王 娟， 侯玉漂， 趙志強(qiáng)， 史國(guó)翠， 謝建國(guó)，徐風(fēng)蒼， 陳立功， 魏忠華*， 王學(xué)靜，*

（1.河北省畜牧獸醫(yī)研究所，河北保定 071000；2.石家莊工程職業(yè)學(xué)院，河北石家莊 050204；3.河北省畜牧總站，河北石家莊 050081；4.唐山市畜牧技術(shù)推廣站，河北唐山 063000；5.滄州市畜牧技術(shù)推廣站，河北滄州 061014；6.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，河北保定 071001）

環(huán)二肽（DKPs），又名2，5二氧哌嗪或2，5二酮哌嗪，由兩個(gè)氨基酸通過(guò)肽鍵環(huán)合形成，是自然界中普遍存在的最小的環(huán)肽，是一組從細(xì)菌到人類進(jìn)化保守的類激素分子（Bellezza等，2014）。環(huán)二肽由于其重要的生物和藥理活性而日益受到重視，在治療和生物材料等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。環(huán)二肽的種類繁多且功能各異，據(jù)統(tǒng)計(jì)其90%由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生（Fenical等，2006），它們也分離自革蘭氏陽(yáng)性菌、真菌、植物和動(dòng)物（Zhu等，2018），其中含有脯氨酸（Pro）的DKPs在發(fā)酵食品中含量較多（Otsuka等，2020）?；诖?，本試驗(yàn)擬通過(guò)研究韓國(guó)泡菜源環(huán)二肽對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、屠宰性能、生產(chǎn)性能及效益影響，為肉雞健康養(yǎng)殖保健產(chǎn)品的篩選及應(yīng)用提供思路與借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 環(huán)二肽口服液：主要成分由韓國(guó)泡菜分離出的細(xì)菌篩選后發(fā)酵而成，其中環(huán)二肽含量125 mmol/μL，購(gòu)自北京路克希德生物科技有限公司。鑒定含有17種活性成分（L-Tyr-LPro、L-Ser-L-Pro、L-Leu-L-Pro、L-Leu-L-Pro、LVal-L-Pro、L-Tyr-L-Pro、L-Val-L-Pro、L-Leu-L-Hyp、L-Ser-L-Pro、L-Phe-L-Ala、L-Tyr-LPro、L-Leu-L-Pro、L-Leu-L-Pro、L-Leu-L-Pro、L-Met-L-Pro、DL-3-phenyllactic acid、L-Phe-LPro、L-Phe-L-Pro）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 選用360只0日齡羅斯308肉雞，按飼養(yǎng)試驗(yàn)要求隨機(jī)分為3組，每組設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞，公母各半，利用飲水方式添加環(huán)二肽，處理Ⅰ0～7 d添加量為2 L/t，8～14 d添加量為1 L/t；處理Ⅱ0～14 d添加量為2 L/t，后期均不添加；對(duì)照組全程不添加，營(yíng)養(yǎng)水平見表1。飼養(yǎng)試驗(yàn)42 d。飼養(yǎng)密度為19.05只/m2，試驗(yàn)組均不添加任何保健、促生長(zhǎng)用藥、抗大腸桿菌藥。

表1 營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）%

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 日增重、料重比、成活率 試驗(yàn)期間以重復(fù)為單位每周記錄料耗料、死淘只數(shù)、空腹體重，飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，計(jì)算試驗(yàn)雞的日增重、料重比、成活率。

日增重（ADG）/g=（末體重-初體重）/試驗(yàn)天數(shù)；

料重比（F/G）=飼養(yǎng)期采食量/全期增重；

死淘率/%=[1-（死淘雞數(shù)/試驗(yàn)雞總數(shù)）]×100。

1.3.2 養(yǎng)分表觀利用率 試驗(yàn)結(jié)束前以重復(fù)為單位連續(xù)收集三天新鮮糞便（測(cè)蛋白樣品需用10%濃度鹽酸進(jìn)行氮固定），并進(jìn)行混合，同時(shí)收集該階段飼料，測(cè)定飼料和糞便樣本中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、磷含量，測(cè)定方法分別參照GB/T6432-2018（肖志明等，2018）、GB/T6433-2006（張?zhí)K等，2006）、GB/T 6436-2018（高麗紅等，2018）（高錳酸鉀法）、GB/T 6437-2018（商軍等，2018）執(zhí)行，并進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的計(jì)算。消化試驗(yàn)采用內(nèi)源指示劑酸不溶灰分法測(cè)定，測(cè)定方法參照國(guó)標(biāo)（GB/T 23742-2009）（李麗蓓等，2002）。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率計(jì)算公式為：

某養(yǎng)分的消化率/%=100-100×（b×c）/（a×d）；

式中：a為飼料中某養(yǎng)分含量，%；b為糞中該成分含量，%；c為飼料中鹽酸不溶灰分含量，%；d為糞中鹽酸不溶灰分含量，%。

1.3.3 屠宰性能指標(biāo) 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)抽取公母肉雞各1只，共36只，在禁食（自由飲水）空腹6 h后進(jìn)行屠宰。參照《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語(yǔ)和度量統(tǒng)計(jì)方法》（NY/T 823-2004）對(duì)胴體進(jìn)行稱重，記錄屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重、翅膀重、腹脂重，并計(jì)算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率、翅膀率、腹脂率。

1.3.4 效益指標(biāo) 根據(jù)市場(chǎng)毛雞、飼料價(jià)格及化學(xué)藥品節(jié)省等情況，對(duì)雞群健康與疾病情況下生產(chǎn)指標(biāo)及效益分別進(jìn)行分析比較，計(jì)算歐洲效益指數(shù)（簡(jiǎn)稱歐指）及單只效益。毛雞、飼料價(jià)格分別按照10、2.7元/kg計(jì)算，各試驗(yàn)組雛雞價(jià)格、常規(guī)預(yù)防用藥及其他管理等費(fèi)用因各試驗(yàn)組一致，未計(jì)入單只效益。

歐洲效益指數(shù)=[（體重×成活率）/（料肉比×出欄日齡）]×10000；

單只效益/元=成活率×（均重×毛雞價(jià)格-料重比×均重×飼料價(jià)格-環(huán)二肽費(fèi)用+節(jié)省化學(xué)藥品費(fèi)用）。

1.4 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析 結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，數(shù)據(jù)處理與分析采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差（ANOVA）分析，利用Duncan’s法進(jìn)行多重比較。以P＜0.05為顯著性差異性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 環(huán)二肽對(duì)肉雞體重和日增重的影響 從表2可以看出，不同組的初生重（0 d）之間無(wú)顯著性差異條件下，處理組與對(duì)照組相比，在環(huán)二肽飲用期（即14 d內(nèi)），處理Ⅰ、處理Ⅱ14 d內(nèi)的體重均偏高，且處理Ⅱ更明顯，但均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；非飲用期（14 d后），僅處理Ⅱ28、42 d體重有所提高，分別提高34.54、90.13 g，亦無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。處理Ⅰ與處理Ⅱ各日齡體重相比，處理Ⅱ體重均偏高，但差異不顯著（P＞0.05）。

表2 環(huán)二肽對(duì)肉雞體重的影響結(jié)果 g

從表3可以看出，處理組與對(duì)照組日增重相比，0～7 d內(nèi)處理Ⅱ較對(duì)照組略高，處理Ⅰ略低；7～14 d處理組均略高于對(duì)照組，處理Ⅱ較明顯；14～21 d兩處理組均低于對(duì)照組；21～28 d兩處理均高于對(duì)照組，處理Ⅱ較明顯；28～42 d兩處理均高于對(duì)照組，處理Ⅰ略明顯。從全期來(lái)看（0～42 d），處理組均略高于對(duì)照組，處理Ⅱ略明顯，但總體不同組各階段日增重之間及全期日增重之間均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表3 環(huán)二肽對(duì)肉雞日增重的影響結(jié)果g

2.2 環(huán)二肽對(duì)肉雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響 從表4可以看出，不同處理組粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、磷的消化率均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），處理Ⅰ分別較對(duì)照組高2.74、7.07、4.4、1.46個(gè)百分點(diǎn)（P＜0.05），處理Ⅱ分別較對(duì)照組高3.81、9.10、6.75、2.03個(gè)百分點(diǎn)（P＜0.05），處理Ⅱ均略高于處理Ⅰ（P＞0.05）。

2.3 環(huán)二肽對(duì)肉雞屠宰性能的影響 從表5可以看出，從屠宰性能各指標(biāo)整體來(lái)看，除處理Ⅱ腹脂率較對(duì)照組低0.55個(gè)百分點(diǎn)，呈顯著性差異（P＜0.05）外，其他指標(biāo)各處理組與對(duì)照組之間，處理組之間均無(wú)顯著性差異。通過(guò)數(shù)據(jù)比較計(jì)算，處理Ⅱ屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、腿肌重、翅膀重均一定程度高于對(duì)照組，分別高125.30、105.60、102.30、49.60、29.40、18.80 g，腹脂重低8.60 g；處理Ⅰ屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、翅膀重分別較對(duì)照組高77.70、31.30、25.10、35.60、2.80 g，腿肌重、腹脂重分別低0.20、1.60 g；處理Ⅱ屠宰率、半凈膛率、全凈膛率較對(duì)照組分別低2.67、2.65、1.81個(gè)百分點(diǎn)，胸肌率、腿肌率、翅膀率分別高1.12、0.52、0.38個(gè)百分點(diǎn)；處理Ⅰ屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、腿肌率較對(duì)照組分別低0.41、1.83、1.63、0.20個(gè)百分點(diǎn)，胸肌率與翅膀率分別高5.98、0.01個(gè)百分點(diǎn)。

2.4 環(huán)二肽對(duì)肉雞生產(chǎn)性能及經(jīng)濟(jì)效益的影響

2.4.1 環(huán)二肽對(duì)生產(chǎn)性能的影響 從表6可以看出，同為42 d出欄肉雞，雞群健康情況下各處理組與對(duì)照組之間、各處理組之間的成活率、均重均無(wú)顯著性差異，處理Ⅰ、處理Ⅱ較對(duì)照組料重比分別降低0.05、0.06，歐指分別提高9.16、10.30。從表7可以看出，在發(fā)生支氣管堵塞疾病情況下，各指標(biāo)均呈現(xiàn)不同程度差異，處理Ⅰ、處理Ⅱ較對(duì)照組成活率分別提高4.51、7.58個(gè)百分點(diǎn)，歐指分別高25.60、29.47；處理Ⅰ、處理Ⅱ較對(duì)照組均重分別低0.21、0.10 kg；料重比方面，處理Ⅰ、處理Ⅱ較對(duì)照組分別低0.14、0.04。

表6 正常生產(chǎn)情況下生產(chǎn)性能結(jié)果

表7 疾病生產(chǎn)情況下生產(chǎn)性能結(jié)果

從圖1中可以看出，雞群健康情況下，處理Ⅰ、處理Ⅱ成活率變化曲線與對(duì)照組相比是一致的；從圖2中可以看出，當(dāng)雞群發(fā)生支氣管堵塞（20 d開始發(fā)?。r(shí)，20 d之前各處理組與對(duì)照組曲線基本是一致的，發(fā)病后處理Ⅰ、處理Ⅱ明顯比對(duì)照組死亡率偏低。

圖1 健康情況下肉雞成活率變化趨勢(shì)圖

圖2 疾病情況下肉雞成活率變化趨勢(shì)圖

2.4.2 環(huán)二肽對(duì)經(jīng)濟(jì)效益的影響 按照表6～9數(shù)據(jù)計(jì)算，不同環(huán)二肽水平對(duì)肉雞健康與疾病條件下經(jīng)濟(jì)效益的影響差異。在雞群正常即健康情況下，處理I與處理II與對(duì)照組相比單只效益未見優(yōu)勢(shì)；在疾病情況下，處理I與處理II分別較對(duì)照組高0.14、1.66元。

表8 正常生產(chǎn)情況下經(jīng)濟(jì)效益分析結(jié)果元

表9 疾病生產(chǎn)情況下經(jīng)濟(jì)效益分析結(jié)果元

3 討論

3.1 環(huán)二肽對(duì)生產(chǎn)性能的影響 環(huán)二肽已被證明具有抗真菌、抗細(xì)菌、抗腫瘤、抑制毒素、鎮(zhèn)痛；增強(qiáng)免疫和抗炎癥 （Balachandra等，2021；Ferro等，2015）等多種重要的生物活性，并顯示明顯的抗酶水解（Scarel等，2021），以及能夠作為潛在載體幫助穿透血腦屏（Scarel等，1997）等其他潛在用途。另外，環(huán)二肽抗菌機(jī)制呈現(xiàn)多樣性和復(fù)雜性，更不易導(dǎo)致致病菌耐藥性，被認(rèn)為是極具前景的新型抗菌物質(zhì)之一（楊子娟等，2009）。隨著對(duì)環(huán)二肽研究的不斷深入，其應(yīng)用價(jià)值將不斷被發(fā)現(xiàn)。劉衛(wèi)東等（2019）通過(guò)在于肉雞日糧中添加復(fù)合小肽制劑，使肉雞終末體重和日均增重得到顯著或極顯著提高的報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，不同水平環(huán)二肽對(duì)肉雞體重、0～42 d全期平均日增重均有一定程度提高，0～14 d添加量為2 L/t的處理組更明顯，但均未達(dá)顯著性水平，料重比、歐指亦無(wú)顯著性變化，而粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、磷的消化率處理組明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），表明環(huán)二肽有提高肉雞生長(zhǎng)性能的潛質(zhì)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率高，但體重、日增重等生產(chǎn)性能指標(biāo)未呈顯著性差異，可能與肉雞高密度，采食量受限（賀衛(wèi)華等，2019），肉雞生長(zhǎng)性能未能正常發(fā)揮有關(guān)。另外，鄧華彬（2019）報(bào)道稱小肽具有促進(jìn)動(dòng)物腸道生長(zhǎng)發(fā)育，協(xié)調(diào)各種養(yǎng)分的利用，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能的作用。黃冠慶等（2009）研究結(jié)果表明，三種濃度的小肽均能提高黃羽肉雞平均日增重，顯著降低料重比，環(huán)二肽屬于小肽，在發(fā)揮其活性的同時(shí)，可能具有提高生產(chǎn)性能的作用。在不同階段日增重的變化趨勢(shì)來(lái)看，14～21日齡段處理組較對(duì)照組均有所偏低，可能與環(huán)二肽停止飲用或階段性換料有關(guān)，造成暫時(shí)的增重降低。

3.2 環(huán)二肽對(duì)肉雞屠宰性能的影響 從環(huán)二肽對(duì)肉雞屠宰性能結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，兩處理組對(duì)屠體重、半凈膛重、全凈膛重、胸肌重、翅膀重有提高的趨勢(shì)，尤其是處理Ⅱ較明顯，但均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；屠宰率、半凈膛率、全凈膛率等指標(biāo)無(wú)規(guī)律性變化；處理Ⅱ腹脂率較對(duì)照組顯著降低（P＜0.05）?，F(xiàn)代商業(yè)肉雞品種絕大多數(shù)脂肪并非生理所需，不但浪費(fèi)飼料，還會(huì)直接影響肉產(chǎn)品的加工，而且會(huì)降低屠宰率和經(jīng)濟(jì)效益（郎倩倩等，2019）。黃冠慶等（2009）在1 d黃羽肉雞的基礎(chǔ)日糧中分別添加0.1%、0.5%和1.0%三種不同濃度的植物小肽，結(jié)果表明三種濃度的小肽均能顯著降低腹脂率和皮下脂肪厚度。王志江（2014）研究表明，環(huán)二肽可通過(guò)調(diào)控脂肪酸和膽固醇代謝，實(shí)現(xiàn)降血脂功效。本研究結(jié)果表明一定水平環(huán)二肽對(duì)脂肪代謝可能有一定影響，與前人研究結(jié)果相近。

3.3 環(huán)二肽對(duì)不同生產(chǎn)情況下經(jīng)濟(jì)效益的影響肉雞生產(chǎn)性能的充分發(fā)揮跟經(jīng)濟(jì)效益有直接關(guān)系。本研究表明，在雞群健康時(shí)，各處理組成活率、均重與對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異，但料重比、歐指有一定程度改善；而在疾病發(fā)生的雞群處理組成活率、歐指明顯提高，但均重與料重比未呈優(yōu)勢(shì)，這可能與環(huán)二肽的抗菌、抗病毒、提高免疫力等功效的發(fā)揮，雞只發(fā)病時(shí)間、死淘率差異，導(dǎo)致后期雞只密度改變，進(jìn)而降低高密度對(duì)雞群采食量的限制等因素有關(guān)。劉衛(wèi)東等（2019）研究發(fā)現(xiàn)日糧中添加復(fù)合小肽制劑，料重比、腹瀉率、呼吸道病發(fā)病率和死亡率得到顯著或極顯著降低，與本研究結(jié)果一致。通過(guò)經(jīng)濟(jì)效益的對(duì)比，雞群發(fā)生支氣管堵塞疾病時(shí)比雞群健康時(shí)效果更明顯，尤其是處理Ⅱ，表明環(huán)二肽的添加與否及劑量均和生產(chǎn)性能、經(jīng)濟(jì)效益有直接關(guān)系。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明：（1）0～14 d添加量為2 L/t的處理組在白羽肉雞飼養(yǎng)密度為19.05只/m2、代替部分抗生素的情況下，可提高肉雞抵御疾病的能力，降低養(yǎng)殖過(guò)程死淘率。因發(fā)揮效果與添加劑量有直接關(guān)系，可根據(jù)疾病流行發(fā)生情況，酌情添加。（2）環(huán)二肽能有效提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，具有提高生長(zhǎng)性能的潛力。