朱彩平，周世新，賀小紅

（東莞康華醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，廣東東莞 523000）

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是呼吸科常見的肺部氣道慢性炎癥性疾病，患者支氣管細(xì)胞壞死，形成潰瘍，導(dǎo)致正常支氣管組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，氣道壁代償性修復(fù)，引發(fā)氣道管壁厚度增加，氣道管壁阻力上升，出現(xiàn)不可逆氣流受限，肺功能減退[1]。由于大氣污染、吸煙、細(xì)菌感染及病毒感染等不良因素的影響，誘發(fā)慢性阻塞性肺疾病急性加重（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD），患者短期內(nèi)出現(xiàn)劇烈咳嗽、呼吸困難加重、痰量增多呈膿性，且常伴發(fā)熱等炎癥反應(yīng)，對(duì)患者健康造成嚴(yán)重威脅，病死率、致殘率較高[2]。臨床多采用外周血白細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白（CRP）對(duì)AECOPD進(jìn)行鑒別，但其敏感度及特異度較低、局限性較大。Th1/Th2亞群細(xì)胞因子含量與機(jī)體免疫功能相關(guān)，有助于反映患者是否感染[3]。中性粒細(xì)胞CD64是新發(fā)現(xiàn)的穿膜糖蛋白，在機(jī)體發(fā)生感染時(shí)會(huì)急劇上升，是有效的炎癥標(biāo)記物[4]。人白細(xì)胞DR抗原（HLA-DR）是單核巨噬細(xì)胞抗原重要分子，在免疫應(yīng)答中起到關(guān)鍵作用[5-6]?；诖耍狙芯糠治鯰h1/Th2亞群細(xì)胞因子聯(lián)合中性粒細(xì)胞CD64和HLA-DR對(duì)AECOPD的評(píng)估價(jià)值，以期為此類患者的診斷提供幫助，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2020年7月至2021年12月東莞康華醫(yī)院收治的296例AECOPD患者設(shè)為觀察組，另選取同期院內(nèi)322例COPD穩(wěn)定期復(fù)診患者設(shè)為對(duì)照組進(jìn)行回顧性分析。觀察組患者中男性194例，女性102例；年齡41～65歲，平均年齡（55.64±7.18）歲；病程1.5～12年，平均病程（7.28±2.14）年。對(duì)照組患者中男性201例，女性121例；年齡42～68歲，平均年齡（56.27±7.61）歲；病程2～10年，平均病程（7.45 ±2.03）年。兩組患者性別、年齡、病程等一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)東莞康華醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《慢性阻塞性肺疾病基層診療指南（2018年）》[7]中COPD和AECOPD的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡＞40歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期使用過(guò)激素、免疫抑制劑治療者；②患惡性腫瘤、癌癥等疾病者；③合并自身免疫系統(tǒng)疾病者；④合并心、肝、腎功能嚴(yán)重異常者。

1.2 檢驗(yàn)方法①Th1/Th2亞群細(xì)胞因子檢測(cè)方法：觀察組患者于入院時(shí)及治療7 d后，對(duì)照組患者于復(fù)診時(shí)抽取其清晨空腹靜脈血5 mL，采用流式細(xì)胞儀（美國(guó)Becton Dickinson公司，型號(hào)：FACS Canto II）檢測(cè)白細(xì)胞介素-6（IL-6）、γ干擾素（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平，試劑盒均購(gòu)于R&D公司。②CRP、降鈣素原（PCT）測(cè)定：采用電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀（德國(guó)羅氏公司，型號(hào)：ELecsys 2010）及其配套試劑盒測(cè)定血清PCT、CRP水平。③CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率測(cè)定：采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)中性粒細(xì)胞CD64、HLA-DR水平，并計(jì)算CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率。

1.3 觀察指標(biāo)①比較觀察組患者入院時(shí)及治療7 d后，對(duì)照組患者復(fù)診時(shí)Th1/Th2亞群細(xì)胞因子、炎癥因子及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率。②分析入院時(shí)IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率對(duì)AECOPD發(fā)生的預(yù)測(cè)價(jià)值。③進(jìn)行一致性分析。IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率中任意一項(xiàng)指標(biāo)預(yù)測(cè)AECOPD為陽(yáng)性則結(jié)果判定為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以（±s）表示，兩組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；多組間比較行方差分析，其兩兩比較行LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)。采用受試者工作曲線（ROC）分析入院時(shí)IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率對(duì)AECOPD發(fā)生的預(yù)測(cè)價(jià)值。一致性分析采用Kappa檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者檢測(cè)指標(biāo)比較觀察組患者入院時(shí)CRP、PCT、IL-6、IFN-γ、TNF-α水 平 及CD64指數(shù)顯著高于觀察組治療7 d后及對(duì)照組復(fù)診時(shí)，HLADR表達(dá)率顯著低于觀察組治療7 d后及對(duì)照組復(fù)診時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；觀察組患者治療7 d后IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數(shù)顯著高于對(duì)照組復(fù)診時(shí)，HLA-DR表達(dá)率顯著低于對(duì)照組復(fù)診時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者檢測(cè)指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組患者檢測(cè)指標(biāo)比較（±s）

注：與同組入院時(shí)比較，*P＜0.05。IL-6：白細(xì)胞介素-6；IFN-γ：γ干擾素；TNF-α：腫瘤壞死因子-α；CRP：C反應(yīng)蛋白；PCT：降鈣素原；HLA-DR：人白細(xì)胞 DR 抗原。

組別 例數(shù) 時(shí)間點(diǎn) IL-6(pg/mL) IFN-γ(pg/mL) TNF-α(pg/mL) CRP(mg/L) PCT(ng/mL) CD64指數(shù) HLA-DR(%)觀察組296 入院時(shí) 109.79±25.53 18.27±3.61 51.37±12.48 100.15±12.04 1.11±0.15 7.72±2.19 45.98±6.89治療7 d后 85.12±17.24*15.24±3.01* 35.14±10.01* 45.92±7.68* 0.05±0.01*4.42±1.15*68.27±5.24*對(duì)照組322 復(fù)診時(shí) 30.04±5.89 13.56±3.24 28.51±9.17 44.82±7.54 0.06±0.02 3.28±1.14 80.63±8.07 F值 602.547 160.684 374.758 2.820 26.617 663.149 202.34 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 入院時(shí)相關(guān)指標(biāo)預(yù)測(cè)AECOPD的ROC分析經(jīng)ROC分析，入院時(shí)IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率預(yù)測(cè)AECOPD的ROC的曲線下面積分別為0.950、0.935、0.948、0.918、0.811，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05)，見表2。入院時(shí)IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率預(yù)測(cè)AECOPD的ROC曲線，見圖1。

圖1 入院時(shí)相關(guān)指標(biāo)預(yù)測(cè)AECOPD的ROC曲線

表2 入院時(shí)相關(guān)指標(biāo)預(yù)測(cè)AECOPD的ROC分析

2.3 聯(lián)合檢測(cè)的一致性分析入院時(shí)IL-6≥73.991 pg/mL、IFN-γ≥15.458 pg/mL、TNF-α≥38.295 pg/mL、CD64指 數(shù)≥5.145、HLA-DR表達(dá)率≤70.438%判定為陽(yáng)性，聯(lián)合預(yù)測(cè)中任一指標(biāo)為陽(yáng)性則結(jié)果判定為陽(yáng)性。經(jīng)一致性分析，296例納入對(duì)象中聯(lián)合預(yù)測(cè)陽(yáng)性268例，敏感度0.905，特異度為0.894，準(zhǔn)確率為0.900，Kappa為0.799，見表3。

表3 聯(lián)合檢測(cè)的一致性分析

3 討論

COPD是危害人類健康的常見疾病之一，多與大氣污染、粉塵、遺傳、病原菌感染等因素相關(guān)。隨著人類生活方式的改變及環(huán)境因素的影響，患者疾病程度加重，發(fā)病率上升，導(dǎo)致患者上呼吸道病菌感染、氣道細(xì)菌負(fù)荷增加及氣道新菌株產(chǎn)生，出現(xiàn)AECOPD，且發(fā)病率增加，病死率上升[8]。另外，臨床對(duì)AECOPD多使用抗生素治療，導(dǎo)致抗生素濫用，影響細(xì)菌耐藥性，導(dǎo)致病情加重，治療難度增加。因此，尋找合適的生物標(biāo)記物及早預(yù)測(cè)AECOPD，對(duì)病情的診斷及指導(dǎo)抗生素的使用具有十分重要的意義。

本研究結(jié)果顯示，AECOPD患者Th1/Th2亞群細(xì)胞因子及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率均處于異常狀態(tài)，提示Th1/Th2亞群細(xì)胞因子及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率的敏感性高于常規(guī)炎癥因子指標(biāo)。其原因分析如下：Th1細(xì)胞分泌 TNF-α、IFN-γ等因子，在細(xì)胞免疫、抗感染方面發(fā)揮重要作用，Th2細(xì)胞通過(guò)分泌IL-6抑制機(jī)體免疫，降低免疫功能[9]。CD64具有較高的特異度、敏感度，在細(xì)胞吞噬、呈遞抗原、炎癥釋放等過(guò)程發(fā)揮重要作用[10]。HLA-DR是MHC-Ⅱ類分子，具有傳遞抗原肽給淋巴細(xì)胞、增強(qiáng)免疫應(yīng)答的功能[11]。COPD患者機(jī)體受細(xì)菌組織、集落刺激因子、INF-γ等促炎因子的影響，CD64表達(dá)迅速上升，通過(guò)細(xì)胞毒性作用，加重炎癥反應(yīng)[12]。AECOPD期間受到細(xì)菌、病毒感染，機(jī)體細(xì)胞交叉調(diào)節(jié)功能異常，Th1 /Th2動(dòng)態(tài)平衡被破壞，免疫功能受損，HLA-DR表達(dá)率下降，可及時(shí)反映患者病情進(jìn)展程度[13]。同時(shí)，CD64指標(biāo)及HLA-DR表達(dá)率受藥物、種族等因素的干擾較小，作為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)預(yù)測(cè)AECOPD具有一定的參考價(jià)值[14]。

經(jīng)ROC分析，入院時(shí)IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率預(yù)測(cè)AECOPD的ROC的AUC分 別 為0.950、0.935、0.948、0.918、0.811，最 佳 截 斷 值 為73.991 pg/mL、15.458 pg/mL、38.295 pg/mL、5.145、70.438%。經(jīng)一致性分析，Kappa值為0.799。上述結(jié)果提示Th1/Th2亞群細(xì)胞因子及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率可作為AECOPD的生物標(biāo)記物。

綜上，Th1/Th2亞群細(xì)胞因子及CD64指數(shù)、HLA-DR表達(dá)率聯(lián)合可及時(shí)反映AECOPD病情的嚴(yán)重程度，對(duì)預(yù)測(cè)AECOPD具有一定的參考作用，值得臨床應(yīng)用。