劉莉 戈春城 黃婧

牙周炎是以牙周組織的進(jìn)行性破壞為特點的一種疾病，據(jù)統(tǒng)計95%的牙周炎患者為慢性牙周炎［1］。慢性牙周炎在臨床上主要表現(xiàn)為附著喪失、牙周支持組織喪失等癥狀，嚴(yán)重影響著患者的日常生活。臨床試驗證實牙菌斑微生物感染是引發(fā)牙周炎的主要原因［2］。相關(guān)臨床實驗發(fā)現(xiàn)，慢性牙周炎患者的牙袋中存在約108個細(xì)菌，是導(dǎo)致患者機(jī)體出現(xiàn)免疫反應(yīng)、產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子的重要原因［3-4］。目前對慢性牙周炎的治療以消除菌斑微生物為基礎(chǔ)，雖取得一定的臨床效果，但有部分患者在牙周袋過深等多因素的影響下，菌斑沒有辦法清除完全，容易引起疾病復(fù)發(fā)［5］。隨著對牙周病的不斷深入認(rèn)知，臨床發(fā)現(xiàn)患者齦溝液中一些細(xì)胞因子能夠反映牙周組織的炎癥狀況，可作為慢性牙周炎早期診斷的重要分子標(biāo)志物［6］。對此，本文就慢性牙周炎患者齦溝液中白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、干擾素γ（Interferon γ，IFN-γ）及白介素-35（Interleukin-35，IL-35）的表達(dá)與臨床意義進(jìn)行研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

分析2018年4月至2021年4月于恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院就診的126 例慢性牙周炎患者的病歷資料，并歸為研究組。其中男66 例，女60 例；平均年齡（37.02±4.48）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①均確診為慢性牙周炎［7］；②在本院治療，且病歷資料及隨訪資料完整無缺損；③1年內(nèi)未接受任何牙周治療；④近一個月內(nèi)未接受抗生素治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有血液系統(tǒng)或傳染性疾病者；②存在惡性腫瘤疾病；③心、肺、肝、腎等功能異常者；④合并精神疾病或認(rèn)知障礙者；⑤明顯錯頜畸形者；⑥處于特殊時期的女性，如：妊娠期、哺乳期或生理期。

另納入同期于本院體檢的101 名健康人群，歸為對照組，其中男56 名，女45 名；平均年齡（38.12±5.18）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。本研究已通過院倫理委員批準(zhǔn)同意，受試者已簽署知情同意書。

1.2 方法

收集患者臨床資料，包括性別、年齡、BMI、糖尿病病史及牙齦出血等。

IL-35、IL-1β 及IFN-γ 檢測方法：首先，選取受檢者4 個象限的牙齒（以第一磨牙為主）的頰側(cè)近中或遠(yuǎn)中位點作為受試點，注意牙齒頸部需要無缺損及充填體；使用無菌棉球?qū)⑹茉囇赖难烂婕把例l擦拭干燥，氣槍吹干，棉卷隔濕。于受試牙的齦溝或牙周袋內(nèi)插入30 號吸潮紙尖，遇到輕阻力時停止，靜置30 s 后拿出，立即存入200 mL PBS 緩沖液的試管中密封，于-80℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫法檢測所有受檢者齦溝液中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 水平，試劑盒購自欣博盛生物科技有限公司，嚴(yán)格遵循說明書操作。參考值：IL-35＞8.59 pg/mL，IL-1β＞12.50 ng/mL，IFN-γ＞3.22 pg/mL，為異常升高［8］。

1.3 隨訪

研究組患者出院后隨訪6 個月（隨訪截止日期：2021年10月），按照預(yù)后判斷標(biāo)準(zhǔn)將患者分為預(yù)后良好組（無附著喪失等癥狀）與預(yù)后不良組（附著喪失1～2 mm，牙周袋深度＞4 mm）［9］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以（±s）描述，行t檢驗；采用Logistic 回歸模型分析影響慢性牙周炎患者預(yù)后的相關(guān)危險因素；采用ROC 曲線分析檢測IL-35、IL-1β 及IFN-γ水平對慢性牙周炎的預(yù)測價值；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平比較

研究組患者的IL-35、IL-1β及IFN-γ表達(dá)水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ between the 2 groups（±s）

表1 兩組IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ between the 2 groups（±s）

組別研究組對照組t 值P 值n 126 101 IL-35（pg/mL）11.76±5.37 5.16±2.16 11.617＜0.001 IL-1β（ng/mL）23.10±5.86 6.78±2.54 26.085＜0.001 IFN-γ（pg/mL）3.34±0.86 2.33±0.78 9.162＜0.001

2.2 不同預(yù)后患者中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平比較

隨訪結(jié)束，預(yù)后良好患者88 例。預(yù)后良好組患者的IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平均低于預(yù)后不良組（P＜0.05）。見表2。

表2 不同預(yù)后患者中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平比較（±s）Table 2 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ in patients with different prognosis（±s）

表2 不同預(yù)后患者中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平比較（±s）Table 2 Comparison of the expression levels of IL-35，IL-1β and IFN-γ in patients with different prognosis（±s）

組別預(yù)后良好組預(yù)后不良組t 值P 值n 88 38 IL-35（pg/mL）10.26±3.22 15.23±4.85 6.772＜0.001 IL-1β（ng/mL）16.26±5.48 38.95±6.48 20.166＜0.001 IFN-γ（pg/mL）2.98±0.88 4.16±0.77 7.163＜0.001

2.3 影響慢性牙周炎患者預(yù)后的相關(guān)因素分析

吸煙史、牙齦出血、糖尿病、齦下菌斑、IL-35、IL-1β 及IFN-γ 水平升高為影慢性牙周炎患者預(yù)后的獨立危險因素（P＜0.05）。見表3。

表3 影響慢性牙周炎患者預(yù)后的相關(guān)因素分析Table 3 Analysis of related factors affecting the prognosis of patients with chronic periodontitis

2.4 IL-35、IL-1β 及IFN-γ 檢測對慢性牙周炎不良預(yù)后的預(yù)測價值

IL-35、IL-1β 及IFN-γ 三者聯(lián)合曲線下面積為0.979，大于三者單獨檢測（P＜0.05）。見表4、圖1。

表4 IL-35、IL-1β 及IFN-γ 檢測對慢性牙周炎不良預(yù)后的預(yù)測價值Table 4 The predictive value of IL-35，IL-1β and IFN-γ levels in chronic periodontitis

圖1 預(yù)測價值曲線圖Figure 1 The predictive value

3 討論

慢性牙周炎是臨床上常見的慢性口腔感染性疾病，作為一個持續(xù)性的炎性反應(yīng)，容易在患者緩解期及急性發(fā)作期間反復(fù)交替，最終導(dǎo)致牙槽骨吸收、牙齦出血等并發(fā)癥，對患者的身心健康造成嚴(yán)重影響［10］。既往研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α、IL-6 作為炎癥介導(dǎo)的活性細(xì)胞因子，在慢性牙周炎患者齦溝液中水平高于健康口腔志愿者，說明兩者與牙周病的發(fā)生具有密切關(guān)系［11］。除TNF-α、IL-6 與牙周炎發(fā)生關(guān)系緊密外，牙周炎炎性反應(yīng)發(fā)作時，牙周袋中的微生物或脂多糖等分泌物會通過受損上皮進(jìn)入患者的血液系統(tǒng)，從而引起單核巨噬細(xì)胞活化，釋放出IL-35、IL-1β、IFN-γ 等炎性因子［12］。越來越多相關(guān)研究證實，在牙周組織的破壞機(jī)制中，細(xì)胞因子具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用及直接介導(dǎo)作用［13］。

IL-35 作為一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的抗炎因子，由調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞分泌，能夠促進(jìn)抑制性T 細(xì)胞的分泌，調(diào)節(jié)全身免疫狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體處于炎癥狀態(tài)時，IL-35 呈現(xiàn)高水平表達(dá)［14］。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，慢性牙周炎及侵襲性牙周炎患者的牙齦組織中IL-35濃度明顯高于健康人群［15］。IL-1β 是一種特異性急性期炎性指標(biāo)，具有促進(jìn)黏附分子和趨化性細(xì)胞因子產(chǎn)生的作用，不但能促進(jìn)造血細(xì)胞和淋巴細(xì)胞增殖活化，還會導(dǎo)致其他炎性因子表達(dá)和釋放［16-17］。相關(guān)文獻(xiàn)顯示，慢性牙周炎患者齦溝液中IL-1β 水平顯著高于正常健康人群，且以濃度依賴方式抑制牙周膜細(xì)胞的增殖，參與了牙周炎的發(fā)展［18］。IFN-γ 為Th1 細(xì)胞的中心細(xì)胞因子，臨床試驗發(fā)現(xiàn)，IFN-γ 具有抑制骨吸收的特性，能夠減少破骨細(xì)胞的分化及骨吸收量［19］。在牙周炎中，IFN-γ具有刺激巨噬細(xì)胞并減弱其活性的作用，以抑制根尖免疫炎癥反應(yīng)，IFN-γ 也可誘導(dǎo)根尖周組織產(chǎn)生其他炎性因子等加速根尖的組織破壞［20］。本文研究結(jié)果顯示，慢性牙周炎患者齦溝液中IL-35、IL-1β 及IFN-γ 表達(dá)水平均高于健康人群，該變化在預(yù)后不良患者中更為顯著，提示三者的高水平變化與慢性牙周炎的發(fā)病具有一定聯(lián)系。

進(jìn)一步研究結(jié)果顯示，吸煙史、牙齦出血、糖尿病、齦下菌斑、IL-35、IL-1β 及IFN-γ 水平升高是影響慢性牙周炎預(yù)后的獨立危險因素。由此可見，影響慢性牙周炎患者預(yù)后的因素多種多樣，針對影響患者預(yù)后的因素采取針對性處理手段，對疾病后續(xù)的治療具有積極意義。ROC 曲線結(jié)果顯示，IL-35、IL-1β 及IFN-γ 三者聯(lián)合曲線下面積為0.979，大于三者單獨檢測。由此可見，IL-35、IL-1β、IFN-γ 三者聯(lián)合檢測對慢性牙周炎患者預(yù)后情況的評價具有較高準(zhǔn)確性，可作為預(yù)測慢性牙周炎患者預(yù)后評估的標(biāo)志物。

綜上所述，慢性牙周炎患者齦溝液中IL-35、IL-1β、IFN-γ 水平異常升高，聯(lián)合檢測對慢性牙周炎的診斷具有意義。