羅文峰，陳金峰，陳坤進(jìn)

(重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院，重慶 400067)

松針是松科松屬植物的葉，別名松毛，是可持續(xù)利用的再生資源，且國(guó)內(nèi)松針儲(chǔ)備量非常龐大，不受季節(jié)影響，來(lái)源廣泛。松針含有揮發(fā)油類(lèi)、氨基酸類(lèi)、黃酮類(lèi)、木脂素類(lèi)、莽草酸等化學(xué)成分，具有一定殺菌抑菌和抗氧化的功效[1-3]。例如松針對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和啤酒酵母都有一定的抑菌活性[4]，能抑制飼料青貯中霉菌的生長(zhǎng)，增加青貯飼料的安全性[5]。其中黃酮類(lèi)物質(zhì)對(duì)金黃色葡萄球菌等食品腐敗細(xì)菌具有很強(qiáng)的抑制作用[6]；松針多糖對(duì)大腸桿菌和枯草芽孢桿菌有較好的抑菌效果[7]；松針精油具有抑菌、抗氧化和抗癌等多種生理功效[8-9]，松針還能抗單純皰疹病毒和抗乙型肝炎病毒[10]。松針作為一味中藥，具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)咳、鎮(zhèn)痛、解熱、抗炎等作用，增強(qiáng)免疫力，調(diào)節(jié)血脂、抗衰老、抗疲勞，抗腫瘤等功能[11-13]，對(duì)帕金森病具有輔助改善的作用[14]。松針揮發(fā)油含有人體必需的氨基酸和多種活性成分[15]，松汁制備的枸杞黃酒醇香協(xié)調(diào)，營(yíng)養(yǎng)豐富[16]。松針?lè)厶砑釉陲暳现薪o禽類(lèi)提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[17]，還可以利用松汁黃酮對(duì)果蔬進(jìn)行保鮮[18]。但松針在日用化學(xué)品工業(yè)中的應(yīng)用尚未報(bào)道，也限制松針的應(yīng)用范圍。試驗(yàn)以松針提取液為抑菌活性劑制備一款新型的天然抑菌洗手液，通過(guò)感官指標(biāo)篩選出最佳洗手液配方，并對(duì)最佳工藝配方的洗手液進(jìn)行抑菌試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 松針提取液的制備和供試菌種

以重慶南山馬尾松松針為材料，洗凈，置于45 ℃烘箱中，烘制8 h，剪刀剪至1～2 cm。稱(chēng)取30 g的松針于1000 mL圓底燒瓶中，向燒瓶中加入50%乙醇溶液600 mL，浸泡24 h，冷凝回流8 h，靜置24 h，取上層清液。

大腸桿菌(Escherichiacoli)和藤黃八疊球菌(Sarcinalutea)由本實(shí)驗(yàn)室保存，其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 洗手液的制備工藝

按照表1的配方制備松針洗手液的，具體操作步驟為：(1)把適量的瓊脂粉加入80 mL蒸餾水中加熱溶解；(2)加入羧甲基纖維素鈉，把混合液在50 ℃條件下進(jìn)行磁力攪拌30 min；(3)依次加入十二烷基硫酸鈉、乙氧基化烷基硫酸鈉、丙三醇、三乙酸甘油酯、單辛酸甘油酯和上述的松針提取液，在50 ℃條件下磁力攪拌1 h；(4)用pH=4的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液調(diào)pH，用蒸餾水定容到100 mL，磁力攪拌2 h，使其充分混合均勻；(5)把混合液超聲30 min，靜置24 h，裝瓶備用。

表1 松針洗手液的配方

1.3 感官檢測(cè)指標(biāo)

感官評(píng)價(jià)由10名評(píng)價(jià)員組成試用小組，試用成員男女各5位，年齡均在20～30歲。皮膚狀況為：2人為干性膚質(zhì)，4人為油性膚質(zhì)，4人為混合型膚質(zhì)。試用前將涂抹少量洗手液在每位試用者的手背上，觀察是否存在過(guò)敏現(xiàn)象。試用小組人員將對(duì)氣味、泡沫、沖洗程度、滋潤(rùn)度進(jìn)行評(píng)價(jià)，每項(xiàng)分值最高分為25分，如表2所示。

表2 松針洗手液感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1.4 理化指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 起泡性能的測(cè)定

依據(jù)迎春花洗手液檢測(cè)方法[19]對(duì)松針洗手液起泡性進(jìn)行測(cè)定測(cè)定。

1.4.2 粘度測(cè)試

準(zhǔn)備好被測(cè)試樣，倒入500 mL的燒杯或平底容器中，測(cè)量溫度控制25 ℃左右，旋轉(zhuǎn)升降鈕將轉(zhuǎn)子緩慢浸入被測(cè)洗手液中，直至轉(zhuǎn)子上液面標(biāo)記線(xiàn)與被測(cè)溶液液面相平，調(diào)整轉(zhuǎn)速為6 rpm/min進(jìn)行洗手液粘度的測(cè)定。

1.4.3 穩(wěn)定性測(cè)定

依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB34855-2017對(duì)松針洗手液進(jìn)行穩(wěn)定性測(cè)定，具體方法為：將洗手液樣品分為2份，一份放入40 ℃的烘箱中，放置24 h，取出放置室溫后，觀察樣品是否出現(xiàn)懸浮物或沉淀，有無(wú)分層現(xiàn)象，顏色、味道有無(wú)出現(xiàn)顯著變化；另一份樣品放入-3 ℃的冰箱中24 h，取出放至室溫后，觀察時(shí)候有懸浮物或沉淀，分層現(xiàn)象，顏色、味道有無(wú)顯著變化。

1.5 抑菌試驗(yàn)

將洗手液溶于石油醚，裝在滅菌試管中，吸取100 μL濃度為OD600=0.5的大腸桿菌和藤黃八疊球菌菌液在LB固體培養(yǎng)基中涂布均勻。用打孔器截取直徑為6 mm 的滅菌濾紙片放入稀釋液浸泡10 min，然后把濾紙片分散貼于培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿貼4片，每組重復(fù)3次，放置37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18 h。用卡尺測(cè)量出抑菌圈的直徑，測(cè)量3次取其平均值，并記錄數(shù)據(jù)，比較其抑菌效果。

2 結(jié)果與分析

2.1 松針洗手液正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3 松針洗手液正交試驗(yàn)結(jié)果

從表3的松針洗手液正交試驗(yàn)結(jié)果可以看出，A>B>C，即對(duì)松針洗手性能影響最大的因素是松汁的添加量，其次是瓊脂粉添加量，pH值影響最小。松針洗手液的最優(yōu)組合為A3B2C2，即松汁的添加量為9.0%，pH值為6.5，瓊脂粉的添加量為1.0%。為了驗(yàn)證最優(yōu)組合，我們根據(jù)最佳因素進(jìn)行組合試驗(yàn)，結(jié)果顯示最優(yōu)組合的感官評(píng)價(jià)為93分，高于試驗(yàn)中的各組感官指標(biāo)。試用者使用最佳組合的洗手液后，均反映洗手液去污能力強(qiáng)，泡沫適中，易于沖洗，洗后皮膚柔和、細(xì)膩無(wú)刺激感，表明洗手液具有去污護(hù)膚功效。同時(shí)，松針洗手液聞起來(lái)有淡淡的松汁特有的清香，且香氣在手上停留時(shí)間較長(zhǎng)。

2.2 洗手液理化性質(zhì)測(cè)定

表4 松針洗手液的指標(biāo)

對(duì)最佳組合洗手液的理化性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果如表4所示。最佳組合的松針洗手液的起泡高度為(255.4±5.89)mm，粘度為(866.3±9.8)mPa·s，均符合洗手液的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。松針洗手液經(jīng)過(guò)穩(wěn)定性測(cè)試試驗(yàn)顯示，樣品未出現(xiàn)懸浮物或沉淀，無(wú)分層現(xiàn)象，顏色、味道也沒(méi)有出現(xiàn)顯著變化，說(shuō)明最佳組合的松針洗手液具有良好的穩(wěn)定性。

2.3 松針洗手液抑菌效果

我們以最優(yōu)組合為樣品，以不添加松汁的樣品，市場(chǎng)售賣(mài)的A洗手液和B洗手液為對(duì)照進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)。表5結(jié)果顯示，松針洗手液對(duì)大腸桿菌和藤黃八疊球菌和的抑菌效果均強(qiáng)于A洗手液和B洗手液，抑菌圈直徑分別達(dá)到(46.2±1.7)mm和(33.4±2.2)mm，顯著高于對(duì)照樣品。無(wú)松汁添加的洗手液有輕微的抑菌作用，而稀釋洗手液的溶劑石油醚沒(méi)有抑菌作用。

表5 松針洗手液的抑菌效果

3 結(jié) 論

松針不僅具有獨(dú)特的松油清香和令人愉悅的黃綠色，而且含有揮發(fā)油和黃酮類(lèi)物質(zhì)等抑菌活性物。本試驗(yàn)所制備的松針洗手液，不但符合洗手液的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，而且能夠糅合松汁的黃綠色和活性成分，產(chǎn)生愉悅的色澤和散發(fā)獨(dú)特的松香味。同時(shí)，松針含有天然抑菌物質(zhì)，由松針提取液制備的洗手液對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球都具有顯著的抑制作用。因此，用松針提取液替代洗手液中添加的色素和香精，在達(dá)到清潔作用和增強(qiáng)感官效果的同時(shí)，也有利于殺菌抑菌和增強(qiáng)環(huán)保的功效，具有較好的市場(chǎng)應(yīng)用前景。