錢進，霍立茹，*，張倩倩（.徐州醫(yī)科大學，江蘇 徐州 000；.南京濟群醫(yī)藥科技股份有限公司，南京 00）

哌柏西利片是治療乳腺癌晚期的主要藥物。其片劑因主藥含量大，可壓性及流動性不佳而較難制劑化，且主藥在pH 4.5介質(zhì)中溶解度差而難以產(chǎn)業(yè)化，故需選用適宜的輔料進行制備[1-3]。琥珀酸常作為片劑的助溶劑、潤滑劑等，具有抗結(jié)塊、改善流動性及提高藥物穩(wěn)定性和溶解度等作用。不同目數(shù)的琥珀酸具有不同特性，能夠從結(jié)合性、溶解性及穩(wěn)定性等多方面影響片劑的質(zhì)量，因此琥珀酸目數(shù)的篩選尤為重要。本試驗通過對比不同目數(shù)琥珀酸的主要功能性指標，分別制備處方研究其對哌柏西利片制備過程中物料流動性、可壓性及包衣片的溶出曲線、有關(guān)物質(zhì)的影響，篩選出合適目數(shù)（粒徑范圍）的琥珀酸用于哌柏西利片的制備[4-6]。

1 材料

1.1 儀器

AL104型電子天平（Mettler Toledo），6S-OCEDM微量電子天平（Sartorius），U3000高效液相色譜儀（DIONEX），BM2000 顯微鏡（江南永新光學儀器有限公司），GL2-35 干法制粒機（張家港市開創(chuàng)機械制造有限公司），ZPS-8壓片機（上海信源制藥機械有限），S250SMART高速壓片機（山東新馬制藥裝備有限公司），三維混合機（南京銳霸科技有限公司），YD-35 硬度儀（天津市鑫洲科技有限公司），MB-35 水分測定儀（奧豪斯儀器有限公司），HELOS/BR-RODOS/T4 激光粒度測定儀（Sympatec），UV-2600 紫外分光光度計（日本島津），F(xiàn)ADT-1202 自動取樣溶出儀（Focs），高效包衣機（深圳信宜特科技有限公司），藥品強光照射試驗箱（重慶永生實驗儀器廠），恒溫恒濕箱（施都凱儀器設(shè)備有限公司）。

1.2 試藥

哌柏西利片（輝瑞公司，批號：EW2912，規(guī)格：125 mg/片）；哌柏西利片（南京濟群醫(yī)藥科技股份有限公司，規(guī)格：125 mg/片，批號分別為210320、210402、210411、210422、210506-1/-2）；對照品哌柏西利（批號：20091201，純度：99.90%）、雜質(zhì)A（批號：21416，純度：99.31%）、雜質(zhì)B（批號：21446，純度：99.31%）（中國食品藥品檢定研究院）；琥珀酸（南京化學，批號：201030083C、201040091C、201030062C）；微晶纖維素（旭化成，批號：2624，型號：PH102）；羧甲基纖維素鈉（德國瑞登梅爾，批號：3201081037）；膠態(tài)二氧化硅（德國Evonik，批號：159011814）；硬脂酸鎂（湖州展望，批號：20200103）；薄膜包衣預(yù)混劑（上?？房蛋录夹g(shù)有限公司）。

2 方法及結(jié)果

2.1 琥珀酸功能性指標測定

結(jié)合原料流動性及可壓性較差的性質(zhì)并查閱產(chǎn)品介紹，選擇4種具有代表性的琥珀酸（30目、40目、60目、80目）進行考察，通過其相關(guān)指標特性進行篩選。

2.1.1 粒徑分布的測定 使用激光粒徑儀干法進樣測定琥珀酸的粒徑分布，分散壓力為4 bar，進樣速率70%，使用RAOXO 2.0 軟件對不同目數(shù)篩分的琥珀酸粒度分布進行分析，結(jié)果見圖1、表1。

圖1 琥珀酸粒度分布圖Fig 1 Particle size distribution of succinic acid

2.1.2 流動性的測定 測定琥珀酸的休止角以考察其流動性，具體方法為將漏斗固定于水平鐵架臺上，從漏斗中緩慢加入物料至物料圓錐體高度不再增加，量取物料垂直高度及圓錐體半徑，以物料垂直高度及圓錐半徑比為正切值計算休止角[7]，每批樣品測量 3 次取平均值，結(jié)果見表 1。

2.1.3 堆密度、振實密度及壓縮性指數(shù) 參照2020年版《中國藥典》（ChP2020）四部通則0993[8]，測定不同目數(shù)琥珀酸的堆密度及振實密度，根據(jù)公式壓縮性指數(shù)＝100×（堆密度－振實密度）/堆密度，計算壓縮性指數(shù)，結(jié)果見表 1，不同目數(shù)琥珀酸的各指標均存在一定差異，將其作為哌柏西利片組成成分，分別制備成制劑后進一步確定其影響片劑的關(guān)鍵指標及選擇最終的目數(shù)。

表1 琥珀酸功能性指標測定Tab 1 Functional indexes of succinic acid

2.2 制劑相關(guān)指標的測定

分別用目數(shù)為＞30、30～40、40～60、60～80的琥珀酸與原料、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、膠態(tài)二氧化硅、硬脂酸鎂過篩后稱重混合，混合后物料進行干法制粒，樣品批號對應(yīng)為 210320、210402、210411、210422，4 批樣品其他輔料種類、用量以及制備工藝均不變。

2.2.1 混粉相關(guān)指標的測定 ① 休止角的測定：取4批樣品混粉參照“2.1.2”項下方法測定休止角，每批樣品測量3次取平均值，結(jié)果見表 2。

② 壓縮性指數(shù)的測定：取4批樣品混粉參照“2.1.3”項下方法測定壓縮性指數(shù)，每批樣品測量3次取平均值，結(jié)果見表 2。

③ 顆粒率的測定：參照 ChP2020 四部通則0982單篩分法[8]測定 4批樣品預(yù)混粉60目以上的顆粒率，每批樣品測量3次，取平均值，結(jié)果見表2。使用60～80目的琥珀酸所制備的混粉休止角明顯大于45°，流動性較差，需關(guān)注其片劑含量均勻度是否符合要求。

表2 混粉相關(guān)指標的測定結(jié)果Tab 2 Related indexes of powder mixture

2.2.2 片芯相關(guān)指標的測定 將 4 批樣品在同一壓片環(huán)境及設(shè)備條件下分別壓片后進行片劑相關(guān)指標的考察。

① 外觀及斷層：在壓片過程中觀察各批樣品的外觀性狀及斷層現(xiàn)象。4 批樣品在實驗室壓片數(shù)量為 500 片左右時均未出現(xiàn)斷層現(xiàn)象，片劑片重穩(wěn)定。繼續(xù)進一步放大批量（2000片）并使用工廠設(shè)備壓制片劑，考察壓片是否斷層，以確定處方工藝的可行性，結(jié)果見表 3及圖2。

圖2 片芯外觀（批號：210402）Fig 2 Core appearance（batch No.210402）

② 硬度的測定：每批樣品在連續(xù)壓片過程中隨機取樣20片使用 MB-35 硬度儀測量片芯硬度，結(jié)果見表 3。

③ 含量均勻度的測定：參照 ChP2020 四部通則含量均勻度檢查法[8]，每批樣品取10片片芯檢測樣品的含量均勻度，結(jié)果見表 3。60～80目琥珀酸流動性差，出現(xiàn)斷層，故而含量均勻度不合格；＞30目琥珀酸壓片時，硬度只有120 N，可壓性不好。因此下一步重點考察30～40目和40～60目琥珀酸所制制劑溶出曲線。

表3 片芯相關(guān)指標測定結(jié)果Tab 3 Related indexes of chip core

2.2.3 溶出曲線的測定

① 溶出試驗條件：溶出方法為槳法，分別以水、pH 1.0 鹽酸溶液、pH 4.5 醋酸鹽緩沖液、pH 6.8 磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速均為 75 r·min－1，溶出介質(zhì)體積均為 900 mL，溶出介質(zhì)溫度均為（37±0.5）℃[9]。

② 溶液的配制：精密稱取哌柏西利片對照品約12 mg置100 mL 量瓶中，加入少量溶出介質(zhì)超聲溶解并定容，再精密移取5 mL置50 mL量瓶中，加入溶出介質(zhì)定容，得對照品溶液。分別于各取樣時間點取出溶液10 mL，并補充同等溫度的溶出介質(zhì)10 mL，將所取樣品溶液過濾，取續(xù)濾液1 mL 用介質(zhì)稀釋定容至10 mL作為供試品溶液。

③ 溶出曲線的測定：將210402 及210411批片芯均使用同一批薄膜包衣預(yù)混劑進行包衣，測定2批樣品包衣片及參比制劑（各12片）在4種介質(zhì)中的溶出曲線，具體方法為取各對照品及供試品溶液，參照 ChP2020 四部通則0401紫外-可見分光光度法[8]在353 nm處測量吸光度，按外標法計算溶出量，繪制溶出曲線，計算相似因子f2[10]。

結(jié)果表明 2 批自制樣品在 pH 1.0、水、pH 6.8介質(zhì)中的溶出曲線均與參比制劑相似，在pH 4.5中210402 批樣品溶出曲線與參比制劑相似，f2＞85，而210411批樣品溶出速率慢于參比制劑，f2只有61，故接下來對210402 批樣品進行影響因素試驗，考察初步穩(wěn)定性。溶出曲線見圖3。

圖3 參比制劑與 2 批自制樣品在不同介質(zhì)中的溶出曲線Fig 3 Dissolution curve of the reference preparation and 2 batches of self-made samples in different dissolution media

2.2.4 有關(guān)物質(zhì)的測定

① 色譜條件：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫為45℃；流速為 1.0 mL·min－1；進樣量為 20 μL；檢測波長為 250 nm；流動相A為0.03%三氟乙酸水，B為0.03%三氟乙酸乙腈；稀釋溶劑為0.1 mol·L－1HCl-乙腈（80∶20），梯度洗脫，洗脫程序如下：0～10 min，90%A；10～40 min，90%～70%A；40～65 min，70%～15%A；65～66 min，15%～90%A；66～75 min，90%A。

② 溶液的制備：取包衣片研磨后細粉50 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，超聲溶解，用稀釋溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取哌柏西利、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B，精密稱定，用稀釋溶劑稀釋成每1 mL含哌柏西利0.5 mg及雜質(zhì)A、雜質(zhì)B各含5 μg的系統(tǒng)溶液。取各溶液進樣測定，各成分分離度符合藥典要求，見圖4。

圖4 系統(tǒng)溶液色譜圖Fig 4 Chromatogram of system solution

取 210402 批自制樣品及參比制劑進行影響因素試驗，將各樣品分別放置于高溫（60℃）、高濕（RH 92.5%）以及光照[（4500±500）lx]條件下于 5、10、30 d取樣檢測有關(guān)物質(zhì)。結(jié)果表明自制樣品各雜質(zhì)含量均不高于參比制劑，且雜質(zhì)增長趨勢與參比制劑基本一致，結(jié)果見表 4。

表4 有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果Tab 4 Related substances

2.3 不同批次琥珀酸（30～40目）主要功能性指標一致性考察

選用2批不同批號（批號：201030083C、201040091C）琥珀酸（30～40目）參照“2.1”及“2.2”項下方法測定主要功能性指標并制備樣品（批號分別為 210506-1、210506-2）進行研究，以考察不同批次輔料功能是否具有一致性，并確定不同批次輔料制備的樣品質(zhì)量是否一致。結(jié)果表明，不同批次的琥珀酸（30～40目）主要功能性指標檢測結(jié)果及制劑相關(guān)檢測結(jié)果均無明顯差異，表明該輔料無明顯批間差異，制備的樣品質(zhì)量基本一致（見表5～7及圖5）。

圖5 參比制劑與 2 批自制樣品在不同介質(zhì)中的溶出曲線Fig 5 Dissolution curve of the reference preparation and 2 batches of self-made samples in different dissolution medium

表5 不同批次琥珀酸(30～40目)功能性指標測定結(jié)果Tab 5 Functional indexes of different batches of succinic acid (30～40 mesh)

3 討論

3.1 流動性

從流動性角度分析，不同目數(shù)的琥珀酸因粒徑大小差異導致流動性不同，從而影響制劑混粉的流動性。篩分得到60～80目的琥珀酸，粒徑小，批量放大后，壓片出現(xiàn)斷層，混粉流動性差，不適合進一步研究。小于60目的琥珀酸，粒徑較大，沒有出現(xiàn)斷層現(xiàn)象，適合進一步研究。

表6 不同批次琥珀酸(30～40目)制劑相關(guān)指標測定結(jié)果Tab 6 Related indexes of different batches of succinic acid (30～40 mesh) preparations

表7 有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果Tab 7 Related substances

3.2 可壓性

從可壓性角度分析，＞30目的琥珀酸，粒徑大，批量放大壓片時，主壓片厚調(diào)至最小后，片芯硬度仍然只有120 N，達不到參比制劑的目標硬度（150～180 N）。故不適合進一步研究。

3.3 崩解特性

崩解特性角度分析，篩分得30～40目琥珀酸所制得制劑在區(qū)分力介質(zhì)中（pH 4.5）崩解現(xiàn)象與參比制劑相似，在12 min左右崩解。但是40～60目琥珀酸所制得制劑在18 min左右崩解，且終點累計溶出度只有80%左右[5]。

綜上所述，琥珀酸（30～40目）不同批次樣品主要功能性指標檢測的結(jié)果基本一致，功能具有一致性，所制備的3 批哌柏西利混粉流動性、可壓性均較好，片劑溶出行為與參比制劑相似，產(chǎn)品質(zhì)量與參比制劑一致，故適合作為哌柏西利的組成成分并進一步用于放大生產(chǎn)[11-12]。