施軍瓊，何書晗,歐陽添，趙璐，紀(jì)璐璐，吳忠興

(西南大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，重慶 400715)

三峽大壩自建立后，其經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益顯著，但也因庫區(qū)“冬蓄夏排”的水體調(diào)度模式，使庫區(qū)水體理化因子發(fā)生較大改變，影響了浮游植物群落結(jié)構(gòu)，易引起浮游植物種間關(guān)聯(lián)發(fā)生變化[1-3].目前，對(duì)三峽庫區(qū)水體浮游植物的研究主要集中在物種組成與環(huán)境因子的研究，水生態(tài)系統(tǒng)的關(guān)聯(lián)性分析研究較少.花溪河作為三峽庫區(qū)的重要支流之一，其群落結(jié)構(gòu)和水文情況受到不同程度的影響.本研究以三峽庫區(qū)一級(jí)支流花溪河作為研究區(qū)域，通過χ2檢驗(yàn)、種間聯(lián)結(jié)系數(shù)(association coefficient,CA)和逐步回歸等方法分析花溪河浮游植物種間關(guān)聯(lián)情況及其與環(huán)境因子的關(guān)系，旨在探究三峽庫區(qū)水位調(diào)度對(duì)浮游植物種間關(guān)系的影響，為三峽庫區(qū)浮游植物研究及水生態(tài)管理提供科學(xué)依據(jù).

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)域概況

花溪河源于重慶市巴南區(qū)石崗鄉(xiāng)碑埡巖口，屬于三峽庫區(qū)一級(jí)支流.本研究從2017年11月16日至2018年10月18日從花溪河源頭到入江口共設(shè)置11個(gè)采樣點(diǎn)，依次為S0(碑埡村),S1(賀家灣),S2(南彭水庫),S3(柏樹灣),S4(蒲蘆塘),S5(吉慶村),S6(虎嘯村),S7(南泉鎮(zhèn)),S8(堤坎),S9(建新村)和S10(入江口)(圖1)，每月對(duì)11個(gè)采樣點(diǎn)分別進(jìn)行調(diào)查.

1.2 水體理化指標(biāo)的測(cè)定

1.3 浮游植物及多樣性指數(shù)

定性樣品采集和分析：通過孔徑為20 μm的浮游生物網(wǎng)采集，加入Lugol溶液進(jìn)行固定，然后使用Nikon E-Ci顯微鏡進(jìn)行物種鑒定，參考文獻(xiàn)[5-8].定量樣品采集和分析：用1 L廣口瓶取樣，滴加Lugol溶液固定，避光處靜置96 h，濃縮至30 mL.浮游植物定量采用面積為20 mm×20 mm，容量為0.1 mL的浮游植物計(jì)數(shù)框進(jìn)行計(jì)數(shù).通過Shannon 多樣性指數(shù)(H)，物種豐富度(S)和均勻度(J)計(jì)算物種的多樣性情況.

1.4 種間關(guān)聯(lián)分析

因每個(gè)季節(jié)物種數(shù)量和優(yōu)勢(shì)種所占比例不同，本研究春季選頻率大于60%的24個(gè)物種，夏季選頻率大于40%的20個(gè)物種，秋季選頻率大于40%的19個(gè)物種，冬季選頻率大于40%的22個(gè)物種進(jìn)行種對(duì)聯(lián)結(jié)性分析.通過基于2×2列聯(lián)表的χ2值、種間聯(lián)結(jié)系數(shù)(CA)以及成對(duì)物種的Pearson相關(guān)分析來衡量物種間的種間關(guān)聯(lián)情況.通過Yates的連續(xù)性公式計(jì)算χ2值[9]，其中χ2<3.814 為不顯著種間聯(lián)結(jié)，3.814≤χ2<6.635 為顯著種間聯(lián)結(jié),χ2≥6.635為極顯著種間聯(lián)結(jié).

種間聯(lián)結(jié)系數(shù)CA的計(jì)算公式：

(1)

(2)

(3)

其中a是成對(duì)物種都出現(xiàn)的樣方數(shù)，d是成對(duì)物種都不出現(xiàn)的樣方數(shù)，b是僅有物種B出現(xiàn)的樣方數(shù)，c是僅有物種A出現(xiàn)的樣方數(shù).

CA的取值范圍在[-1,1]之間，CA越靠近1，正聯(lián)結(jié)性越強(qiáng)，CA越靠近-1，負(fù)聯(lián)結(jié)性越強(qiáng)，CA等于0，物種對(duì)之間完全獨(dú)立.CA≥0.67(正聯(lián)結(jié)程度高)、0.67>CA>0(正聯(lián)結(jié)程度弱)，CA=0(無聯(lián)結(jié))，-0.67

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

用Excel對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)；用Origin 2019進(jìn)行作圖；RStudio 的spaa包計(jì)算種間CA分析群落種間關(guān)聯(lián)情況以及繪制CA值半矩陣圖；SPSS 22.0 軟件分析種間關(guān)聯(lián)與環(huán)境因子間的相關(guān)性.

2 結(jié)果與分析

2.1 水體理化特征

2.2 群落結(jié)構(gòu)

花溪河全年檢測(cè)出藍(lán)藻、綠藻、硅藻、裸藻、甲藻、隱藻、金藻和黃藻共8門藻類(附圖Ⅰ)，主要以硅藻和綠藻為主，均占總物種數(shù)的32.6%；裸藻和藍(lán)藻物種數(shù)量占比分別為16.6%和9.2%.春夏季節(jié)物種數(shù)相對(duì)高于秋冬季節(jié)，5月份達(dá)到最大值197種，2月份最低為140種.對(duì)不同月份藻密度分析發(fā)現(xiàn)2月份、5至9月份藻密度相對(duì)較高，在7月份達(dá)到最高密度.S1和S2樣點(diǎn)在一年中藻密度明顯高于其他樣點(diǎn)，5月至10月份藻密度較高，在7月份S2樣點(diǎn)藻密度最高達(dá)2.85×108L-1.

2.3 種間關(guān)聯(lián)性

Pearson相關(guān)性分析中，春季物種對(duì)不顯著相關(guān)(P>0.05)占比高達(dá)85.6%，夏季、秋季和冬季的種間關(guān)聯(lián)不顯著相關(guān)(P>0.05)比例分別為80.1%，80%和80.1%，均大于顯著相關(guān)的物種對(duì)數(shù)(附表Ⅰ).4個(gè)季節(jié)大多數(shù)物種對(duì)的種間關(guān)聯(lián)未達(dá)到顯著相關(guān)水平，物種對(duì)間的聯(lián)結(jié)性總體呈松散狀況.此外，花溪河物種種間關(guān)聯(lián)情況以χ2檢驗(yàn)為基礎(chǔ)，結(jié)合CA來定量分析.其中，春季不顯著聯(lián)結(jié)性種對(duì)有452對(duì)，占78.4%，只有11.7%表現(xiàn)為極顯著性聯(lián)結(jié).夏季不顯著聯(lián)結(jié)物種對(duì)有336對(duì)，占83.9%，只有10.2%表現(xiàn)為極顯著性聯(lián)結(jié).同樣，秋季和冬季種對(duì)間不顯著聯(lián)結(jié)比例分別為83%和74% (附表Ⅰ) .Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)均表明物種對(duì)間聯(lián)結(jié)性不顯著.

花溪河浮游植物4個(gè)季節(jié)主要物種間的種間聯(lián)結(jié)系數(shù)CA半矩陣圖(圖3)可以看出，春季聯(lián)結(jié)程度弱和無聯(lián)結(jié)藻類物種對(duì)數(shù)有占87.7%，物種對(duì)之間聯(lián)結(jié)程度弱，種間聯(lián)結(jié)系數(shù)CA≥0.67的種對(duì)數(shù)有31對(duì)，占全部對(duì)數(shù)10.3%( 圖3(a)).其中尖針桿藻(Synedraacusvar)與顆粒直鏈藻(Melosiragranulata),菱形藻(Nitzschiasp.),四尾柵藻(Scenedesmusquadricauda)以及假魚腥藻(Pseudoanabaenasp.)等大多說藻類的正聯(lián)結(jié)程度高(CA≥0.67).CA≤-0.67 的藻類物種只有6對(duì).這6對(duì)之間表現(xiàn)為極強(qiáng)的負(fù)聯(lián)結(jié)性，占比為2%，比如，尖針桿藻(S.acusvar)與舟形藻(Naviculasp.). 夏季種間聯(lián)結(jié)系數(shù)CA≥0.67的物種對(duì)數(shù)有9對(duì)，占全部對(duì)數(shù)4.3%，其中雙對(duì)柵藻(Scenedesmusbijuba)與雙棘柵藻(Scenedesmusspinosus)、四尾柵藻(S.quadricauda)、梅尼小環(huán)藻(Cyclotellameneghiniana)之間的正聯(lián)結(jié)程度高.水華束絲藻(Aphanizomenonflos-aquae)與四尾柵藻(S.quadricauda)、尖針桿藻(S.acus)物種對(duì)負(fù)聯(lián)結(jié)程度高， ( 圖3(b)).

秋季菱形藻(N.sp.)與尖針桿藻(S.acusvar)，二形柵藻(Scenedesmusdimorphus)與小環(huán)藻(Cyclotellasp.)、尖針桿藻(S.acusvar)等物種之間的正聯(lián)結(jié)程度高(CA≥0.67).尖針桿藻(S.acusvar)與四足十字藻(Crucigeniatetrapedia)負(fù)聯(lián)結(jié)程度高(CA≤-0.67)( 圖3(c)).冬季浮游藻類尖針桿藻(S.acusvar)與其他物種間正聯(lián)結(jié)程度和春季情況類似，即與大部分藻種之間的正聯(lián)結(jié)程度都很高，總的CA≥0.67共有28對(duì)，占11.1%.水華束絲藻(A.flos-aquae)與四足十字藻(C.tetrapedia)物種對(duì)負(fù)聯(lián)結(jié)程度高(CA≤-0.67) ( 圖3(d)).

2.4 種間關(guān)聯(lián)影響因子

為探究影響不同程度種間關(guān)聯(lián)的環(huán)境因子，將環(huán)境因子變化量與種間關(guān)聯(lián)變化量進(jìn)行逐步線性回歸分析，探究出引起浮游植物種間關(guān)聯(lián)變化的主要環(huán)境因子.種間關(guān)聯(lián)與環(huán)境因子之間的逐步回歸關(guān)系(附表Ⅱ).CA≥0.67，0.67>CA>0和CA=0這三種情況與環(huán)境因子之間的逐步回歸系數(shù)依次為0.786，0.738和0.615，P值均小于 0. 05.其中，物種均勻度的變化是CA≥0.67和0.67>CA>0兩種情況主要影響因子.葉綠素a的變化是影響物種間無聯(lián)結(jié)(CA=0)主要生物因子，兩者的線性回歸關(guān)系為：Y=-0.01+0.003CA(Y:Chl.a,P=0.033).負(fù)聯(lián)結(jié)(0>CA>-0.67和CA≤-0.67)情況未篩選出主要的影響因子.

在逐步線性回歸定量分析種間關(guān)聯(lián)與環(huán)境因子關(guān)系的基礎(chǔ)上，通過主成分分析，剔除對(duì)總體種間關(guān)聯(lián)影響較小的環(huán)境因子后，蒙特卡羅置換檢驗(yàn)結(jié)果顯示，花溪河物種均勻度變化對(duì)種間關(guān)聯(lián)的貢獻(xiàn)值為56.7%，高錳酸鹽指數(shù)變化對(duì)種間關(guān)聯(lián)的貢獻(xiàn)值為11.7%，而總氮、電導(dǎo)率、葉綠素a、硝態(tài)氮和透明度等變化對(duì)種間關(guān)聯(lián)的貢獻(xiàn)值分別為9.9%，5.1%，3.9%，3.4%和2.8%，這7種環(huán)境因子對(duì)種間關(guān)聯(lián)的貢獻(xiàn)值高達(dá)93.5%，是影響種間關(guān)聯(lián)的主要因子.種間關(guān)聯(lián)與環(huán)境因子進(jìn)行 PCA二維排序分析中(圖4)，CA≥0.67(正聯(lián)結(jié)程度高)與透明度、高錳酸鹽指數(shù)、電導(dǎo)率、總磷、電導(dǎo)率和物種均勻度具有較強(qiáng)相關(guān).0.67>CA>0(正聯(lián)結(jié)程度弱)與硝態(tài)氮、總氮、氧化還原電位和物種均勻度有較強(qiáng)相關(guān).CA=0(正聯(lián)結(jié))與葉綠素a具有較強(qiáng)的相關(guān)，這與逐步線性回歸結(jié)果一致.

3 討 論

3.1 浮游植物種間關(guān)聯(lián)分析

種對(duì)聯(lián)結(jié)主要是反應(yīng)物種在空間分布上的關(guān)聯(lián)性[9]，物種關(guān)系外在的表現(xiàn)可以通過種間關(guān)系描述，體現(xiàn)群落的現(xiàn)狀或群落內(nèi)物種種間競(jìng)爭(zhēng)的結(jié)果[10].花溪河浮游植物四個(gè)季節(jié)的種對(duì)聯(lián)結(jié)性檢驗(yàn)(Pearson相關(guān)性和χ2檢驗(yàn))結(jié)果中，種對(duì)不顯著聯(lián)結(jié)所占的比例遠(yuǎn)大于顯著性聯(lián)結(jié)所占比例，種對(duì)間不顯著聯(lián)結(jié)物種對(duì)比例由高到低為：夏季(83.9%)，秋季(83.0%)，春季(78.4%)，冬季(74.0%).夏季的不顯著聯(lián)結(jié)物種對(duì)最多.這可能與夏季藻類水華暴發(fā)相關(guān)，其主要因由是藻類現(xiàn)存量較高，物種多樣性較單一引起.已有研究發(fā)現(xiàn)物種種間競(jìng)爭(zhēng)加強(qiáng)，種群結(jié)構(gòu)容易發(fā)生變化；冬季種間不顯著聯(lián)結(jié)最小，可能與冬季水溫過低和營養(yǎng)鹽含量少限制了藻類生長，物種組成少，藻密度低群落相對(duì)穩(wěn)定有關(guān)[11].

種間聯(lián)結(jié)可反映出群落結(jié)構(gòu)和數(shù)量特點(diǎn)，與群落的演化形成緊密相關(guān)，是種間相互關(guān)系的表現(xiàn)形式[12].種間CA值半矩陣圖中，四個(gè)季節(jié)的弱聯(lián)結(jié)性顯著大于其他聯(lián)結(jié)程度，物種間多為相互獨(dú)立，群落結(jié)構(gòu)松散聯(lián)結(jié)不緊密.對(duì)比南海湖浮游植物種間聯(lián)結(jié)性多為弱聯(lián)結(jié)或無聯(lián)結(jié)，可能是在空間分布上的獨(dú)立性造成的[13].花溪河浮游植物種間多為弱聯(lián)結(jié)的主要原因可能是優(yōu)勢(shì)種間生態(tài)位重疊少，物種間獨(dú)立程度高.物種對(duì)環(huán)境要求的趨同性、趨異性和物種在生活型、生態(tài)型上的差異是影響種間關(guān)聯(lián)的重要因素[14].其中，正聯(lián)結(jié)物種對(duì)生境要求相似，物種間因生物或非生物因子限制互相依存生長在一起，生態(tài)位重疊程度高.負(fù)聯(lián)結(jié)物種對(duì)由于對(duì)生境要求差異較大，或因?yàn)榉N間競(jìng)爭(zhēng)相互排斥，導(dǎo)致物種間傾向于分離狀態(tài)，生態(tài)位重疊少，最終表現(xiàn)為負(fù)聯(lián)結(jié)(CA<0).負(fù)聯(lián)結(jié)程度越高，因種間競(jìng)爭(zhēng)導(dǎo)致物種消失的概率越大.在春季和冬季，尖針桿藻(S.acusvar)與菱形藻(N.sp.)和梅尼小環(huán)藻(C.meneghiniana)等種間正聯(lián)結(jié)性程度高，這與它們對(duì)生活環(huán)境要求、生態(tài)策略和生態(tài)功能相似有關(guān).在廣泛使用的FG(Functional Groups)法中，針桿藻(Synedrasp.)、菱形藻(Nitzschiasp.)、小環(huán)藻(Cyclotellasp.)等都屬于功能群D，生境為窮營養(yǎng)，耐沖刷，較渾濁的淺水水體[15]. 舟形藻(Naviculasp.)屬于功能群MP，生境為淺水湖泊，頻繁干擾的渾濁型水體.不同功能群物種間正聯(lián)結(jié)程度弱，傾向于負(fù)聯(lián)結(jié).這也是尖針桿藻(S.acusvar)與舟形藻(Naviculasp.)負(fù)聯(lián)結(jié)程度高的重要原因.

種間聯(lián)結(jié)程度對(duì)研究群落的動(dòng)態(tài)演替具有重要意義，不僅能體現(xiàn)目前群落結(jié)構(gòu)，還可以反映群落未來的演替方向和趨勢(shì).一般正向演替中，演替初期，群落種間聯(lián)結(jié)多為負(fù)聯(lián)結(jié)，隨著向頂級(jí)演替發(fā)展，群落穩(wěn)定性增加，種對(duì)正聯(lián)結(jié)比例增加，在一定時(shí)間內(nèi)形成穩(wěn)定狀況.花溪河浮游植物四個(gè)季節(jié)種間弱聯(lián)結(jié)占比大，物種間獨(dú)立性較強(qiáng)，生境要求有差異，生態(tài)位重疊小.因此花溪河浮游植物群落結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，還需要較長時(shí)間的演替才能達(dá)到多物種共存的穩(wěn)定狀況.這與南四湖浮游植植物種間負(fù)聯(lián)結(jié)最大，群落結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性差的研究結(jié)果一致[16].

3.2 種間關(guān)聯(lián)與環(huán)境因子

種間競(jìng)爭(zhēng)作用會(huì)促進(jìn)物種均勻度的變化[17].花溪河浮游植物總體種間關(guān)聯(lián)與環(huán)境因子的PCA排序結(jié)果中物種均勻度對(duì)種間關(guān)聯(lián)貢獻(xiàn)值高達(dá)74.1%，不同的種間關(guān)聯(lián)程度與環(huán)境因子關(guān)系的逐步線性回歸分析中發(fā)現(xiàn)，物種均勻度與CA≥0.67和0.67>CA>0均具有較強(qiáng)的正相關(guān)(附表Ⅱ).表明了物種均勻度是維持花溪河浮游植物種間關(guān)系極其重要的因素.高錳酸鹽指數(shù)反映水體被還原性物質(zhì)污染的程度，能體現(xiàn)水中所含有機(jī)物的多少，對(duì)浮游植物群落結(jié)構(gòu)組成具有較大影響[18].本研究中高錳酸鹽指數(shù)對(duì)種間關(guān)聯(lián)的貢獻(xiàn)值為11.7%,僅次于物種均勻度，主要與CA≥0.67的關(guān)聯(lián)性最強(qiáng)(圖4)，高錳酸鹽指數(shù)也是影響浮游植物種間關(guān)系不可忽視的因子.

葉綠素a含量和不同門類浮游植物密切相關(guān)，浮游植物優(yōu)勢(shì)種的變更會(huì)引起葉綠素a濃度也發(fā)生變化.花溪河浮游植物不同季節(jié)各優(yōu)勢(shì)種之間獨(dú)立性較強(qiáng)，有著自己的生態(tài)位，種間多為無聯(lián)結(jié)，而葉綠素a含量隨優(yōu)勢(shì)種的變化而變化，所以呈現(xiàn)出葉綠素a與種間無聯(lián)結(jié)(CA=0)呈Y=-0.01+0.003χ(P=0.033)的線性回歸關(guān)系.整體而言，三峽庫區(qū)浮游植物種間關(guān)聯(lián)并非某一種因子作用的結(jié)果，而是受生物因子和非生物因子的綜合影響.

附 錄

附圖、附表見電子版(DOI:10.16366/j.cnki.1000-2367.2022.05.015).