應(yīng)俊杰， 應(yīng)錚崢， 沈穎， 吳曉燕， 吳世軍， 張建斌*

(1.仙居縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，浙江 仙居 317300； 2.浙江省植保檢疫與農(nóng)藥管理總站，浙江 杭州 310020；3.上海盛谷光電科技有限公司，上海 松江 201607)

楊梅[Myricarubra(Lour.)S. et Zucc.]是楊梅目楊梅科常綠果樹，原產(chǎn)于中國東南部，是浙江省最主要的特色經(jīng)濟(jì)作物之一，其果實(shí)可食用部分為高度肉質(zhì)化的外果皮，呈乳頭狀密集排列，天然裸露，富含糖分和汁水，風(fēng)味獨(dú)特，深受消費(fèi)者喜愛。仙居縣位于浙江省東南山區(qū)，屬亞熱帶季風(fēng)氣候，日照充足，土壤有機(jī)質(zhì)含量高，酸堿度適中，楊梅生產(chǎn)環(huán)境得天獨(dú)厚，全縣楊梅種植面積9 200 hm2，年產(chǎn)量7.5萬 t[1]，為中國楊梅種植第一大縣，有“中國楊梅之鄉(xiāng)”之稱。仙居楊梅一二三產(chǎn)融合聯(lián)動發(fā)展，年度總產(chǎn)值超過10億元[1]，對促進(jìn)鄉(xiāng)村振興和實(shí)現(xiàn)共同富裕有著重要意義，先后榮獲國家地理標(biāo)志產(chǎn)品、原產(chǎn)地保護(hù)標(biāo)記注冊證書及中國馳名商標(biāo)，并成功創(chuàng)建全國綠色食品原料(楊梅)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)基地[2]，仙居楊梅觀光帶被評為中國美麗田園。

果蠅是雙翅目果蠅科約1 000余種昆蟲的統(tǒng)稱，其成蟲體型較小，身長3～4 mm，分布廣泛。危害浙江省楊梅的主要有黑腹果蠅(D.melanogaster)、斑翅果蠅(D.suzukii)、擬果蠅(D.simulans)、高橋氏果蠅(D.takahashii)、伊米果蠅(D.immigrans)和黑果蠅(D.virile)等6種[3]。果蠅世代歷期短、繁殖能力強(qiáng)，對成熟水果的酸香味趨性明顯，雌成蟲可將卵產(chǎn)在即將成熟的楊梅果實(shí)表面，幼蟲孵化后再鉆蛀取食果肉，造成果汁外溢，引起果肉軟化以至變褐腐爛，誘發(fā)落果，還能傳播灰腐病和褐腐病等病菌，嚴(yán)重影響楊梅的產(chǎn)量、品質(zhì)以及保質(zhì)期，對晚熟品種和高山楊梅的影響更加嚴(yán)重，有些楊梅主產(chǎn)區(qū)的被害果率高達(dá)60%以上[4]，是楊梅成熟采摘期最主要的害蟲，也是楊梅產(chǎn)業(yè)發(fā)展中的一個重要制約因素。為提高楊梅品質(zhì)，科學(xué)防控楊梅果蠅，仙居縣自2015年開始實(shí)施全縣整建制楊梅統(tǒng)防統(tǒng)治工作，從源頭保障楊梅質(zhì)量安全。截至2021年8月已登記用于防治楊梅果蠅的農(nóng)藥只有乙基多殺菌素和伊維菌素2種制劑，長期連續(xù)使用容易使果蠅產(chǎn)生抗藥性。為尋求更多防治楊梅果蠅的高效、低毒、低殘留安全農(nóng)藥，探索以菌治蟲的生物防治技術(shù)，促進(jìn)統(tǒng)防統(tǒng)治與綠色防控融合，2021年5—6月進(jìn)行了鎮(zhèn)江市潤宇生物科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)的短穩(wěn)桿菌懸浮劑防治楊梅果蠅田間藥效小區(qū)試驗(yàn)，以明確該藥劑對楊梅果蠅的防治效果、適宜濃度以及對楊梅的安全性等[5]。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)地點(diǎn)A選擇在仙居縣福音果業(yè)專業(yè)合作社(浙江省仙居縣福應(yīng)街道中橋頭村)楊梅基地，土壤為洪積砂性壤土，地力等級為4，有機(jī)質(zhì)含量27.4 g·kg-1，全氮含量1.10 g·kg-1，有效磷含量0.24 g·kg-1，速效鉀含量0.29 g·kg-1，pH 5.2，供試品種為15～16 a生東魁楊梅盛結(jié)果樹。試驗(yàn)地點(diǎn)B選擇在仙居縣果悅種植專業(yè)合作社(浙江省仙居縣皤灘鄉(xiāng)板橋村)楊梅基地，土壤為紅粉泥砂壤土，地力等級為5，有機(jī)質(zhì)含量16.8 g·kg-1，全氮含量0.78 g·kg-1，有效磷含量0.02 g·kg-1，速效鉀含量0.10 g·kg-1，pH 5.2，供試品種為7～8 a生東魁楊梅初結(jié)果樹。

兩處試驗(yàn)地點(diǎn)分別位于仙居縣東部和西部楊梅主產(chǎn)區(qū)，具有一定的區(qū)域代表性，同一基地內(nèi)楊梅植株大小、長勢以及肥水管理等農(nóng)事操作措施基本一致，具有較好的可重復(fù)性。2個基地歷年都有楊梅果蠅發(fā)生為害，具備楊梅果蠅防治試驗(yàn)的基礎(chǔ)。

供試藥劑為100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑，由鎮(zhèn)江市潤宇生物科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)；對照藥劑為60 g·L-1乙基多殺菌素懸浮劑，由科迪華農(nóng)業(yè)科技有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

1.2 處理設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)5個處理：處理1，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑1 000倍液(1.00×107·mL-1)；處理2，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑800倍液(1.25×107·mL-1)；處理3，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑600倍液(1.67×107·mL-1)；處理4，60 g·L-1乙基多殺菌素懸浮劑2 000倍液(30 mg·kg-1)；處理5，清水對照。每個處理4次重復(fù)，共20個小區(qū)。每個小區(qū)為4株楊梅樹，面積約133.3 m2(以300株·hm-2計(jì))。各小區(qū)采用隨機(jī)區(qū)組排列，小區(qū)間設(shè)保護(hù)行。

1.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)采用葉面噴施的方法，間隔7 d連續(xù)2次施藥。由于100億·mL-1短穩(wěn)桿菌為活體細(xì)菌農(nóng)藥，為避免殺菌劑干擾，試驗(yàn)期間不同時(shí)使用任何殺菌劑。首次施藥時(shí)間為5月29日(楊梅采前半個月左右，果實(shí)開始進(jìn)入轉(zhuǎn)色期)，晴，西南風(fēng)1～2級，19～27 ℃，藥后48 h無雨；第二次施藥時(shí)間為6月5日，晴轉(zhuǎn)多云，東南風(fēng)3～4級，17～29 ℃，藥后48 h無雨。施藥器械采用臺州富士特 FST-769背負(fù)式動力噴霧機(jī)(工作壓力1.5～2.5 MPa、容量25 L)，對樹冠和果實(shí)均勻常量噴霧，以葉片正反面、果實(shí)和枝條表面潤濕為標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 調(diào)查項(xiàng)目

分別在第二次施藥后7 d(6月12日，小雨，24～31 ℃，楊梅采摘初期)和14 d(6月19日，小到中雨轉(zhuǎn)小雨，23～32 ℃，楊梅采摘末期)各調(diào)查1次存活的果蠅幼蟲數(shù)。在每棵調(diào)查樹的樹冠四周及內(nèi)膛的中上部隨機(jī)摘取果實(shí)10個，共計(jì)40個，當(dāng)天用75%乙醇浸泡20 min后調(diào)查各果實(shí)存活的幼蟲數(shù)，計(jì)算蟲果率和防治效果。同時(shí)，觀察記錄施藥后供試藥劑對楊梅葉片、枝梢、果實(shí)及樹勢等是否有安全性影響。

藥效計(jì)算方法：蟲果率=蟲果數(shù)/調(diào)查總果數(shù)×100%；防效=(對照區(qū)蟲果率-處理區(qū)蟲果率)/對照區(qū)蟲果率×100%。

1.5 數(shù)據(jù)分析與處理

采用Excel 2003記錄、整理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，并繪制蟲口數(shù)和蟲果率圖表。數(shù)據(jù)不作轉(zhuǎn)換，采用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的Duncan′s新復(fù)極差法對不同處理的果蠅防效進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和比較[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 安全性

在本次試驗(yàn)條件下，整個試驗(yàn)期間供試藥劑處理后對楊梅葉片、枝梢、果實(shí)及樹勢等均無不良影響，安全性較高。

2.2 防治效果

從圖1來看，A、B 2個試驗(yàn)地點(diǎn)的試驗(yàn)結(jié)果基本吻合，其中試驗(yàn)地點(diǎn)A的蟲口基數(shù)較小，與綜合使用了黏蟲色板和食源引誘劑有關(guān)。試驗(yàn)結(jié)果表明，各處理施藥后7和14 d楊梅果蠅蟲口數(shù)量和蟲果率均極顯著區(qū)別于清水對照，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑對楊梅果蠅具有較好的預(yù)防控制效果，其效果隨藥劑濃度增加而上升。

圖1 不同處理對楊梅果蠅蟲口數(shù)和蟲果率的影響

從表1可知，施藥后7 d，處理B1防效僅80.0%，顯著低于處理A1，極顯著低于其他各處理，說明100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑 1 000倍液對楊梅果蠅的短期防效已趨向不穩(wěn)定，在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)當(dāng)加大劑量使用；施藥后14 d，處理A3和B3防效與處理A4和B4無顯著性差異，說明100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑600倍液與60 g·L-1乙基多殺菌素懸浮劑2 000倍液防效相當(dāng)，可以在楊梅生產(chǎn)中作為替代、輪換藥劑使用；處理B2防效顯著低于處理B4，但與處理A4無顯著性差異，處理A2顯著低于處理A4，極顯著低于處理B3和B4，說明100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑800倍液對楊梅果蠅的長期防效趨向不穩(wěn)定，為保證長期防效應(yīng)適當(dāng)加大劑量。

表1 不同處理對楊梅果蠅防效的影響

3 小結(jié)與討論

100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑是一種從解剖罹病死亡的害蟲尸體中分離提取的Empedobacterbrevis菌株經(jīng)過三級發(fā)酵法制造而成的新型細(xì)菌型微生物殺蟲劑[7]，由鎮(zhèn)江市潤宇生物科技開發(fā)有限公司創(chuàng)制。短穩(wěn)桿菌經(jīng)害蟲取食進(jìn)入消化道，損傷中腸組織細(xì)胞，并轉(zhuǎn)移到體腔和血淋巴而感染殺死害蟲，與其他微生物殺蟲劑具有相似的毒殺機(jī)理[8]。目前短穩(wěn)桿菌懸浮劑已在茶樹、棉花、十字花科蔬菜、水稻、煙草、芋頭6種作物上登記，用于防治茶尺蠖、棉鈴蟲、小菜蛾、斜紋夜蛾、稻縱卷葉螟、煙青蟲等鱗翅目害蟲，對草地貪夜蛾也有一定防效[9-10]。近年來，有研究表明，短穩(wěn)桿菌對美洲斑潛蠅[11]、水稻潛葉蠅[12]等雙翅目害蟲也有較為理想的防治效果。武海斌等[13]試驗(yàn)結(jié)果表明，100億·mL-1短穩(wěn)桿菌懸浮劑對櫻桃果蠅防治效果達(dá)87.4%～92.3%，與本試驗(yàn)結(jié)果基本相符，在實(shí)際生產(chǎn)中建議使用600倍液樹冠噴施來替代、輪換乙基多殺菌素等藥劑使用，延緩果蠅抗藥性的產(chǎn)生。同時(shí)，短穩(wěn)桿菌在一定范圍內(nèi)與茚蟲威[14]、綠僵菌[15]等其他殺蟲劑復(fù)配具有很高的增效活性，可以擴(kuò)大防治譜、提升速效性和持效性，值得進(jìn)一步研究討論。此外，短穩(wěn)桿菌被列入食品中農(nóng)藥最大殘留限量豁免名單[16]，具有較高的安全性，值得進(jìn)一步研究其適當(dāng)推遲使用對楊梅果蠅是否有更好的預(yù)防控制效果；其生產(chǎn)原料以奶粉和食用糖為主，產(chǎn)品施用無化學(xué)殘留，不會對環(huán)境造成污染。綜上所述，短穩(wěn)桿菌具有高效、安全、環(huán)境友好等特點(diǎn)，適用于楊梅果園防治果蠅，并能兼治楊梅卷葉蛾、蓑蛾、尺蠖等鱗翅目害蟲，可以在實(shí)際生產(chǎn)上應(yīng)用，再結(jié)合果園生草栽培、懸掛色板和食誘劑誘殺、撿拾落果等綠色防控措施[17]，能夠有效減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量，延緩害蟲抗藥性的產(chǎn)生，提升農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。

但是短穩(wěn)桿菌等活菌型生物農(nóng)藥相對于傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥在使用方法上有更高的要求，在推廣應(yīng)用的過程中必須更加注重操作規(guī)范，否則容易造成農(nóng)業(yè)生產(chǎn)事故。一方面應(yīng)注意施藥時(shí)的天氣，楊梅成熟前的高溫高濕天氣雖然有助于提高短穩(wěn)桿菌的藥效[18]，但是施藥后如遭遇暴曬、強(qiáng)降雨等天氣則會對藥效產(chǎn)生負(fù)面影響，施藥應(yīng)選擇在清晨、傍晚或陰天白天進(jìn)行；另一方面不可與防治細(xì)菌性病害的藥劑和強(qiáng)酸堿性物質(zhì)混用，而楊梅成熟前必須同時(shí)防治白腐病等掛果期病害[19-20]，如果混配吡唑醚菌酯等在實(shí)際生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用的廣譜型殺菌劑則容易導(dǎo)致藥效降低甚至失效；另外應(yīng)慎用植保無人機(jī)，雖然機(jī)器換人的輕簡化模式是未來植保的發(fā)展趨勢[21]，但目前低空低量施藥技術(shù)對活菌型生物農(nóng)藥的影響缺乏研究，需要謹(jǐn)慎對待；此外，還需進(jìn)一步關(guān)注生物農(nóng)藥對人體健康、害蟲天敵等方面的影響，有研究表明，短穩(wěn)桿菌會對鱗翅目害蟲的寄生型天敵斑痣懸繭蜂(Meteoruspulchricornis)造成一定影響[22-25]。