秦貝貝，賈澤菲，王佳莉，馬 琳，張鐵軍，胡 靜*

馬錢子化學成分和藥理作用的研究進展及其質(zhì)量標志物（Q-Marker）預測分析

秦貝貝1，賈澤菲1，王佳莉1，馬 琳1，張鐵軍2，胡 靜1*

1. 天津中醫(yī)藥大學，天津 301617 2. 天津藥物研究院 天津市中藥質(zhì)量標志物重點實驗室，天津 300462

馬錢子為我國傳統(tǒng)有毒中藥，藥用歷史悠久、療效顯著，其化學成分復雜多樣，主要包括生物堿、酚酸、萜類、甾體及苷類等，對骨骼、神經(jīng)、心血管系統(tǒng)均有顯著的藥理作用，在鎮(zhèn)痛、抗腫瘤方面藥效顯著。隨著現(xiàn)代科學技術的發(fā)展與應用，馬錢子新的化學成分和藥理活性不斷被發(fā)現(xiàn)，具有廣闊的開發(fā)應用前景。以質(zhì)量標志物（quality marker，Q-Marker）的理論為指導，總結(jié)馬錢子化學成分和藥理作用的研究進展，從親緣關系、傳統(tǒng)藥性、藥效、毒性、炮制、成分可測性和入血成分等方面對其Q-Marker進行預測分析，為馬錢子更加科學合理的質(zhì)量評價體系建立及其進一步開發(fā)利用提供參考。

馬錢子；質(zhì)量標志物；生物堿類；酚酸類；環(huán)烯醚萜類；士的寧；馬錢子堿

馬錢子為馬錢科（Loganiaceae）馬錢屬L. 植物馬錢L. 的干燥成熟種子，又名番木鱉、苦實把豆兒、火失刻把都等，主要分布于印度、越南、泰國、緬甸等，我國臺灣、福建、廣東、海南、廣西和云南等省有少量栽培。馬錢子始載于《本草綱目》，其性溫、味苦，有大毒，歸肝、脾經(jīng)，具有通絡止痛、散結(jié)消腫的功效，臨床用于跌打損傷、骨折腫痛、風濕頑痹、麻木癱瘓、癰疽瘡毒、咽喉腫痛等[1]。由于馬錢子有劇毒，臨床需要炮制減毒后再使用，《中國藥典》2020年版收載的馬錢子炮制品有生馬錢子、制馬錢子和馬錢子粉。馬錢子素有“通絡止痛馬錢王”之稱，在治療風濕免疫性疾病、外傷遺留疼痛等方面療效顯著，因此為歷代醫(yī)家所推崇[2]。近年來，隨著對馬錢子研究的不斷深入，其應用也越來越廣，并取得了良好效果[3]，但其質(zhì)量評價方法一直是制約其臨床應用的關鍵問題。馬錢子化學成分復雜多樣，主要包括生物堿、酚酸、萜類、甾體及苷類等，對骨骼、神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等具有顯著的藥理作用，尤其在鎮(zhèn)痛、抗腫瘤方面療效顯著。網(wǎng)絡藥理學研究表明，馬錢子產(chǎn)生藥理學作用是多成分、多靶點、多通路的協(xié)同作用的結(jié)果[4]。然而，現(xiàn)行標準多以士的寧和馬錢子堿作為其質(zhì)量評價指標[1]，這顯然是不完善的。本文總結(jié)了馬錢子化學成分和藥理作用的研究進展，從親緣關系、傳統(tǒng)藥性、藥效、毒性、炮制差異、成分可測性和入血成分等角度對其質(zhì)量標志物（quality marker，Q-Marker）進行預測分析，旨在為馬錢子更加科學合理的質(zhì)量評價體系的建立提供科學依據(jù)。

1 化學成分

馬錢子化學成分繁多復雜，目前已經(jīng)從其生品、炮制品及原植物中檢測到生物堿類、萜類、有機酸及甾體類等多種化學成分。

1.1 生物堿類

馬錢子中含有豐富的生物堿類成分，占1.5%～5.0%，主要包括士的寧（番木鱉堿）、馬錢子堿、番木鱉次堿、偽士的寧、偽馬錢子堿、異番木鱉堿、異馬錢子堿等。前二者約占總生物堿的80%，其中士的寧質(zhì)量分數(shù)40%～50%，馬錢子堿質(zhì)量分數(shù)30%～40%，二者既是馬錢子主要藥效成分也是其毒性成分。馬錢子生物堿基本是以士的寧為母核的，以吲哚類生物堿為主，分為偽型（pseudo-）、氮氧化物型（-oxide-）、異型（iso-）、氮甲基型（-Me-）等類型。目前已從馬錢子中檢測到的生物堿類化合物見表1，母核結(jié)構(gòu)見圖1。

表1 馬錢子中的生物堿類成分

Table 1 Alkaloids from Strychni Semen

序號化合物母核R1R2R3R4R5X來源文獻 1士的寧（strychnine）AHHHH N種子5 2馬錢子堿（brucine）AOCH3OCH3HH N種子5 3士的寧氮氧化物（strychnine-N-oxide）AHHHH N-O種子5 4馬錢子堿氮氧化物（brucine-N-oxide）AOCH3OCH3HH N-O種子5 5偽士的寧（pseudostrychnine）AHHHOH N種子5 6偽馬錢子堿（pseudobrucine）AOCH3OCH3HOH N種子6 72-羥基-3-甲氧基士的寧（2-hydroxy-3-methoxy-strychnine）AOHOCH3HH N種子6 8α-可魯勃林（α-colubrine）AHOCH3HH N種子7 9β-可魯勃林（β-colubrine）AOCH3HHH N種子7 1016-羥基-α-可魯勃林（16-hydroxy-α-colubrine）AHOCH3HOH N種子7 1116-羥基-β-可魯勃林（16-hydroxy-β-colubrine）AOCH3HHOH N種子7 124-羥基士的寧（4-hydroxy-strychnine）AHHOHH N種子8 134-羥基-3-甲氧基士的寧（4-hydroxy-3-methoxy-strychnine）AHOCH3OHH N種子8 142-羥基士的寧（2-hydroxy-strychnine）AOHHHH N種子9 153-甲氧基士的寧（3-methoxyhydroxy-strychnine）AHOCH3HH N種子9 164-甲氧基士的寧（4-methoxyhydroxy-strychnine）AHHOCH3H N種子9 172-甲氧基番木鱉堿氮氧化物（2-methoxyhydroxy-strychnine-N-oxide）AOCH3HHH N-O種子9

續(xù)表1

序號化合物母核R1R2R3R4R5X來源文獻 183-甲氧基番木鱉堿氮氧化物（3-methoxyhydroxy-strychnine-N-oxide）AHOCH3HH N-O種子 9 193-羥基番木鱉堿氮氧化物（3-hydroxyl-strychnine-N-oxide）AHOHHH N-O種子 9 20β-colubrine-chloromethochlorideAOCH3HHH N+-CH2Cl種子10 21α-colubrine-chloromethochlorideAHOCH3HH N+-CH2Cl種子10 224-羥基偽士的寧（4-hydroxyl-pseudostrychnine）AHHOHOH N種子10 23stryvomicineAHHOHOH N-Me種子11 2418-O-馬錢子堿（18-oxobrucine）BOCH3OCH3H 種子11 2518-O-偽士的寧（18-oxopseudostrychnine）BHHOH 種子11 26異士的寧（isostrychnine）CHHHCH2OH N種子 7 27異馬錢子堿（isobrucine）COCH3OCH3HCH2OH N種子 5 28異馬錢子堿氮氧化物（isobrucine-N-oxide）COCH3OCH3HCH2OH N-O種子 5 29異士的寧氮氧化物（isostrychnine-N-oxide）CHHHCH2OH N-O種子 5 30異偽番木鱉堿（isopseudostrychnine）CHHOHCH2OH N種子11 31deoxy-isostrychnine-chloromethochlorideCHHHCH3 N+-CH2Cl種子10 32去氧異士的寧（deoxy-isostrychnine）CHHHCH3 N種子10 33諾法生（novacine）DOCH3OCH3HHHN-Me種子 5 34依卡精（icajine）DHHHHHN-Me種子 5 35番木鱉次堿（vomicine）DHHOHHHN-Me種子 5 362-羥基-依卡精（2-hydroxyl-icajine）DOHHHHHN-Me種子11 373-羥基-依卡精（3-hydroxyl-icajine）DHOHHHHN-Me種子11 3818-羥基-番木鱉次堿（18-hydroxyl-vomicine）DHHOHHOHN-Me種子11 3914-羥基-依卡精（14-hydroxy-icajine）DHHHOHHN-Me種子10 40依卡精氮氧化物（icajine-N-oxide）DHHHHHN-O種子10 414-N-hydroxymethylstrychnidin-17-acetic acidEHH 種子11 4210,11-dimethoxy-4-N-hydroxymethylstrychnidin-17-acetic acidEOCH3OCH3 種子11 43prestrychnineF 種子 8 44原番木鱉堿（protostrychnine）G 種子 8 45normacusine BH 種子 8 46stryvomicine AI 種子10 47stryvomitineJ 種子11 48strychnochrysineK 莖皮12 49Nb-methyl-longicaudatineL 莖皮12 50demethoxyguiaflavineM N+-Me莖皮12 51strychnoflavine artefactM N+-Cl莖皮12 52strychnoflavineM N莖皮12

1.2 萜類、甾體及苷類

Zhang等[13]從馬錢子中分離得到5個環(huán)烯醚萜，分別為6′--乙酰基番木鱉苷酸（6′--acetylloganicacid）、4′--乙?；诀M苷酸（4′--acetylloganicacid）、3′--乙酰番木鱉苷酸（3′--acetylloganicacid）、7--乙酰番木鱉苷酸（7--acetylloganic acid）、馬錢苷酸（loganic acid）。從馬錢子炮制品中分離得到1個環(huán)烯醚萜斷氧化馬錢子苷（secoxyloganin）[14]。從馬錢子果實中分離得到3個環(huán)烯醚萜馬錢苷（loganin）[15]、去氧馬錢苷（deoxyloganin）、酮基馬錢苷（ketologanin）[16]。

此外，馬錢子中還有京尼平苷（geniposide）[17]、毛柳苷（salidroside）[18]、β-谷甾醇（β-sitosterol）、α-香樹脂醇（α-amyrin）、胡蘿卜苷（daucosterol）、熊果酸（ursolic acid）[19]等成分。馬錢子炮制品分離得到熊果醇（uvaol）、羽扇豆醇（lupeol）[18]、11-酮基-α-香樹脂醇棕櫚酸酯（11-oxo-α-amyrin palmitate）、豆甾-7,22,25-三烯-3-醇（stigmasta-7,22,25-triene-3-ol）[14]。馬錢果實中存在豆甾醇葡萄糖苷（stigmasterol glucoside）、羊齒烯醇（fernenol）[15]。

圖1 馬錢中生物堿類成分母核結(jié)構(gòu)

1.3 其他類

劉艷萍[19]首次從馬錢子提取物中分離出阿魏酸（ferulic acid）、肉桂酸（cinnamic acid）、原兒茶酸（protocatechuic acid）、水楊酸（salicylic acid）、沒食子酸（gallic acid）、香草酸（vanillic acid）、咖啡酸乙酯（caffeic acid ethyl ester）7個有機酸類物質(zhì)。秦偉瀚等[18]在馬錢子生品及油炸品中共檢測到綠原酸（chlorogenic acid）、對羥基苯乙酸（hydroxyphenyl-acetic acid）、兒茶酚（catechol）、麥芽酚（maltol）、油酸（oleic acid）、2-羥基-二十四烷酸（cerebronic acid）、奎尼酸（quinic acid）、二高亞油酸（dihomolinoleic acid）、5--咖啡酰莽草酸（dattelic acid）、腦羥脂酸（cerebronic acid）等。從馬錢子及其炮制品中還檢測出硬脂酸（steari cacid）、沒食子酸乙酯（gallic acid ethyl ester）、沒食子酸甲酯（gallic acid methy lester）[17]、咖啡酸（caffeic acid）、對羥基苯甲酸（-hydroxybenzoic acid）[14]。此外，從馬錢子葉中還分離得到黃酮苷類化合物山柰酚-7--葡萄糖苷（kaempferol-7-glucoside）、槲皮素-3--鼠李糖苷（quercetin-3--rhamnoside）、山柰酚-3--蕓香糖苷（kaempferol-3--rutinoside）和蘆丁（rutin）[20]。

2 藥理作用

2.1 鎮(zhèn)痛、抗炎

馬錢子是傳統(tǒng)鎮(zhèn)痛中藥，是中醫(yī)治療痹證的代表藥物，對類風濕性關節(jié)炎、坐骨神經(jīng)痛、骨質(zhì)增生、痛風、腰肌勞損等疾病療效顯著[21]。

研究發(fā)現(xiàn)，制馬錢子對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹、醋酸腹腔刺激所致疼痛具有顯著的抑制作用，并以醋炙馬錢子鎮(zhèn)痛作用最強[22]。馬錢子總生物堿和去士的寧的馬錢子總堿均有顯著的抗炎作用，能明顯抑制大鼠足跖脹和肉芽組織增生，而非生物堿部分對上述炎癥無影響[23]。鄧志軍等[4]采用網(wǎng)絡藥理學方法從馬錢子中篩選出馬錢子堿、原番木鱉堿、馬錢子堿氮氧化物、士的寧氮氧化物、β-可魯勃林、α-香樹脂醇等22個鎮(zhèn)痛活性成分以及與鎮(zhèn)痛相關的毒蕈堿型膽堿受體M2（cholinergic receptor, muscarinic 2，CHRM2）、煙堿型乙酰膽堿受體α7（cholinergic receptor nicotinic alpha 7，CHRNA7）、5-羥色胺受體2A（5-hydroxytryptamine receptor 2A，HTR2A）、5-羥色胺受體2C（5-hydroxytryptamine receptor 2C，HTR2C）等26個作用靶點和Ca2+、環(huán)磷酸鳥苷-蛋白激酶G（cyclic guanosine monophosphate/protein kinase G，CGMP?PKG）等25條信號通路，說明馬錢子的鎮(zhèn)痛作用是多成分-多靶點-多通路的協(xié)同作用模式。

馬錢子堿和士的寧是馬錢子中含量最高的生物堿類成分，其中馬錢子堿有明顯的鎮(zhèn)痛作用，而士的寧的鎮(zhèn)痛作用很弱，且毒性更強[24]。馬錢子堿還具有顯著的抗炎作用，對二甲苯所致的小鼠耳腫脹和醋酸所致小鼠扭體反應均有明顯的抑制作用[25]。馬錢子堿通過中樞和外周2種途徑發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，其中樞鎮(zhèn)痛作用與調(diào)節(jié)大腦神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺、腦肽啡和去甲腎上腺素的含量有關[26-28]。同時，馬錢子堿的外周鎮(zhèn)痛作用與降低大鼠血漿中6-酮-前列腺素F1a、5-羥色胺和血栓素等炎癥介質(zhì)水平和抑制外周炎癥組織前列腺素E2釋放相關。此外，馬錢子堿的鎮(zhèn)痛作用還和腎上腺素能受體、-精氨酸-一氧化氮（nitric oxide，NO）通路和Na+、K+通道有關[29-31]。

2.2 促進骨折愈合，修復關節(jié)軟骨損傷

馬錢子能夠促進骨折愈合，刺激骨生長激素分泌和骨膠原基因的表達，促進鈣鹽沉積及骨痂形成，改善血液循環(huán)，增加血清堿性磷酸酶和微量元素水平[31]。研究發(fā)現(xiàn)，馬錢子能延緩膝骨關節(jié)炎的軟骨退變、抑制軟骨細胞的凋亡、改善軟骨細胞的合成代謝[32]。

馬錢子生物堿具有修復膝關節(jié)炎軟骨損傷的作用，其修復作用與抑制NO介導的軟骨細胞凋亡、降低全血黏度、改善軟骨細胞代謝，抑制關節(jié)軟骨組織中基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-9、MMP-13、白細胞介素（interleukin，IL）- 1β、β-聯(lián)蛋白的蛋白和mRNA表達，以及促進糖原合成酶激酶-3β的蛋白和mRNA表達水平有關。此外，抑制Wnt/β-連環(huán)蛋白信號通路也是馬錢子生物堿修復關節(jié)軟骨損傷的作用機制之一[33-34]。體內(nèi)、外藥理實驗結(jié)果均證實，馬錢子堿是馬錢子修復膝關節(jié)軟骨損傷的有效成分，能夠促進軟骨細胞的增殖，拮抗NO對軟骨細胞的抑制作用[35-36]。

2.3 對神經(jīng)系統(tǒng)的作用

臨床上馬錢子用于治療重癥肌無力、面神經(jīng)麻痹、周圍神經(jīng)病變、膀胱逼尿肌收縮無力、神經(jīng)性疼痛等多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病，且療效顯著[37]。

研究表明，馬錢子生物堿能顯著抑制大鼠海馬神經(jīng)前體細胞的分裂，對神經(jīng)元性細胞具有敏感的選擇性抑制作用[38]。士的寧對整個中樞系統(tǒng)都有興奮作用，首先興奮脊髓的反射功能，其次興奮延髓的呼吸中樞和血管運動中樞，并提高大腦皮質(zhì)感覺中樞的功能[39]。士的寧對多巴胺能神經(jīng)元退行性損傷具有保護作用，能顯著增加1-甲基-4-苯基吡啶離子和谷氨酸誘導的神經(jīng)元退行性損傷神經(jīng)樹突的數(shù)量[40]。馬錢子堿能透過血腦屏障，進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生作用，并能迅速并可逆地阻斷大鼠海馬神經(jīng)元的Na+通道，且呈劑量相關性[41]。

2.4 對心血管系統(tǒng)的作用

臨床上，馬錢子常被作為活血化瘀藥使用，研究表明馬錢子堿及其氮氧化物的抗血栓作用與阿司匹林類似，能夠顯著抑制由二磷酸腺苷和膠原引起的血小板聚集，馬錢子堿有明顯的蓄積毒性，而馬錢子堿氮氧化物未顯示毒性[42]。在高脂血癥動物模型中，馬錢苷可顯著降低小鼠血清中的三酰甘油和總膽固醇水平，抑制脂滴生成，抑制動脈粥樣硬化的發(fā)生[43]。馬錢子堿、士的寧還能通過下調(diào)血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、腫瘤壞死因子-α、轉(zhuǎn)化生長因子-β和上皮細胞激酶A2的表達來抑制炎癥反應[44-45]。

馬錢子生物堿具有抗心律失常的作用，其作用機制與其阻滯心室肌細胞Na+、K+、Ca2+通道電流有關[41,45]。NaV1.5通道蛋白主要表達于心肌外周，參與心臟細胞動作電位的形成和電沖動的傳導，士的寧和依卡精對該通道慢滅活的影響是其治療心律失常的潛在優(yōu)勢[46]。異馬錢子堿及其氮氧化物對心肌細胞具有保護作用，能抵消黃嘌呤及其氧化酶對心肌細胞肌絲和線粒體的破壞作用，激動T、L、B型鈣通道，增加心肌細胞的開放率[47]。

2.5 抗腫瘤

中醫(yī)認為，腫瘤多為陰毒之邪結(jié)于內(nèi)所致，馬錢子善入經(jīng)絡，能攻堅蝕瘡、破癖散結(jié)、消腫止痛，是“以毒攻毒”治療惡性腫瘤的常用藥物。馬錢子水提物可明顯減輕乳腺癌骨轉(zhuǎn)移小鼠的疼痛，增加骨礦物質(zhì)密度，減輕骨質(zhì)損傷[48]。馬錢子水提物金納米粒子還具有抗膽管癌作用，能夠影響膽管肝癌細胞KMCH-1固有凋亡基因的表達[49]。

馬錢子堿對乳腺癌、肝癌、結(jié)腸癌、胃癌等均有顯著的抑制作用，其抗腫瘤機制包括抑制腫瘤生長、誘導腫瘤細胞凋亡、逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞耐藥性，同時上調(diào)抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移細胞因子的表達[50-53]。馬錢子堿可顯著抑制乳腺癌移植瘤細胞增殖，對人乳腺癌MDA-MB-231細胞系形成血管生成擬態(tài)具有抑制作用，其誘導乳腺癌細胞凋亡機制與血管生產(chǎn)擬態(tài)標志蛋白水平下降、促凋亡基因蛋白Bcl-2-相關X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cysteine aspartate protease-3，Caspase-3）表達明顯增高，抗凋亡蛋白B淋巴細胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）表達水平明顯降低有關[54-55]。研究發(fā)現(xiàn)，馬錢子堿經(jīng)皮給藥能抑制乳腺癌骨轉(zhuǎn)移瘤的生長，減輕骨損傷，其機制與調(diào)控VEGF、環(huán)氧合酶-2相關蛋白的表達有關[56]。馬錢子堿治療多發(fā)性骨髓瘤的效果優(yōu)于硼替佐米，可抑制破骨細胞分化和促進成骨細胞生成[57]。馬錢子堿能誘導結(jié)腸癌細胞凋亡，其誘導機制包括降低細胞線粒體膜電位、抑制IL-6/信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）通路和Wnt/β-連環(huán)蛋白信號通路[58-60]。

此外，士的寧、偽士的寧對結(jié)腸癌細胞增殖具有靶向抑制作用，可促進結(jié)腸癌細胞凋亡，降低線粒體膜電位和調(diào)節(jié)p53、Bcl-2蛋白的表達[61-62]。馬錢苷可減輕順鉑引起的急性腎損傷，抑制細胞外蛋白激酶活性，有望成為鉑類藥物腫瘤治療的輔助藥物[63]。

3 馬錢子Q-Marker的預測分析

針對目前中藥質(zhì)量控制和質(zhì)量標準評價體系中所存在的問題，劉昌孝院士[64]于2016年提出中藥Q-Marker的新概念，明確指出中藥Q-Marker應滿足的基本條件：（1）是中藥材和中藥產(chǎn)品中固有的或加工制備過程中形成的次生代謝產(chǎn)物；（2）源于中藥材，與中藥的功能屬性密切相關，且具有明確的化學結(jié)構(gòu)；（3）可以進行定性、定量分析；（4）根據(jù)中醫(yī)配伍的君藥首選原則，兼顧“臣、佐、使”藥的代表性物質(zhì)?！吨袊幍洹?020年版規(guī)定生馬錢子和制馬錢子中士的寧的質(zhì)量分數(shù)為1.20%～2.20%，馬錢子堿的質(zhì)量分數(shù)不得少于0.80%；馬錢子粉中士的寧的質(zhì)量分數(shù)為0.78%～0.82%，馬錢子堿的質(zhì)量分數(shù)不得少于0.50%。馬錢子含多種類型的化學成分，環(huán)境和人為因素會導致其化學成分種類及含量產(chǎn)生變化，而《中國藥典》2020年版中關于馬錢子及其炮制品的化學成分質(zhì)量評價指標僅有士的寧和馬錢子堿，這難以全面評價馬錢子質(zhì)量。因此，通過整理文獻資料對馬錢子Q-Marker進行預測分析，建立更加科學完善且具有專屬性的馬錢子質(zhì)量評價體系十分必要。

3.1 基于植物親緣關系和專屬性的Q-Marker分析

馬錢屬植物全球約190種，廣泛分布于全世界熱帶及亞熱帶地區(qū)，是馬錢科第一大屬，我國產(chǎn)10種、2變種，分布于西南、南及東南部地區(qū)[65]。目前，從馬錢屬植物中分離出的成分的中，生物堿類成分在馬錢屬中具有廣泛的植物分布、豐富的化學結(jié)構(gòu)類型以及鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血栓、抗腫瘤等多種藥理活性。生物堿是馬錢屬植物最主要的次生代謝產(chǎn)物，主要包括單萜吲哚、二氫吲哚、叔胺堿、β-卡波林等類型，馬錢子生物堿以單萜和二氫吲哚型為主，可作為其Q-Marker選擇的參考依據(jù)[66]。此外，馬錢子中硬脂酸、沒食子酸乙酯、沒食子酸甲酯、咖啡酸、對羥基苯甲酸等酚酸類成分及6′--乙?；诀M苷酸、4′--乙?；诀M苷酸、3′--乙?；诀M苷酸等環(huán)烯醚萜類成分為首次從馬錢屬植物得到，也可考慮作為馬錢子Q-Marker選擇的參考依據(jù)[13-14,17]。

3.2 基于藥性的Q-Marker分析

中藥藥性是我國歷代醫(yī)家經(jīng)過長期醫(yī)療實踐的經(jīng)驗總結(jié)，是與中藥功效相關的藥物屬性，取決于中藥的物質(zhì)基礎，可作為確定中藥Q-Marker的依據(jù)之一。五味既是中藥功效發(fā)揮的物質(zhì)基礎，也是中藥毒性的物質(zhì)基礎。中醫(yī)理論認為，苦為陰，有沉降之性，苦味藥往往具有能泄、能燥、能堅、能下的功效[67]。研究表明，生物堿和苷類是形成中藥苦味的主要成分，且常與苦味藥的藥理活性密切相關[68]。馬錢子味苦，有毒，生物堿類成分既是馬錢子的主要活性成分也是其毒性成分。馬錢子歸肝經(jīng)，對有毒中藥的統(tǒng)計結(jié)果發(fā)現(xiàn)，其中以歸肝經(jīng)的藥物數(shù)量最多，而這些藥物鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌的活性成分多以有機酸、萜類、黃酮類為主[69-70]。因此，可將馬錢子中生物堿類、環(huán)烯醚萜類、三萜類、苷類和有機酸類成分作為表達其性味的物質(zhì)基礎和Q-Marker選擇的重要參考依據(jù)。

3.3 基于藥效的Q-Marker分析

馬錢子具有通絡止痛、散結(jié)消腫的功效，臨床用于跌打損傷、麻木癱瘓、咽喉腫痛、風濕、頑痹、骨折、腫痛、癰疽、瘡毒等。此外，馬錢子還用于治療惡性腫瘤、心血管疾病等。研究表明，馬錢子具有廣泛的藥理作用，包括鎮(zhèn)痛、抗炎、興奮神經(jīng)中樞、神經(jīng)保護、抗腫瘤、修復軟骨損傷、促進骨折愈合、抗血栓、抗心律失常等。物質(zhì)基礎決定中藥功效，馬錢子所含的化學成分是其發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎。

馬錢子鎮(zhèn)痛作用是多成分、多靶點、多通路協(xié)同作用的結(jié)果，其鎮(zhèn)痛活性成分包括馬錢子堿、α-香樹脂醇、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、偽番木鱉堿、β-可魯勃林、原番木鱉堿、normacusine B等[4]。馬錢子堿不僅是馬錢子鎮(zhèn)痛的主要有效成分，還具有抗炎、抗腫瘤、抗血栓、抗心律失常、保護心肌細胞等多種藥理活性。網(wǎng)絡藥理學研究發(fā)現(xiàn)，α-香樹脂醇對應的潛在鎮(zhèn)痛靶點達53個，并能夠顯著抑制醋酸引起的小鼠內(nèi)臟疼痛[71]，可能是馬錢子發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的另一重要成分。馬錢子生物堿還具有促進骨折愈合、修復關節(jié)軟骨損傷的作用[31]，這些成分符合馬錢子“通絡止痛、散結(jié)消腫”的傳統(tǒng)功效。

此外，馬錢子堿、士的寧、偽馬錢子堿、偽士的寧、異馬錢子堿、16-甲氧基士的寧等生物堿類成分對結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌、肝癌等有顯著的抑制作用[72]。馬錢子炮制品中7個生物堿成分在人源腸 Caco-2細胞單層模型中的吸收特性研究表明，馬錢子生物堿可以通過小腸上皮細胞被動吸收進入體內(nèi)，其中士的寧、馬錢子堿、β-可魯勃林、偽士的寧、依卡精屬于吸收良好的化合物，士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物屬于中等吸收的化合物，這為馬錢子有效成分的確定提供腸吸收方面的依據(jù)[73]。馬錢苷、馬苷酸等環(huán)烯醚萜類成分具有抗腫瘤、抗炎[74-75]、抗帕金森病[76]、抗抑郁、抑制氧化應激反應和炎癥因子釋放[77]、清除自由基[78]等多種藥理作用。毛柳苷對心血管系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)均有藥理活性，具有的神經(jīng)保護作用有助于改善認知功能，能夠抗阿爾茨海默病、抗帕金森病、抗外傷性腦損傷[79]、抗癌、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗骨質(zhì)疏松[80]等。此外，綠原酸、咖啡酸等酚酸類成分也具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗癌、透過血腦屏障、保護腦神經(jīng)[81]等作用。因此，可將馬錢子中馬錢子堿、士的寧、β?可魯勃林、依卡精、馬錢子堿氮氧化物、士的寧氮氧化物、異馬錢子堿、偽馬錢子堿、偽士的寧、原番木鱉堿、normacusine B、16-甲氧基士的寧、α-香樹脂醇、馬錢苷、馬苷酸、毛柳苷、綠原酸、咖啡酸等成分作為表征其功效的Q-Marker選擇的重要依據(jù)。

3.4 基于化學成分可測性的Q-Marker分析

化學成分可測性是確定Q-Marker的原則之一，要求Q-Marker在滿足有效、傳遞與溯源的條件下，還需具備一定含量、定量測定方法和體內(nèi)暴露量以及專屬性含量測定方法等條件[82]。《中國藥典》2020年版僅規(guī)定了馬錢子中士的寧和馬錢子堿的含量測定方法及其限度要求。

潘自皓等[83]采用高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC）同時測定了馬錢子提取物中馬錢子堿、士的寧、馬錢子堿氮氧化物、士的寧氮氧化物和番木鱉次堿5個成分的含量。Tang等[84]采用HPLC-二極管陣列檢測器（HPLC-DAD）同時測定了馬錢子中的綠原酸、馬錢苷、馬錢子堿、士的寧、馬錢子堿氮氧化物和士的寧氮氧化物6個成分的含量，并首次將綠原酸和馬錢苷作為馬錢子質(zhì)量控制的指標成分。張加余等[85]采用HPLC-電噴霧離子化串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術從馬錢子中鑒定了18個生物堿成分，其中士的寧型8個、偽型2個、氮氧化物型5個、氮甲基型3個，包括馬錢子堿、士的寧、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、偽士的寧、偽馬錢子堿、甲基偽士的寧、甲基偽馬錢子堿、4-羥基士的寧、2-羥基士的寧、2-羥基-3-甲氧基番木鱉堿、3-甲氧基番木鱉堿、4-甲氧基番木鱉堿、2-甲氧基番木鱉氮氧化物、3-羥基番木鱉氮氧化物、3-甲氧基番木鱉氮氧化物、β-可魯勃林、番木鱉次堿。劉玉杰等[86]采用超高液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）在馬錢子中鑒定了士的寧、馬錢子堿、異士的寧、士的寧氮氧化物、異馬錢子堿氮氧化物、偽士的寧、偽馬錢子堿、綠原酸、甲基偽士的寧、番木鱉次堿、甲氧基番木鱉堿、羥基士的寧、β-可魯勃林13個成分。Tian等[87]采用高效液相色譜-電噴霧電離-飛行時間質(zhì)譜鑒定了砂燙馬錢子中的士的寧、馬錢子堿及24個二氫吲哚類生物堿成分，包括異馬錢子堿、依卡精、19--甲基士的寧、β（α）-可魯勃林、羥基士的寧、諾法生、番木鱉次堿等。閆靜等[88]應用ESI-MS/MS建立了區(qū)分馬錢子中士的寧、異士的寧、16-羥基-α-可魯勃林、4-羥基依卡精微量同分異構(gòu)體的方法。秦偉瀚等[89]利用超高效液相色譜-四級桿串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS）對砂燙馬錢子主要化學成分進行定性研究，鑒定了生物堿、脂肪酸酯、糖苷和甾醇類24個成分，其中12個為生物堿，包括士的寧、馬錢子堿、馬錢子堿氮氧化物、偽番木鱉堿、18--偽馬錢子堿、8--馬錢子堿等，5個生物堿為馬錢子中首次報道，還發(fā)現(xiàn)了3個糖苷類新化合物。馬錢子化學成分的含量測定方法見表2。

表2 馬錢子化學成分的含量測定方法

Table 2 Determination of components of Strychni Semen by different methods

測定方法化學成分文獻 HPLC士的寧、馬錢子堿 90 HPLC士的寧、馬錢子堿氮氧化物 91 HPLC士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物 92 HPLC士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物 93 HPLC士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、番木鱉次堿 83 HPLC-DAD士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、綠原酸、馬錢苷 84 HPLC-DAD-MS士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、諾法生、番木鱉次堿、羥基士的寧、α-可魯勃林、β-可魯勃林、19-N-甲基士的寧、2,3-二甲氧基-19-N-甲基士的寧 94 UPLC-MS士的寧、馬錢子堿 95 UPLC-MS/MS異士的寧、士的寧氮氧化物、異馬錢子堿氮氧化物、偽士的寧、偽馬錢子堿 86 毛細管區(qū)帶電泳士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物 96 毛細管區(qū)帶電泳士的寧、馬錢子堿 97 薄層色譜士的寧、馬錢子堿、異士的寧、異馬錢子堿、異士的寧氮氧化物、異馬錢子堿氮氧化物 98 比色法總生物堿 99 原子熒光法鋅、鉻、銅、鈹、鎘、釩、鎳、鈷、鋇、鍶、鋰、鈉、鐵、氟、氯、溴、碘、鉬、鎢、鉛、鈣、錳、鎂、鉀、硅、鋁、鈦、磷、砷、銻、鉍、汞、硒100

因此，基于化學成分可測性可以將馬錢子堿、士的寧、馬錢子堿氮氧化物、士的寧氮氧化物、番木鱉次堿、綠原酸、馬錢苷、諾法生、羥基士的寧、α-可魯勃林、β-可魯勃林、19--甲基士的寧、2,3-二甲氧基-19--甲基士的寧、偽馬錢子堿、偽士的寧、異士的寧、異馬錢子堿、異馬錢子堿氮氧化物、異士的寧氮氧化物作為馬錢子的候選Q-Marker。

3.5 基于毒性和炮制前后差異的Q-Marker分析

馬錢子有大毒，研究表明，生物堿是馬錢子致腎損傷的主要毒性部位，主要指標成分包括士的寧、馬錢子堿、番木鱉次堿、諾法生[101]。此外，馬錢子生物堿還具有明顯的神經(jīng)毒性[102]。士的寧和馬錢子堿既是馬錢子的主要活性成分，也是其毒性成分。馬錢子堿可競爭性插入DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，與磷酸基團發(fā)生靜電相互作用，造成DNA損傷[103]。士的寧和馬錢子堿的肝、腎毒性具有時間和劑量相關性，且士的寧毒性更大[104]。成人口服士的寧5～10 mg即致中毒，30～100 mg可致死亡，且其治療和中毒劑量接近[105]。

中藥炮制是根據(jù)中醫(yī)藥理論，依照辨證施治用藥的需要和藥物自身的性質(zhì)，以及調(diào)劑、制劑不同要求所采取的一項制藥技術。炮制方法是中醫(yī)用藥的特點，對中藥性能和功效均有重要影響，炮制方法與中藥藥效、毒性和化學成分之間存在關聯(lián)性。由于馬錢子有劇毒，限制了其臨床應用，一般需炮制后再使用。傳統(tǒng)中藥理論認為，炮制能夠降低馬錢子的毒性，同時便于制劑和粉碎[106-107]。目前，馬錢子常用的炮制方法主要有砂燙、醋炙、油炸法等。研究表明，炮制不僅降低了馬錢子的毒性，而且擴大了其在臨床上的應用[86,108]。

Cai等[109]從砂燙馬錢子分離得到了4個新的生物堿成分，分別為異馬錢子堿、異馬錢子堿氮氧化物、異士的寧氮氧化物和2-羥基-3-甲氧基士的寧。馬恩耀等[110]建立了馬錢子醋炙前后的HPLC指紋圖譜，確定了生品和炮制品的16個共有峰，證實醋炙使馬錢子中的某些生物堿含量降低，并轉(zhuǎn)化成其他成分。李俊松等[111]建立了馬錢子炮制前后HPLC指紋圖譜，歸納出馬錢子藥材18個共有峰、制馬錢子21個共有峰，證實馬錢子砂燙后士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物含量增加。采用UPLC-MS/MS對生、砂燙馬錢子的成分進行比較，發(fā)現(xiàn)砂燙后馬錢子中新產(chǎn)生或含量增加的成分分別為士的寧氮氧化物、異士的寧和異馬錢子堿氮氧化物，同時含量減少或消失的成分為偽士的寧、偽馬錢子堿[86]。Jiang等[94]首次采用HPLC-DAD-MS分析了馬錢子生品和砂燙品中士的寧、馬錢子堿以及10種二氫吲哚類生物堿的相對含量，發(fā)現(xiàn)砂燙后馬錢子中士的寧、馬錢子堿、諾法生、番木鱉次堿的含量均下降，而士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、α-可魯勃林、β-可魯勃林、羥基士的寧、19--甲基士的寧和2,3-二甲氧基-19--甲基士的寧相對含量增加，其中19--甲基士的寧、2,3-二甲氧基-19--甲基士的寧相對含量增加幅度最大。油炸馬錢子中士的寧、馬錢子堿的含量顯著降低，而異士的寧、異馬錢子堿、異士的寧氮氧化物、異馬錢子堿氮氧化物的含量則明顯增加[98]。秦偉瀚等[18]利用UPLC-Q-TOF-MS對油炸及生品馬錢子主要成分進行了研究，結(jié)果顯示油炸前后差異最顯著成分是生物堿類和有機酸類成分。番木鱉次堿和馬錢苷僅在生品中檢測到，而阿魏酸和羽扇豆醇僅在油炸品中發(fā)現(xiàn)。此外，采用原子熒光法對馬錢子砂燙前后的元素進行了分析，結(jié)果顯示砂燙后馬錢子中的汞元素降低了200倍，而鋅、錳、鐵、鈣、磷均增加。有益元素的增加和有害元素的減少為馬錢子炮制的科學性提供了更多依據(jù)[100]。

馬錢子經(jīng)過炮制后，含量降低或消失的成分包括士的寧、馬錢子堿、番木鱉次堿、諾法生、偽士的寧、偽馬錢子堿、馬錢苷、汞等；含量增加或新產(chǎn)生的成分包括士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、異士的寧、異馬錢子堿、異士的寧氮氧化物、異馬錢子堿氮氧化物、2-羥基-3-甲氧基士的寧、α-可魯勃林、β-可魯勃林、羥基士的寧、19--甲基士的寧、2,3-二甲氧基-19--甲基士的寧、阿魏酸、羽扇豆醇、鋅、錳、鐵、鈣、磷等。生物堿既是馬錢子的主要活性成分也是毒性成分，炮制后馬錢子中士的寧、馬錢子堿、番木鱉次堿和諾法生等有毒成分的含量降低，從而毒性降低，同時馬錢子堿和士的寧等會轉(zhuǎn)化為氮氧化物，而氮氧化物的毒性遠低于其原型，且具有較好的生物活性。這些變化是馬錢子炮制后減毒存效的物質(zhì)基礎。因此，基于毒性和炮制前后的差異，上述成分可以考慮作為馬錢子Q-Marker選擇的重要參考依據(jù)。

3.6 基于入血成分的Q-Marker分析

中藥化學成分復雜多樣，必須吸收入血并在體內(nèi)達到一定血藥濃度才可以發(fā)揮藥效。通過原型成分-代謝產(chǎn)物-靶點-通路對其藥效作用方式進行分析，并與入血成分的組織分布和疾病部位相結(jié)合，是篩選中藥Q-Marker的重要標準[112]。Liu等[113]采用UPLC-MS/MS建立了同時測定小鼠血漿中士的寧和馬錢子堿的方法。Lin等[114]采用LC-MS /MS對大鼠血漿中馬錢子生物堿成分的藥動學參數(shù)進行比較，發(fā)現(xiàn)士的寧、馬錢子堿的體內(nèi)吸收受馬錢子中其他生物堿的影響。此外，采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）和濁點萃取-HPLC法建立了人和大鼠血漿中士的寧、馬錢子堿及其主要代謝物士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物含量測定方法[115-116]。Chen等[117]利用液相色譜-電噴霧電離-離子阱質(zhì)譜（LC-ESI-ITMS）建立了快速同時測定大鼠肝臟中上述4個生物堿的方法。此外，張敏等[118]利用HPLC-紫外分光光度（UV）-MS建立了大鼠血漿中士的寧、馬錢子堿、3-甲氧基士的寧的測定方法。

因此，基于馬錢子原型成分到血中移行成分的分析，士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、3-甲氧基士的寧等可以考慮作為馬錢子Q-Marker選擇的重要參考依據(jù)。

4 結(jié)語

馬錢子藥用歷史悠久，療效獨特、顯著，擁有廣闊的開發(fā)利用前景，同時其毒性劇烈，治療窗窄，使其臨床應用受到一定限制。因此，建立科學、合理、系統(tǒng)的馬錢子質(zhì)量評價體系，對提高其質(zhì)量標準和保證臨床用藥的安全、有效具有深遠意義。中藥所含化學成分是其藥效和毒性作用的物質(zhì)基礎，馬錢子化學成分復雜多樣，其品質(zhì)與產(chǎn)地、采收、炮制等多種因素相關，而傳統(tǒng)測定指標較為單一，難以體現(xiàn)并確保馬錢子的整體質(zhì)量。本文對馬錢子化學成分和藥理作用進行總結(jié)，并在此基礎上以中藥Q-Marker的理論為指導，從親緣、傳統(tǒng)藥性、功效、毒性、炮制、化學成分可測性和入血成分等角度，對馬錢子的Q-Marker進行預測分析（圖2）。

圖2 馬錢子Q-Marker預測分析

馬錢子生物堿類成分毒效兼具，除現(xiàn)行標準的士的寧和馬錢子堿外，建議將士的寧氮氧化物、馬錢子堿氮氧化物、偽馬錢子堿、偽士的寧、異士的寧、異馬錢子堿、異馬錢子堿氮氧化物、異士的寧氮氧化物、β?可魯勃林、α-可魯勃林、原番木鱉堿、normacusine B、16-甲氧基士的寧、19--甲基士的寧、2,3-二甲氧基-19--甲基士的寧、依卡精、諾法生、番木鱉次堿、3-甲氧基士的寧等生物堿類成分也選作馬錢子的Q-Marker。此外，基于馬錢苷、馬錢酸、6′--乙酰基番木鱉苷酸、4′--乙酰基番木鱉苷酸、3′--乙?；诀M苷酸等環(huán)烯醚萜類成分和硬脂酸、沒食子酸乙酯、沒食子酸甲酯、咖啡酸、對羥基苯甲酸、綠原酸、阿魏酸等酚酸類成分的藥理活性和化學成分可測性等，也可作為馬錢子Q-Marker的篩選對象，并建議對以上成分進行深入研究，為建立全面、科學的馬錢子質(zhì)量評價方法提供參考。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 中國藥典[S]. 一部. 2020: 52.

[2] 趙榮, 宋勇. 呂光榮教授應用馬錢子治療痛證經(jīng)驗探析 [J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2015, 26(2): 473-474.

[3] 林昌松, 陳紀藩, 劉曉玲, 等. 馬錢子藥理研究及臨床應用概況 [J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2006, 17(2): 158-161.

[4] 鄧志軍, 劉若軒, 洪波, 等. 基于網(wǎng)絡藥理學研究馬錢子活性成分鎮(zhèn)痛作用機制 [J]. 熱帶醫(yī)學雜志, 2020, 20(6): 731-734.

[5] 楊秀偉, 嚴仲鎧, 蔡寶昌. 馬錢子生物堿成分的研究 [J]. 中國中藥雜志, 1993, 18(12): 739-740.

[6] 蔡寶昌, 吳皓, 楊秀偉, 等. 馬錢子中16個生物堿類化合物13CNMR譜的數(shù)據(jù)分析 [J]. 藥學學報, 1994, 29(1): 44-48.

[7] Galeffi C, Delle Monache E M, Marini-Bettòl(fā)o G B.alkaloids. XXVII. separation and characterisation of isostrychnine innux vomica L. seeds [J]., 1974, 88(2): 416-418.

[8] Baser K H C, Bisset N G, Hylands P J. Protostrychnine, a new alkaloid from[J]., 1979, 18(3): 512-514.

[9] 張加余, 張倩, 張凡, 等. HPLC-ESI-MS-MS鑒定馬錢子中4類生物堿成分 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2013, 19(9): 147-151.

[10] Shi Y S, Liu Y B, Ma S G,. Four new minor alkaloids from the seeds of[J]., 2014, 55(48): 6538-6542.

[11] Yang G M, Tu X, Liu L J,. Two new bisindole alkaloids from the seeds of[J]., 2010, 81(7): 932-936.

[12] Jonville M C, Dive G, Angenot L,. Dimeric bisindole alkaloids from the stem bark ofL. [J]., 2013, 87: 157-163.

[13] Zhang X Z, Xu Q, Xiao H B,. Iridoid glucosides from[J]., 2003, 64(8): 1341-1344.

[14] Zhang J Y, Tu P F. Chemical constituents from processed seeds of[J]., 2012, 21(2): 187-191.

[15] 劉錫葵, 李薇. 馬錢子果化學成分研究 [J]. 中草藥, 1998, 29(7): 435-438.

[16] Bisset N G, Choudhury A K. Alkaloids and iridoids fromfruits [J]., 1974, 13(1): 265-269.

[17] 解寶仙, 唐文照, 王利紅, 等. 馬錢子化學成分研究 [J]. 中藥材, 2016, 39(1): 86-89.

[18] 秦偉瀚, 陽勇, 李卿, 等. 基于植物代謝組學方法的馬錢子油炸炮制前后化學差異研究 [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2019, 31(2): 240-249.

[19] 劉艷萍. 馬錢子的化學成分研究 [D]. 濟南: 山東大學, 2010.

[20] Eldahshan O A, Abdel-Daim M M. Phytochemical study, cytotoxic, analgesic, antipyretic and anti-inflammatory activities of[J]., 2015, 67(5): 831-844.

[21] 林錦霞. 抗炎鎮(zhèn)痛中藥馬錢子外用制劑的研究進展 [J]. 醫(yī)學綜述, 2018, 24(16): 3259-3263.

[22] 楊紅梅, 劉若軒, 李麗明, 等. 不同制法馬錢子抗炎鎮(zhèn)痛作用研究 [J]. 中藥材, 2016, 39(6): 1276-1278.

[23] 魏世超, 徐麗君, 張秀橋. 馬錢子總生物堿對大鼠佐劑性關節(jié)炎的作用 [J]. 中國藥理學通報, 2001, 17(4): 479-480.

[24] 唐敏, 伍冠一, 朱嬋, 等. 馬錢子堿鎮(zhèn)痛研究進展 [J]. 中草藥, 2014, 45(12): 1791-1795.

[25] Chen J, Wang X, Qu Y G,. Analgesic and anti-inflammatory activity and pharmacokinetics of alkaloids from seeds ofafter transdermal administration: Effect of changes in alkaloid composition [J]., 2012, 139(1): 181-188.

[26] 徐金華, 陳軍, 蔡寶昌. 馬錢子堿的研究進展 [J]. 中國新藥雜志, 2009, 18(3): 213-216.

[27] 張娟, 肖魯偉, 戴體俊, 等. 馬錢子堿的鎮(zhèn)痛作用及其作用機制的探討 [J]. 中國中醫(yī)藥科技, 2009, 16(5): 374-375.

[28] 崔姣, 許惠琴, 陶玉菡. 馬錢子堿透皮貼劑鎮(zhèn)痛實驗研究及對大鼠腦啡肽含量的影響 [J]. 湖南中醫(yī)藥大學學報, 2015, 35(5): 7-9.

[29] 李永豐, 任維. 馬錢子堿通過鉀離子通道調(diào)節(jié)外周鎮(zhèn)痛 [J]. 中國疼痛醫(yī)學雜志, 2019, 25(2): 94-101.

[30] 張娟, 肖魯偉, 戴體俊, 等. 馬錢子堿中樞鎮(zhèn)痛作用的研究 [J]. 中國中醫(yī)藥科技, 2009, 16(1): 34-35.

[31] 李長雷, 馬寶苗, 柳威, 等. 馬錢子對家兔骨折愈合的影響 [J]. 中國組織工程研究, 2015, 19(11): 1647-1651.

[32] 張梅. 馬錢子對骨關節(jié)炎中軟骨細胞凋亡與增殖的影響 [D]. 北京: 北京中醫(yī)藥大學, 2003.

[33] 王明喜, 張麗霞, 王長平. 馬錢子總生物堿修復膝骨關節(jié)炎大鼠軟骨損傷的效果觀察及作用機制研究 [J]. 中醫(yī)正骨, 2021, 33(5): 11-18.

[34] 洪振強, 高弘建, 蘇友新, 等. 馬錢子總堿對兔膝骨關節(jié)炎模型軟骨損傷修復作用及機制 [J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2018, 38(8): 991-996.

[35] 徐軍. 馬錢子堿液關節(jié)腔內(nèi)注射對兔膝關節(jié)軟骨損傷的影響 [D]. 太原: 山西醫(yī)科大學, 2013.

[36] 宋曉亮. 馬錢子堿對體外培養(yǎng)的人軟骨細胞增殖的影響 [D]. 太原: 山西醫(yī)科大學, 2013.

[37] 李鳳霞, 胡致平, 聶富意, 等. 馬錢子治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究進展 [J]. 新中醫(yī), 2020, 52(13): 17-20.

[38] 龔芝, 孫麗榮, 曹雄, 等. 馬錢子復合生物堿成分抑制成年大鼠海馬神經(jīng)前體細胞的分裂作用 [J]. 南方醫(yī)科大學學報, 2008, 28(12): 2121-2125.

[39] 李曉天, 張麗容, 王天奎, 等. 馬錢子堿在小鼠體內(nèi)的組織分布 [J]. 中國臨床藥理學與治療學, 2006, 11(3): 342-344.

[40] 楊洋, 周德生, Rausch W D, 等. 士的寧對多巴胺能神經(jīng)元的保護作用 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2012, 18(24): 223-227.

[41] 李明華, 張艷, 劉巨源. 馬錢子堿對大鼠海馬神經(jīng)元鈉通道的影響 [J]. 新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報, 2003, 20(6): 389-392.

[42] 周建英, 卞慧敏, 馬騁, 等. 馬錢子堿和馬錢子堿氮氧化物抗血小板聚集及抗血栓形成作用的研究 [J]. 江蘇中醫(yī), 1998(4): 41-43.

[43] 李揚. 馬錢苷對脂質(zhì)代謝及ApoCⅢ誘導的NF-κB信號通路的影響 [D]. 長春: 吉林大學, 2016.

[44] 徐萌, 李平. 馬錢子堿誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡過程中血管內(nèi)皮生長因子和上皮細胞激酶A2的表達變化 [J]. 安徽醫(yī)科大學學報, 2020, 55(2): 195-199.

[45] 曹玉鳳. 馬錢子堿對豚鼠乳頭肌動作電位及鈉、鉀通道的影響 [D]. 長春: 吉林大學, 2008.

[46] Yuan C H, Sun L R, Zhang M,. Inhibition of human Na(v)1.5sodium channels by strychnine and its analogs [J]., 2011, 82(4): 350-357.

[47] 陸躍鳴, 陳龍, 蔡寶昌, 等. 異馬錢子堿對心肌細胞作用的單鈣通道及透射電鏡分析 [J]. 安徽中醫(yī)學院學報, 1999, 18(6): 47-49.

[48] 喬翠霞, 張新峰, 程旭鋒, 等. 馬錢子水煎液對骨轉(zhuǎn)移小鼠疼痛及骨轉(zhuǎn)移灶中破骨細胞的影響 [J]. 中成藥, 2020, 42(7): 1907-1910.

[49] Li Y H, Ke Y, Zou H,. Gold nano particles synthesized fromand its anticancer activity in cholangiocarcinoma cell (KMCH-1) [J]., 2019, 47(1): 1610-1616.

[50] 趙立民, 劉玉國, 牛作興. 馬錢子堿抗腫瘤作用的研究進展 [J]. 中華腫瘤防治雜志, 2013, 20(11): 877-880.

[51] 辛菲. 馬錢子堿誘導人單核細胞白血病THP-1細胞凋亡及初步作用機制的實驗研究 [D]. 太原: 山西醫(yī)科大學, 2014.

[52] 婁諍, 王大維. 馬錢子堿誘導KG-1細胞凋亡及其機制研究 [J]. 中藥材, 2018, 41(6): 1463-1466.

[53] Shu G W, Mi X, Cai J,. Brucine, an alkaloid from seeds ofLinn., represses hepatocellular carcinoma cell migration and metastasis: The role of hypoxia inducible factor 1 pathway [J]., 2013, 222(2): 91-101.

[54] 索明珠, 李平, 張梅, 等. 馬錢子堿抑制乳腺癌細胞體外血管生成擬態(tài)的形成及其可能機制研究 [J]. 中國癌癥雜志, 2018, 28(4): 241-247.

[55] 宋萬吉, 徐夢冉, 董文欽, 等. 馬錢子堿對人乳腺癌裸鼠移植瘤生長的影響及機制探討 [J]. 安徽醫(yī)科大學學報, 2019, 54(7): 1047-1051.

[56] 夏克春, 張梅, 李平. 馬錢子堿經(jīng)皮給藥對乳腺癌骨轉(zhuǎn)移抑制機制的探討 [J]. 中華腫瘤防治雜志, 2012, 19(23): 1771-1775.

[57] 王藝華, 馬艷萍. 馬錢子堿對多發(fā)性骨髓瘤中成骨細胞及破骨細胞代謝的影響 [J]. 中國實驗血液學雜志, 2011, 19(2): 399-403.

[58] 楊珍, 馮振宇, 孟霜, 等. 馬錢子堿對人結(jié)腸癌HT-29細胞線粒體膜電位及凋亡的影響 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2020, 35(2): 950-952.

[59] 王雪, 金朗, 王炳強. 馬錢子堿對人結(jié)腸癌細胞HT-29增殖與凋亡的影響及相關機制 [J]. 中國老年學雜志, 2017, 37(17): 4194-4196.

[60] 王文佳, 司方瑩, 趙飛, 等. 馬錢子堿對人結(jié)腸癌細胞SW480增殖和周期的影響及機制研究 [J]. 中華中醫(yī)藥學刊, 2020, 38(8): 106-109.

[61] 馮振宇, 孟霜, 常劍敏, 等. 偽士的寧對人結(jié)腸癌HT-29細胞凋亡的影響及其機制研究 [J]. 中國藥房, 2020, 31(2): 179-183.

[62] Ren H, Zhao J P, Fan D S,. Alkaloids from nux vomica suppresses colon cancer cell growth through Wnt/β-catenin signaling pathway [J]., 2019, 33(5): 1570-1578.

[63] Kim D U, Kim D G, Choi J W,. Loganin attenuates the severity of acute kidney injury induced by cisplatin through the inhibition of ERK activation in mice [J]., 2021, 22(3): 1421.

[64] 劉昌孝, 陳士林, 肖小河, 等. 中藥質(zhì)量標志物 (Q-Marker): 中藥產(chǎn)品質(zhì)量控制的新概念 [J]. 中草藥, 2016, 47(9): 1443-1457.

[65] 中國科學院中國植物志編輯委員會. 中國植物志 (第八卷) [M]. 北京: 科學出版社, 1992: 230.

[66] 馬密霞, 胡文祥, 劉接卿, 等. 馬錢子屬植物的藥理毒理作用及臨床應用進展 [J]. 中國醫(yī)院藥學雜志, 2007, 27(12): 1725-1728.

[67] 肖治均, 劉傳鑫, 楊欣欣, 等. 雷公藤研究進展及其質(zhì)量標志物的預測分析 [J]. 中草藥, 2019, 50(19): 4752-4768.

[68] 張靜雅, 曹煌, 許浚, 等. 中藥苦味藥性表達及在臨證配伍中的應用 [J]. 中草藥, 2016, 47(2): 187-193.

[69] 張靖, 張瑤, 王彥麗, 等. 有毒中藥抗癌作用及其與歸經(jīng)的相關性研究進展 [J]. 中草藥, 2013, 44(13): 1852-1859.

[70] 王小雪, 盧杉, 鄭思悅, 等. 歸經(jīng)中藥化學成分、藥理作用及臨床應用的實證分析 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2018, 33(11): 5193-5197.

[71] Otuki M F, Ferreira J, Lima F V,. Antinociceptive properties of mixture of alpha-amyrin and beta-amyrin triterpenes: Evidence for participation of protein kinase C and protein kinase A pathways [J]., 2005, 313(1): 310-318.

[72] 潘稚云, 朱天冀, 賈茹, 等. 馬錢子堿氮氧化物對MKN-45瘤株增殖及活體血管生成的影響 [J]. 南京中醫(yī)藥大學學報, 2014, 30(6): 557-560.

[73] Ma L, Yang X W, Xu W,. Intestinal permeability of antitumor alkaloids from the processed seeds ofin a Caco-2 cell model [J]., 2009, 75(6): 631-634.

[74] 胡家銘, 陳權(quán), 肖魯偉, 等. 馬錢苷藥理學作用及機制研究進展 [J]. 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志, 2020, 26(8): 1206-1209.

[75] Recio M C, Giner R M, Má?ez S,. Structural considerations on the iridoids as anti-inflammatory agents [J]., 1994, 60(3): 232-234.

[76] Hwang E S, Kim H B, Lee S,. Loganin enhances long-term potentiation and recovers scopolamine-induced learning and memory impairments [J]., 2017, 171: 243-248.

[77] 劉凱, 許惠琴, 吳佳蕾, 等. 馬錢苷、莫諾苷對AGEs損傷HUVEC的增殖的影響 [J]. 中藥藥理與臨床, 2014, 30(3): 53-57.

[78] Abirami A, Sinsinwar S, Rajalakshmi P,. Antioxidant and cytoprotective properties of loganic acid isolated from seeds ofL. against heavy metal induced toxicity in PBMC model [J]., 2022, 45(1): 239-249.

[79] Zhong Z F, Han J, Zhang J Z,. Pharmacological activities, mechanisms of action, and safety of salidroside in the central nervous system [J]., 2018, 12: 1479-1489.

[80] Zhang X M, Xie L, Long J Y,. Salidroside: A review of its recent advances in synthetic pathways and pharmacological properties [J]., 2021, 339: 109268.

[81] Nabavi S F, Tejada S, Setzer W N,. Chlorogenic acid and mental diseases: From chemistry to medicine [J]., 2017, 15(4): 471-479.

[82] 張鐵軍, 白鋼, 劉昌孝. 中藥質(zhì)量標志物的概念、核心理論與研究方法 [J]. 藥學學報, 2019, 54(2): 187-196, 186.

[83] 潘自皓, 顧薇, 彭薇, 等. 基于5種生物堿定量分析的馬錢子總堿提取工藝優(yōu)化 [J]. 食品與生物技術學報, 2014, 33(6): 641-646.

[84] Tang H B, Cai H L, Li H D,. HPLC-DAD method for comprehensive quality control of[J]., 2013, 51(11): 1378-1383.

[85] 張加余, 張倩, 張凡, 等. HPLC-ESI-MS-MS鑒定馬錢子中4類生物堿成分 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2013, 19(9): 147-151.

[86] 劉玉杰. 砂炒馬錢子炮制工藝優(yōu)化與質(zhì)量評價研究 [D]. 成都: 成都中醫(yī)藥大學, 2014.

[87] Tian J X, Tian Y, Xu L,. Characterisation and identification of dihydroindole-type alkaloids from processed semen strychni by high-performance liquid chromatography coupled with electrospray ionisation ion trap time-of-flight mass spectrometry [J]., 2014, 25(1): 36-44.

[88] 閆靜, 林佳娣, 劉志強, 等. 馬錢子微量生物堿的ESI-MS/MS質(zhì)譜分析 [J]. 藥物分析雜志, 2020, 40(1): 132-138.

[89] 秦偉瀚, 陽勇, 李卿, 等. 基于UPLC-Q-TOF-MS法砂燙馬錢子化學成分定性研究 [J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2019, 30(3): 362-369.

[90] 周道根, 張的鳳, 龔千峰, 等. 反相高效液相色譜法測定馬錢子不同炮制品中士的寧與馬錢子堿的含量 [J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2007, 18(1): 33-34.

[91] 楊國忠, 陳玲, 朱舟. HPLC測定馬錢子炮制品中士的寧和馬錢子堿氮氧化物的含量 [J]. 中國中醫(yī)急癥, 2013, 22(1): 32-33.

[92] 王丹丹, 李俊松, 蔡寶昌. 馬錢子炮制前后士的寧及馬錢子堿氮氧化物的含量變化研究 [J]. 中華中醫(yī)藥學刊, 2009, 27(2): 435-436.

[93] 王丹丹, 李俊松, 蔡寶昌. HPLC法同時測定制馬錢子中4種生物堿類成分的含量 [J]. 藥學與臨床研究, 2008, 16(6): 523-524.

[94] Jiang X, Tian J X, Wang M,. Analysis of dihydroindole-type alkaloids inunprocessed and processed seeds by high-performance liquid chromatography coupled with diode array detection and mass spectrometry [J]., 2019, 42(22): 3395-3402.

[95] 郭玉巖, 馬文保, 肖洪彬, 等. 基于UPLC-MS技術分析馬錢子-甘草藥對配伍湯液不同相態(tài)中毒效物質(zhì)的變化規(guī)律 [J]. 中草藥, 2017, 48(23): 4880-4884.

[96] 張芳, 潘揚, 劉亮鏡. 毛細管區(qū)帶電泳法同時測定制馬錢子中4種生物堿的含量 [J]. 藥物生物技術, 2011, 18(5): 441-444.

[97] 曹紅, 劉云, 靳守東. 毛細管區(qū)帶電泳法測定馬錢子藥材及其制劑中士的寧和馬錢子堿的含量 [J]. 藥物分析雜志, 2002, 22(4): 279-282.

[98] 孫麗榮, 袁春華, 李曉文, 等. 油炸馬錢子的生物堿成分研究 [J]. 紅河學院學報, 2011, 9(4): 5-8.

[99] 陳軍, 蔡寶昌, 沈春云, 等. 馬錢子總生物堿的含量測定 [J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2007, 18(6): 468-471.

[100]余南才, 孫翠華. 馬錢子炮制前后有效成分及元素含量的研究 [J]. 中國中藥雜志, 1998, 23(2): 85-87.

[101]張美玉, 陳明明, 張克霞, 等. 馬錢子致大鼠腎毒性作用部位的化學成分 [J]. 沈陽藥科大學學報, 2018, 35(3): 193-198.

[102]呂明明, 褚艷杰, 侯臣之, 等. 馬錢子致神經(jīng)毒性部位及白芍神經(jīng)保護作用部位的篩選 [J]. 沈陽藥科大學學報, 2018, 35(10): 865-871.

[103]Liu F, Wang X L, Han X,. Cytotoxicity and DNA interaction of brucine and strychnine-two alkaloids of[J]., 2015, 77: 92-98.

[104]Zhou Z Y, Lin Y K, Gao L,. Cyp3a11 metabolism-based chronotoxicity of brucine in mice [J]., 2019, 313: 188-195.

[105]張莉, 李莉, 杜冠華. 中藥馬錢子毒的歷史認識與現(xiàn)代研究 [J]. 中藥藥理與臨床, 2018, 34(4): 191-194.

[106]葉定江. 馬錢子炮制歷史沿革的研究 [J]. 中國中藥雜志, 1993, 18(5): 259-262.

[107]劉玉杰, 吳伯英, 徐穎, 等. 馬錢子本草考證與炮制沿革研究 [J]. 中藥與臨床, 2014, 5(2): 90-92.

[108]王曉崴, 龔千鋒. 馬錢子的炮制沿革、藥理作用及安全性的研究進展 [J]. 江西中醫(yī)藥, 2013, 44(3): 70-72.

[109]Cai B C, Yang X W, Hattori M,. Processing of nux vomica (I): Four new alkaloids from the processed seeds of[J]., 1990, 44(1): 42-46.

[110]馬恩耀, 高明, 蔣麗蕓, 等. 嶺南特色飲片醋馬錢子炮制前后HPLC指紋圖譜研究 [J]. 中藥材, 2017, 40(1): 77-80.

[111]李俊松, 王丹丹, 蔡寶昌. 馬錢子炮制前后HPLC指紋圖譜研究 [J]. 中藥材, 2009, 32(12): 1816-1819.

[112]史永平, 孔浩天, 李昊楠, 等. 梔子的化學成分、藥理作用研究進展及質(zhì)量標志物預測分析 [J]. 中草藥, 2019, 50(2): 281-289.

[113]Liu Y W, Zhu R H, Li H D,. Ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometric method for the determination of strychnine and brucine in mice plasma [J]., 2011, 879(26): 2714-2719.

[114]Lin A H, Su X C, She D,. LC-MS/MS determination and comparative pharmacokinetics of strychnine, brucine and their metabolites in rat plasma after intragastric administration of each monomer and the total alkaloids from[J]., 2016, 1008: 65-73.

[115]翁德新, 戴其昌. RP-HPLC法同時測定人血漿中馬錢子4種生物堿的含量 [J]. 中國藥房, 2014, 25(15): 1371-1373.

[116]Guo J, Meng H, Li H H,. Determination of strychnine, brucine, strychnine N-oxide, and brucine-oxide in plasma samples after the oral administration of processedextract by high-performance liquid chromatography with ultrasound-assisted mixed cloud point extraction [J]., 2016, 39(13): 2553-2561.

[117]Chen X G, Lai Y Q, Cai Z W. Simultaneous analysis of strychnine and brucine and their major metabolites by liquid chromatography-electrospray ion trap mass spectrometry [J]., 2012, 36(3): 171-176.

[118]張敏, 鄧陽, 文雅潔, 等. 基于HPLC-UV-MS技術的甘草和馬錢子大鼠口服入血成分分析 [J]. 中國藥學雜志, 2017, 52(9): 731-737.

Research progress on chemical components and pharmacological effects ofand prediction and analysis of its quality markers

QIN Bei-bei1, JIA Ze-fei1, WANG Jia-li1, MA Lin1, ZHANG Tie-jun2, HU Jing1

1. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 301617, China 2. Tianjin Key Laboratory of Quality Marker of Traditional Chinese Medicine, Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300462, China

Maqianzi () is a poisonous traditional Chinese medicine with a long history and remarkable curative effect. Its chemical components are complex, including alkaloids, phenolic acids, terpenoids, steroids and glycosides, etc., which have shown significant pharmacological effects on bone, nervous and cardiovascular system, especially unique analgesia and anti-tumor effects. With the development and application of modern scientific research technology, new chemical constituents and pharmacological activities ofhave been discovered constantly, which has a broad prospect of development and utilization. Based on the theory of quality marker (Q-Marker), this paper summarizes the chemical constituents and pharmacological activities of, predicts and analyzes its Q-Marker from the aspects such as genetic relationship, traditional medicine property, efficacy, toxicity, processing, measurable components and blood components of, with view to providing the references for establishing a more scientific and reasonable quality evaluation system ofand its further development and utilization.

; quality marker (Q-marker); alkaloids; phenolic acids; iridoids; strychnine; brucine

R282.71

A

0253 - 2670(2022)18 - 5920 - 14

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.18.034

2022-04-11

國家自然科學基金面上項目（81873083）

秦貝貝，女，碩士研究生。E-mail: 319006239@qq.com

胡 靜，副教授。E-mail: hjtju@163.com

[責任編輯 潘明佳]