李 津，吳憲彬，康美艷，熊惠連，羅曼華

(贛州市中心血站 a.成分科； b.質(zhì)管科教科，江西 贛州 341000)

濃縮血小板是來源于患者全血的生物自體產(chǎn)物，主要由血小板和生長因子的超生理濃度組成，是常用于臨床外科中的成分輸血制品[1-2]。濃縮血小板在醫(yī)院血站較為常用，可用于失血、血小板減少等癥狀的患者。濃縮血小板作為一種臨床節(jié)約和充分利用血液資源的方法，其制備方法以白膜法最為常見，但不同大小的白膜袋對濃縮血小板的質(zhì)量有著一定的影響[3-4]。為此，本研究采用2種不同尺寸的白膜袋制備濃縮血小板，比較其對濃縮血小板質(zhì)量的影響，同時進(jìn)一步分析制備濃縮血小板過程中的影響因素。

1 資料和方法

1.1 一般資料

抽取2021年5—12月在贛州市中心血站獻(xiàn)血量為400 mL的42名獻(xiàn)血者血液，保存待用，均符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(2012版)。

1.2 制備方法

按照《血站技術(shù)操作規(guī)程》[5]制備濃縮血小板：全血采集于有血小板保存袋的六聯(lián)袋內(nèi)，采集后6 h內(nèi)或采集后置于20～24 ℃保存和運輸?shù)娜?4 h內(nèi)，在室溫條件下將血小板分離出，并懸浮于一定量血漿內(nèi)。將400 mL全血放入離心杯內(nèi)平衡后，溫度控制在20～24 ℃。把離心后的主袋置于全自動血液成分分離機(jī)上，分出上層血漿至血漿袋，留下約20～30 mL血漿，然后將剩余血漿連同白膜層及白膜層下1.5 cm的紅細(xì)胞擠入白膜層袋，將紅細(xì)胞保存液加入主袋內(nèi)，使之與主袋內(nèi)紅細(xì)胞混勻，熱合封閉并切斷連接主袋。將白膜層置于20～24 ℃血小板恒溫保存箱內(nèi)靜置時，取出后輕度離心，使紅細(xì)胞和白細(xì)胞下沉。上層懸液擠入濃縮血小板保存袋。分別將42名獻(xiàn)血者血液按照上述方法置于2種不同尺寸大小的白膜袋：小白膜袋組(A組)21袋，白膜成分袋尺寸為97 mm×120 mm,容量約為110 mL；大白膜袋組(B組)21袋，白膜成分袋尺寸為112 mm×138 mm,容量約為250 mL；2組白膜層容量均為80～90 mL。

1.3 質(zhì)量控制

本研究42名獻(xiàn)血者均為隨機(jī)選取，隨機(jī)分組，不會因血液來自不同的人，血小板本身就存在數(shù)量上的差異而影響研究結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo)

1)濃縮血小板計數(shù)：采用自動血細(xì)胞計數(shù)儀對濃縮血小板作血細(xì)胞計數(shù)；2)檢測血小板紅細(xì)胞混入量；3)選擇濃縮血小板質(zhì)量最優(yōu)的白膜袋，控制其他變量不變，分析制備濃縮血小板過程中的影響因素。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 2組濃縮血小板計數(shù)、紅細(xì)胞混入量比較

與B組相比，A組紅細(xì)胞混入量顯著減少，血小板計數(shù)顯著增加，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)，見表1。

表1 2組濃縮血小板計數(shù)、紅細(xì)胞混入量比較>

2.2 制備濃縮血小板的影響因素分析

上述結(jié)果顯示，采用小白膜袋(A組)制備濃縮血小板質(zhì)量優(yōu)于大白膜袋(B組)。通過控制其他變量不變分析小白膜袋(A組)制備濃縮血小板的影響因素，結(jié)果顯示，不同轉(zhuǎn)速、離心時間、濃縮血小板放置時間均是影響濃縮血小板質(zhì)量的因素，見表2。

表2 制備濃縮血小板影響因素分析

3 討論

血小板是人體血液里面的重要組成部分，是最小的血細(xì)胞之一，體積比紅細(xì)胞和白細(xì)胞都要小[6-7]。血小板盡管體積非常小，但是有著非常重要的作用，最主要的功能就是凝血和止血，其含量過低或過高對人的健康都有很大影響，因此在做血常規(guī)檢查的時候，血小板檢查是其中非常重要的一項指標(biāo)[8-11]。

濃縮血小板被廣泛應(yīng)用于臨床[12]，目前，富血小板血漿法和白膜法是制備濃縮血小板的常用方法，大多數(shù)血站以白膜法為主。白膜法具有血小板中白細(xì)胞殘留量較低，輸注安全性好的優(yōu)勢，因此在本站中制備濃縮血小板也以白膜法為主要制備方法。目前，國內(nèi)外尚缺乏制備濃縮血小板的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，因而濃縮血小板制備的質(zhì)量有差異。本站在制備濃縮血小板過程中接觸過2種不同大小的白膜袋，本研究旨在比較兩者之間的效果。

血小板計數(shù)是可用于判斷患者止血能力的單位體積血液中所含的血小板數(shù)目[13-15]。根據(jù)濃縮血小板質(zhì)控質(zhì)量和要求可知，來源于400 mL全血的正常的血小板含量≥4.0×1010個，本研究A組、B組濃縮血小板含量分別為(9.43±1.56)×1010個和(5.26±2.02)×1010個，結(jié)果顯示無論是大白膜袋還是小白膜袋，其制備濃縮血小板的血小板計數(shù)均遠(yuǎn)高于質(zhì)控要求，且小白膜袋制備濃縮血小板的血小板計數(shù)更高。這提示采用大白膜袋和小白膜袋制備濃縮血小板均能達(dá)到質(zhì)控要求，安全性高，小白膜袋制備濃縮血小板所得的血小板計數(shù)更高，相比于大白膜袋更具優(yōu)勢。紅細(xì)胞是把氧氣運送到全身各器官組織，帶走各組織器官產(chǎn)生的二氧化碳的血細(xì)胞[16-20]。根據(jù)濃縮血小板質(zhì)控質(zhì)量和要求，400 mL全血的濃縮血小板中紅細(xì)胞混入量≤2.0×109個。在本研究中，小白膜袋和大白膜袋的紅細(xì)胞混入量分別為(0.65±0.02)×109個和(1.33±0.44)×109個，均達(dá)到了質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，而且與大白膜袋相比，小白膜袋紅細(xì)胞混入量更少。綜合血小板計數(shù)結(jié)果可知，小白膜袋制備濃縮血小板的質(zhì)量更優(yōu)。這可能是由于白膜袋體積與濃縮血小板的紅細(xì)胞混入量和血小板回收率有關(guān)，袋體大則紅細(xì)胞混入量高、血小板回收率低；而小白膜袋的容量與白膜層容量更匹配，所以充盈度更合適，離心時更不易發(fā)生血袋褶皺現(xiàn)象，能高效地回收血小板、減少血小板2次回離率。其次是血液離心分層明顯，紅細(xì)胞混入量少，避免褶疊是保證離心效果的前提條件。小白膜袋在分離時血小板更容易收集，不易造成血小板的丟失。

本研究進(jìn)一步對制備濃縮血小板的影響因素進(jìn)行分析，通過控制其他變量不變的情況下，均采用小白膜袋制備濃縮血小板，結(jié)果顯示，2600 r·min-1離心14 min，濃縮放置時間在1 h內(nèi)的濃縮血小板質(zhì)量最佳。分析原因可能在于轉(zhuǎn)速過快或過慢，離心時間過長或過短都會對血小板分離效果造成一定的影響，導(dǎo)致血小板下沉，從而減少血小板含量。血小板是體積較小的細(xì)胞,膜薄易碎,放置時間過長則越容易破碎，因而放置時間對濃縮血小板的質(zhì)量也會有影響。因此，血站在制備濃縮血小板時，應(yīng)采用小白膜袋，且選擇轉(zhuǎn)速2600 r·min-1，離心時間14 min，放置時間控制在1 h內(nèi)等條件進(jìn)行制備，可以最大程度保證濃縮血小板的質(zhì)量。