熊 鷹，劉 麗，胡曉靜，孟懷書，羅 霞

近年來卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)發(fā)病率呈逐年上升趨勢，相關研究顯示，POF發(fā)病率為1.92%，發(fā)病人群集中于生育期女性，月經(jīng)不規(guī)律、閉經(jīng)、絕經(jīng)是此類患者常有的臨床表現(xiàn)，給患者心理、精神造成重大不良影響[1-2]。目前，臨床上對POF并無有效便捷的診斷手段，多依靠患者的臨床表現(xiàn)進行評估，無法準確診斷，從而影響治療，導致患者預后情況差[3]。尋找合適的指標對POF的預后進行有效評估，具有重要臨床意義。抗苗勒管激素(AMH)為評價卵巢儲備功能的敏感性指標，可對卵泡生長發(fā)育起到調(diào)節(jié)控制作用[4]。近年來有報道顯示，細胞免疫及免疫細胞分泌的細胞因子可參與POF發(fā)生發(fā)展[5]。已有報道表明，淋巴細胞亞群的改變可促進POF進展，但臨床中對于相關細胞因子的研究并不全面[6]。本文通過對比POF患者與健康人群的AMH、干擾素-γ(IFN-γ)、白細胞介素-2(IL-2)水平差異，分析AMH、IFN-γ、IL-2檢測在POF診斷以及病情評估中的應用價值，旨在為POF診療提供新思路，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年2月—2020年3月重慶市江津區(qū)婦幼保健院收治的POF 109例為POF組，病程0.5～5.0(2.26±1.22)年；年齡24～38(30.95±2.26)歲。①納入標準：符合POF診斷標準[7]：年齡≤40歲絕經(jīng)者，血清雌二醇(E2)水平低下、卵泡刺激素(FSH)>40 U/L、泌乳素水平正常，內(nèi)外生殖器第二性征明顯退化，合并圍絕經(jīng)期綜合征癥狀；臨床資料完整；均知曉同意本次研究，并簽署同意書。②排除標準：合并生殖器官腫瘤者；合并嚴重心血管疾病者；存在卵巢手術史者；合并子宮內(nèi)膜增生、多囊卵巢綜合征等疾病者。另選取同期在本院進行健康體檢月經(jīng)周期正常女性100例為對照組，年齡23～38(30.21±2.14)歲。2組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 所有入選者在月經(jīng)周期前，抽取晨起外周靜脈血液標本，使用離心機以3000 r/min離心10 min，獲取上清液，保存待測。IFN-γ、IL-2均使用放射免疫法檢測，試劑購自比利時M EDGEN IX公司，AMH使用酶聯(lián)免疫吸附試驗進行檢測；黃體生成素(LH)、FSH、E2使用化學發(fā)光法進行檢測，試劑盒均購自貝克曼庫爾特商貿(mào)(中國)有限公司。竇狀卵泡(AFC)數(shù)目檢測：在月經(jīng)周期第3天進行陰道超聲檢查，檢測AFC直徑，統(tǒng)計直徑0.2～1.0 cm的AFC數(shù)目。

1.3觀察指標 ①比較POF組與對照組AMH、IFN-γ、IL-2水平。②比較POF組與對照組性激素水平及AFC數(shù)目。③分析AMH、IFN-γ、IL-2與性激素及AFC的相關性。④分析AMH、IFN-γ聯(lián)合IL-2檢測對POF的診斷價值。

2 結果

2.1POF組與對照組AMH、IFN-γ、IL-2水平比較 POF組IFN-γ水平明顯高于對照組，AMH、IL-2水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表1。

表1 POF組與對照組AMH、IFN-γ、IL-2水平比較

2.2POF組與對照組性激素水平及AFC數(shù)目比較 POF組LH、FSH水平明顯高于對照組，E2水平明顯低于對照組，AFC數(shù)目明顯少于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表2。

表2 POF組與對照組性激素水平及AFC數(shù)目比較

2.3POF患者AMH、IFN-γ、IL-2與性激素、AFC的相關性 POF患者AMH、IL-2與LH、FSH呈負相關，與E2、AFC呈正相關(P<0.05，P<0.01)；IFN-γ與LH、FSH呈正相關，與E2、AFC呈負相關(P<0.05，P<0.01)。見表3。

表3 POF患者AMH、IFN-γ、IL-2與性激素、AFC的相關性分析

2.4AMH、IFN-γ、IL-2檢測對POF的診斷價值 依據(jù)ROC曲線分析可知，AMH、IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測診斷POF敏感度和特異度分別為96.32%、80.41%，曲線下面積為0.874(95%CI：0.785，0.963)，明顯高于三者單獨檢測。見表4及圖1。

表4 AMH、IFN-γ、IL-2檢測對POF的診斷價值分析

圖1 AMH、IFN-γ、IL-2檢測診斷POF的ROC曲線

3 討論

AMH是由胚胎中初級卵泡的顆粒細胞分泌，隨著年齡增加，AMH水平逐漸下降，絕經(jīng)后AMH消失[8]。有實驗研究發(fā)現(xiàn)，建立POF大鼠模型后，對其進行激素治療，在此過程中發(fā)現(xiàn)AMH的分泌水平并未改變，但大鼠的FSH、LH水平下調(diào)，E2水平升高[9]。提示外源性激素并不會對AMH的分泌造成影響，相比其他性激素而言，即使處于月經(jīng)周期AMH的波動也極小，因此使用AMH評估卵巢功能的敏感度較高[10]。有學者研究發(fā)現(xiàn)，在POF患者中AMH、E2表達水平明顯降低，而FSH、LH表達水平則呈明顯上調(diào)的趨勢，提示在常規(guī)性激素指標未能診斷POF時，AMH已提示卵巢功能衰退[11]。本研究結果也表明，在POF患者中AMH水平明顯降低，與上述研究結果相符。

本研究中POF患者的IFN-γ水平明顯高于對照組，而IL-2水平則明顯低于對照組，與以往研究結果相符[12]。還有研究結果證明，自身免疫功能異常也可導致POF發(fā)生，Zp3致敏的特異性T淋巴細胞可導致卵巢損傷，而在受損卵巢中IFN-γ、腫瘤壞死因子-α、IL-1β等mRNA表達水平可明顯升高[13]。有研究發(fā)現(xiàn)，IFN-γ、IL-2與抗卵巢抗體效價有高度相關性，IFN-γ與IL-2之間也存在高度相關性[14]。在正常情況下卵泡從基礎卵泡發(fā)展成為成熟卵泡，再到排卵、閉鎖，在此過程中細胞因子均完全參與，可利用內(nèi)分泌、旁分泌或是自分泌來實現(xiàn)調(diào)控[15]。

LIU等[16]研究發(fā)現(xiàn)，IFN-γ導致某些細胞因子被激活，引發(fā)了卵泡閉鎖的現(xiàn)象。如果機體免疫功能異常，CD4+ T淋巴細胞會被卵巢的抗原激活，隨著其細胞數(shù)量不斷地增加，可直接作用于B淋巴細胞導致免疫球蛋白分泌，以及細胞的生殖、分化從而誘導多種殺傷細胞激活，最終導致卵巢抗原靶細胞(顆粒細胞、黃體細胞、生產(chǎn)甾體激素細胞以及卵細胞)的凋亡、損傷[17-18]。卵巢過度損傷后，會引起卵泡過度閉鎖進而出現(xiàn)排卵障礙，最終導致POF發(fā)生或引起不孕。AFC數(shù)目對POF卵巢功能的診斷也具有較高敏感度和特異度，在POF患者中AFC數(shù)目明顯減少。通過相關性分析可知，POF患者AMH、IL-2與LH、FSH呈負相關，與E2、AFC呈正相關；IFN-γ與LH、FSH呈正相關，與E2、AFC呈負相關。提示AMH、IFN-γ、IL-2對卵巢功能評估具有一定參考價值。進一步行ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，AMH、IFN-γ、IL-2均可為POF臨床診斷提供參考，三者聯(lián)合檢測診斷POF的敏感度和特異度分別為96.32%、80.41%，曲線下面積為0.874(95%CI：0.785，0.963)，提示三者聯(lián)合能有效提高診斷效能。

綜上所述，AMH、IFN-γ、IL-2可反映POF患者的卵巢儲備功能，三者聯(lián)合檢測對POF的早期診斷及嚴重程度評估具有重要參考價值。