定的血液硒含量，進(jìn)而導(dǎo)致各組母貂血清硒含量差異不顯著。GSH-Px是機(jī)體抗氧化系統(tǒng)中最重要的硒蛋白，可催化還原內(nèi)源性過氧化氫和羥自由基，從而減少血液中脂質(zhì)過氧化物及自由基含量。石磊等[21]在妊娠母羊上的研究表明，飼糧中添加酵母硒可顯著提高血液GSH-Px活性。Warken等[22]給圍產(chǎn)期奶牛肌肉注射亞硒酸鈉后發(fā)現(xiàn)，其血清ROS含量顯著下降。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與CN組相比，飼糧中添加酵母硒可顯著提高母貂血清GSH-Px活性，而添加硒代蛋氨酸可極顯著降低血清ROS含量。這一結(jié)果說明，飼糧中添加酵母硒或硒代蛋氨酸有利于提高泌乳期母貂機(jī)體抗氧化能力。

3.3 不同硒源對斷奶期水貂血清硒及抗氧化指標(biāo)的影響

母畜乳汁及飼糧中硒含量影響其后代硒的攝入與沉積，進(jìn)而影響機(jī)體抗氧化能力。Gunter等[13]在妊娠母牛上的研究發(fā)現(xiàn)，與亞硒酸鈉相比，飼糧中添加硒酵母可顯著提高犢牛出生時全血硒含量。在本試驗中，與CN組和SS組相比，飼糧中添加硒代蛋氨酸或酵母硒均可顯著提高斷奶仔貂血清硒含量，這與Yoon等[18]在仔豬上的研究結(jié)果一致。這可能是由于不同硒源經(jīng)母體轉(zhuǎn)運到后代的效率不同導(dǎo)致的。在仔豬上的研究表明，有機(jī)硒通過胎盤轉(zhuǎn)運給胎兒的效率比無機(jī)硒高，且有機(jī)硒通過乳腺轉(zhuǎn)運給后代的效率比無機(jī)硒高，因此胎兒及初生后代機(jī)體貯存的硒含量也高[23-24]。硒是GSH-Px活性中心的重要組成部分，體內(nèi)硒含量的高低決定了GSH-Px的活性，進(jìn)而影響機(jī)體抗氧化能力。高建忠等[25]研究了不同硒源對仔豬機(jī)體抗氧化能力的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)飼糧中添加硒可以顯著提高仔豬血液GSH-Px活性，而添加有機(jī)硒較添加無機(jī)硒效果更明顯。Mahan等[26]報道，仔豬飼糧中添加富硒酵母較亞硒酸鈉可以顯著提高血清GSH-Px活性。本研究結(jié)果與前人報道基本一致，說明飼糧中添加酵母硒或硒代蛋氨酸可顯著提高斷奶仔貂血清GSH-Px活性，進(jìn)而有利于提高機(jī)體抗氧化能力。

3.4 不同硒源對斷奶水貂血清激素含量的影響

硒對甲狀腺激素的調(diào)控作用主要是通過硒酶表現(xiàn)出來的。研究表明，脫碘酶Ⅰ結(jié)構(gòu)中含有硒酶，而脫碘酶Ⅰ可催化T4脫碘轉(zhuǎn)變?yōu)樯飳W(xué)活性強(qiáng)的T3[27]。T3是調(diào)節(jié)戊核磷酸循環(huán)酶因素之一，不僅能調(diào)節(jié)脂肪酸代謝和蛋白質(zhì)合成，還能調(diào)控胰島素和GH的mRNA表達(dá)。硒缺乏會導(dǎo)致脫碘酶活性降低，減少T3的生成量，降低機(jī)體GH和IGF-1含量，使動物生長發(fā)育受阻。李星[28]研究表明，母豬妊娠后期和泌乳期飼糧中添加有機(jī)硒比添加無機(jī)硒提高了斷奶仔豬血清T3含量，降低了血清T4含量。石磊[29]研究結(jié)果表明，給圍術(shù)期羊補(bǔ)充適量硒可以提高血清GH含量。然而在本試驗中，飼糧中添加不同硒源對斷奶仔貂血清T3、T4、GH及IGF-1含量均無顯著影響。

4 結(jié) 論

飼糧中添加不同硒源對母貂繁殖性能無顯著影響；與亞硒酸鈉相比，飼糧中添加酵母硒或硒代蛋氨酸可提高母貂及其后代抗氧化能力，促進(jìn)21～42日齡仔貂生長。