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        火棘果黃酮提取工藝優(yōu)化及其抗油脂氧化活性分析

        2022-08-15 02:46:26王小婷
        中國食物與營養(yǎng) 2022年7期
        關(guān)鍵詞:油脂黃酮工藝

        火棘果是薔薇科常綠野生灌木果樹火棘的果實(shí),主要分布在我國東南、 西南和西北部

        。 火棘果提取物具有抗氧化、 增強(qiáng)免疫力、 促進(jìn)血凝等作用, 這與其含有槲皮素、 蘆丁等黃酮類化合物有關(guān)

        。 黃酮類化合物不僅具有抗菌、 抗病毒、 抗腫瘤、 抗心血管疾病等廣泛的生理活性和藥理活性, 而且具有較強(qiáng)的抗氧化性能

        。 各種食用油脂是人們?nèi)粘I钪胁豢苫蛉钡氖称吩希?但油脂在加工、 運(yùn)輸和貯藏等過程中極易受到外界環(huán)境如光照等因素的影響發(fā)生氧化, 從而影響食用油脂品質(zhì)與安全

        。 為保證油脂在貯藏期內(nèi)的穩(wěn)定性, 常在油脂中加入BHT、 TBHQ 等化學(xué)抗氧化劑以延緩食用油脂的氧化, 而這些人工合成抗氧化劑的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物及其潛在毒性備受爭議

        , 故無毒副作用的天然油脂抗氧化劑的開發(fā)受到了社會各屆的關(guān)注。 鑒于黃酮的抗氧化性能

        , 本研究采用火棘果為原料, 提取其中黃酮類物質(zhì), 以正交法優(yōu)化最佳提取工藝, 并探索火棘果黃酮在油脂中的抗氧化效果, 為開發(fā)天然高效的油脂抗氧化劑提供一定的理論依據(jù)與試驗(yàn)基礎(chǔ)的同時, 實(shí)現(xiàn)商洛當(dāng)?shù)刈匀毁Y源的綜合開發(fā)利用。

        圍手術(shù)期護(hù)理是從患者確定入院治療時起, 是對患者進(jìn)行心理、生理、社會等整體性護(hù)理,在整個圍手術(shù)期中,根據(jù)不同階段需求,給予護(hù)理措施[5]。陳秀麗等人[6]為探討鏡下切除腸息肉圍術(shù)期護(hù)理措施,納入251例結(jié)腸息肉患者例,對患者的腸息肉切除患者進(jìn)行圍術(shù)期護(hù)理,研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),鏡下息肉切除術(shù)是一種方便、快捷的治療方法,但易發(fā)生并發(fā)癥,因此應(yīng)加強(qiáng)患者的圍術(shù)期護(hù)理。

        1 材料與方法

        1.1 材料與設(shè)備

        1.1.1 材料及試劑 火棘果, 采自陜西省商洛市商州區(qū); 乙醇、 石油醚、 三氯化鋁、 醋酸鈉等(均為分析純), 國藥集團(tuán); 蘆丁, 廣州分析測試中心科力技術(shù)開發(fā)公司; 菜籽油、 豬油(市售)。

        1.1.2 主要儀器及設(shè)備 電熱恒溫水浴鍋(HH-6),上??等A生化儀器制造廠; 紫外可見分光光度計(jì)(754型), 上海菁華儀器有限公司; 電動研磨粉碎機(jī)(HXYM19), 佛山市海迅電器有限公司。

        1.2 方法

        1.2.1 原料的預(yù)處理 將采摘的火棘果清洗干凈, 放至恒溫干燥箱中60 ℃烘干(前后兩次質(zhì)量差不超過0.01~0.05 g), 粉碎后, 過60 目篩后備用

        2.2.4 提取溫度對提取效果的影響 由圖5 可知, 隨著提取溫度的增加, 火棘果黃酮的得率增加, 當(dāng)提取時間超過70 ℃時, 火棘果黃酮的得率呈現(xiàn)出下降趨勢。這可能是由于適當(dāng)升溫有利于黃酮類物質(zhì)的溶出、 擴(kuò)散; 但當(dāng)溫度過高時, 一方面乙醇提取劑開始揮發(fā), 導(dǎo)致提取劑濃度降低, 另一方面溫度過高會造成黃酮物質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞, 影響黃酮提取效果, 致使黃酮得率降低

        1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品0.012 5 g,加入乙醇溶解, 定容至100 mL, 即得蘆丁對照品溶液。準(zhǔn)確吸取對照品溶液0、 2.0、 4.0、 6.0、 8.0、 10.0 mL分別置于25 mL 容量瓶中, 加入AlCl

        溶液2 mL 及NaCl溶液3 mL, 搖勻后在25 ℃環(huán)境中顯色5 min, 再以80%乙醇定容至刻度搖勻, 以80%乙醇溶液作空白對照, 在波長418 nm 處測定吸光度

        , 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        3.2 從最基本的需要滿足了農(nóng)村文化生活需要。在農(nóng)村鄉(xiāng)鎮(zhèn)官場開展的民間自娛性廣場文化,如村頭街尾的扭秧歌、交誼舞、健身操,公園、庭院的演唱會、故事會、讀書會等。這種類型的廣場文化不受時間、場地、服飾、設(shè)施、水平等條件的限制,多以健身強(qiáng)體、自娛自樂為目的。這種自娛性廣場文化滿足了農(nóng)民群眾精神生活的需求,起到了調(diào)節(jié)身心,陶冶思想情操,增進(jìn)人際交往,激發(fā)工作活力等最基本的作用。

        1.2.4 樣品中黃酮含量的測定 準(zhǔn)確量取火棘果提取液2 mL 置于25 mL 容量瓶中, 按1.2.3 中的方法, 在波長418 nm 處測定吸光度, 通過標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算樣品濃度, 并通過式(1) 計(jì)算火棘果中黃酮類化合物的得率。

        今后,只要在住宅小區(qū)內(nèi)有固定場所,為小區(qū)居民或村民提供自行車維修、小家電維修、縫紉修補(bǔ)、管道疏通和衛(wèi)生保潔等服務(wù)的,就可不辦理營業(yè)執(zhí)照,只要向所屬居委會或村委會備案即可。

        1.2.5 火棘果黃酮提取的單因素試驗(yàn) (1) 料液比對提取效果的影響: 按照1.2.2 中的方法, 稱取10 g 火棘果粉末, 在乙醇濃度為75%、 提取溫度為70 ℃條件下提取3 h。 設(shè)置料液比為1 ∶5、 1 ∶10、 1 ∶15、 1 ∶20、1 ∶25 進(jìn)行試驗(yàn), 測定樣品吸光度并計(jì)算黃酮的得率。(2) 乙醇濃度對提取效果的影響: 按照1.2.2 中的方法, 稱取10 g 火棘果粉末, 在料液比為1 ∶15, 提取溫度為70 ℃條件下提取3 h。 設(shè)置乙醇濃度為55%、65%、 75%、 85%、 95% 進(jìn)行試驗(yàn), 測定樣品吸光度并計(jì)算黃酮的得率。 (3) 提取時間對提取效果的影響: 按照1.2.2 中的方法, 稱取10 g 火棘果粉末, 在料液比為1 ∶15、 乙醇濃度為75%、 提取溫度為70 ℃條件下, 設(shè)置提取時間為1、 2、 3、 4、 5 h 進(jìn)行試驗(yàn), 測定樣品吸光度并計(jì)算黃酮的得率。 (4) 提取溫度對提取效果的影響: 按照1.2.2 中的方法, 稱取10 g 火棘果粉末, 在料液比為1 ∶15、 乙醇濃度為75%、 提取時間為3 h 條件下, 設(shè)置提取溫度為50 ℃、 60 ℃、 70 ℃、 80 ℃、90 ℃進(jìn)行試驗(yàn), 測定樣品吸光度并計(jì)算黃酮的得率。

        1.2.6 正交試驗(yàn) 根據(jù)火棘果黃酮提取的單因素試驗(yàn)結(jié)果, 以黃酮得率作為標(biāo)準(zhǔn), 采用L

        ( 3

        ) 正交表進(jìn)行正交試驗(yàn), 優(yōu)化火棘果黃酮提取的最佳工藝條件(表1)。

        2.2.2 乙醇濃度對提取效果的影響 由圖3 可知, 隨著乙醇濃度的增加, 火棘果黃酮的得率增加, 當(dāng)乙醇濃度超過75%時, 火棘果黃酮的得率呈現(xiàn)出下降趨勢。 這可能是由于當(dāng)乙醇濃度較小時, 乙醇濃度的增加會加大乙醇與溶質(zhì)接觸, 同時由于溶劑濃度不同極性不同, 在一定的乙醇濃度范圍內(nèi), 會利于黃酮類物質(zhì)的溶出; 隨著乙醇濃度繼續(xù)增加, 親脂性成分(如鞣質(zhì)等) 會與黃酮類物質(zhì)競爭溶劑, 阻礙其溶出, 從而使火棘果黃酮的得率降低

        。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

        2.2.1 料液比對提取效果的影響 由圖2 可知, 隨著料液比的增加, 火棘果黃酮的得率增加, 當(dāng)料液比超過1 ∶15 時, 火棘果黃酮的得率呈現(xiàn)出下降趨勢。 這可能是由于溶劑量的增加, 加大了溶液傳質(zhì)推動力, 利于黃酮類物質(zhì)的溶出, 進(jìn)而提取率變大; 之后溶劑量的繼續(xù)增加, 會使雜質(zhì)溶出, 有礙黃酮類物質(zhì)溶出, 提取率下降

        。

        2.2 火棘果黃酮提取的單因素試驗(yàn)結(jié)果

        由圖1 可知, 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為

        =15.971

        -0.011,

        =0.999 4 >0.999, 證明該回歸方程有效。

        1.2.7 火棘果黃酮的抗油脂氧化性試驗(yàn) 抗油脂氧化試驗(yàn)設(shè)計(jì)2 組, 1 組為動物油新煉制豬油、 1 組為植物油菜籽油。 準(zhǔn)確稱取50.0 g 油脂數(shù)份, 置于100 mL 的燒杯中, 分別添加相同濃度的黃酮樣品、 蘆丁、 BHT(2, 6-二叔丁基對甲酚), 并設(shè)置空白對照。 放置在(60±1)℃烘箱中, 每12 h 振蕩1 次, 并交換在烘箱中的位置。 定期測定過氧化值(POV), 測定方法采用GB/T5538-2005/ISO 3960: 2001 《動植物油脂過氧化值測定》

        。

        2.2.3 提取時間對提取效果的影響 由圖4 可知, 隨著提取時間的增加, 火棘果黃酮的得率增加, 當(dāng)提取時間超過3 h 時, 火棘果黃酮的得率呈現(xiàn)出略微下降趨勢。這可能是由于在提取時間較短時, 黃酮與多糖等物質(zhì)結(jié)合不易溶出; 隨著時間的延長, 原料中的黃酮大量快速溶出, 得率升高; 但隨著提取時間繼續(xù)增加, 由于黃酮含量為一定值, 大部分黃酮已基本溶出后, 溶液趨于飽和, 黃酮含量不再升高; 若提取時間過長, 容易造成黃酮的緩慢分解, 使其得率下降

        。

        從信的內(nèi)容判斷,楊小水與常江的通信遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止這八封,有些信可能弄丟了。按時間順序,頭兩封信簡單,客氣,就像兩個陌生人見面先握手,然后才試探著深入。

        式(1) 中,

        —測定液中黃酮類化合物的濃度(mg/mL)、

        —提取液的總體積(mL)、

        —稱取的樣品質(zhì)量(mg)

        1.2.2 樣品的制備 以石油醚為溶劑, 采用索氏提取法對火棘果進(jìn)行脫色處理。 脫色后的火棘果中加入乙醇, 回流提取并抽濾, 收集濾液, 得到樣品溶液。

        回煞這個儀式,在納平山和相距十多公里的坡業(yè)不同。據(jù)坡業(yè)的陶興文介紹,回煞之后,還有除靈,這是兩個時間上分開的儀式。而且,回煞不吹蘆笙,只有除靈才吹。但在納平山,回煞和除靈這兩個儀式,合二為一,一步到位,回煞的后半段就是除靈,期間還要吹16個“調(diào)”的蘆笙。

        2.3 正交試驗(yàn)優(yōu)化最佳提取工藝

        根據(jù)火棘果黃酮提取的單因素試驗(yàn)結(jié)果, 以黃酮得率作為標(biāo)準(zhǔn), 選定料液比、 乙醇濃度、 提取時間、 提取溫度為正交試驗(yàn)中的4 個因素, 優(yōu)化火棘果黃酮提取的最佳工藝條件。 由表2 可知, 4 種因素影響火棘果黃酮得率的主次順序?yàn)锳 >B >C >D, 即料液比>乙醇濃度>提取時間>提取溫度。 正交試驗(yàn)分析確定最佳的提取工藝條件組合為A

        B

        C

        D

        。

        正交試驗(yàn)分析的最優(yōu)組合A

        B

        C

        D

        與正交試驗(yàn)(9組) 中最佳組合A

        B

        C

        D

        不一致。 為確定最優(yōu)的工藝條件, 進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn), 由表3 可知, 在A

        B

        C

        D

        工藝條件下, 火棘果黃酮得率為2.34%, 高于A

        B

        C

        D

        工藝條件下的火棘果黃酮得率2.23%, 因此得到最優(yōu)提取工藝條件組合為A

        B

        C

        D

        , 即料液比1 ∶15、 乙醇濃度為75%、 提取時間為3 h、 提取溫度為70 ℃。

        2.4 火棘果黃酮的抗油脂氧化活性

        選擇植物油脂中代表性的菜籽油、 動物油脂中代表性的豬油作為研究對象。 在2 種油脂中分別加入蘆丁、火棘果黃酮、 BHT, 分別設(shè)置空白對照, 測定這8 種組合放置期內(nèi)的POV。 由圖6 可知, 植物油脂在放置期內(nèi)的氧化酸敗現(xiàn)象不太明顯。 3 種抗氧化劑(火棘果黃酮、 BHT、 蘆丁) 對菜籽油的抗氧化效果相似, 且與空白組相差不大, 即在植物油脂中加入抗氧化劑的意義不大, 這可能是由于植物油脂中含有一些天然的維生素,如維生素E 等具有抗氧化的作用

        。

        與之形成鮮明對比的是動物油脂, 在放置期內(nèi), 尤其是后期發(fā)生明顯的氧化酸敗現(xiàn)象, POV 迅速升高。 3種抗氧化劑(火棘果黃酮、 BHT、 蘆丁) 對豬油的抗氧化效果不盡相同。 空白豬油組伴隨著時間的推移, 迅速發(fā)生急劇的氧化酸敗現(xiàn)象; 蘆丁對豬油沒有明顯的抗氧化效果, 與空白組相差不大; BHT 干擾游離基反應(yīng), 可以有效清除自由基

        , 對豬油的氧化酸敗有強(qiáng)烈的抑制作用, 20 d 時過氧化值基本保持不變; 黃酮類化合物是作為金屬離子絡(luò)合物來抑制油脂的自動氧化, 火棘果黃酮可與微量金屬元素螯合以減少自由基的產(chǎn)生, 因而能夠消除金屬離子對油脂的催化作用, 從而發(fā)揮抗氧化功能, 其抗氧化效果明顯, 但不及BHT。

        根據(jù)40例頸部富血供包塊患者的臨床診斷資料及其在CT掃描診斷與MRI掃描診斷中的實(shí)際表現(xiàn),對比研究影像學(xué)特征。綜合性的研究CT掃描診斷與MRI掃描診斷頸部富血供包塊的臨床效果。

        3 結(jié)論與討論

        本研究以乙醇為溶劑提取火棘果中的黃酮, 并對其提取工藝進(jìn)行優(yōu)化, 同時探索火棘果黃酮對于不同油脂的抗氧化活性。 通過正交試驗(yàn)確定火棘果中黃酮提取的最佳工藝組合為A

        B

        C

        D

        , 即料液比1 ∶15、 乙醇濃度為75%、 提取時間為3 h、 提取溫度為70℃。 其中, 4種因素影響火棘果黃酮得率的主次順序?yàn)榱弦罕龋疽掖紳舛龋咎崛r間>提取溫度。 此工藝下, 火棘果黃酮的得率為2.34%。 植物油脂在放置期內(nèi)氧化現(xiàn)象不明顯,而動物油脂在放置期內(nèi)發(fā)生明顯的氧化酸敗現(xiàn)象, POV迅速升高。 火棘果黃酮在菜籽油中添加的意義不大, 但在豬油中添加火棘果黃酮可以有效地延緩豬油的氧化,表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗油脂氧化活性。

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