徐 歡，譚鈞元，黃 荷，董丹丹

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)是傳染性強、流行面廣的肝臟疾病，主要是感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)所致[1,2]。CHB具有病情復雜、病程綿長等特點，可造成肝功能代謝紊亂，引起全身多器官功能損傷，能發(fā)展為肝纖維化和肝硬化[3]。恩替卡韋具有高效的抗病毒活性，但長期治療存在HBV耐藥性問題[4,5]。聚乙二醇干擾素α-2a(pegylated interferon-α 2a，Peg-IFN α-2a)是具有免疫調節(jié)性的干擾素類藥物，可以通過免疫調節(jié)及抑制病毒復制發(fā)揮抗病毒療效，病毒學應答率較持久[6]。本研究應用Peg-IFN α-2a治療CHB患者，旨在分析其療效及對外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)Toll樣受體4(Toll 1ike receptors 4，TLR4)和協(xié)同刺激分子B7-H1(costimulatory molecule B7-H1，B7-H1)表達水平的影響，為臨床用藥提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2019年7月～2021年7月我院診治的CHB患者96例，男56例，女40例；年齡為30～58歲，平均年齡為(41.5±4.9)歲。符合《慢性乙型肝炎防治指南(2019年版)》的診斷標準[7]。排除標準：合并肝衰竭、肝硬化、肝癌、藥物性肝損傷和遺傳代謝性肝病、近期使用過免疫調節(jié)或抗病毒治療、合并丙型肝炎或丁型肝炎等其他類型肝炎感染、合并自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)功能異常、對Peg-IFN α-2a過敏、認知功能障礙和其他重要臟器嚴重損傷。采用隨機數(shù)字表法將患者分為觀察組48例和對照組48例，兩組一般資料比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，具有可比性。本研究經我院醫(yī)學倫理委員會批準，患者簽署知情同意書。

1.2 治療方法 給予對照組患者恩替卡韋(北京貝麗萊斯生物化學有限公司，H20133149)0.5 mg口服，1次/d；觀察組在對照組治療的基礎上給予Peg-IFN α-2a(上海羅氏制藥有限公司，S20040007)180μg皮下注射，1次/w。兩組均治療觀察48 w。

1.3 檢測指標 采用化學發(fā)光法檢測血清抗HBe和HBeAg；采用PCR法檢測血清HBV DNA；使用美國貝克曼庫爾特公司提供的AU680全自動生化分析儀檢測血生化指標；采用ELISA法檢測血清Ⅳ型膠原、層粘連蛋白、Ⅲ型前膠原、透明質酸、白細胞介素-10(interleukin-10，IL-10)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和IL-6(試劑盒購自上?？迫A生物技術公司)；使用美國BD公司的FACS Calibur型流式細胞儀檢測PBMCs表面TLR4和B7-H1表達水平。

2 結果

2.1 兩組臨床療效比較 在治療48 w結束時，觀察組血清HBeAg轉陰率和HBeAg血清轉換率均顯著高于對照組(P<0.05，表1)。

表1 兩組臨床療效[n(%)]比較

2.2 兩組肝功能指標比較 在治療結束時，觀察組血清AST和ALT水平比較，差異無顯著意義(P<0.05，表2)。

表2 兩組肝功能指標比較

2.3 兩組血清肝纖維化指標比較 在治療結束時，觀察組血清Ⅳ型膠原、層粘連蛋白和透明質酸水平顯著低于對照組(P<0.05，表3)。

表3 兩組血清肝纖維化指標比較

2.4 兩組細胞因子水平比較 在治療結束時，觀察組血清TNF-α和IL-6水平顯著低于，而血清IL-10水平顯著高于對照組(P<0.05，表4)。

表4 兩組血清細胞因子水平比較

2.5 兩組PBMCs表面TLR4和B7-H1表達水平比較 在治療結束時，觀察組PBMCs表面TLR4和B7-H1表達水平顯著低于對照組(P<0.05，表5)。

表5 兩組PBMCs表面TLR4和B7-H1表達水平比較

3 討論

HBV不直接損傷宿主肝細胞，可通過間接作用引起肝臟炎性病變，誘發(fā)肝細胞腫脹變性和壞死[8,9]。目前，臨床對于CHB的主要治療目的為抑制HBV復制、減輕肝功能損傷、緩解肝纖維化等[10]。恩替卡韋屬于環(huán)戊酰鳥苷酸類似物，是臨床一線藥物，能影響HBV核苷酸代謝過程，抑制病毒復制[11]。恩替卡韋在口服后代謝為三磷酸核苷類似物，影響HBV DNA聚合酶活性，導致HBV逆轉錄酶失活，對病毒產生抑制，但用藥時間延長會引起耐藥性問題。

Peg-IFN α-2a是干擾素α-2a結合聚乙二醇修飾劑得到的具有生物活性的干擾素類藥物，具有用藥頻率及劑量少、半衰期長等優(yōu)點而應用于CHB患者的長期治療。近年來，美國肝病學會將Peg-IFN α-2a作為CHB治療的優(yōu)先選擇藥物[12,13]。本研究在聯(lián)合治療48 w后觀察組血清HBeAg轉陰率和HBeAg血清轉換率均顯著高于對照組，表明聯(lián)合聚乙二醇干擾素α-2a治療CHB患者具有良好的療效，能有效抑制HBV復制，促進肝功能恢復，提高血清學應答率。研究認為，Peg-IFN α-2a可以促進細胞內抗病毒蛋白激活，從而降解病毒內核苷酸，阻止病毒復制。Peg-IFN α-2a經皮下注射后能在血液中高度積聚，并通過體循環(huán)達到肝臟，確保肝臟血藥濃度較高，有利于增加藥物的抗病毒活性，發(fā)揮抗病毒作用。此外，Peg-IFN α-2a結合了高分子量的聚乙二醇，可增加干擾素α活性，延長半衰期，發(fā)揮持續(xù)抗病毒效應。HBV大量復制引發(fā)的免疫功能紊亂會引起CHB患者肝細胞處于持續(xù)損傷及異常修復狀態(tài)，從而促進肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展[14]。既往研究顯示，若對CHB患者治療不及時可能使肝纖維化發(fā)展為肝硬化或肝癌，危及生命安全[15]。本研究結果顯示，在治療48 w后觀察組血清Ⅳ型膠原、層粘連蛋白和透明質酸水平顯著低于對照組，提示聯(lián)合Peg-IFN α-2a治療能緩解肝纖維化的進程，可能是因為Peg-IFN α-2a能與肝細胞表面特異性受體結合，改變相關基因轉錄機制，延緩肝纖維化的發(fā)生。

研究顯示，HBV主要通過介導免疫炎癥反應引起免疫細胞對肝細胞的過度免疫應答，從而損傷肝細胞功能[16]。此外，CHB患者炎癥反應與肝纖維化有關，肝細胞在炎癥刺激作用下會導致肝臟內纖維組織異常增生[17]。TLR4屬于TLRs模式識別受體家族，能發(fā)揮固有免疫應答的調節(jié)作用。當肝組織發(fā)生炎癥反應時，外周血脂多糖能上調TLR4表達水平，影響肝組織炎癥發(fā)生及發(fā)展[18]。B7-H1作用協(xié)同刺激分子，具有共抑制、共刺激的雙重作用，可以進行免疫負性調控，與病毒感染性疾病的發(fā)生有關[19]。本研究發(fā)現(xiàn)，在治療48 w后觀察組血清TNF-α、IL-6、PBMCs表面TLR4和B7-H1表達水平顯著低于對照組，而血清IL-10水平顯著高于對照組，提示聯(lián)合Peg-IFN α-2a能緩解CHB患者機體炎癥反應，抑制PBMCs表面TLR4和B7-H1表達。Peg-IFN α-2a可以結合被HBV感染細胞膜上的干擾素α受體，促進被感染肝細胞內抗病毒蛋白基因激活，進而合成多種抗病毒蛋白，抑制HBV持續(xù)復制，最終緩解肝細胞內炎癥反應[20]。

綜上所述，在選擇治療CHB患者的方案時，聯(lián)合Peg-IFN α-2a和恩替卡韋可以抑制HBV復制，改善肝功能，緩解肝纖維化進程，減輕炎癥反應，降低PBMCs表面TLR4和B7-H1表達，具有良好的療效，尤其能提高血清學應答率，值得進一步觀察和研究。