杜秋霞
(山東省寧陽縣疾病預(yù)防控制中心 山東 寧陽 271400)
瘧疾屬于傳染性疾病,同時(shí)也是寄生蟲病,嚴(yán)重危害人類健康,在我國(guó)比較常見,一旦發(fā)病患者將會(huì)出現(xiàn)周期性發(fā)熱、寒戰(zhàn)、出汗等現(xiàn)象,而外周血確定瘧原蟲是準(zhǔn)確診斷的主要依據(jù)。景觀近些年瘧疾防疫工作進(jìn)一步強(qiáng)化,瘧疾發(fā)生率明顯下降,但相關(guān)檢驗(yàn)工作仍需要充分重視。伴隨血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用愈加廣泛,白細(xì)胞顯微鏡分類應(yīng)用減少,多通過儀器進(jìn)行分類,這也在一定程度上提高了瘧原蟲漏檢率。實(shí)際上,瘧疾患者血小板多有明顯下降癥狀,但相關(guān)報(bào)道比較少。對(duì)于瘧疾而言,在血細(xì)胞分析過程中,由于溶血?jiǎng)┎粫?huì)對(duì)紅細(xì)胞中寄生瘧原蟲進(jìn)行溶解,且其存在一定密度與形態(tài),所以儀器通常將其作為血球顆粒予以計(jì)數(shù),這將會(huì)對(duì)血細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響,應(yīng)引起重視,對(duì)其予以深入研究[1]。本次研究從2015年1月至2020年12月?lián)袢?0例瘧疾患者作為研究對(duì)象,觀察瘧疾血細(xì)胞涂片分析檢查結(jié)果,具體內(nèi)容如下。
1.1一般資料
從2015年1月至2020年12月?lián)袢?0例瘧疾患者作為研究組,其中男女比例為20:10,年齡最大53歲,最小3歲,均值(39.78±3.85)歲,并擇取同期30例健康體檢者作為對(duì)照組,其中男女比例為19:11,年齡最大52歲,最小4歲,均值(39.80±3.99)歲,兩組資料對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
1.2方法
選用希森美康Sysmex自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(XE2100型)進(jìn)行檢測(cè),配合使用試劑包括稀釋液、清潔劑、白細(xì)胞分類溶血?jiǎng)?、有核紅細(xì)胞溶血素、幼稚細(xì)胞溶血素、鞘液、嗜堿性細(xì)胞溶血素、白細(xì)胞分類染液、有核紅細(xì)胞染色液、血紅蛋白溶血素等,質(zhì)控品由佰樂(BIO-RAD)提供。對(duì)所選研究對(duì)象實(shí)施血細(xì)胞涂片檢驗(yàn),采集2ml靜脈血,置于乙二胺四乙酸二鉀抗凝管內(nèi),使其充分勻混,之后通過自動(dòng)血細(xì)胞儀進(jìn)行檢查,按照操作規(guī)程進(jìn)行操作。針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果予以五分類血細(xì)胞分析,分析檢查結(jié)果。
2.1兩組血細(xì)胞分析結(jié)果對(duì)比
經(jīng)血細(xì)胞分析檢查,研究組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)、血紅蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞均低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1:
表1 兩組血細(xì)胞分析結(jié)果對(duì)比
2.2瘧疾血細(xì)胞涂片結(jié)果分析
經(jīng)血細(xì)胞涂片分析,30例瘧疾患者中,23例為間日瘧,占比76.67%,7例惡性瘧,占比為23.33%。其中,21例白細(xì)胞正常,占比為70.00%,5例白細(xì)胞減少,占比為16.67%,4例白細(xì)胞升高,占比為13.33%。從白細(xì)胞分類來看,8例淋巴細(xì)胞百分比正常,占比為26.67%,13例淋巴細(xì)胞百分比減少,占比為43.33%,4例淋巴細(xì)胞百分比升高,占比為13.33%,5例出現(xiàn)可疑現(xiàn)象,占比為16.67%;12例單核細(xì)胞百分比正常,占比為40.00%,3例單核細(xì)胞百分比減少,占比為10.00%,14例單核細(xì)胞百分比升高,占比為46.67%,1例無分類結(jié)果,占比為3.33%。20例紅細(xì)胞正常,占比為66.67%,7例紅細(xì)胞減少,占比為23.33%,3例紅細(xì)胞升高,占比為10.00%;8例血小板正常,占比為26.67%,21例血小板減少,占比為70.00%,1例血小板升高,占比為3.33%。
對(duì)于瘧疾患者來說,在血細(xì)胞分析過程中,因部分紅細(xì)胞內(nèi)含瘧原蟲滋養(yǎng)體、環(huán)狀體,或配子體、裂殖體,無法經(jīng)溶血?jiǎng)┻M(jìn)行破壞與溶解,而且其自身存在一定形態(tài)結(jié)構(gòu),在經(jīng)過WBC/BASO通道過程中,寄生紅細(xì)胞在通過計(jì)數(shù)小孔過程中會(huì)使兩個(gè)電極之間的射頻電阻發(fā)生改變,而正常紅細(xì)胞不會(huì)出現(xiàn)這一變化,將會(huì)被儀器視為裸核顆粒納入白細(xì)胞計(jì)數(shù)內(nèi),進(jìn)而提高了白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平。在DIFF通道內(nèi),紅細(xì)胞經(jīng)溶解釋放瘧原蟲,核酸部位將結(jié)合染料,在激光照射作用下形成熒光強(qiáng)度信號(hào),儀器將其視為白細(xì)胞顆粒進(jìn)行計(jì)數(shù),且其在形態(tài)以及體積大小上均與細(xì)胞群類似,進(jìn)而對(duì)白細(xì)胞分類結(jié)果產(chǎn)生影響。若瘧原蟲密度比較高,配子體或裂殖體、滋養(yǎng)體含量大,則會(huì)對(duì)儀器產(chǎn)生嚴(yán)重影響,可能會(huì)導(dǎo)致無白細(xì)胞分類結(jié)果的問題,儀器將會(huì)進(jìn)行警示。儀器對(duì)血小板計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)可以通過電阻抗法實(shí)施。血液樣板在經(jīng)過儀器稀釋處理之后送入紅細(xì)胞樣品室內(nèi),在經(jīng)過鞘瘤技術(shù)處理,將其送入血小板檢測(cè)器或紅細(xì)胞檢測(cè)器,紅細(xì)胞顆??山?jīng)過計(jì)數(shù)小孔,使兩個(gè)電極之間的直流電阻出現(xiàn)變化,以細(xì)胞體積大小為依據(jù)對(duì)細(xì)胞類型進(jìn)行識(shí)別,并通過對(duì)脈沖信號(hào)進(jìn)行記錄,進(jìn)而獲得血小板以及紅細(xì)胞的數(shù)據(jù)。
在瘧疾血常規(guī)檢查過程中,因未破壞瘧原蟲,且瘧原蟲本身結(jié)構(gòu)類似于紅細(xì)胞,所以在儀器計(jì)數(shù)時(shí)容易混入瘧原蟲,這也將提高白細(xì)胞計(jì)數(shù),使檢驗(yàn)結(jié)果受到影響[2]。同時(shí)溶解紅細(xì)胞釋放瘧原蟲之后,基于強(qiáng)烈光照條件,核酸將融合染料,產(chǎn)生白細(xì)胞類似,也將影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)[3]。如果人體瘧原蟲的密度較高,將會(huì)有大量滋養(yǎng)體以及繁殖體、配子體出現(xiàn),嚴(yán)重影響儀器檢查過程,出現(xiàn)無白細(xì)胞分類的問題[4]。血液樣本在經(jīng)過儀器稀釋處理之后,送入紅細(xì)胞樣品室過程中,鞘流技術(shù)不僅處理了紅細(xì)胞,也處理了血小板,細(xì)胞顆粒經(jīng)技術(shù)小孔,而產(chǎn)生電極變化,再以脈沖信號(hào)方式予以記錄,獲得血小板直方圖和紅細(xì)胞直方圖[5]。對(duì)于瘧疾患者而言,發(fā)病初期因瘧原蟲數(shù)量少,所以未嚴(yán)重?fù)p傷紅細(xì)胞,所以其計(jì)數(shù)無明顯異常,但隨著病情發(fā)展,瘧原蟲逐漸破壞紅細(xì)胞,且代謝產(chǎn)物對(duì)肝脾等臟器產(chǎn)生刺激,增強(qiáng)了免疫反應(yīng),使得內(nèi)皮細(xì)胞大量增生,因此這一疾病病程較長(zhǎng)的患者將會(huì)出現(xiàn)血小板減低、白細(xì)胞減低、貧血等癥狀[6]。其中肝臟功能亢進(jìn)主要表現(xiàn)為血小板減少,而脾臟作為機(jī)體儲(chǔ)血器官,若發(fā)生病理性腫大,則會(huì)使血小板大量潴留,進(jìn)而巨噬細(xì)胞將會(huì)吞噬部分血小板,進(jìn)而減少血小板,同時(shí)紅細(xì)胞碎片會(huì)被當(dāng)做血小板,摻雜在血小板內(nèi)進(jìn)行計(jì)數(shù),進(jìn)而使血小板直方圖呈現(xiàn)出異常狀態(tài),進(jìn)而影響最終檢測(cè)結(jié)果[7-8]。
在瘧疾發(fā)病初期,瘧原蟲進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)中的數(shù)量比較少,紅細(xì)胞并未受到嚴(yán)重?fù)p害,所以血紅蛋白、紅細(xì)胞水平均無明顯異?,F(xiàn)象。但隨著病情進(jìn)一步發(fā)展,瘧原蟲對(duì)紅細(xì)胞的破壞程度增加,紅細(xì)胞碎片增加,加上瘧原蟲代謝產(chǎn)物的影響,對(duì)機(jī)體產(chǎn)生刺激作用,使肝脾出現(xiàn)充血腫大現(xiàn)象,機(jī)體出現(xiàn)較強(qiáng)的免疫反應(yīng)。隨著疾病發(fā)展至晚期,則會(huì)大量產(chǎn)生網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞,使得脾功能出現(xiàn)亢進(jìn)狀態(tài)[9]。在長(zhǎng)時(shí)間反復(fù)感染狀態(tài)下,裂殖子游離,加上虐色素導(dǎo)致單核細(xì)胞增生,所以隨著病程延長(zhǎng)患者將會(huì)出現(xiàn)貧血現(xiàn)象,主要表現(xiàn)為血紅蛋白水平下降、紅細(xì)胞水平降低,同時(shí)伴隨單核細(xì)胞數(shù)量增加,血小板水平下降,白細(xì)胞水平也將減少。血小板水平下降主要是因脾亢進(jìn)狀態(tài)下會(huì)產(chǎn)生過度阻留作用,脾臟作為貯血器官,通常情況下脾臟中有1/3左右的血小板,同時(shí)也有部分淋巴細(xì)胞,如果脾臟受損,出現(xiàn)病理性腫大,則會(huì)使脾臟功能亢進(jìn),進(jìn)而使脾內(nèi)阻留大量的血小板與淋巴細(xì)胞,另外部分紅細(xì)胞也會(huì)滯留在脾臟中,一些被單核-巨噬細(xì)胞吞噬,使得周圍血液中血小板水平下降,紅細(xì)胞水平降低,淋巴細(xì)胞減少[10]。紅細(xì)胞碎片將會(huì)被檢測(cè)儀器視為大體積的血小板顆粒計(jì)算在血小板計(jì)數(shù)中,對(duì)血小板分析產(chǎn)生影響,使得血小板直方圖出現(xiàn)異?,F(xiàn)象,無法將血小板分布寬度、血小板體積計(jì)算出來,同時(shí)也無法準(zhǔn)確顯示大血小板比率,產(chǎn)生警示信息[11]。所以在血常規(guī)監(jiān)測(cè)中,除臨床疑似瘧疾,必須實(shí)施血涂片,對(duì)瘧原蟲進(jìn)行檢查之外,還需要對(duì)檢測(cè)過程中血小板是否明顯減少情況進(jìn)行觀察,或直方圖是否出現(xiàn)異常,或是否出現(xiàn)警示信息,另外散點(diǎn)圖、白細(xì)胞分類也可能出現(xiàn)異?,F(xiàn)象,需要對(duì)血涂片進(jìn)行復(fù)審以及分類,特別是在瘧疾高發(fā)季節(jié),需要對(duì)瘧原蟲寄生情況進(jìn)行仔細(xì)查找,避免誤診及漏診問題[12]。
在血常規(guī)檢驗(yàn)中,若發(fā)現(xiàn)直方圖異常以及血小板減低現(xiàn)象,另外伴隨白細(xì)胞散點(diǎn)圖異?;虬准?xì)胞分類異常等,需要做好血涂片復(fù)審,并對(duì)白細(xì)胞予以分類,特別是夏秋季節(jié)發(fā)熱樣本,需要對(duì)瘧原蟲寄生情況予以仔細(xì)查找,避免誤診和漏診。