秦志清，梁 萍，林建斌，王茂元，劉銀華，李學貴，邱曼麗，黃洪貴

（福建省淡水水產(chǎn)研究所，福建福州 350002）

蕪萍（Wolffia arrhiza）屬于浮萍科、蕪萍屬的多年生飄浮植物，又名無根萍、瓢莎和粒萍等（黃斌，2011），細小如沙，為世界上最小的種子植物。蕪萍生長快、適應性強、分布很廣，除了北極和沙漠地區(qū)外全球各地水域均有分布，我國各?。▍^(qū)）亦有分布（印萬芬，1998）。其營養(yǎng)豐富，氨基酸組分平衡性好，特別是畜禽、水產(chǎn)飼料中幾種主要限制性氨基酸（蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸和色氨酸等）含量均較高（黃斌，2011）；同時易被消化吸收，適口性好，有望成為植物性蛋白源及活性黃酮類成分的新來源。

在我國傳統(tǒng)養(yǎng)魚學中，蕪萍被用作天然生物餌料來養(yǎng)魚的歷史很悠久，但將其作為飼料原料添加到配合飼料中，以驗證其功效的研究是20世紀末才開始。陳永安等（1999）開展了蕪萍配合飼料網(wǎng)箱養(yǎng)魚試驗；黃斌（2011a）在基礎(chǔ)日糧中添加蕪萍，結(jié)果表明其對泥鰍的生長有顯著影響；黃斌等（2011b）還探討了日糧添加蕪萍對紅色草金魚生長及體色的影響，認為蕪萍不但能影響紅色草金魚的生長性能，而且還能顯著改善其體色；季鵬飛等（2012）分析了不同蕪萍餌料組分對兩種社群規(guī)模的鰲蝦生長影響。但目前蕪萍作為主要飼料原料養(yǎng)殖羅非魚的研究鮮見報道。本研究擬在基礎(chǔ)飼料中添加不同比例的蕪萍粉，探討其對羅非魚生長、肌肉營養(yǎng)及免疫指標的影響，旨在開發(fā)新的飼料原料，并為羅非魚肌肉品質(zhì)改良提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 材料來源 試驗用羅非魚為福建省淡水水產(chǎn)研究所榕橋試驗基地繁育，平均體重172 g左右。蕪萍來源于福建省閩侯縣某漁場，使用前經(jīng)去雜、濾水、晾曬、烘干、粉碎后，過60目篩獲得蕪萍粉。其質(zhì)量要求為：色澤一致，呈黃色或淺黃色粉狀；無其他污染及金屬雜質(zhì)（雜質(zhì)≤0.5%）；有青草氣味；無發(fā)酵、霉變、結(jié)塊蟲蛀及異味異嗅。

基礎(chǔ)料的常規(guī)營養(yǎng)成分為水分 （9.85±0.07）%、粗灰分（14.35±0.07）%、粗蛋白質(zhì)（32.07±0.64）%、粗脂肪（5.72±0.13）%。在基礎(chǔ)料中分別添加0、5%、10%、20%的蕪萍粉 （分別記為A、B、C、D組），混勻后用軟顆粒機制成4種顆粒飼料，經(jīng)晾曬后儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗魚養(yǎng)殖管理 試驗在福建省淡水水產(chǎn)研究所榕橋試驗基地進行。停食24 h后，從水泥池挑選規(guī)格基本一致、健康無傷的羅非魚，放入室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)中（試驗桶直徑1.0 m，水深0.8 m），每桶15尾。試驗分4個組（1個對照組、3個試驗組），每組3個平行。試驗用水為曝氣后的自來水，試驗期間水溫25～30℃、溶解氧≥5.0 mg/L、pH 6.9～7.2。循環(huán)效率為2 h/全循環(huán)，前期每隔1星期排污1次，后期每星期1次。投餌采取飽食投喂法，2次/d（上午8:00～9:00，下午3:00～4:00），以30 min內(nèi)攝食完為準。試驗周期8周 （56 d），從2020年7月20日至9月13日。

1.2.2 生長指標測定 試驗結(jié)束后，試驗魚停食24 h后測定各生長指標。計算公式如下：

增重率/%＝（增重/始重）×100；

飼料系數(shù)＝總投餌量/總增重；

成活率/%＝（試驗結(jié)束魚尾數(shù)/試驗開始魚尾數(shù)）×100；

臟體比/%＝內(nèi)臟重/魚體重×100；

肝體比/%＝肝胰臟重/魚體重×100；

肥滿度＝體重×100/體長3。

1.2.3 肌肉營養(yǎng)測定 飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，每個試驗組各取4尾魚，各取背部肌肉50 g，去皮，-20℃下冷凍備用。肌肉的水分測定參照GB 5009.3-2016常壓恒溫干燥法進行；粗灰分測定參照GB 5009.4-2016 550℃干法灰分法進行；粗蛋白質(zhì)含量測定參照GB 5009.5-2016凱氏定氮法進行；粗脂肪測定參照GB 5009.6-2016索氏提取法進行；氨基酸組成與含量 （除色氨酸外）參照GB 5009.124-2016鹽酸水解法使用氨基酸自動分析儀測定。

1.2.4 血清免疫指標測定 每個試驗桶另隨機取5尾魚，采用尾靜脈取血，4℃離心（3000 r/min，10 min）后取血清于-80℃冰箱保存待測。血清中總超氧化物歧化酶（T-SOD）、堿性磷酸酶（AKP）、溶菌酶（LZM）活性及丙二醛（MDA）含量均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒進行測定。TSOD、AKP活性和MDA含量利用酶標儀（TECAN 200PRO，瑞士）測定，而LZM活性則用紫外可見分光光度計（UV-1601型，北京瑞利分析儀器有限公司）進行測定。

1.3 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件處理，統(tǒng)計值采用“平均值±標準差”表示。

2 結(jié)果

2.1 蕪萍對羅非魚生長性能的影響 由表1可知，各組的增重率以C組最高，達到72.64%，顯著高于其他各組（P＜0.05），比對照組增加26.60%，并隨著蕪萍添加比例增加呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢，D組顯著低于其他組（P＜0.05），比對照組降低18.75%。飼料系數(shù)以D組最高，為3.10，顯著高于其他組（P＜0.05），其他各組之間差異不顯著（P＞0.05）。形體指標方面，臟體比和肥滿度在A組與B組之間、C組與D組之間差異不顯著（P＞0.05），但A、B組與C、D組之間差異顯著 （P＜0.05）；各組間的肝體比和成活率均沒有顯著差異（P＞0.05）。

表1 蕪萍對羅非魚生長性能的影響

2.2 蕪萍對羅非魚肌肉營養(yǎng)的影響

2.2.1 蕪萍對羅非魚肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分的影響由表2可知，隨著蕪萍添加比例的上升，羅非魚肌肉的水分含量略有下降，其中C組最低并與其他各組差異顯著（P＜0.05）；灰分以D組含量最高（1.33%），并呈現(xiàn)隨蕪萍添加比例的上升而逐步增加趨勢；粗蛋白質(zhì)含量也有逐步上升的趨勢，D組含量最高（23.15%），但與試驗B組、C組無顯著差異（P＞0.05）；粗脂肪含量方面，B組與對照組（A組）基本一致，C組含量最高（1.23%），且與A組和B組存在顯著差異（P＜0.05）。

表2 蕪萍對羅非魚肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分的影響 %

2.2.2 蕪萍對羅非魚肌肉氨基酸含量的影響 由表3可知，肌肉的總氨基酸（TAA）、必需氨基酸（EAA）和鮮味氨基酸（UAA）的含量、WEAA/WTAA與WEAA/WNEAA比值均以C組為最高，分別達到21.14%、8.64%、8.08%、40.87%和81.59%，但與其他各組沒有顯著差異（P＞0.05）。

表3 蕪萍對羅非魚肌肉氨基酸含量的影響 %

2.3 蕪萍對羅非魚免疫指標的影響 由表4可知，T-SOD、LZM及MDA均隨蕪萍添加比例的上升呈現(xiàn)先升后降的趨勢，其中C組的T-SOD活性顯著高于其他各組 （P＜0.05），MDA含量則以D組為最低，但試驗各組與對照組相比均差異不顯著；而AKP活性隨著蕪萍添加比例的上升而逐步升高，D組顯著高于對照組（P＜0.05）。

表4 蕪萍對羅非魚血清免疫指標的影響

3 討論

蕪萍的營養(yǎng)豐富，利用歷史悠久，用途廣泛，既有藥用價值（利尿、抗菌、解毒等作用），也可直接食用（作為蔬菜食用），同時還可作為畜禽、魚類的優(yōu)質(zhì)餌料（印萬芬，1998），特別是在草魚苗種培育中應用較多 （劉松巖，2012；葉華，2011；朱久遠，2001）。有研究表明，蕪萍含高質(zhì)量的蛋白質(zhì)，且其特性接近動物蛋白和大豆蛋白（Skillicorn，1993），這為蕪萍應用于動物飼料提供了方向和理論依據(jù)。

陳永安等（1999）探討了蕪萍配合飼料的養(yǎng)魚效果，分別在配合飼料中加入30%或40%蕪萍干粉養(yǎng)殖草魚，或加入20%～30%蕪萍干粉養(yǎng)殖鯉魚、工程鯽、淡水白鯧，結(jié)果表明其增重率明顯高于對照組，而飼料系數(shù)則明顯低于對照組。黃斌（2011）也證明在日糧中添加10%～30%的蕪萍對泥鰍的生長有正向促進作用。本研究結(jié)果表明，各試驗組羅非魚的增重率和飼料效率隨著蕪萍添加比例增加呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢，以10%添加組（C組）最高，分別達到77.12%和58.86%，顯著高于對照組及其他試驗組（P＜0.05）。這再次證明了蕪萍具有明顯的促生長作用。但添加量過高（20%添加組）反而會抑制羅非魚的生長性能，這可能是由于蕪萍添加比例增高時，其所含某些化學成分影響了羅非魚腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，具體原因有待于進一步的研究；而飼料系數(shù)的上升可能與蕪萍添加比例增加導致試驗飼料水中穩(wěn)定性降低有關(guān)。

在基礎(chǔ)飼料中添加不同比例的蕪萍干粉，對羅非魚的肌肉營養(yǎng)有一定影響。肌肉中的粗灰分和粗蛋白質(zhì)含量隨蕪萍添加比例的上升呈現(xiàn)逐步增加趨勢，而粗脂肪含量則以C組最高，達到1.23%；其肌肉的TAA、EAA和UAA的含量、WEAA/WTAA與WEAA/WNEAA比值均以C組為最高，但與其他各組差異不顯著（P＞0.05）。分析認為，這可能與蕪萍的氨基酸組分平衡性好，特別是水產(chǎn)飼料中幾種主要限制性氨基酸（蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸和色氨酸等）含量均較高有關(guān)。試驗結(jié)果還表明，羅非魚血清的T-SOD和LZM活性及MDA含量均隨蕪萍添加比例的上升呈現(xiàn)先升后降的趨勢，其中C組的T-SOD活性顯著高于其他各組（P＜0.05）。說明在配合飼料中添加一定比例的蕪萍，可提高羅非魚的機體免疫力。

4 小結(jié)

在羅非魚基礎(chǔ)飼料中添加10%的蕪萍粉具有明顯促生長、提高免疫力的效果，同時對其肌肉的營養(yǎng)也有一定改善作用。