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        基于1T-WS2@AuNPs復(fù)合材料的白蕓豆酯酶電化學(xué)生物傳感器構(gòu)建及其殺螟硫磷檢測應(yīng)用

        2022-10-09 01:58:02田運霞吳遠根石啟麗
        食品科學(xué) 2022年18期
        關(guān)鍵詞:檢測

        田運霞,吳遠根,王 嘯,季 春,石啟麗,陶 菡,*

        (1.貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院,貴州省發(fā)酵工程與生物制藥重點實驗室,貴州 貴陽 550025;2.貴州大學(xué)藥學(xué)院,貴州 貴陽 550025)

        作為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中使用最廣泛的農(nóng)藥,有機磷農(nóng)藥(organophosphorus pesticides,OPPs)在保護農(nóng)作物免受蟲害和提高農(nóng)作物產(chǎn)量方面發(fā)揮著重要作用。不幸的是,由于它在世界范圍內(nèi)的濫用,對水、土壤甚至農(nóng)產(chǎn)品造成了嚴重的污染。OPPs進入人體內(nèi)會引起乙酰膽堿酯酶活性的不可逆抑制,進而導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)的紊亂,甚至威脅生命。因此,開發(fā)一種靈敏、快速、可靠和經(jīng)濟的方法檢測OPPs相當(dāng)重要。但大多數(shù)農(nóng)藥殘留檢測方法是依賴于大型儀器的實驗室分析技術(shù),這些方法靈敏、準確,可用于高通量檢測,但通常需要復(fù)雜的樣品預(yù)處理步驟和較長的分析時間,需要訓(xùn)練有素的操作員。更重要的是,這些儀器價格昂貴,攜帶不方便。這些缺點嚴重限制其廣泛應(yīng)用。相比之下,電化學(xué)傳感檢測技術(shù)具操作簡單、檢測迅速、靈敏度高、成本低等優(yōu)點,非常適合于OPPs殘留的簡便快捷、靈敏可靠檢測。

        酶抑制法具有檢測原理簡單、無需大型儀器且易操作等優(yōu)點,是目前最常用的OPPs快速檢測方法。應(yīng)用在農(nóng)藥殘留檢測的酶絕大部分是從動物體內(nèi)分離純化得到的膽堿酯酶。膽堿酯酶提取步驟繁瑣、價格高昂,極大地增加了檢測成本。有研究發(fā)現(xiàn),植物酯酶對OPPs具有與膽堿酯酶相似的敏感性,其酶活性也可被OPPs抑制,從而可應(yīng)用于酶抑制法農(nóng)藥殘留檢測。此外,植物酯酶廣泛存在于植物中,具有提取方法簡單,成本低且易于保存的優(yōu)勢。因此,以植物酯酶替代膽堿酯酶進行OPPs檢測具有可行性和良好的開發(fā)應(yīng)用價值。

        隨著納米技術(shù)的飛速發(fā)展,納米材料因其獨特的光、電、催化等特性而被廣泛應(yīng)用于新型高效生物傳感器的開發(fā)。在眾多納米材料中,過渡金屬硫族化合物因其比表面積大、優(yōu)良的電導(dǎo)率和催化性能而受到人們廣泛關(guān)注和重視。二硫化鎢(WS)是一種典型的過渡金屬硫族化合物,具有不同電子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的兩相,分別是1T金屬相和2H半導(dǎo)體相。研究表明,1TWS具有更高的電導(dǎo)率、更強的電荷轉(zhuǎn)移能力和更高的催化活性位點密度,適合構(gòu)建酶基電化學(xué)生物傳感器。納米金(AuNPs)因其良好的生物相容性而被廣泛用于固定化生物分子以構(gòu)建生物傳感器,并且AuNPs可以促進電子在電極表面和固定化生物分子活性位點之間的傳遞,通過信號放大提高生物傳感器的靈敏度。此外,AuNPs與1T-WS同時用于構(gòu)建傳感平臺可實現(xiàn)信號的協(xié)同放大,進一步提高傳感器的電化學(xué)性能。然而,目前鮮見利用1T-WS構(gòu)建植物酯酶基電化學(xué)傳感平臺的相關(guān)研究。

        本研究構(gòu)建來源于白蕓豆的植物酯酶基電化學(xué)生物傳感器,利用1T-WS@AuNPs納米復(fù)合材料優(yōu)異的理化性能增敏傳感信號,并對其農(nóng)藥檢測性能和實際應(yīng)用性能進行評價。殺螟硫磷檢測原理如圖1所示,蕓豆酯酶(KbE)催化水解底物1-乙酸萘酯(1-naphthyl acetate,1-NA)產(chǎn)生電化學(xué)活性物質(zhì)1-萘酚,當(dāng)體系中存在農(nóng)藥殺螟硫磷時,KbE活性會被抑制,導(dǎo)致1-萘酚的產(chǎn)生減少,相應(yīng)的電化學(xué)響應(yīng)信號也會降低,從而實現(xiàn)殺螟硫磷的定量檢測。

        圖1 電化學(xué)生物傳感器檢測原理示意圖Fig. 1 Schematic illustration of detection principle for the electrochemical biosensor

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        白蕓豆、白菜、油菜 貴陽花溪永輝超市;氯化鎢、硫代乙酰胺、,-二甲基甲酰胺、聚二烯丙基二甲基氯化銨、氯金酸 上海阿拉丁試劑有限公司;殼聚糖(chitosan,CS)(純度90.0%) 北京索萊寶科技有限公司;1-NA、殺螟硫磷標準品 西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;AlO打磨粉 上海辰華有限公司。若無特殊說明,實驗用水均為超純水(電阻率18 MΩ·cm),所用試劑均為分析純及以上。

        1.2 儀器與設(shè)備

        CHI660E電化學(xué)工作站 上海辰華儀器有限公司;A-10超純水儀 美國Milipore公司;SB-5200 DTD超聲清洗機 寧波新芝生物科技股份有限公司;S-3400N透射電子顯微鏡(transmission electron microscope,TEM)、SU8010掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope,SEM) 日本日立公司;3K18離心機德國Sigma公司;ESCALAB 250Xi X射線光電子能譜儀(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)、DXRxi顯微拉曼成像光譜儀 美國賽默飛世爾科技公司。

        1.3 方法

        1.3.1 KbE的分離純化

        參照Bao Jing和Yang Limin等的方法,白蕓豆洗凈晾干后粉碎,稱取適量白蕓豆粉,按照1∶5(g/mL)比例加入蒸餾水,攪拌30 min,4 ℃浸提過夜,5 000 r/min離心10 min取上清液,即得到KbE粗酶液。采用兩步雙水相萃取法對KbE粗酶液進行純化,在聚乙二醇(PEG 1000)與NaHPO組成的雙水相體系中萃取2~3 h后,棄下相,加入(NH)SO進行第二步萃取,2~3 h后收集下相進行透析處理,最后冷凍干燥得到KbE粉末。

        1.3.2 AuNPs的制備

        參照Das等的方法并稍作修改。將100 mL超純水加熱至沸騰,在劇烈攪拌下迅速加入1 000 μL質(zhì)量分數(shù)4%聚二烯丙基二甲基氯化銨溶液、800 μL 0.5 mol/L NaOH溶液和400 μL 10 mg/mL的HAuCl溶液。并在劇烈攪拌下持續(xù)加熱,直至溶液顏色變成酒紅色并不再改變,停止加熱,繼續(xù)攪拌直至溶液冷卻至室溫。將所得AuNPs溶液裝于棕色試劑瓶中,置于4 ℃冰箱保存。

        1.3.3 水熱法制備1T-WS

        將0.793 2 g的氯化鎢和1.502 6 g硫代乙酰胺溶于60 mL,-二甲基甲酰胺,攪拌溶解1 h,超聲溶解1 h。將上述溶液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)釜中,200 ℃高溫下反應(yīng)24 h。反應(yīng)終止后冷卻至室溫,用無水乙醇和超純水多次洗滌黑色產(chǎn)物,5 000 r/min離心10 min后收集產(chǎn)物,將產(chǎn)物在真空下50 ℃干燥12 h,得到1T-WS納米片。

        1.3.4 1T-WS@AuNPs納米復(fù)合物的制備

        稱取適量1T-WS納米片分散于超純水中,超聲分散30 min,得到1 mg/mL 1T-WS分散液。將1T-WS分散液與AuNPs溶液按一定體積比混合,超聲分散使其充分混勻,得到1T-WS@AuNP納米復(fù)合物的分散液。

        1.3.5 納米材料的表征

        在最優(yōu)制備條件下,對1T-WS@AuNPs納米復(fù)合物及1T-WS納米片進行表征。用SEM和TEM表征樣品的微觀形貌和結(jié)構(gòu),圖像采集的加速電壓為10 kV和200 kV。用XPS確定樣品的元素組成、元素的化學(xué)價態(tài)以及相的構(gòu)成,以Al靶(1 486.6 eV)作為激發(fā)光源。用拉曼光譜對樣品的結(jié)構(gòu)進行鑒定,激發(fā)波長為532 nm。

        1.3.6 修飾電極的制備

        對玻碳電極(glassy carbon electrode,GCE)進行預(yù)處理,在含有AlO料漿的拋光絨布上打磨數(shù)次,依次在丙酮、無水乙醇和超純水中進行超聲清洗,活化后備用。采用滴涂法制備CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極,在潔凈的GCE表面滴涂一定體積的1T-WS@AuNP納米復(fù)合物分散液,在紅外燈下烘干后,滴加一定體積的KbE,室溫干燥后在其表面均勻覆蓋一層質(zhì)量分數(shù)為0.25%的CS,干燥后得到CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極。其他修飾電極按照類似方法進行制備,所有酶電極于4 ℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

        1.3.7 修飾電極電化學(xué)特性測定

        以GCE為工作電極,鉑絲電極和Ag/AgCl電極分別為對電極和參比電極,在CHI660E電化學(xué)工作站上完成電化學(xué)測試。采用循環(huán)伏安法(cyclic voltammetry,CV)和電化學(xué)交流阻抗譜(electrochemical impedance spectroscopy,EIS)分別對經(jīng)最優(yōu)制備條件得到的裸電極(GCE)、1T-WS/GCE、1T-WS@AuNPs/GCE和CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極進行測定,以表征傳感器組裝過程。5 mmol/L K[Fe(CN)]/K[Fe(CN)](1∶1,/)為電解質(zhì)溶液,CV測試電壓范圍為-0.4~0.5 V,掃描速率100 mV/s;EIS測試采用相同的電解質(zhì)溶液,頻率范圍為1~100 kHz,振幅5 mV。

        1.3.8 修飾電極的催化性能測定

        將三電極系統(tǒng)浸入含5 mmol/L 1-NA的0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液反應(yīng)體系中,采用方波伏安法(square wave voltammetry,SWV)在最優(yōu)條件下測定CS/KbE/GCE、CS/KbE/AuNPs/GCE、CS/KbE/1T-WS/GCE、CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE對1-萘酚的響應(yīng)電流值。SWV測試電壓范圍為-0.1~0.6 V,振幅25 mV,頻率為15 Hz。

        1.3.9 CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極制備及測試條件的優(yōu)化

        采用SWV分別考察磷酸鹽緩沖液pH值(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0)、1T-WS與AuNPs體積比(0∶1、1∶0、1∶1、2∶1、3∶1)、1T-WS@AuNPs負載體積(6~18 μL)、KbE負載量(0.032~0.23 U)以及農(nóng)藥抑制時間(5~25 min)對響應(yīng)電流的影響,優(yōu)化電極制備參數(shù)。

        1.3.10 CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極的重復(fù)性、穩(wěn)定性及抗干擾性測試

        在最優(yōu)制備條件下,同一批制備5 支修飾電極,并在最優(yōu)測試條件下分別對同濃度1-NA(5 mmol/L)進行SWV測試。

        1.3.11 殺螟硫磷的檢測

        在最佳條件下,將所構(gòu)建CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE用于殺螟硫磷的檢測。將CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE浸入含一定濃度底物(1-NA)的0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液中,進行SWV掃描,得到電流響應(yīng)。電極清洗后,將電極浸入不同濃度的殺螟硫磷標準液中孵化15 min,再次將其浸入含同濃度底物(1-NA)的0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液中,進行SWV掃描得到電流響應(yīng)。

        根據(jù)下式計算農(nóng)藥對酶的抑制率:

        式中:為初始電流值;為農(nóng)藥抑制后電流值。

        根據(jù)酶抑制率與殺螟硫磷質(zhì)量濃度呈正比的線性關(guān)系,以峰電流值為縱坐標、殺螟硫磷質(zhì)量濃度為橫坐標構(gòu)建標準曲線,其中殺螟硫磷質(zhì)量濃度設(shè)置為0.1、1、10 100、200、500、1 000、2 000 μg/L。

        1.3.12 CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極的實際樣品及回收率測試

        根據(jù)Kumar等的方法稍作修改,將油菜和白菜清洗凈晾干后,切碎備用。取2 g油菜樣品或白菜樣品于10 mL 0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液中,攪拌10 min混勻,8 000 r/min離心10 min,收集上清液備用。

        在上清液中分別添加不同質(zhì)量濃度的殺螟硫磷(5、100、1 000 μg/L)進行實際樣品分析,每組實驗平行測定3 次?;谒鶚?gòu)建的標準曲線計算實際樣品體系中的殺螟硫磷含量,考察檢測體系對實際樣品的加標回收率和相對標準偏差。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        通過Excel統(tǒng)計并分析實驗數(shù)據(jù),利用Origin 9.0軟件繪圖。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 納米材料的表征分析

        由圖2A可知,1T-WS呈片狀,并且1T-WS納米片組成了具有大量孔隙的空間結(jié)構(gòu)且結(jié)構(gòu)分布均一。這些空隙一方面能夠增加1T-WS的比表面積,為酶的附著提供更多位點;另一方面也為酶促反應(yīng)提供了足夠的反應(yīng)環(huán)境,促進反應(yīng)的進行。圖2B表明,AuNPs是均勻的球形顆粒,平均粒徑為13.5 nm,且較為均勻地附著在1T-WS的片狀表面。

        由圖2C可知,1T-WS納米片中含有鎢、硫、氮等元素。從圖2D可知,與2H-WS相比(軟件擬合所得),1T-WS對應(yīng)的峰向低結(jié)合能處偏移了約0.5 eV。同樣,硫元素2p高分辨率譜圖(圖2E)也表現(xiàn)出相似的趨勢,以上峰結(jié)合能的變化與相關(guān)文獻報道一致,表明本實驗制備的1T-WS納米片中,1T相占主導(dǎo)地位。為進一步確定1T相的存在,采用拉曼光譜對1T-WS納米片的結(jié)構(gòu)進行了鑒定。如圖2F所示,在347 cm和411 cm處有兩個明顯的特征峰,分別對應(yīng)于WS中面內(nèi)(E)和層間(A)兩種分子振動模式。此外,在低頻區(qū)域出現(xiàn)了幾個新的峰,這文獻報道一致,表明1T-WS制備成功,這與XPS的表征結(jié)果也相對應(yīng)。

        圖2 1T-WS2及1T-WS2@AuNPs納米材料的表征Fig. 2 Characterization of 1T-WS2 and 1T-WS2@AuNPs nanomaterials

        2.2 不同修飾電極的電化學(xué)特性分析

        如圖3A所示,4 種電極均出現(xiàn)一對氧化還原峰。與裸電極相比,1T-WS/GCE修飾電極上的氧化和還原峰電流明顯增大;同時,峰電位差從裸電極的173 mV減小到138 mV,這歸因于1T-WS的高導(dǎo)電性。與AuNPs復(fù)合后,F(xiàn)e/Fe電對的氧化和還原電流值進一步增大且峰電位差減小至103 mV,表明1T-WS@AuNPs修飾電極具有更優(yōu)異的電化學(xué)性能,這與AuNPs良好的導(dǎo)電性有關(guān);因此將AuNPs引入1T-WS可以進一步提高電極的導(dǎo)電性,從而加速電子的傳遞。由于KbE和CS為不導(dǎo)電的生物分子,阻礙了電子的傳遞,所以觀察到CS/KbE/1TWS@AuNPs/GCE修飾電極上的氧化還原電流下降且峰電位差增加。

        進一步研究不同修飾電極的電化學(xué)特性,如圖3B所示,每條曲線都是由高頻區(qū)的一個半圓與低頻區(qū)的一條直線組成,其中高頻區(qū)的半圓直徑大小反映了電極的電荷轉(zhuǎn)移電阻大小。1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極的半圓直徑最小,即電荷轉(zhuǎn)移電阻最小,表明1T-WS@AuNPs具有優(yōu)異的電子轉(zhuǎn)移能力。隨著KbE和CS的進一步修飾固定,半圓直徑明顯增大,CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE的電子轉(zhuǎn)移能力最差。上述結(jié)果與CV測試結(jié)果一致,同時表明CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE生物傳感器被成功構(gòu)建。

        圖3 不同修飾電極的CV圖(A)及EIS圖(B)Fig. 3 CV curves (A) and Nyquist plots (B) of different modified electrodes

        2.3 不同修飾電極的催化性能分析

        由圖4可知,在不含1-NA的磷酸鹽緩沖液中,CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極的SWV曲線平滑,無峰電流響應(yīng)產(chǎn)生;加入1-NA后,出現(xiàn)一個明顯的氧化峰,說明此峰是由KbE水解1-NA生成的1-萘酚在電極上被電化學(xué)氧化而產(chǎn)生。以上結(jié)果表明KbE被成功固定在電極上并保持其生物活性。此外,相比于CS/KbE/GCE電極,CS/KbE/1T-WS/GCE、CS/KbE/AuNPs/GCE、CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE修飾電極上所產(chǎn)生的氧化峰電流增大且出峰電位減小。結(jié)果表明1T-WS@AuNPs良好的導(dǎo)電性和協(xié)同電催化效應(yīng)有效促進電子的傳遞,從而增強1-萘酚的氧化電流信號,該信號的增強有助于提高傳感器的響應(yīng)靈敏度。

        圖4 不同修飾電極的SWV響應(yīng)曲線圖Fig. 4 SWV response curves of different modified electrodes

        2.4 CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE修飾電極制備及測試條件優(yōu)化

        2.4.1 底液pH值的影響

        如圖5A所示,隨著pH值的增大,電流響應(yīng)先增大后減小,在pH 7.0處具有最高電流響應(yīng)。因此pH 7.0為最優(yōu)pH值,后續(xù)實驗使用pH 7.0的磷酸鹽緩沖液。

        圖5 不同制備條件及測試條件對SWV響應(yīng)電流及抑制率的影響Fig. 5 Effects of different preparation and test conditions on SWV response current and inhibition rate

        2.4.2 1T-WS與AuNPs體積比和1T-WS@AuNPs負載體積的影響

        電極修飾材料的組成會影響生物傳感器的電化學(xué)性能。如圖5B所示,1T-WS與AuNPs的最佳體積比為1∶1。適量的納米材料修飾到電極上可以增大電極的比表面積,促進電極與電活性物質(zhì)之間的電子轉(zhuǎn)移。如圖5C所示,當(dāng)1T-WS@AuNPs負載體積從6 μL增加到12 μL,峰電流隨負載體積增加而增大,于12 μL時達到最大;當(dāng)負載體積進一步增加,峰電流值逐漸下降,這可能因為過厚的膜會阻礙電子傳遞。因此,選擇12 μL作為1T-WS@AuNPs納米復(fù)合物的最佳負載體積。

        2.4.3 負載的KbE酶活力的影響

        作為傳感器的生物識別元件,負載的KbE酶活力對響應(yīng)信號的影響較大。如圖5D所示,隨著負載的KbE酶活力的增加,傳感器的響應(yīng)電流值變大,在0.13 U時達到最大值;繼續(xù)增加負載的KbE酶活力,峰電流值略有下降,這是因為KbE是蛋白酶,導(dǎo)電性很差,過量的酶會阻礙電子在傳感器表面的傳遞。因此,0.13 U為負載的最佳酶活力。

        2.4.4 農(nóng)藥抑制時間的影響

        農(nóng)藥抑制時間的長短會影響檢測的準確性。從圖5E可以看出,隨抑制時間延長,酶活性下降越多,導(dǎo)致生成的1-萘酚越少,抑制率上升;當(dāng)抑制時間超過15 min時,由于酶活性位點與農(nóng)藥的飽和結(jié)合,酶的抑制程度也趨于穩(wěn)定。因此,以15 min作為最佳抑制時間。

        2.5 CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE傳感器殺螟硫磷的標準曲線

        圖6A表明CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE傳感器的峰電流值整體隨著殺螟硫磷質(zhì)量濃度的增加而減小,農(nóng)藥對酶活性的抑制逐漸增強。由圖6B可知,在0.1~2 000 μg/L范圍內(nèi),抑制率與殺螟硫磷質(zhì)量濃度(lg)呈良好的線性關(guān)系,其線性標準方程為=14.82lg+24.18,相關(guān)系數(shù)()為0.992,檢出限為0.04 μg/L(信噪比為3)。將CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE傳感器與已報道的其他檢測方法進行比較(表1),結(jié)果表明本研究構(gòu)建的傳感器具有較寬的線性區(qū)間和檢出限;此外,還具有制備簡單、成本低等優(yōu)點。說明將植物酯酶替代來源于動物的膽堿酯酶進行農(nóng)藥的高效檢測切實可行,具有進一步開發(fā)應(yīng)用的價值。

        圖6 不同質(zhì)量濃度殺螟硫磷抑制后的SWV曲線圖(A)及殺螟硫磷質(zhì)量濃度與抑制率的線性關(guān)系圖(B)Fig. 6 SWV curves in the presence of different concentrations of fenitrothion (A), and linear relationship between KbE inhibition rate and fenitrothion concentration (B)

        表1 殺螟硫磷檢測方法的比較Table 1 Comparison of different methods for fenitrothion detection

        2.6 CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE傳感器重復(fù)性、穩(wěn)定性和抗干擾能力分析

        同一批制備5 支修飾電極,分別對同濃度1-NA進行SWV測試,峰電流值相對標準偏差為4.83%。在相同測試條件下,對同一支修飾電極進行連續(xù)5 次SWV測試,峰電流值相對標準偏差為3.96%。不用時將傳感器置于4 ℃冰箱貯存,分別測試貯存15 d和30 d的SWV響應(yīng),電流響應(yīng)下降為初始電流的95.9%和80.9%。結(jié)果表明所制備的CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE傳感器具有良好的重復(fù)性和貯存穩(wěn)定性。

        圖7 各干擾物對CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE傳感器響應(yīng)信號的影響Fig. 7 Effects of interfering substances on the response signal of CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE sensor

        2.7 CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE傳感器在實際樣品中應(yīng)用分析

        為了評估所建CS/KbE/1T-WS@AuNPs/GCE傳感器在實際樣品中的應(yīng)用,將其用于白菜、油菜的加標回收檢測,每組實驗平行測定3 次。如表2所示,回收率為96.16%~109.60%,相對標準偏差小于5%,表明該生物傳感器具有良好的實用性,有望應(yīng)用于實際樣品中OPPs的檢測。

        表2 CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE傳感器在實際樣品中殺螟硫磷檢測Table 2 Rsults of fenitrothion detection in real samples with CS/KbE/1T-WS2@AuNPs/GCE sensor

        3 結(jié) 論

        制備了具有良好電催化活性的1T-WS@AuNPs納米復(fù)合物,并以KbE代替乙酰膽堿酯酶構(gòu)建新型電化學(xué)生物傳感器,將其用于殺螟硫磷的簡便、高效檢測。SEM和TEM表征結(jié)果表明1T-WS@AuNPs納米復(fù)合物具有大比表面積,可為酶的負載提供良好的微環(huán)境,同時電化學(xué)表征表明1T-WS@AuNPs具有良好的導(dǎo)電性和協(xié)同電催化效應(yīng)可以有效促進電子的傳遞,提高傳感器的響應(yīng)靈敏度。與傳統(tǒng)分析方法相比,該電化學(xué)傳感器成本低、制備簡單、靈敏度高,在OPPs檢測中具有潛在的應(yīng)用價值,并為植物酯酶在農(nóng)藥殘留檢測方面的應(yīng)用提供一定理論和技術(shù)基礎(chǔ)。

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