杜秋霞

(山東省寧陽縣疾病預(yù)防控制中心 山東 寧陽 271400)

瘧疾屬于傳染性疾病，同時(shí)也是寄生蟲病，嚴(yán)重危害人類健康，在我國(guó)比較常見，一旦發(fā)病患者將會(huì)出現(xiàn)周期性發(fā)熱、寒戰(zhàn)、出汗等現(xiàn)象，而外周血確定瘧原蟲是準(zhǔn)確診斷的主要依據(jù)。景觀近些年瘧疾防疫工作進(jìn)一步強(qiáng)化，瘧疾發(fā)生率明顯下降，但相關(guān)檢驗(yàn)工作仍需要充分重視。伴隨血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用愈加廣泛，白細(xì)胞顯微鏡分類應(yīng)用減少，多通過儀器進(jìn)行分類，這也在一定程度上提高了瘧原蟲漏檢率。實(shí)際上，瘧疾患者血小板多有明顯下降癥狀，但相關(guān)報(bào)道比較少。對(duì)于瘧疾而言，在血細(xì)胞分析過程中，由于溶血?jiǎng)┎粫?huì)對(duì)紅細(xì)胞中寄生瘧原蟲進(jìn)行溶解，且其存在一定密度與形態(tài)，所以儀器通常將其作為血球顆粒予以計(jì)數(shù)，這將會(huì)對(duì)血細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，應(yīng)引起重視，對(duì)其予以深入研究[1]。本次研究從2015年1月至2020年12月?lián)袢?0例瘧疾患者作為研究對(duì)象，觀察瘧疾血細(xì)胞涂片分析檢查結(jié)果，具體內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

從2015年1月至2020年12月?lián)袢?0例瘧疾患者作為研究組，其中男女比例為20:10，年齡最大53歲，最小3歲，均值(39.78±3.85)歲，并擇取同期30例健康體檢者作為對(duì)照組，其中男女比例為19:11，年齡最大52歲，最小4歲，均值(39.80±3.99)歲，兩組資料對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

選用希森美康Sysmex自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(XE2100型)進(jìn)行檢測(cè)，配合使用試劑包括稀釋液、清潔劑、白細(xì)胞分類溶血?jiǎng)?、有核紅細(xì)胞溶血素、幼稚細(xì)胞溶血素、鞘液、嗜堿性細(xì)胞溶血素、白細(xì)胞分類染液、有核紅細(xì)胞染色液、血紅蛋白溶血素等，質(zhì)控品由佰樂(BIO-RAD)提供。對(duì)所選研究對(duì)象實(shí)施血細(xì)胞涂片檢驗(yàn)，采集2ml靜脈血，置于乙二胺四乙酸二鉀抗凝管內(nèi)，使其充分勻混，之后通過自動(dòng)血細(xì)胞儀進(jìn)行檢查，按照操作規(guī)程進(jìn)行操作。針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果予以五分類血細(xì)胞分析，分析檢查結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1兩組血細(xì)胞分析結(jié)果對(duì)比

經(jīng)血細(xì)胞分析檢查，研究組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)、血紅蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1：

表1 兩組血細(xì)胞分析結(jié)果對(duì)比

2.2瘧疾血細(xì)胞涂片結(jié)果分析

經(jīng)血細(xì)胞涂片分析，30例瘧疾患者中，23例為間日瘧，占比76.67%，7例惡性瘧，占比為23.33%。其中，21例白細(xì)胞正常，占比為70.00%，5例白細(xì)胞減少，占比為16.67%，4例白細(xì)胞升高，占比為13.33%。從白細(xì)胞分類來看，8例淋巴細(xì)胞百分比正常，占比為26.67%，13例淋巴細(xì)胞百分比減少，占比為43.33%，4例淋巴細(xì)胞百分比升高，占比為13.33%,5例出現(xiàn)可疑現(xiàn)象，占比為16.67%；12例單核細(xì)胞百分比正常，占比為40.00%，3例單核細(xì)胞百分比減少，占比為10.00%，14例單核細(xì)胞百分比升高，占比為46.67%，1例無分類結(jié)果，占比為3.33%。20例紅細(xì)胞正常，占比為66.67%，7例紅細(xì)胞減少，占比為23.33%，3例紅細(xì)胞升高，占比為10.00%；8例血小板正常，占比為26.67%，21例血小板減少，占比為70.00%，1例血小板升高，占比為3.33%。

3 討論

對(duì)于瘧疾患者來說，在血細(xì)胞分析過程中，因部分紅細(xì)胞內(nèi)含瘧原蟲滋養(yǎng)體、環(huán)狀體，或配子體、裂殖體，無法經(jīng)溶血?jiǎng)┻M(jìn)行破壞與溶解，而且其自身存在一定形態(tài)結(jié)構(gòu)，在經(jīng)過WBC/BASO通道過程中，寄生紅細(xì)胞在通過計(jì)數(shù)小孔過程中會(huì)使兩個(gè)電極之間的射頻電阻發(fā)生改變，而正常紅細(xì)胞不會(huì)出現(xiàn)這一變化，將會(huì)被儀器視為裸核顆粒納入白細(xì)胞計(jì)數(shù)內(nèi)，進(jìn)而提高了白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平。在DIFF通道內(nèi)，紅細(xì)胞經(jīng)溶解釋放瘧原蟲，核酸部位將結(jié)合染料，在激光照射作用下形成熒光強(qiáng)度信號(hào)，儀器將其視為白細(xì)胞顆粒進(jìn)行計(jì)數(shù)，且其在形態(tài)以及體積大小上均與細(xì)胞群類似，進(jìn)而對(duì)白細(xì)胞分類結(jié)果產(chǎn)生影響。若瘧原蟲密度比較高，配子體或裂殖體、滋養(yǎng)體含量大，則會(huì)對(duì)儀器產(chǎn)生嚴(yán)重影響，可能會(huì)導(dǎo)致無白細(xì)胞分類結(jié)果的問題，儀器將會(huì)進(jìn)行警示。儀器對(duì)血小板計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)可以通過電阻抗法實(shí)施。血液樣板在經(jīng)過儀器稀釋處理之后送入紅細(xì)胞樣品室內(nèi)，在經(jīng)過鞘瘤技術(shù)處理，將其送入血小板檢測(cè)器或紅細(xì)胞檢測(cè)器，紅細(xì)胞顆?？山?jīng)過計(jì)數(shù)小孔，使兩個(gè)電極之間的直流電阻出現(xiàn)變化，以細(xì)胞體積大小為依據(jù)對(duì)細(xì)胞類型進(jìn)行識(shí)別，并通過對(duì)脈沖信號(hào)進(jìn)行記錄，進(jìn)而獲得血小板以及紅細(xì)胞的數(shù)據(jù)。

在瘧疾血常規(guī)檢查過程中，因未破壞瘧原蟲，且瘧原蟲本身結(jié)構(gòu)類似于紅細(xì)胞，所以在儀器計(jì)數(shù)時(shí)容易混入瘧原蟲，這也將提高白細(xì)胞計(jì)數(shù)，使檢驗(yàn)結(jié)果受到影響[2]。同時(shí)溶解紅細(xì)胞釋放瘧原蟲之后，基于強(qiáng)烈光照條件，核酸將融合染料，產(chǎn)生白細(xì)胞類似，也將影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)[3]。如果人體瘧原蟲的密度較高，將會(huì)有大量滋養(yǎng)體以及繁殖體、配子體出現(xiàn)，嚴(yán)重影響儀器檢查過程，出現(xiàn)無白細(xì)胞分類的問題[4]。血液樣本在經(jīng)過儀器稀釋處理之后，送入紅細(xì)胞樣品室過程中，鞘流技術(shù)不僅處理了紅細(xì)胞，也處理了血小板，細(xì)胞顆粒經(jīng)技術(shù)小孔，而產(chǎn)生電極變化，再以脈沖信號(hào)方式予以記錄，獲得血小板直方圖和紅細(xì)胞直方圖[5]。對(duì)于瘧疾患者而言，發(fā)病初期因瘧原蟲數(shù)量少，所以未嚴(yán)重?fù)p傷紅細(xì)胞，所以其計(jì)數(shù)無明顯異常，但隨著病情發(fā)展，瘧原蟲逐漸破壞紅細(xì)胞，且代謝產(chǎn)物對(duì)肝脾等臟器產(chǎn)生刺激，增強(qiáng)了免疫反應(yīng)，使得內(nèi)皮細(xì)胞大量增生，因此這一疾病病程較長(zhǎng)的患者將會(huì)出現(xiàn)血小板減低、白細(xì)胞減低、貧血等癥狀[6]。其中肝臟功能亢進(jìn)主要表現(xiàn)為血小板減少，而脾臟作為機(jī)體儲(chǔ)血器官，若發(fā)生病理性腫大，則會(huì)使血小板大量潴留，進(jìn)而巨噬細(xì)胞將會(huì)吞噬部分血小板，進(jìn)而減少血小板，同時(shí)紅細(xì)胞碎片會(huì)被當(dāng)做血小板，摻雜在血小板內(nèi)進(jìn)行計(jì)數(shù)，進(jìn)而使血小板直方圖呈現(xiàn)出異常狀態(tài)，進(jìn)而影響最終檢測(cè)結(jié)果[7-8]。

在瘧疾發(fā)病初期，瘧原蟲進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)中的數(shù)量比較少，紅細(xì)胞并未受到嚴(yán)重?fù)p害，所以血紅蛋白、紅細(xì)胞水平均無明顯異?，F(xiàn)象。但隨著病情進(jìn)一步發(fā)展，瘧原蟲對(duì)紅細(xì)胞的破壞程度增加，紅細(xì)胞碎片增加，加上瘧原蟲代謝產(chǎn)物的影響，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生刺激作用，使肝脾出現(xiàn)充血腫大現(xiàn)象，機(jī)體出現(xiàn)較強(qiáng)的免疫反應(yīng)。隨著疾病發(fā)展至晚期，則會(huì)大量產(chǎn)生網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞，使得脾功能出現(xiàn)亢進(jìn)狀態(tài)[9]。在長(zhǎng)時(shí)間反復(fù)感染狀態(tài)下，裂殖子游離，加上虐色素導(dǎo)致單核細(xì)胞增生，所以隨著病程延長(zhǎng)患者將會(huì)出現(xiàn)貧血現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為血紅蛋白水平下降、紅細(xì)胞水平降低，同時(shí)伴隨單核細(xì)胞數(shù)量增加，血小板水平下降，白細(xì)胞水平也將減少。血小板水平下降主要是因脾亢進(jìn)狀態(tài)下會(huì)產(chǎn)生過度阻留作用，脾臟作為貯血器官，通常情況下脾臟中有1/3左右的血小板，同時(shí)也有部分淋巴細(xì)胞，如果脾臟受損，出現(xiàn)病理性腫大，則會(huì)使脾臟功能亢進(jìn)，進(jìn)而使脾內(nèi)阻留大量的血小板與淋巴細(xì)胞，另外部分紅細(xì)胞也會(huì)滯留在脾臟中，一些被單核-巨噬細(xì)胞吞噬，使得周圍血液中血小板水平下降，紅細(xì)胞水平降低，淋巴細(xì)胞減少[10]。紅細(xì)胞碎片將會(huì)被檢測(cè)儀器視為大體積的血小板顆粒計(jì)算在血小板計(jì)數(shù)中，對(duì)血小板分析產(chǎn)生影響，使得血小板直方圖出現(xiàn)異?，F(xiàn)象，無法將血小板分布寬度、血小板體積計(jì)算出來，同時(shí)也無法準(zhǔn)確顯示大血小板比率，產(chǎn)生警示信息[11]。所以在血常規(guī)監(jiān)測(cè)中，除臨床疑似瘧疾，必須實(shí)施血涂片，對(duì)瘧原蟲進(jìn)行檢查之外，還需要對(duì)檢測(cè)過程中血小板是否明顯減少情況進(jìn)行觀察，或直方圖是否出現(xiàn)異常，或是否出現(xiàn)警示信息，另外散點(diǎn)圖、白細(xì)胞分類也可能出現(xiàn)異?，F(xiàn)象，需要對(duì)血涂片進(jìn)行復(fù)審以及分類，特別是在瘧疾高發(fā)季節(jié)，需要對(duì)瘧原蟲寄生情況進(jìn)行仔細(xì)查找，避免誤診及漏診問題[12]。

4 結(jié)語

在血常規(guī)檢驗(yàn)中，若發(fā)現(xiàn)直方圖異常以及血小板減低現(xiàn)象，另外伴隨白細(xì)胞散點(diǎn)圖異?；虬准?xì)胞分類異常等，需要做好血涂片復(fù)審，并對(duì)白細(xì)胞予以分類，特別是夏秋季節(jié)發(fā)熱樣本，需要對(duì)瘧原蟲寄生情況予以仔細(xì)查找，避免誤診和漏診。