劉 瑋，吳 東，袁翊茗，何冬太，鄭宇新，曾燕斌

（1.江西中醫(yī)藥大學(xué)，江西南昌 330006；2.華潤江中制藥集團(tuán)有限公司，江西南昌 330006； 3.中藥固體制劑制造技術(shù)國家工程研究中心，江西南昌 330006）

隨著手機(jī)、電腦的普及，人們的用眼時間越來越長。視疲勞是目前眼科非常普遍的一種疾病，中醫(yī)認(rèn)為，雙眼“看”的功能依賴于肝血的滋養(yǎng)，血液存儲于肝臟，受肝臟的調(diào)節(jié)、管束。養(yǎng)眼先養(yǎng)肝，當(dāng)感覺眼干、眼澀、眼痛等視疲勞癥狀時，需清肝以明目。視疲勞是由于用眼過度而產(chǎn)生的眼部疲勞，主要表現(xiàn)為眼部不適、干淚、酸脹和眼睛模糊等，嚴(yán)重時還會產(chǎn)生惡心、眩暈、頭痛和肩部酸痛等全身癥狀[1-2]。因此，及時緩解和改善視疲勞十分必要。目前緩解視疲勞的功能食品主要包括維生素和多種礦物質(zhì)類、中藥花色苷類等[3]。藍(lán)莓果實(shí)中花青素含量豐富，還含有多種藥效成分，具有改善視力、抗氧化、清除自由基、降血壓和調(diào)節(jié)代謝等功效[4-5]。葉黃素酯屬于類胡蘿卜素，具有抗氧化作用，能夠防止視力退化并可防止藍(lán)光對視網(wǎng)膜的損傷[6]。現(xiàn)以葉黃素酯和藍(lán)莓濃縮果汁為原料，配合果膠、麥芽糖醇液、異麥芽酮糖醇和檸檬酸等為輔料，制得凝膠糖果，經(jīng)過試驗(yàn)驗(yàn)證其功能有益于改善視覺疲勞。

藍(lán)莓（Vacciniumspp.）是杜鵑花科越橘屬的統(tǒng)稱，屬多年生低灌木，樹體大小及形態(tài)差異明顯。藍(lán)莓的花為總狀花序，果實(shí)是一種藍(lán)色小漿果，表面被一層白色果粉包裹，果肉細(xì)膩、種子極小。果實(shí)平均重0.5～2.5 g，最大重5 g，可食率為100%，酸甜適口，是一種鮮食佳品，同時也是世界糧農(nóng)組織推薦的五大健康水果之一[7]。

藍(lán)莓果實(shí)飽滿，富含多種營養(yǎng)物質(zhì)以及生物活性成分，如多糖、維生素、花青素、多酚、黃酮和兒茶素等，多種多樣的生物活性成分賦予了藍(lán)莓抗氧化、抗腫瘤、預(yù)防老年癡呆、緩解視疲勞、抗炎、抗衰老和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等功能[8]。

藍(lán)莓中花青素含量豐富，有文獻(xiàn)報道稱藍(lán)莓中的花青素含量約有400 mg/100 g[9]。研究表明，藍(lán)莓中的花青素是保護(hù)視力的重要元素，對視物模糊、眼干澀、明視持久度及總有效率有明顯改善，可使視紅素再生，增加視覺敏感度，從而減少視網(wǎng)膜以及黃斑的恢復(fù)所需時間，來達(dá)到保護(hù)視力和消除視疲勞的效果[10-11]。

葉黃素酯是葉黃素與長鏈不飽和脂肪酸所形成的酯，是葉黃素在植物中存在的主要形式，在自然界中分布廣泛，尤其大量存在于萬壽菊中，它是多種酯的混合物，包括單酯、雙酯和混合雙酯，其中雙棕櫚酸酯是最主要的酯，還有雙肉桂酸酯、肉桂酸棕櫚酸酯、棕櫚酸硬脂酸酯和雙硬脂酸酯。萬壽菊花瓣的提取物主要含有葉黃素雙棕櫚酸酯，已作為一種眼科藥物上市。天然葉黃素酯是一種類胡蘿卜素脂肪酸酯，具有著色和營養(yǎng)的雙重功效[12]。研究發(fā)現(xiàn)葉黃素酯功效與葉黃素相當(dāng)，甚至優(yōu)于葉黃素，葉黃素酯能預(yù)防藍(lán)光對視網(wǎng)膜的損傷，具有保護(hù)視網(wǎng)膜、緩解視疲勞的保健功能[13]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

藍(lán)莓濃縮汁、葉黃素酯(西安天豐生物科技有限公司)；麥芽糖醇液（山東淄博市青縣富欣生物有限公司）；異麥芽酮糖醇（江蘇先卓食品科技股份有限公司）；果膠（碭山海升果膠有限責(zé)任公司）；檸檬酸（濰坊英軒實(shí)業(yè)有限公司）。

電子天平CP114，奧豪斯儀器（上海）有限公司；752紫外可見分光光度計(jì)，上海奧譜勒儀器有限公司；分析天平，上海精天儀器有限公司；SKG微電腦電陶爐，廣東艾詩凱奇智能科技有限公司；XCD-NS-3C超聲波清洗機(jī)，濟(jì)寧鑫欣超聲電子設(shè)備有限公司；真空泵，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；手提式粉碎機(jī)，西安寶正實(shí)業(yè)有限公司；真空干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，EYELA。

1.2 藍(lán)莓葉黃素酯軟糖制作工藝流程

藍(lán)莓葉黃素酯軟糖的制作工藝流程見圖1。

圖1 工藝流程圖

1.3 感官評價

隨機(jī)選取25名不同年齡段、不同性別、不同職業(yè)的志愿者，針對藍(lán)莓葉黃素酯軟糖的口感、色澤（顏色均勻度、澄清度）、氣味和組織（表面光滑度、切面情況、硬度、黏性和氣泡存在情況）進(jìn)行客觀評價。各項(xiàng)評分標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1 藍(lán)莓葉黃素酯軟糖的感官評分標(biāo)準(zhǔn)

1.4 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)分別考察藍(lán)莓濃縮汁和葉黃素酯的濃度（25 g/L、50 g/L、100 g/L、150 g/L和200 g/L）、果膠與水的配比（1∶2、1∶4、1∶6、1∶8和1∶10），糖 度（30%、35%、45%、50%和55%）和 檸 檬 酸添 加 量（0.25 g/L、0.50 g/L、1.00 g/L、1.50 g/L和 2.00 g/L）對藍(lán)莓葉黃素酯軟糖感官品質(zhì)的影響，確定最佳配方。

1.5 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取藍(lán)莓濃縮汁和葉黃素酯添加量、果膠與水的比例、糖漿濃度和檸檬酸添加量4個因素，各取3個水平進(jìn)行正交試驗(yàn)，3次平行取平均值，篩選出軟糖的最佳配方，因素水平見表2。

表2 正交試驗(yàn)因素水平表

1.6 產(chǎn)品功效評價

1.6.1 試驗(yàn)動物及方法

將60只雄性小鼠（18～22 g/只）隨機(jī)分為陽性對照組、陰性對照組和電磁輻射模型對照組，造模前對小鼠眼睛進(jìn)行健康檢查以排除其他眼睛疾病。

陰性對照組在正常光線下喂淀粉飼料；陽性對照組接受電磁輻射并喂淀粉飼料；電磁輻射模型組輻射前20 d每天飼喂藍(lán)莓葉黃素酯軟糖鼠飼料，而后進(jìn)行電磁輻射。

1.6.2 處理方法和指標(biāo)測定

各組試驗(yàn)動物置于手術(shù)顯微鏡的冰面上，于角膜緣后剪開眼球，去除眼前節(jié)及晶狀體，剝離視網(wǎng)膜，以精密天平稱取視網(wǎng)膜濕重，再用冰生理鹽水配成10%的溶液，在冰環(huán)境下手動勻漿后，離心，取上清液，所得樣品保存于-20 ℃冰箱中。用比色法測定丙二醛（Malondialdehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

由圖2可知，藍(lán)莓濃縮汁和葉黃素酯濃度的適宜添加范圍為50～150 g/L；果膠與水比例的適宜添加范圍為1∶4～1∶8（g∶g）；糖度的適宜添加范圍為35%～50%；檸檬酸添加量適宜添加范圍為0.25～1.00 g/L。

圖2 各因素對感官評分的影響

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

由表3、表4可知，影響評分因素的順序依次為B果膠與水的比例＞C糖漿濃度＞A藍(lán)莓濃縮汁和葉黃素酯添加量＞D檸檬酸添加量。果膠與水的比例和糖漿濃度對軟糖評分有顯著性影響?？紤]到生產(chǎn)成本及確保產(chǎn)品質(zhì)量的前提下，初步確定工藝為A1B3C2D2，即藍(lán)莓濃縮汁和葉黃素酯添加量為 50 g/L、果膠與水的比例為1∶8（g/g）、糖漿濃度為45%、檸檬酸添加量為0.5 g/L。

表3 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

表4 評分方差分析

2.3 小鼠視網(wǎng)膜中過氧化物歧化酶（SOD）含量

在測得的各組小鼠血清過氧化物歧化酶（SOD）含量中，陽性對照組明顯比陰性對照組含量降低，且飼喂藍(lán)莓葉黃素酯軟糖飼料的輻射治療組亦比陰性對照組的SOD含量低，同時具有顯著意義（P＜0.05），由此可知藍(lán)莓葉黃素酯軟糖對電磁輻射后的小鼠視網(wǎng)膜SOD含量降低具有抑制作用（表5）。

表5 各組小鼠視網(wǎng)膜過氧化物歧化酶（SOD）活性

2.4 小鼠視網(wǎng)膜丙二醛（MDA）含量

在測得的各組小鼠血清丙二醛含量中，陽性對照組丙二醛含量明顯降低，而飼喂藍(lán)莓葉黃素酯軟糖飼料的輻射治療組丙二醛含量與陰性對照組相比具有顯著意義（P＜0.05），由此可知藍(lán)莓葉黃素酯軟糖對電磁輻射后的小鼠丙二醛含量降低具有抑制作用（表6）。

表6 各組小鼠輻射后小鼠視網(wǎng)膜丙二醛（MDA）含量

3 結(jié)論與討論

通過單因素結(jié)合正交試驗(yàn)對制備軟糖的工藝進(jìn)行考察，篩選出最佳的制備工藝；研究發(fā)現(xiàn)，SOD是對抗氧化損傷的重要酶類之一，它的活性可反映組織的抗氧化能力。研究表明，視網(wǎng)膜內(nèi)SOD陽性細(xì)胞多位于內(nèi)核層，輻射損傷后視網(wǎng)膜內(nèi)SOD消耗較多。氧化損傷可導(dǎo)致視網(wǎng)膜出現(xiàn)脂質(zhì)過氧化現(xiàn)象，MDA是脂質(zhì)過氧化的終末產(chǎn)物，也是脂質(zhì)過氧化的標(biāo)志，MDA含量可用于評價氧化損傷的嚴(yán)重程度。本試驗(yàn)結(jié)果表明電磁輻射后會對小鼠視網(wǎng)膜造成一定損傷，而藍(lán)莓葉黃素酯軟糖對輻射造成的損傷具有顯著的修復(fù)和抑制作用，使視網(wǎng)膜SOD水平和視網(wǎng)膜MDA含量因輻射所造成的損傷降低而顯著提高，從而為藍(lán)莓葉黃素酯軟糖在抗電磁輻射損傷方面提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，證實(shí)了本產(chǎn)品具有緩解視疲勞的功能。隨著生活水平的提高，人們的保健意識越來越強(qiáng)，功能性食品越來越受到廣大消費(fèi)者的青睞。研制安全有效的功能性食品，組方的搭配是關(guān)鍵，科學(xué)合理的搭配能起到事半功倍的作用。