孫亞波，朱延旭，冀紅芹，賈富勃*，王春艷，吉尚雷，全治國(guó)，劉媛緣

（1.遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧 營(yíng)口 115009；2.遼寧省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)基地建設(shè)工程中心，遼寧 沈陽(yáng) 110032；3.遼寧省遼寧絨山羊原種場(chǎng)有限公司，遼寧 營(yíng)口 115200）

角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子2（KGF-2）是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族（FGFs）的一員，也稱(chēng)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10（FGF10）。KGF-2分子全長(zhǎng)627 bp，編碼蛋白由208個(gè)氨基酸殘基組成[1]。KGF-2具有促進(jìn)上皮細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化的功能[2]，參與并調(diào)控多種組織器官的形成。有研究發(fā)現(xiàn)，敲除KGF-2基因大鼠的肺和前后肢未發(fā)育，牙齒和毛囊等也存在發(fā)育缺陷[3]。有研究認(rèn)為，KGF-2存在于真皮乳突中，對(duì)皮膚組織和毛囊的發(fā)育具有調(diào)控作用[4]。嚴(yán)家榮等[5]研究發(fā)現(xiàn)，重組角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子2（rhKGF-2）對(duì)治療試驗(yàn)大鼠角膜燒傷的效果較好；馬麗等[6]研究發(fā)現(xiàn)，燙傷大鼠外用rhKGF-2可促進(jìn)皮膚傷口愈合和毛發(fā)再生；王澤[7]研究發(fā)現(xiàn)，脫毛大鼠采用rhKGF-2涂抹給藥，試驗(yàn)后第14 d可明顯看到毛發(fā)再生。

上述文獻(xiàn)啟示，外源KGF-2可調(diào)控動(dòng)物的毛發(fā)生長(zhǎng)。柳楠等[8]對(duì)敖漢細(xì)毛羊不同部位皮膚毛囊中FGF10的mRNA和蛋白表達(dá)量進(jìn)行對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GF10的蛋白表達(dá)量與毛囊發(fā)育存在正調(diào)節(jié)作用。羊絨是絨山羊皮膚內(nèi)次級(jí)毛囊生長(zhǎng)的一類(lèi)無(wú)髓毛，經(jīng)濟(jì)價(jià)值非常高。本試驗(yàn)設(shè)想通過(guò)外源給藥的方式，將rhKGF-2補(bǔ)充進(jìn)絨山羊皮內(nèi)，探討其能否促進(jìn)其次級(jí)毛囊發(fā)育，提升產(chǎn)絨量。已有文獻(xiàn)多數(shù)采用外用涂抹給藥方式，但在絨山羊生產(chǎn)實(shí)際中沒(méi)有可操作性；外源補(bǔ)充rhKGF-2在動(dòng)物體內(nèi)存留量和存留時(shí)間決定了其發(fā)揮效果的顯著性。本研究主要探討rhKGF-2不同方式和不同劑量對(duì)絨山羊體內(nèi)KGF-2濃度的影響，期望篩選出適宜的劑量參數(shù)和合適的給藥方法，實(shí)現(xiàn)一次性給藥使動(dòng)物體內(nèi)KGF-2濃度維持較長(zhǎng)時(shí)間，為后續(xù)研究KGF-2調(diào)控絨山羊絨毛生長(zhǎng)提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)動(dòng)物來(lái)自遼寧省遼寧絨山羊原種場(chǎng)，選擇24只5~7月齡、體重為（26.95±1.87）kg的遼寧絨山羊，公母各半，隨機(jī)分為4組，每組6只羊。試驗(yàn)設(shè)計(jì)與各處理體重見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與各處理體重Tab.1 Design of experiment and body weight of each treatment單位：kg

試驗(yàn)1組皮下注射rhKGF-2膠原蛋白溶液，試驗(yàn)2組皮下注射rhKGF-2溫敏感凝膠溶液，試驗(yàn)3組皮下注射rhKGF-2生理鹽水溶液；試驗(yàn)4組為對(duì)照，不做KGF-2處理。本試驗(yàn)設(shè)3個(gè)周期，每個(gè)周期18 d，依次給予低、中、高等3個(gè)劑量[9-10]處理，分別為每只羊每日10、20、30μg/kg。

1.2 試劑及制備方法

本試驗(yàn)所使用的rhKGF-2購(gòu)自成都云?；び邢薰?，純度為95%。膠原蛋白粉和溫敏感凝膠購(gòu)自沈陽(yáng)鼎國(guó)生物科技公司。

1.2.1 rhKGF-2膠原蛋白溶液的制備

在無(wú)菌操凈臺(tái)下，分別稱(chēng)量5 mg和55 mg的rhKGF-2和膠原蛋白粉[11]于滅菌的10 mL離心管中，加入溫度為15~18℃的滅菌超純水6 mL，玻璃棒攪動(dòng)，渦旋振蕩器振蕩3~5 min，KGF-2和膠原蛋白粉充分混勻，達(dá)到靜止30 min后不分層的狀態(tài)。將溶液分裝于1.5 mL離心管中，-20℃保存。

1.2.2 rhKGF-2溫敏感水凝膠溶液的制備

溫敏感水凝膠制備方法參照Chen等[12]的冷溶法。

在無(wú)菌操凈臺(tái)下，稱(chēng)量2.2 g溫敏感凝膠于滅菌的10 mL離心管中，加入溫度為4℃的滅菌超純水6 mL，玻璃棒攪動(dòng)，振蕩器振蕩5~10 min，溫敏感凝膠充分混勻，無(wú)氣泡和小的凝膠顆粒。在操作過(guò)程中利用冰塊間斷性地對(duì)離心管降溫，4℃條件下靜置過(guò)夜，形成透明溶液。稱(chēng)量5 mg的rhKGF-2加入離心管的溶液，再次振蕩混合，達(dá)到充分混勻、完全溶解、無(wú)氣泡、無(wú)顆粒、不分層的狀態(tài)，分裝，0~4℃保存。

1.2.3 rhKGF-2生理鹽水溶液的制備

在無(wú)菌操凈臺(tái)下，分別稱(chēng)量rhKGF-2和滅菌生理鹽水5 mg和11 mL于滅菌的15 mL離心管中，渦旋振蕩器振蕩5~8 min，使溶液完全混勻。分裝保存同1.2.1。

1.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)當(dāng)日上午，試驗(yàn)動(dòng)物稱(chēng)重。14：30各組試驗(yàn)動(dòng)物分別于左側(cè)頸部皮下注射，注意將溫敏凝膠試劑管始終放置于0~4℃左右的低溫盒中取用。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

在試驗(yàn)處理前以及處理后6、18、42、90、138、210、258、354、426 h，分別采集試驗(yàn)羊靜脈血5 mL，3 500 r/min離心15 min，制備血清，分裝至1 mL離心管，-20℃冷凍保存。采用ELASA法，應(yīng)用華衛(wèi)德朗DR-200BS酶標(biāo)分析儀測(cè)定絨山羊血清KGF-2水平。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用Excel 2010軟件處理原始數(shù)據(jù)，SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），Duncan's法進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化

2.1.1 低劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化（見(jiàn)表2）

由表2可知，3個(gè)試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均隨著時(shí)間推移呈先增加后降低的趨勢(shì)，對(duì)照組未發(fā)生顯著波動(dòng)。試驗(yàn)處理6 h后，3個(gè)試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。處理18 h后，3個(gè)試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均極顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。處理42 h后，3個(gè)試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均極顯著高于對(duì)照組（P<0.01），同時(shí)試驗(yàn)1組顯著高于試驗(yàn)3組（P<0.05）。

表2 低劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化Tab.2 Changesof serum KGF-2 concentration in Cashmere goatstreated with low-doserhKGF-2 單位：ng/L

處理90 h后，試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組血清KGF-2濃度均極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01）。處理138 h后，試驗(yàn)1組血清KGF-2濃度極顯著高于對(duì)照組（P<0.01），并顯著高于試驗(yàn)3組（P<0.05），試驗(yàn)2組極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01）。處理210 h及之后，各試驗(yàn)組血清KGF-2濃度差異均不顯著（P>0.05）。

從處理前到處理后258 h，3個(gè)試驗(yàn)組均在試驗(yàn)處理后42 h達(dá)到高峰，其后逐步降低，對(duì)照組隨著時(shí)間推移血清KGF-2濃度無(wú)顯著的變化。從血清KGF-2濃度絕對(duì)值看，試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組在各時(shí)間點(diǎn)均略高于試驗(yàn)3組，3個(gè)試驗(yàn)組在此期間均高于對(duì)照組。

2.1.2 中劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化（見(jiàn)表3）

由表3可知，各試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均呈先增加后降低的趨勢(shì)，對(duì)照組未發(fā)生顯著波動(dòng)，濃度比較平穩(wěn)。在試驗(yàn)處理6~42 h后，3個(gè)試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均極顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。處理90 h后，試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組血清KGF-2濃度極顯著高于對(duì)照組（P<0.01），試驗(yàn)3組顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。

表3 中劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化Tab.3 Changes of serum KGF-2 concentration in Cashmeregoats treated with middle-dose rhKGF-2 單位：ng/L

處理138 h后，試驗(yàn)1組血清KGF-2濃度極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01）；試驗(yàn)2組顯著高于試驗(yàn)3組（P<0.05），并極顯著高于對(duì)照組（P<0.01）；試驗(yàn)3組高于對(duì)照組，但差異不顯著（P>0.05）。在處理210~258 h后，試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組血清KGF-2濃度極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01）；試驗(yàn)3組與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)處理后354 h后，各組間差異均不顯著（P>0.05）。

從處理前到處理后426 h，試驗(yàn)1組血清KGF-2濃度在試驗(yàn)處理后138 h達(dá)到高峰，試驗(yàn)2組則在90 h達(dá)到高峰，試驗(yàn)3組在42 h后達(dá)到高峰，其后各組均降低；其中試驗(yàn)1組和2組呈近似拋物線(xiàn)形式下降，但試驗(yàn)3組濃度呈近似直線(xiàn)形式急劇下降。對(duì)照組隨著時(shí)間推移血清KGF-2濃度無(wú)顯著的變化。從血清KGF-2濃度絕對(duì)值看，試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組在各時(shí)間點(diǎn)明顯高于對(duì)照組，同時(shí)試驗(yàn)1組總體上高于試驗(yàn)2組，試驗(yàn)3組自210 h后，與對(duì)照組基本無(wú)顯著差異。

2.1.3 高劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化（見(jiàn)表4）

由表4可知，各試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均呈現(xiàn)隨著時(shí)間推移先增加后降低的趨勢(shì)，對(duì)照組血清KGF-2濃度未發(fā)生顯著波動(dòng)。試驗(yàn)處理6~18 h后，3個(gè)試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均極顯著高于對(duì)照組（P<0.01），同時(shí)試驗(yàn)3組顯著高于試驗(yàn)1組和2組（P<0.05）。在試驗(yàn)處理后42 h后，3個(gè)試驗(yàn)組血清KGF-2濃度均極顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。試驗(yàn)處理90~138 h后，試驗(yàn)1組和2組極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01），試驗(yàn)3組極顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。

表4 高劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化Tab.4 Changesof serum KGF-2 concentration in Cashmeregoatstreated with high-doserhKGF-2 單位：ng/L

試驗(yàn)處理210 h后，試驗(yàn)1組極顯著高于其他組（P<0.01），試驗(yàn)2組極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01）。試驗(yàn)處理258~354 h后，試驗(yàn)1組和2組極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01）。試驗(yàn)處理426 h后，試驗(yàn)1組顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.01），試驗(yàn)2組極顯著高于試驗(yàn)3組和對(duì)照組（P<0.05）。自處理210 h后，試驗(yàn)3組與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05）。

按照時(shí)間軸來(lái)對(duì)比，試驗(yàn)1組血清KGF-2濃度在試驗(yàn)處理后138 h達(dá)到高峰，試驗(yàn)2組則在90 h達(dá)到高峰，試驗(yàn)3組為42 h達(dá)到高峰，其后逐步降低，對(duì)照組隨著時(shí)間推移血清KGF-2濃度無(wú)顯著的變化。從血清KGF-2濃度絕對(duì)值看，試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組在各時(shí)間點(diǎn)均明顯高于對(duì)照組。

2.2 各處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化

2.2.1 膠原蛋白溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化（見(jiàn)圖1）

由圖1可知，隨著注射劑量增加，血清中KGF-2的峰值出現(xiàn)時(shí)間由42 h逐漸延后至138 h；從各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的血清KGF-2的絕對(duì)值看，提高注射劑量可使血清KGF-2濃度增加、延長(zhǎng)血清KGF-2高水平維持時(shí)間。

圖1 膠原蛋白溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化Fig.1 Changesof serum KGF-2 concentration in Cashmere goatstreated with collagen solution

2.2.2 溫敏感凝膠溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化（見(jiàn)圖2）

由圖2可知，檢測(cè)到隨著劑量的增加，血清KGF-2濃度高峰出現(xiàn)時(shí)間由18 h順延至90 h；在42 h后，增加處理劑量可使血清KGF-2濃度增加；提高處理劑量可使血清KGF-2高濃度（高于對(duì)照組）維持時(shí)間增加至426 h。

圖2 溫敏感凝膠溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化Fig.2 Changes of serum KGF-2 concentration in Cashmeregoats treated with temperature-sensitivegel solution

2.2.3 生理鹽水溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化（見(jiàn)圖3）

由圖3可知，低劑量rhKGF-2生理鹽水溶液皮下注射，在處理18 h后，血清KGF-2濃度即開(kāi)始斷崖式降低，在138 h接近于試驗(yàn)前水平和對(duì)照組水平；中劑量試驗(yàn)和高劑量試驗(yàn)表明，在處理42 h后血清KGF-2濃度達(dá)到最高峰，之后呈迅速下降，138~210 h即下降至試驗(yàn)前或?qū)φ战M水平。

圖3 生理鹽水溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化Fig.3 Changes of serum KGF-2 concentration in Cashmeregoats treated with normal salinesolution

3 討論

KGF-2對(duì)皮膚組織損傷修復(fù)[13]和毛囊發(fā)育具有重要影響[6]，研究其對(duì)絨山羊毛囊發(fā)育的作用在生產(chǎn)中具有極大的意義。外源補(bǔ)充rhKGF-2對(duì)絨山羊毛囊發(fā)育的作用要依靠體內(nèi)持續(xù)的高濃度KGF-2水平，其作用效果主要受給藥方式和給藥劑量的影響。

3.1 不同劑量rhKGF-2處理下絨山羊血清KGF-2濃度的變化

在相同劑量下，以膠原蛋白溶液、溫敏感凝膠和生理鹽水方式給絨山羊補(bǔ)充rhKGF-2，均可使血清KGF-2濃度先升高而后緩慢下降。

低劑量補(bǔ)充rhKGF-2后，3種處理的絨山羊血清KGF-2濃度在42 h即達(dá)到頂峰，而后下降，至240 h左右與對(duì)照組相近。中劑量組在138 h前達(dá)到頂峰，之后開(kāi)始下降，至408 h左右與對(duì)照組相近。高劑量組則在426 h仍高于對(duì)照組。因此，從絨山羊血清KGF-2高濃度維持時(shí)間看，高劑量組更適宜。

3.2 不同rhKGF-2處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化

3.2.1 膠原蛋白溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化

在膠原蛋白溶液給藥方式下，不同處理劑量對(duì)血清KGF-2的濃度和維持時(shí)間均具有一定影響，本研究設(shè)置的低、中、高3個(gè)劑量分別為10、20、30μg/kg，主要參考宗英[9]和鄭杰民等[10]的毒性試驗(yàn)研究得出的KGF-2安全劑量以及王澤等[4]對(duì)試驗(yàn)禿毛大鼠每日涂抹給藥劑量而設(shè)計(jì)。利用膠原蛋白作為rhKGF-2的載體可以制作成具有緩釋作用的制劑，蔡敏倩[11]以豬皮為原料提取出膠原蛋白，并以此膠原蛋白為原料與KGF-2復(fù)合制作成了KGF-2生物蛋白復(fù)合海綿，該復(fù)合物能在25℃和37℃下穩(wěn)定保存6個(gè)月，經(jīng)過(guò)測(cè)定其KGF-2可緩慢釋放14 d，釋放量為51.33%。

本研究利用膠原蛋白作為骨架材料制成rhKGF-2膠原蛋白溶液，通過(guò)皮下注射進(jìn)遼寧絨山羊體內(nèi)。注射不同劑量rhKGF-2膠原蛋白溶液后發(fā)現(xiàn)，隨著注射劑量增加，血清中KGF-2的峰值出現(xiàn)時(shí)間從42 h逐漸延后到138 h，從各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的血清KGF-2的絕對(duì)值看，提高注射劑量可使血清KGF-2濃度增加、延長(zhǎng)血清KGF-2高水平維持時(shí)間。

3.2.2 溫敏感凝膠溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化

溫敏感水凝膠是一類(lèi)具有溫敏感特性的智能高分子材料[14-15]，可以吸收并保留大量水而維持其三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，能夠應(yīng)對(duì)環(huán)境的改變產(chǎn)生智能性響應(yīng)，是人醫(yī)載藥系統(tǒng)中一類(lèi)特殊的載體[16]，常利用溫敏感水凝膠制作成微囊給藥[17],從而達(dá)到緩釋效果。本試驗(yàn)所采用的溫敏感凝膠是N-異丙基丙烯酰胺（NIPAM）是熱縮溫敏水凝膠的一種，在低溫下該凝膠溶于水中形成液態(tài)凝膠；當(dāng)溫度高于32~35℃時(shí)，則聚合形成聚N-異丙基丙烯酰胺（PNIPAM）的固態(tài)凝膠。該聚合物可形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，可作為藥物緩釋載體[18]。利用溫敏感材料做KGF-2緩釋載體可以產(chǎn)生延緩KGF-2釋放速度的作用[19]，生長(zhǎng)因子和合適的載體材料組合可以防止蛋白酶水解，有效保護(hù)和緩慢釋放生長(zhǎng)因子[20]。付文亮等[21]曾利用殼聚糖、殼聚糖季銨鹽等配制成溫敏感材料與KGF-2復(fù)合，形成一種敷料，其KGF-2的蛋白活性可基本保持穩(wěn)定，并具有一定的緩釋效果。

本試驗(yàn)將KGF-2在4℃下與NIPAM溶解制成溶液，注射到試驗(yàn)絨山羊皮下。由于羊的體表溫度高于32℃，即可形成PNIPAM，KGF-2存在于凝膠網(wǎng)絡(luò)中即可發(fā)揮緩釋效果。本試驗(yàn)皮下注射了低、中、高等3個(gè)劑量的rhKGF-2，結(jié)果顯示，隨著劑量的增加，血清KGF-2濃度高峰出現(xiàn)時(shí)間由18 h順延至90 h；在處理42 h后，增加處理劑量可提高血清KGF-2濃度；提高處理劑量可使血清KGF-2高濃度（高于對(duì)照組）維持時(shí)間增加至426 h。

3.2.3 生理鹽水溶液處理方式下絨山羊血清KGF-2濃度的變化

生理鹽水是動(dòng)物給藥常用的溶劑。本研究發(fā)現(xiàn)，低劑量rhKGF-2生理鹽水溶液皮下注射18 h后，血清KGF-2濃度即開(kāi)始斷崖式降低，在138 h接近于試驗(yàn)前水平和對(duì)照組水平；中計(jì)量試驗(yàn)和高劑量試驗(yàn)表明，在42 h時(shí)，血清KGF-2濃度達(dá)到最高峰，之后呈迅速下降，138~210 h即下降至試驗(yàn)前或?qū)φ战M水平。由此可知，用生理鹽水溶液注射給藥后羊體內(nèi)rhKGF-2快速吸收、快速代謝分解，無(wú)法持續(xù)發(fā)揮作用，此方式在生產(chǎn)實(shí)際中的可操作性不強(qiáng)，應(yīng)用的局限性較大。

綜上可知，提高rhKGF-2的劑量均增加了試驗(yàn)絨山羊血清KGF-2的濃度，使血清KGF-2峰值延時(shí)出現(xiàn)，使血清KGF-2高濃度（高于對(duì)照組）維持時(shí)間延長(zhǎng)至426 h。合適的緩釋時(shí)間是rhKGF-2調(diào)控羊的絨毛生長(zhǎng)在生產(chǎn)中能否施行的關(guān)鍵；本研究發(fā)現(xiàn)，給予30μg/kg的劑量可使緩釋時(shí)間達(dá)到接近18 d，效果較為理想。

對(duì)比膠原蛋白和溫敏感凝膠這兩種處理方式發(fā)現(xiàn)，二者對(duì)KGF-2的延時(shí)釋放效果相似，且各具優(yōu)勢(shì)。膠原蛋白溶液方式處理后血清KGF-2濃度更高，溫敏感凝膠處理后羊血清KGF-2濃度在峰值之后下降更平緩；但rhKGF-2溫敏感凝膠溶液制作過(guò)程中要求在低溫條件下操作，否則凝膠不易溶解，比膠原蛋白方式操作復(fù)雜。

綜上所述，在本研究條件下認(rèn)為，采用KGF-2膠原蛋白溶液更合適。

4 結(jié)論

按照30μg/（kg·d）的劑量配制KGF-2膠原蛋白溶液皮下注射絨山羊后，絨山羊的血清KGF-2濃度在138 h達(dá)到高峰，血清KGF-2高濃度（高于對(duì)照組）維持時(shí)間可達(dá)426 h。因此，本試驗(yàn)條件下rhKGF-2的適宜補(bǔ)充劑量為30μg/kg，合適的給藥處理方式是膠原蛋白溶液。