●周禹彤 潘子怡 趙婉婷 孫高原 王 楠 劉 璐 王思涵 徐 巖 劉美琦 何曉燕

（通化師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 吉林 通化 134002）

獾（Meles meles）別名狗獾、山狗、貆等，是狗獾屬哺乳類的半冬眠動(dòng)物[1]。獾肉可食用，且味道鮮美。獾子油是由獾的皮下脂肪提取的淡黃色、氣味辛涼的油脂，具有清熱解毒、止痛、潤(rùn)腸等諸多功效[2-3]。獾子油經(jīng)常以外敷的方式用來(lái)治療燙傷?！侗静菥V目》中關(guān)于獾子油的藥用記載也有很多，可用于治療小兒疳瘡、子宮脫垂、咯血、白禿等病癥[4]。

慢性腎功能衰竭（CRF）是各種原因引起的腎臟損害進(jìn)展惡化達(dá)終末期的表現(xiàn)。在臨床上患者一般表現(xiàn)為雙下肢水腫，胃氣上逆，頭暈，乏力，胸悶氣短等[5]。致病的原因一般有藥物誘導(dǎo)、進(jìn)食不規(guī)律、酗酒等。近年來(lái)，中醫(yī)學(xué)在預(yù)防和治療CRF方面獲得了許多的經(jīng)驗(yàn)，中藥用于治療CRF疾病也已經(jīng)得到腎病學(xué)者的關(guān)注，目前研究最多的治療CRF的中藥是大黃[6]，但對(duì)于獾子油治療CRF的研究尚未見報(bào)道。本文通過(guò)腺嘌呤誘導(dǎo)小鼠CRF來(lái)探究獾子油對(duì)CRF小鼠的治療作用，以期為今后開發(fā)新的治療CRF藥物或保健品提供一定的試驗(yàn)數(shù)據(jù)依據(jù)，也可為獾子油的藥用價(jià)值研究提供新的方向。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種小白鼠，雄性，體重為（20.03±2.13）g，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司，許可證號(hào)：SCXK（遼）2020-0001。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品和儀器

腺嘌呤（美國(guó)Sigma公司）；尿毒清顆粒（康臣藥業(yè)有限責(zé)任公司）；獾子油；羧甲基纖維素鈉；尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、尿酸（UA）試劑盒；URIT-880型半自動(dòng)生化分析儀；高速離心機(jī)；PMA7500動(dòng)物天平；恒溫水浴鍋。

1.3 動(dòng)物模型建立

除正常空白組外，在實(shí)驗(yàn)的第1、3、5天，小鼠灌胃給予250 mg/kg的腺嘌呤混懸液（配置0.5‰羧甲基纖維素鈉溶液，再加入腺嘌呤配置成25 mg/mL的腺嘌呤混懸液）[7-8]，為維持小鼠CRF狀態(tài)，在后續(xù)給藥的28 d期間，每隔7 d灌胃1次，灌入同等劑量的腺嘌呤混懸液。

1.4 分組和給藥

蛇形分組法將60只小鼠分為6組。根據(jù)《中藥藥理研究方法學(xué)》[9]，可計(jì)算出每天小鼠灌胃尿毒清的劑量為0.38 mg/10 g，并按照0.1 mL/10 g給藥，正?？瞻捉M和模型組灌胃給予相同體積的蒸餾水，而獾子油高、中、低劑量組每天獾子油的灌胃給藥劑量為0.2 mL/10 g、0.15 mL/10 g、0.1 mL/10 g，試驗(yàn)周期為28 d。

1.5 血清中BUN、Cr、UA的測(cè)定

飼養(yǎng)周期結(jié)束后，隨機(jī)取10只小鼠，將小鼠頸椎脫臼處死，立即取其心臟血液，用離心機(jī)在3500 r/min條件下離心20 min，取上清液即血清，測(cè)定血清中BUN、Cr、UA的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 獾子油對(duì)腺嘌呤致慢性腎衰竭小鼠血清中BUN、Cr含量的影響

由表1可知，灌胃給藥28 d后，與正?？瞻捉M小鼠比較，模型組小鼠血清中的BUN、Cr含量存在差異性顯著（P＜0.05），說(shuō)明腺嘌呤混懸液致小鼠CRF模型建立成功；與模型組比較，尿毒清組和獾子油高、中、低劑量組小鼠血清中的BUN、Cr含量均表現(xiàn)存在差異性顯著（P＜0.05），說(shuō)明尿毒清和獾子油高、中、低劑量對(duì)腺嘌呤混懸液致小鼠CRF均有明顯的恢復(fù)作用，且隨著獾子油給藥劑量的增加，恢復(fù)作用逐漸增強(qiáng)，同時(shí)與尿毒清組作用越接近。因此，獾子油高劑量作用最佳。

表1 不同處理腺嘌呤致慢性腎衰竭小鼠血清中BUN、Cr含量

2.2 不同處理腺嘌呤致慢性腎衰竭小鼠血清中UA含量

由表2可知，灌胃給藥28 d后，與正?？瞻捉M小鼠比較，模型組小鼠血清中UA含量存在顯著性差異（P＜0.05），說(shuō)明腺嘌呤混懸液致小鼠CRF模型建立成功；尿毒清組和獾子油高、中、低劑量組小鼠血清中的UA含量與模型組比較存在差異性顯著（P＜0.05），說(shuō)明尿毒清和獾子油高、中、低劑量對(duì)腺嘌呤混懸液致小鼠CRF均有明顯恢復(fù)作用；且隨著獾子油給藥劑量的增加，恢復(fù)作用逐漸增強(qiáng)，同時(shí)與尿毒清組作用越接近。因此，獾子油高劑量作用最佳。

表2 不同處理腺嘌呤致慢性腎衰竭小鼠血清中UA含量

3 討論

獾子油常用于治療燙傷、燒傷且可淡化疤痕，說(shuō)明其有殺菌、消毒功能，可促進(jìn)細(xì)胞再生。獾子油中含有不飽和脂肪酸及飽和脂肪酸，其中不飽和脂肪酸含量較高，主要有降血脂、抗炎、抗腫瘤等諸多藥用功效[10]，飽和脂肪酸含量較低，其可通過(guò)減少炎癥及纖維化對(duì)酒精性肝病進(jìn)行防治。本試驗(yàn)選擇腺嘌呤誘導(dǎo)并建立CRF小鼠模型，是因?yàn)橄汆堰收T導(dǎo)小鼠CRF致病機(jī)理與人類患病者的病理過(guò)程相類似。腺嘌呤誘導(dǎo)CRF的致病機(jī)理是濃度較高的腺嘌呤混懸液進(jìn)入體內(nèi)后，在黃嘌呤氧化酶的作用下生成不溶于水的2，8-二羥基腺嘌呤沉積，影響氮質(zhì)化合物的排泄和電解質(zhì)等物質(zhì)的代謝[11-12]。此誘導(dǎo)方法可導(dǎo)致腎臟形態(tài)異常、代謝功能紊亂，從而實(shí)現(xiàn)CRF模型的構(gòu)建。

BUN和Cr均是體內(nèi)除蛋白質(zhì)外的一類含氮化合物，經(jīng)過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)作用再排出到體外，若腎功能異常，腎小球?yàn)V過(guò)率降低，BUN和Cr排出量下降，從而導(dǎo)致血清中BUN和Cr含量升高。因此，它們可作為判斷腎功能是否正常的重要指標(biāo)。UA既是非蛋白含氮化合物，也是嘌呤代謝的終產(chǎn)物，血中UA也需經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)后再排出到體外。若腎功能異常，則只有少量的UA排出體外，從而使UA在血清中的含量升高，因此，血液中UA含量的多少也能反映出腎功能的好壞。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，獾子油可降低由腺嘌呤所致CRF小鼠血清中BUN、Cr、UA的含量，說(shuō)明獾子油可以改善腺嘌呤致CRF小鼠的腎功能。因此，獾子油作為一種新型治療CRF的藥物，有進(jìn)一步研究的意義。