叢湘明 李 向 華雪銘* 宓水潮 杭 瑩 易婉婷

(1.上海海洋大學(xué)，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境生態(tài)與魚類營養(yǎng)研究中心，上海 201306；2.上海海洋大學(xué)，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水水生遺傳資源重點實驗室，上海 201306；3.上海海洋大學(xué)，國家水產(chǎn)科學(xué)實驗教育示范中心，上海 201306；4.常州亞源生化科技有限公司，常州 213111)

魚類的胃排空率(gastric evacuation rate，GER)指攝食后食物從胃排至腸道的速率[1]，是建立魚類攝食和生長模型的重要組成部分[2-3]。在野生魚類資源調(diào)查中常將測定的胃排空率與相應(yīng)種群在自然環(huán)境中的胃內(nèi)容物相結(jié)合，用來研究魚類在自然狀態(tài)下的日攝食量[4]、攝食周期以及生態(tài)轉(zhuǎn)換效率等一系列生態(tài)學(xué)相關(guān)的問題[5-6]。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中，胃排空率常被用于人工配合飼料開發(fā)[7]、餌料轉(zhuǎn)換率評估[3]以及投喂策略優(yōu)化[8-10]等研究。20世紀(jì)末以來，國內(nèi)學(xué)者陸續(xù)對鲇魚(SilurusasotusLinnaeus)[11]、斑點叉尾(Ietaluruspunetaus)[12]、虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[13]等養(yǎng)殖魚類的胃排空率進行了系統(tǒng)研究，并通過多種數(shù)學(xué)模型對胃內(nèi)容物重量進行擬合，為科學(xué)制定養(yǎng)殖魚類投喂頻率提供重要參數(shù)。

大口黑鱸(Micropterussalmoides)，隸屬鱸形目(Perciformes)，黑鱸屬(Micropterus)，是具有適應(yīng)性強、生長快等優(yōu)點的肉食性溫水魚類，且可以全程使用人工配合飼料養(yǎng)殖，目前已成為我國淡水魚養(yǎng)殖的主要品種之一。但近幾年陸續(xù)報道在全程使用配合飼料飼養(yǎng)后期會出現(xiàn)肌肉品質(zhì)下降[14]、肝臟病變等狀況[15]，這說明大口黑鱸相關(guān)飼料產(chǎn)品還有很大的提升空間。小肽又稱寡肽，是一類由蛋白質(zhì)水解形成，以2～10個氨基酸組成的易消化吸收且兼顧多種生物功能的小分子物質(zhì)[16]。在本實驗室前期研究中發(fā)現(xiàn)，飼料中添加2%小肽可以提高消化酶活性，促進養(yǎng)殖動物生長[17]，但是否需要同時改變投喂策略更有利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收還未可知。

因此，本研究在前期研究[17]基礎(chǔ)上，考察攝食含小肽飼料后的大口黑鱸胃排空率及胃排空過程中消化酶活性變化，使用數(shù)學(xué)模型對胃排空率進行擬合，計算其排空時間，旨在了解添加小肽后對大口黑鱸消化吸收進程的影響，為養(yǎng)殖中投喂頻率和飼料配方的優(yōu)化提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

試驗所用小肽由常州某生化科技有限公司提供，通過復(fù)合水解法以玉米蛋白作為底物，經(jīng)過浸泡、酸化、酶解、濃縮、均質(zhì)、噴霧干燥、半成品物理冷卻、粉體包衣等多道工藝精制而成。其蛋白質(zhì)水平為46%，其中小肽平均分子質(zhì)量為1 003 Da，分子質(zhì)量為1 000 Da的小分子蛋白質(zhì)占總蛋白質(zhì)的25%～30%。

根據(jù)大口黑鱸的營養(yǎng)需求并結(jié)合養(yǎng)殖生產(chǎn)中常用的商品飼料設(shè)計本試驗所用飼料配方，以魚粉、豆粕、玉米蛋白粉等原料為蛋白質(zhì)源，魚油、菜籽油和大豆磷脂為脂肪源，配制3種飼料：D0+飼料滿足大口黑鱸的營養(yǎng)需求(正對照組)，D0-飼料在D0+飼料基礎(chǔ)上降低3%蛋白質(zhì)水平(飼料中魚粉、血粉、豆粕、玉米蛋白粉等比例減少)(負(fù)對照組)，D2飼料則在D0-飼料基礎(chǔ)上添加2%小肽。

將飼料原料粉碎后過60目篩，按照配方比例充分混勻后，再加入油脂使用混合機混合均勻，隨后加入所配飼料質(zhì)量15%～20%的水后再次混勻，經(jīng)制粒機制成直徑為2 mm的顆粒飼料，待50 ℃烘干至水分含量低于10%后，密封儲存于-20 ℃冰箱中備用。試驗飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項目 Items飼料 DietsD0+D0-D2酵母膏 Yeast extract1.001.001.00氯化膽堿 Choline chloride0.500.500.50磷酸二氫鈣 Ca(H2PO4)2 1.001.001.00?；撬?Taurine 0.300.300.30微晶纖維素 Microcrystalline cellulose2.002.002.00沸石粉 Zeolite4.706.724.72合計 Total100.00100.00100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels3)粗蛋白質(zhì)Crude protein46.6443.7044.64粗脂肪 Crude lipid12.0711.7811.82總能 Gross energy/(MJ/kg)18.9418.8418.81

1.2 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗在上海海洋大學(xué)濱海養(yǎng)殖基地進行。提前將購買于浙江省湖州市池塘養(yǎng)殖的魚苗進行暫養(yǎng)與馴化，選取規(guī)格均勻、健康的大口黑鱸540尾[初始體重(21.27±0.17) g]，隨機分配至12個網(wǎng)箱中，每個網(wǎng)箱(200 cm×120 cm×100 cm)45尾魚，每組4個網(wǎng)箱即4個重復(fù)，養(yǎng)殖周期為60 d，每天表觀飽食投喂2次(08:30和16:30)，日投喂量為體重的2%～3%，采用自然光照，水體溫度(27±5) ℃；定期吸污換水，24 h連續(xù)充氣；溶解氧濃度不低于5 mg/L，氨氮濃度不高于0.3 mg/L。

1.3 試驗設(shè)計

D0+組、D0-組和D2組分別從飼養(yǎng)試驗結(jié)束后的4個網(wǎng)箱中挑選規(guī)格相同、體重為(85.58±1.81) g的大口黑鱸80尾，將挑選出的大口黑鱸放置在每組相應(yīng)的小網(wǎng)箱(80 cm×30 cm×50 cm)中，每組8個網(wǎng)箱，每個網(wǎng)箱10尾。正式試驗開始前，通過解剖法確定取樣時間間隔，為保證試驗采樣操作方便，所有正式試驗用魚饑餓處理48 h，確保其消化道徹底排空。隨后，所有網(wǎng)箱的魚投喂與養(yǎng)殖試驗對應(yīng)的飼料，表觀飽食投喂1次，投喂持續(xù)時間30 min，分別在投喂結(jié)束后的0、3、6、9、12、18、24、30 h隨機對各組8個網(wǎng)箱中的1個網(wǎng)箱取樣。胃排空試驗時水質(zhì)和管理條件與前期養(yǎng)殖試驗相同。

1.4 樣品采集與測定

將網(wǎng)箱中10尾大口黑鱸全部撈出，使用丁香酚迅速將魚麻醉。沿著大口黑鱸腹部，從肛門剪至下頜部，暴露內(nèi)臟。分離出胃和消化道，用鑷子分別夾緊胃賁門部和幽門部，將賁門朝向預(yù)先干燥稱重的離心管，完全擠出胃內(nèi)容物，對離心管稱重，所得重量即為胃內(nèi)容物濕重；將胃內(nèi)容物置于烘箱中按GB/T 6435—2006測定水分含量，然后記錄所得干重。

將去除內(nèi)容物的胃和腸道置于-20 ℃保存，用于消化酶活性的測定。淀粉酶、脂肪酶活性均采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒進行測定；胃蛋白酶活性采用GB/T 23527—2009中酸性蛋白酶活性測定方法測定，腸道蛋白酶活性采用GB/T 23527—2009中中性蛋白酶活性測定方法測定，組織勻漿液的蛋白質(zhì)濃度采用考馬斯亮藍染色法進行測定。

1.5 指標(biāo)計算與數(shù)學(xué)模型

SR(%)=100×Nt/N0；
WGR(%)=100×(Wt-W0)/W0；
FCR=Wf/(WT-WO)；
SGR(%/d)=100×(lnWt-lnW0)/t。

式中：SR為存活率；Nt為終末尾數(shù)；N0為初始尾數(shù)；WGR為增重率；Wt為終末體重；W0為初始體重；FCR為飼料系數(shù)；Wf為攝入飼料量；WT為試驗?zāi)┛傊?；WO為試驗初總重；SGR為特定生長率。

參照文獻[10]用線性、指數(shù)和平方根模型分別擬合胃內(nèi)容物剩余重量百分比：

線性模型:Y=A-Bt；
指數(shù)模型:Y=Ae-Bt；
平方根模型:Y0.5=A-Bt。

式中：Y為任一取樣時間胃內(nèi)容物重量占總攝食量的百分比，即胃內(nèi)容物剩余重量百分比(%)=(任一取樣時間時胃內(nèi)容物重量/總攝食量)×100；B為瞬時胃排空率(%/h)；t為攝食后的時間(h)；A為常數(shù)。通過比較各擬合模型的相關(guān)系數(shù)(R2)、殘差平方和(RSS)、殘差的標(biāo)準(zhǔn)差(SDR)來選擇大口黑鱸的最佳排空模型。

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)用SPSS 25.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，若發(fā)現(xiàn)各時間點存在顯著差異則采用Duncan氏法進行多重比較。3種數(shù)學(xué)模型的參數(shù)A、B均由統(tǒng)計軟件Origin 2018進行曲線擬合得到。所有統(tǒng)計值均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，顯著水平定為P<0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 大口黑鱸攝食不同飼料后生長性能的變化

從表2可以看出，D0+組終末體重與增重率最高，D2組終末體重與增重率略高于D0-組，但差異不顯著(P>0.05)。3組間飼料系數(shù)、特定生長率與存活率也都差異不顯著(P>0.05)。

表2 各組大口黑鱸攝食不同飼料的生長性能

2.2 大口黑鱸攝食不同飼料后胃內(nèi)容物水分含量的變化

由于30 h時大口黑鱸胃內(nèi)容物已排空未采集到內(nèi)容物，因此攝食后各組胃內(nèi)容物水分含量變化為24 h內(nèi)，結(jié)果如圖1所示。3組大口黑鱸胃內(nèi)容物水分含量均在攝食后0～6 h顯著上升(P<0.05)，均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。D0+組、D0-組和D2組胃內(nèi)容物水分含量分別在18、12和18 h最高。D0-組和D2組胃內(nèi)容物水分含量在3～24 h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.3 大口黑鱸攝食不同飼料后胃排空模型的選擇與胃排空時間

分別使用線性、平方根及指數(shù)模型對3組大口黑鱸胃排空數(shù)據(jù)進行擬合。結(jié)果顯示(表3，圖2)，3組胃內(nèi)容物的干重和濕重數(shù)據(jù)能較好地與3種模型進行擬合。比較各組各模型的R2，采用濕重擬合結(jié)果中只有D2組線性模型R2高于0.900。綜合R2、RSS以及SDR可知，使用胃內(nèi)容物干重擬合結(jié)果相對要優(yōu)于濕重擬合結(jié)果。在本試驗條件下，D0+組胃排空規(guī)律的最佳模型是使用干重擬合的指數(shù)模型，D0-組和D2組的最佳模型是使用干重擬合的平方根模型。

將圖2中最佳模型與表4結(jié)合來看，D0+、D0-和D2組的胃內(nèi)容物完全排空均為30 h，但3組的變化趨勢不盡相同。D0+組中在0～9 h，胃內(nèi)容物剩余重量百分比在9 h時急劇下降，胃內(nèi)容物剩余重量百分比降至42%左右，隨后緩慢下降至24 h時，胃內(nèi)容物已排空85%左右; 在30 h時，胃內(nèi)容物已基本排空。D0-組中在0～9 h，胃內(nèi)容物剩余重量百分比保持著相對勻速下降趨勢，9～18 h時胃內(nèi)容物剩余重量百分比急劇降至23%左右，隨后緩慢下降至24 h時，胃內(nèi)容物已排空80%左右；在30 h時，胃內(nèi)容物已基本排空。D2組在整個排空過程中，胃內(nèi)容物剩余重量百分比也呈現(xiàn)先慢后快再慢的特點，但保持著相對勻速下降趨勢，12 h時胃內(nèi)容物剩余重量百分降至42%左右，在24 h時，胃內(nèi)容物已排空85%左右；在30 h時，胃內(nèi)容物已基本排空。因此，根據(jù)各組最佳模型擬合得到的方程式Y(jié)=99.080e-0.084t、Y0.5=9.972-0.257t和Y0.5=9.868 9-0.274t，計算可知50%和80%胃排空的理論時間，D0+組分別為8.14和19.04 h，D0-組分別為11.28和21.4 h，D2組分別為10.21和19.67 h。

不同小寫字母表示不同取樣時間點的數(shù)據(jù)之間差異顯著(P<0.05)。下圖同。

表3 各組大口黑鱸攝食不同飼料的胃排空曲線的3種數(shù)學(xué)模型擬合

續(xù)表3項目 Items組別 Groups模型 Models公式 EquationsR2RSS SDR濕重Wet weightD0+線性模型 Y=98.554-3.187t0.86511 991.96312.320平方根模型Y0.5=10.171-0.222t0.85413 191.93212.917指數(shù)模型Y=106.638e-0.058t0.82415 661.11414.056D0-線性模型 Y=106.890-3.588t0.8837 052.9979.449平方根模型 Y0.5=10.605-0.245t0.86215 322.74113.913指數(shù)模型Y=114.725e-0.060t0.81720 328.52015.985D2線性模型 Y=107.133-3.638t0.90710 266.07511.400平方根模型 Y0.5=10.623-0.250t0.88812 601.46412.614指數(shù)模型Y=115.145e-0.061t0.84017 867.01114.971

表4 各組大口黑鱸攝食不同飼料的體重與胃內(nèi)容物重量(干重)

2.4 各組胃排空過程中消化酶活性的變化

由圖3至圖5可知，各組胃腸道中的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性均呈先升高后降低的趨勢，D0+組攝食后9 h時胃腸道中的淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶活性達到最高值，而D0-組和D2組則在攝食后9 h時胃蛋白酶活性達到最高值，顯著高于同組其他時間點(P<0.05)，12 h時胃腸道中的淀粉酶、脂肪酶及腸道蛋白酶活性達到最高值，顯著高于同組其他時間點(P<0.05)。

通過比較各組各時間點3種消化酶活性(圖6)可知，剛攝食后，D0-組胃淀粉酶和胃蛋白酶活性顯著高于D0+組和D2組(P<0.05)，而D0+組腸道淀粉酶活性顯著高于其余2組(P<0.05)，腸道蛋白酶活性顯著低于D0-組和D2組(P<0.05)；3組胃脂肪酶活性除6 h外其余時間點差異不顯著(P>0.05)。隨著時間的推移，胃腸道3種消化酶的活性也發(fā)生了變化，在攝食后6 h時D0+組胃蛋白酶、淀粉酶以及腸道脂肪酶活性顯著高于其余2組(P<0.05)，攝食12 h后D0+組胃腸道的淀粉酶和胃蛋白酶活性顯著低于其余2組(P<0.05)。

圖2 3種數(shù)學(xué)模型對各組大口黑鱸胃內(nèi)容物剩余重量百分比變化的擬合結(jié)果

圖3 各組大口黑鱸攝食不同飼料30 h內(nèi)胃腸道淀粉酶活性變化

圖4 各組大口黑鱸攝食不同飼料30 h內(nèi)胃腸道蛋白酶活性變化

圖5 各組大口黑鱸攝食不同飼料30 h內(nèi)胃腸道脂肪酶活性變化

3 討 論

3.1 不同飼料對大口黑鱸魚胃排空特征的影響

雖然魚類種屬繁多，有著不同的生活習(xí)性與攝食習(xí)慣，但主要胃排空類型分為3種：第1種類型為先快后慢型，當(dāng)食物到達魚類胃部后，先經(jīng)過一段時間的快速排空，隨后隨著時間的增加胃排空速率逐漸減慢，如攝食浮游生物的鳀魚(Engraulis)[18]和玉筋魚(Ammodytespersonatus)[5]，投喂飼料的斑點叉尾[12]和瓦氏黃顙魚(Pelteobagrusvachelli)[19]；第2種類型為直線下降型，魚類攝食后其胃內(nèi)容物重量隨時間的推移呈線性下降趨勢，如許氏平鲉(Sebastesschlegelii)[20]、黑鯛(Sparusmacrocephalus)[21]等肉食性魚類；第3種類型為先慢后快再慢型，魚類攝食后其初始胃排空速率較低，隨后排空速率開始加快，最后又降低排空速率直至胃內(nèi)容物排空，如厚頜魴幼魚(Megalobramapellegrini)[22]、云龍石斑魚(E.moara♀×E.lanceolatus)[23]和虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[24]等。本研究發(fā)現(xiàn)，攝食不同飼料后的大口黑鱸胃排空特征不盡相同，但都呈現(xiàn)出先慢后快再慢的特點，D0+組和D0-組尤為明顯，胃內(nèi)容物剩余重量百分比分別于9和18 h明顯下降。這說明不同飼料對于大口黑鱸胃排空的總體趨勢影響不大，在使用不同品質(zhì)魚粉制作的飼料投喂歐白鮭(Coregonusalbula)[25]及不同蛋白質(zhì)水平的飼料投喂虹鱒[24]時也得到了類似的結(jié)果。

圖6 各時間點內(nèi)3組大口黑鱸攝食不同飼料的胃腸道消化酶活性的比較

3.2 不同飼料對大口黑鱸最優(yōu)模型的影響

在本試驗中，3組大口黑鱸胃內(nèi)容物水分含量均在攝食3 h后上升，自6 h開始基本保持不變，這種現(xiàn)象是魚類消化飼料的主要步驟之一[12]。研究表明，魚類胃內(nèi)容物中的水分含量對胃排空模型的建立有一定的影響[26]，用濕重來模擬魚類胃排空有可能高估胃內(nèi)容物的實際含量。本研究中，各組胃內(nèi)容物剩余濕重百分比在0～6 h會有個別取樣點超過100%的現(xiàn)象，在虹鱒[13]和南方鲇幼魚[27]等試驗中均出現(xiàn)此現(xiàn)象，這種現(xiàn)象會導(dǎo)致擬合模型的可靠性降低。從本試驗濕重擬合結(jié)果來看確實如此，各組各模型的R2只有D2組的線性模型高于0.900。因此，本試驗采用胃內(nèi)容物干重來模擬評估大口黑鱸胃排空模型。

由于魚類胃排空機制復(fù)雜多樣，因此很難用統(tǒng)一的模型表現(xiàn)不同魚類胃排空方式。文獻報道的擬合模型就有10余種，如平方根模型、指數(shù)模型、線性模型、冪函數(shù)模型、邏輯斯蒂克模型、Gompertz模型、倒數(shù)模型等[1]。其中最為常用的擬合模型是線性模型、指數(shù)模型以及平方根模型[28]。目前研究表明，眼斑擬石首魚(Sciaenopsocellatus)[29]、許氏平鲉[20]、大眼梭鱸(Stizostedionvitreumvitreum)[30]等魚類的胃排空方式適用線性模型擬合，而俄羅斯鱘(Acipensergueldenstaedtii)幼魚[31]、厚頜魴幼魚[22]、鲇魚[11]等魚類的胃排空方式適用平方根模型擬合；斑點叉尾[12]、瓦氏黃顙魚[19]和銀大麻哈魚(Oncorhynchuskisutch)[32]等魚類的胃排空方式適用指數(shù)模型擬合。在本試驗中，3組數(shù)據(jù)能較好地用3種模型進行擬合，由結(jié)果可以看出經(jīng)D0+組指數(shù)模型和平方根模型的R2、RSS以及SDR差異不大，綜合比較后，D0+組胃排空規(guī)律的最佳模型是指數(shù)模型，D0-組和D2組的最佳模型是平方根模型，其方程式分別為Y=99.080e-0.084t、Y0.5=9.972-0.257t和Y0.5=9.868 9-0.274t，通過計算可知50%和80%胃排空的理論時間，D0+組分別為8.14和19.04 h，D0-組分別為11.28和21.40 h，D2組分別為10.21和19.67 h。3組50%和80%胃排空時間有一定差異，D0+組最短，可能是因為D0+組飼料中蛋白質(zhì)水平高于其他2組，尤其是魚粉中存在“未知生長因子”，使得飼料更容易被機體消化分解；D2組胃排空后期時間縮短，可能與小肽促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收功能有關(guān)。

有研究表明，當(dāng)魚類胃內(nèi)容物排出超過50%后，其食欲的恢復(fù)也超過50%[33]，當(dāng)排空超過80%時，其食欲完全恢復(fù)[34]。在理想情況下，當(dāng)魚類的食欲恢復(fù)時，立即獲得飼料，才能保證良好的生長，并避免過度投喂所造成的養(yǎng)殖水體污染。但張鵬飛等[35]認(rèn)為胃排空率達到80%作為投喂最佳時間間隔的判定指標(biāo)并不充分，還要考慮到魚類的攝食節(jié)律，郭浩宇等[20]在許氏平鲉幼魚的研究中認(rèn)為，投喂間隔時間應(yīng)結(jié)合養(yǎng)殖過程中的實際觀察；朱云海等[36]在日本黃姑魚(Nibeajaponica)的研究中認(rèn)為，投喂間隔時間應(yīng)該在食欲開始恢復(fù)和完全恢復(fù)之間。因此，綜合3組擬合結(jié)果大口黑鱸投喂間隔時間應(yīng)為8～21 h，此時食欲已得到較大程度的恢復(fù), 能取得較好的投喂效果。謝蘇明等[37]研究大口黑鱸投飼頻率后發(fā)現(xiàn)，分別于每天06:00和18:00各投喂1次的生長率、抗氧化能力優(yōu)于其他組，間隔時間為12 h，與本試驗結(jié)論基本吻合。

3.3 胃排空過程中消化酶活性的變化

消化酶在魚類生長發(fā)育過程中有著極其重要的作用，根據(jù)消化對象的不同，大致可分為蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纖維素酶等幾種[38]。魚類在攝食消化過程中，隨著時間的推移，消化酶的活性也發(fā)生相應(yīng)的變化，消化道中酶的數(shù)量經(jīng)過一段時間達到峰值，之后便會隨著飼料的減少而減少，消化道排空時最少[39]。

在本試驗中，3組大口黑鱸胃腸道中的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性隨著時間的推移都呈現(xiàn)先升高后降低的規(guī)律性時序變化和組織差異性，這與在斑點叉尾[12]、云龍石斑魚[23]、全雄黃顙魚(all-malePelteobagrusfulvidraco)[40]和羅非魚(Oreochromismossambicus)[41]的研究結(jié)果一致。D0+組飼料蛋白質(zhì)水平及魚粉用量高于其他2組，機體更容易獲取所需要的營養(yǎng)，因此，胃腸道的淀粉酶和蛋白酶活性變化速率要快于其余2組，這與D0+組胃排空變化速率快于其余2組的結(jié)果相吻合；而D0-組和D2組為了獲得足夠的營養(yǎng)，機體通過增強胃腸道消化酶活性的方式來強化營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，因此消化酶活性在前期達到峰值要慢于D0+組。本研究中，D2組大口黑鱸6～9 h胃內(nèi)容物排空速度高于D0-組，其9 h胃蛋白酶活性也顯著高于D0-組，9～30 h腸道的蛋白酶活性都顯著高于D0+組和D0-組，可能因為飼料中添加的小肽在胃部經(jīng)過胃蛋白酶-鹽酸系統(tǒng)的分泌和消化作用釋放到達腸道，經(jīng)腸道中PepT1跨膜運輸進行完整的轉(zhuǎn)運吸收[42]，在此過程中通過激活細(xì)胞膜上的受體或與細(xì)胞內(nèi)受體結(jié)合等方式，引起細(xì)胞信號傳遞，誘導(dǎo)胃腸道內(nèi)分泌細(xì)胞分泌多種激素[16]，進而提高胃腸道內(nèi)消化酶的活性[43]，增強腸道對蛋白質(zhì)的吸收利用。

但是從生長結(jié)果來看，3組之間差異不顯著，這與我們前期在(11.04±0.05) g的大口黑鱸魚研究[17]中得出來的結(jié)果基本一致。目前，尚未見到關(guān)于胃排空特征和消化酶活性與生長性能差異的報道，基于本試驗現(xiàn)有結(jié)果，推測飼料蛋白質(zhì)水平的變化以及小肽的添加均能引起消化酶活性改變，以保持胃排空時間的相對恒定，進而保證了各組大口黑鱸對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用相對穩(wěn)定，從而導(dǎo)致了各組生長性能差異不顯著。

4 結(jié) 論

綜上所述，改變飼料蛋白質(zhì)水平(3%以內(nèi))或在飼料中添加2%小肽對大口黑鱸總體胃排空時間及胃排空變化趨勢影響不顯著，胃排空方式為先慢后快再慢型，以平方根方模型為最優(yōu)；攝食不同飼料后的大口黑鱸胃腸道消化酶活性均呈各自的規(guī)律性變化，以維持胃排空時間的相對恒定，因此不需要改變投喂頻率。結(jié)合生產(chǎn)實踐，建議大口黑鱸投喂間隔時間為8～21 h，每日投喂2次。