陳 軍，張歡歡，任國英，王慧敏，任雪琴，趙佳輝

（北京東方博大醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100021）

結(jié)核病是臨床上常見的一種慢性疾病。此病主要是由感染結(jié)核分枝桿菌（MTB）所致，其具有傳染性，病變部位包括肺部、腦膜、皮膚等（其中肺部為多發(fā)部位）[1-2]。結(jié)核性胸膜炎（TBP）主要是因MTB 與其代謝產(chǎn)物深入胸腔內(nèi)，引起炎癥反應(yīng)后產(chǎn)生大量胸腔積液所致[3-4]。盡早診斷、盡早治療對控制此病患者的病情具有重要的意義。近年來，隨著相關(guān)技術(shù)的不斷發(fā)展，γ 干擾素釋放試驗(yàn)（IGRAs）逐漸被應(yīng)用于結(jié)核病的臨床診斷中。IGRAs 主要是以體外酶聯(lián)反應(yīng)斑點(diǎn)試驗(yàn)為基礎(chǔ)，通過檢測早期分泌性抗原靶-6、培養(yǎng)濾液蛋白-10 抗原刺激后釋放的INF-γT 細(xì)胞數(shù)來判斷患者是否感染MTB[5-6]。本文對2018 年5 月至2019 年12 月我院接診的80 例疑似TBP 患者進(jìn)行研究，旨在探討胸腔積液IGRAs 與血液IGRAs 在診斷TBP 中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年5 月至2019 年12 月我院接診的80 例疑似TBP 患者為研究對象。其中有男性49 例（占61.25%），女性31 例（占38.75%）；其年齡為28 ～58 歲，平均年齡（42.36±3.25）歲；其體重指數(shù)為18.50 ～26.30，平均體重指數(shù)（22.30±1.25）。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究對象的納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1）存在典型的TBP 臨床癥狀（包括發(fā)熱、畏寒及乏力等）；2）胸腔內(nèi)有大量的積液；3）無結(jié)核病史；4）對臨床檢查的配合度理想；5）自愿參與本研究，且已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）處于妊娠期或哺乳期；2）存在凝血功能異常；3）過敏體質(zhì)；4）存在惡性腫瘤；5）近期內(nèi)使用過免疫抑制劑；6）近期內(nèi)使用過抗結(jié)核藥物；7）有結(jié)核病史或結(jié)核病接觸史。

1.3 方法

為所有入選者均采集胸腔積液與血液進(jìn)行IGRAs， 方 法 是：采 集 其3 ～5mL 的 外 周 血 與30 ～50mL 的胸腔積液，使用安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)的離心機(jī)（以3000r/min 的轉(zhuǎn)速）進(jìn)行離心處理，離心時(shí)間為10min。完成離心處理后，取上層清液。分別將血液標(biāo)本與胸腔積液標(biāo)本置于陽性對照管（P）、陰性對照管（N）、結(jié)核刺激管（T）內(nèi)。分別加入刺激劑，P 加入植物血凝素，N加入磷酸鹽緩沖液，T 加入培養(yǎng)濾液蛋白-10（CFP-10）與早期分泌性抗原靶-6（ESTA-6）混合物，搖勻后放入APC-30D 培養(yǎng)箱（注冊證號：國械注進(jìn)20152223362，生產(chǎn)廠家：ASTEC CO.，LTD.）中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為37℃，培養(yǎng)時(shí)間為20 ～24h。完成培養(yǎng)后，再次以3000r/min 的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心處理，然后取上層清液。使用北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行檢測，所有操作方法均依據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行，使用酶標(biāo)儀（生產(chǎn)廠家：上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司，型號：HKBST-360）測定450nm波長下的光密度（OD）值，再將標(biāo)準(zhǔn)曲線帶入獲取N、P、T 各管的干擾素濃度值。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)是：1）陽性：T-N 值≥14，且≥N/4，N 值≤400 ；2）陰性：T-N值＜14，N 值＜400，P-N 值≥20；3）不確定：（1）P-N 值＜20，T-N 值＜14 ；（2）P-N 值＜20，T-N值≥14 但＜N/4 ；（3）N 值＞400。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS24.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗(yàn)。采用Kappa一致性檢驗(yàn)法評價(jià)IGRAs 與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性，Kappa值≥0.74 提示一致性好，≥0.4 但＜0.74 提示一致性一般，＜0.4 提示一致性差。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MTB 培養(yǎng)結(jié)果

入選本研究的80 例疑似T BP 患者中有72 例（90.00%）患者的MTB 培養(yǎng)結(jié)果為陽性，有8 例（10.00%）患者的MTB 培養(yǎng)結(jié)果為陰性。

2.2 用IGRAs 診斷這些患者病情的效果

經(jīng)MTB 培養(yǎng)結(jié)果證實(shí)，用血液IGRAs 診斷這些患者病情的準(zhǔn)確率為85.00%（68/80），敏感度為86.11%（62/72），特異度為75.00%（6/8），陽性預(yù)測值為96.88%（62/64），陰性預(yù)測值為37.50%（6/16）；用胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情的準(zhǔn)確率為96.25%（77/80），敏感度為97.22%（70/72），特異度為87.50%（7/8），陽性預(yù)測值為98.59%（70/71），陰性預(yù)測值為77.78%（7/9）。與采用血液IGRAs 相比，用胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情的準(zhǔn)確率、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1、表2。

表1 血液IGRAs 結(jié)果、胸腔積液IGRAs 結(jié)果與MTB 培養(yǎng)結(jié)果的對比（例）

表2 用血液IGRAs、胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情效果的比較[%( 例)]

2.3 血液IGRAs、胸腔積液IGRAs 與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性

進(jìn)行Kappa 一致性分析的結(jié)果顯示，血液IGRAs診斷TBP 與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性一般，Kappa 值為0.423；胸腔積液IGRAs 診斷TBP 與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好，Kappa 值為0.803。胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果顯著優(yōu)于血液IGRAs。

3 討論

TBP 是引起胸腔積液的重要因素。此病患者的主要臨床表現(xiàn)為出汗、發(fā)熱、食欲不振、胸痛、呼吸困難等[7-8]。用IGRAs 診斷TBP 的主要原理是TBP患者的體內(nèi)存在大量的結(jié)核特異效應(yīng)T 細(xì)胞，這種T細(xì)胞在受到抗原特異性細(xì)胞刺激后會(huì)生成大量的γ干擾素（γ-IFN），故檢測γ-IFN 水平可準(zhǔn)確診斷TBP。近年來，隨著相關(guān)研究的不斷深入，IGRAs 在臨床診斷TBP 中得到了廣泛的應(yīng)用[9-11]。本研究的結(jié)果顯示，用血液IGRAs 診斷這些患者病情的準(zhǔn)確率為85.00%（68/80），敏感度為86.11%（62/72），特異度為75.00%（6/8），陽性預(yù)測值為96.88%（62/64），陰性預(yù)測值為37.50%（6/16）；用胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情的準(zhǔn)確率為96.25%（77/80），敏感度為97.22%（70/72），特異度為87.50%（7/8），陽性預(yù)測值為98.59%（70/71），陰性預(yù)測值為77.78%（7/9）。與采用血液IGRAs 相比，用胸腔積液IGRAs診斷這些患者病情的準(zhǔn)確率、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)行Kappa 一致性分析的結(jié)果顯示，血液IGRAs 診斷TBP 與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性一般，Kappa值為0.423 ；胸腔積液IGRAs 診斷TBP 與金標(biāo)準(zhǔn)的一致性較好，Kappa 值為0.803。胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果顯著優(yōu)于血液IGRAs。分析其原因在于，在TBP 患者感染MTB 后，趨化作用會(huì)使細(xì)胞因子更容易聚集在其胸腔內(nèi)部，這導(dǎo)致其胸腔積液中抗原特異性細(xì)胞的數(shù)量比血液中多，故用胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果更好[12-15]。

綜上所述，與采用血液IGRAs 相比，用胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果較好。此法值得在臨床上推廣應(yīng)用。