孫紅崗 何麗欽 夏穎

甲狀腺癌是起源于甲狀腺濾泡上皮的一種惡性腫瘤，是頭頸部最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率呈逐年上升趨勢[1]。最常用的治療方法為手術(shù)切除，但有部分晚期患者容易復(fù)發(fā)，因而早期診斷具有重要的意義。目前，尚沒有針對甲狀腺癌診斷的特異性標志物。SOX2 在肝癌、惡性黑色素瘤、乳腺癌的發(fā)生發(fā)展都有密切的關(guān)系[2～4]，但在甲狀腺癌中鮮有報道。本次研究旨在分析SOX2 在甲狀腺癌診斷治療中的應(yīng)用價值?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2018 年1 月至2021 年12 月期間紹興市人民醫(yī)院行甲狀腺切除的確診為甲狀腺癌150 例患者為腫瘤組，其中男性71 例、女性79 例；平均年齡（43.62±4.85）歲；收集本院同期經(jīng)病理確診的甲狀腺良性疾病患者30 例為良性組，其中男性18 例、女性12 例；平均年齡（48.32±3.68）歲。兩組的性別與年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。本次研究通過醫(yī)院倫理委員會審批同意，且患者均簽署生物樣本研究同意書。

1.2 方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbnent assay，ELISA）測定兩組的血清SOX2 水平。采用免疫組化的方法檢測兩組的SOX2 陽性表達，取5 cm3的組織切成4 mm片，42 ℃恒溫箱中烘烤過夜；二甲苯脫蠟，100%乙醇浸泡，水化，在甲醇中與過氧化氫孵育消除內(nèi)源性過氧化物酶活性的作用，抗原修復(fù)液修復(fù)抗原磷酸鹽緩沖興中孵育1 h 以封閉蛋白。SOX2 抗體用含1%胎牛血清和5%山羊血清的溶液按1∶100 稀釋，4 ℃過夜；用免疫組化法檢測結(jié)合抗體，顯色，蘇木精復(fù)染。SOX2 的表達強度根據(jù)染色深度分為4 級：無染色者為陰性（-）、淺黃色者為弱陽性（+）、棕黃色者為中等度陽性（++）、棕褐色者為強陽性（+++）。+～+++為SOX2陽性標本，以此計算其陽性表達率。

同時通過醫(yī)院內(nèi)部數(shù)據(jù)庫收集腫瘤組患者的術(shù)前甲狀腺球蛋白（thyroglobulin，TG）、促甲狀腺激素受體抗體（thyroid stimulating hormone receptor antibody，TRAb）檢測數(shù)據(jù)，臨界值按照試劑說明書TG＞8 ng/ml，TRAb＞5 mg/ml判讀為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 16.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)±標準差（）表示。組間計量資料比較采用t檢驗；計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic，ROC）分析SOX2、TG 和TRAb 對甲狀腺癌的診斷價值。設(shè)P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清中SOX2水平及陽性率比較見表1

表1 兩組血清中SOX2水平及陽性率比較

由表1可見，腫瘤組血清中的SOX2水平及陽性率均高于良性組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t=3.21，χ2=36.11，P均＜0.05）。

2.2 血清SOX2、TG、TRAb 診斷甲狀原癌的ROC 曲線分析見圖1

由圖1可見，發(fā)現(xiàn)SOX2診斷甲狀腺癌的臨界值為31.95 pg/ml，診斷的曲線下面積為0.79（95%CI0.70～0.87）；同時，血清TG 和TRAb 對甲狀腺癌的診斷的曲線下面積分別為0.52（95%CI0.41～0.64）和0.69（95%CI0.58～0.79）。

圖1 血清SOX2、TG、TRAb診斷甲狀腺癌的ROC曲線

3 討論

腫瘤干細胞又稱腫瘤啟動細胞，是一群具有自我更新能力和多能性的惡性腫瘤細胞亞群[5]。腫瘤干細胞具有干細胞的許多特征，腫瘤干細胞與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移、耐藥都有重要關(guān)系[6,7]，通過促進腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移導(dǎo)致患者預(yù)后不良。多能轉(zhuǎn)錄因子（SOX2、Nanog、c-Myc 和Oct4）參與轉(zhuǎn)錄腫瘤干細胞自我更新[8,9]。Tsunedomi 等[10]研究發(fā)現(xiàn)SOX2 是誘導(dǎo)多功能干細胞重要的轉(zhuǎn)錄因子。SOX2在腫瘤的發(fā)展和腫瘤干細胞的調(diào)節(jié)中起著重要作用。

由于甲狀腺癌缺乏有效的診斷治療檢測標志物，傳統(tǒng)的細針穿刺有創(chuàng)檢測患者不容易接受，還有造成癌組織播散的風(fēng)險。近年許多研究都表明腫瘤干細胞與腫瘤微環(huán)境與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系，因此，找出甲狀腺癌干細胞中的關(guān)鍵標志物與甲狀腺癌診斷轉(zhuǎn)移的關(guān)系，對治療和預(yù)后具有很重要的意義。

本次研究從腫瘤干細胞標志物SOX2 的角度入手，在組織與血清中研究SOX2 對于甲狀腺癌的影響，揭示其在甲狀腺癌診斷治療中的作用。本次研究結(jié)果顯示，腫瘤組患者血清中的SOX2 水平及陽性率均高于良性組（P均＜0.05），表明甲狀腺癌組織中SOX2 的表達明顯強于良性組織，由此推斷SOX2可能是由甲狀腺癌組織分泌入血，提供血清學(xué)診斷的依據(jù)。并且可能與腫瘤進展有關(guān)系，對于判斷甲狀腺癌分期及組織切除是否完全、復(fù)發(fā)有一定的意義。

目前，臨床上沒有診斷甲狀腺癌的特異性指標。一般情況下應(yīng)用TG[11]、TRAb[12]作為甲狀腺癌檢測的非特異性指標。本次研究結(jié)果顯示，SOX2診斷甲狀腺癌的臨界值為31.95 pg/ml，曲線下面積為0.79（95%CI0.70～0.87），而TG、TRAb 診斷甲狀腺癌的曲線下面積分別為0.52（95%CI0.41～0.64）和0.69（95%CI0.58～0.79）。由此可見，SOX2 的診斷效能更具有優(yōu)勢，具有診斷甲狀腺癌的意義。

綜上所述，SOX2 在甲狀腺癌血清中的表達升高，SOX2 對甲狀腺癌診斷效能較高，血清中SOX2有可能可以作為甲狀腺癌診斷及檢測預(yù)后的一個指標。本次研究由于樣本數(shù)量的限制還具有一定的局限性，以后將繼續(xù)聯(lián)合多中心以更多的樣本數(shù)量，以及與臨床分期相關(guān)性等做進一步研究。