陳 萍，譚書明

（1.黔南州檢驗(yàn)檢測院，貴州黔南 558000；2.貴州大學(xué) 釀酒與食品工程學(xué)院，貴州貴陽 550025）

近年來高血脂人群越來越趨于年輕化，2020年發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示中國居民超重肥胖的形勢嚴(yán)峻，成年居民超重率和肥胖率分別為34.3%和16.4%；6～ 17歲兒童青少年超重率和肥胖率分別為11.1%和7.9%；6歲以下兒童超重率和肥胖率分別為6.8%和3.6%[1]。中國18歲及以上居民男性和女性的平均體重分別為69.6 kg和59 kg，與2015年發(fā)布結(jié)果相比分別增加3.4 kg和1.7 kg。城鄉(xiāng)各年齡組居民超重肥胖率繼續(xù)上升。超重肥胖也是心腦血管疾病、糖尿病和多種癌癥等慢性病的重要危險(xiǎn)因素，會(huì)加大高血壓、糖尿病、高膽固醇血癥的患病率。而高血脂正是高血壓、高膽固醇血癥、心腦血管疾病的重要的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一，加大天然、無毒害降血脂食品的研究力度是非常迫切的[2]。

蜂膠是一種棕褐色或帶有青綠色的固體膠狀物質(zhì)，味微苦，溫度低于15 ℃時(shí)質(zhì)地易粉碎，也是一種藥食同源的材料，其含有的多種活性成分可有效緩解高血脂癥狀。蜂膠中的總黃酮類物質(zhì)可有效改善脂質(zhì)代謝紊亂，具有極好的降血脂功效[3]，蜂膠水溶液可有效緩解高血脂癥狀[4-5]，能有效抑制腸道對膽固醇的吸收、促進(jìn)膽固醇降解和排泄，最終起到降血脂作用。李心怡等[6]研究發(fā)現(xiàn)蜂膠降脂方能降低高脂血癥模型斑馬魚的血脂水平，以降低TG為主。黃曉其等[7]研究發(fā)現(xiàn)蜂膠的顯著降血脂作用，其作用機(jī)制與改善肝臟脂質(zhì)代謝紊亂、調(diào)控脂質(zhì)代謝轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白相關(guān)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

蜂膠：購于貴州合力超市；辛伐他汀片：貴州天安藥業(yè)股份有限公司；膽固醇：河南青羊生物科技有限公司；膽酸鹽：河北格貝達(dá)生物科技有限公司；蛋黃粉：亳州市紅日蛋制品有限責(zé)任公司；總膽固醇（Total Cholesterol，TC）測定試劑盒、甘油三酯（Triglyceride，TG）測定試劑盒、高密度脂蛋白膽固 醇（High-density Lipoprotein Cholesterol，HDL-C）測定試劑盒：南京建成科技有限公司；小鼠飼料：騰鑫科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Haier立式超低溫保存箱：青島海爾特種電器有限公司；電子分析天平 FA22048 型，奧豪斯儀器（上海）有限公司；循環(huán)水式多用真空泵 SHB-Ⅲ型，鄭州世紀(jì)雙科實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；光吸收酶標(biāo)儀Spectra Max 190：美谷分子儀器(上海)有限 公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 高脂飼料的配方

78.8%基礎(chǔ)飼料、1%膽固醇、10%豬油、10%蛋黃粉及0.2%膽酸鹽[8]。

1.3.2 高脂血癥模型建立

SPF級的KM小鼠40只，3周齡，體重18～22 g，雌雄各半，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，按體重隨機(jī)分組，每組10只。空白組普通飼料喂養(yǎng)，模型組用高脂飼料喂養(yǎng)造模，均飲自來水，不限飲食，正常光照，每周稱重一次，飼養(yǎng)30 d，造模成功。

1.3.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥

將造模成功的小鼠隨機(jī)分為3組，分別為高脂模型組、陽性對照組、蜂膠組，分別每組平行10只。每組每日灌胃具體情況如表1所示，每日灌胃劑量按人60 mL/60 kg bw進(jìn)行計(jì)算，則小鼠灌胃劑量為0.12 mL/10 g bw[9]。

表1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組灌胃表

1.3.4 小鼠體重和采食量測定

造模成功的小鼠重新分組后，紀(jì)錄各組小鼠每天的采食量，每周測一次各組小鼠的體重，計(jì)算每周各組小鼠的飼料效率。

1.3.5 血清及肝臟總膽固醇（TC）、總甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）的測定

總膽固醇（TC）、總甘油三酯（TG）是衡量機(jī)體內(nèi)膽固醇代謝的重要指標(biāo)。高密度脂蛋白（HDL-C）是將肝臟外組織的膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)回肝臟的主要形式。小鼠灌胃第28 d禁食不禁水，12 h后摘眼球取血，靜置2 h后于4 ℃，3000 r/min離心10 min取上清液存放在-20 ℃待分析；脫頸處死后剖取小鼠肝臟清洗稱重，后取相同部位肝臟制備10%肝臟勻漿[10]。使用TC、TG、HDL-C測定試劑盒進(jìn)行檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 蜂膠中總黃酮對小鼠體重、體重增量、采食量及飼料效率的影響

在高脂小鼠飼養(yǎng)過程中，小鼠無異常死亡情況。第1周開始喂養(yǎng)高脂飼料后，空白組的小鼠體重就遠(yuǎn)低于喂養(yǎng)高脂飼料的小鼠，4周后小鼠高血脂癥造模成功，高脂模型組的體重較空白組增長了28.4%，顯著高于空白組，如圖1所示。

圖1 小鼠建模4周模型組與空白組對比圖

由表2可知，高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠與空白對照組小鼠相比，其體重增加量及小鼠采食量顯著提高。經(jīng)過4周的飼養(yǎng)后，各給藥組的小鼠采食量較高脂模型組小鼠均有不同程度的降低，說明不同的刺梨口服液對小鼠的食欲有一定的影響，可在一定程度上緩解高血脂癥狀況。

表2 蜂膠提取液對體重增加量、小鼠采食量、飼料效率的影響 （單位：g）

2.2 蜂膠提取液對小鼠血清TC、TG、HDL-C的影響

由表3可知，高脂模型組的TC水平與空白組無顯著性差異（P＞0.05），但與陽性對照組、蜂膠提取液組存在顯著性差異（P＜0.05），其TC水平較高脂模型組分別下降了43.04%、36.7%；高脂模型組與空白組的TG水平存在顯著性差異（P＜0.05），蜂膠提取液組、陽性對照組與高脂模型組相比均有不同程度的降低，刺梨蜂膠組較高脂模型組降低了37.34%（P＜0.05）；高脂模型組的HDL-C水平與空白組無顯著性差異（P＞0.05），各給藥組之間的HDL-C水平差異不顯著（P＞0.05）。

表3 蜂膠提取液對小鼠血清TC、TG、HDL-C的影響（單位：mmol/L）

2.3 蜂膠提取液對小鼠肝臟TC、TG、HDL-C的影響

由表4可知，蜂膠提取液組的TC水平與高脂模型組差異不顯著（P＞0.05），蜂膠提取液組的肝臟TG、HDL-C水平與高脂模型組差異不顯著（P＞0.05），說明蜂膠提取液對高血脂癥小鼠肝臟的TC、TG、HDL-C水平影響不明顯。

表4 蜂膠提取液對小鼠肝臟TC、TG、HDL-C的影響（單位：mmol/L）

3 結(jié)論

通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對蜂膠提取液的輔助降血脂功效進(jìn)行評價(jià)發(fā)現(xiàn)，蜂膠提取液可降低小鼠血清中的TC、TG，能夠達(dá)到輔助降血脂的目的，但是對降低小鼠血清中的HDL-C，小鼠肝臟中的TC、TG、HDL-C效果不顯著。該研究為后續(xù)研究脂代謝通路及研發(fā)降血脂食品奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。