韓 斌，高 艷，賈燕青，白崇生，薛九州

（榆林市畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心，陜西榆林 719000）

榆林是陜西省生豬養(yǎng)殖大市，生豬養(yǎng)殖是當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的重要手段，也是增加農(nóng)民收入的主要來源，但是偽狂犬?。╬seudorabies，PR）等豬群疫病對生豬健康養(yǎng)殖造成了極大威脅。PR 是由偽狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的豬急性傳染病，是影響世界養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病之一，可呈暴發(fā)性流行，引起妊娠母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎，公豬不育，育肥豬呼吸困難、生長停滯，新生仔豬神經(jīng)癥狀、嘔吐、腹瀉等，如果治療不及時還可誘發(fā)其他疫病，造成大量死亡，給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟損失。針對PR，國內(nèi)大多規(guī)?；i場選用PRVgE基因缺失疫苗進行防控，防控成效顯著，僅偶有分離到病毒的報道[1-3]。但2011 年以后，國內(nèi)許多使用基因缺失疫苗的規(guī)模場又出現(xiàn)了PR 流行[4-5]，因此許多規(guī)模豬場開始進行PR 凈化。為掌握榆林市豬群PR 流行情況，以便科學(xué)制定凈化方案，2014—2015 年通過問卷調(diào)查與實驗室血清學(xué)檢測相結(jié)合方法，對榆林市豬群的PR 流行情況進行了調(diào)研。2016—2020 年選取榆林A 縣（該縣養(yǎng)殖規(guī)模適中，且根據(jù)前期調(diào)查，認(rèn)為其PR 流行情況可反映榆林市的平均流行水平）作為示范區(qū)，進行了PRV 凈化方案示范建設(shè)。

1 材料與方法

1.1 問卷調(diào)查

制定豬群PR 流行病學(xué)問卷調(diào)查表，內(nèi)容包括以下幾類：

（1）不同生長階段豬群PR 流行情況，按育肥豬、母豬、種豬、仔豬4 個階段分類調(diào)查，涉及母豬流產(chǎn)、新生仔豬死亡、育肥豬生長發(fā)育等情況，以及發(fā)病豬臨床癥狀、疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律等。

（2）豬群PR 免疫情況，涉及是否進行疫苗免疫以及疫苗種類、疫苗來源、免疫劑量、免疫程序、免疫范圍等。

（3）養(yǎng)殖場戶引種情況，涉及是否引種、種畜來源，以及引種時是否進行過疫病檢測。

1.2 采樣檢測

1.2.1 采樣設(shè)計 2014—2015 年，以全市預(yù)估年平均養(yǎng)殖量為抽樣框，按照預(yù)期流行率10%、可接受誤差5%、置信水平95%，用Epi info 計算得出。在全市2 640 個規(guī)模豬場（存欄量大于100 頭）中，隨機抽檢132 個，在全市3 360 戶散養(yǎng)戶（存欄量小于100 頭）中，隨機抽檢散養(yǎng)戶168 戶。其中：規(guī)模場按8.5%的隨機抽樣率，采集豬血清4 200份；散養(yǎng)戶每戶隨機采集5 份，共抽檢840 份，共采集豬血清樣品5 040 份。

1.2.2 抗體檢測 對采集的血清樣品，使用相應(yīng)的ELISA 檢測試劑盒進行PRV-gB 及gE 抗體檢測，嚴(yán)格參照試劑盒說明書進行操作。PRV-gB 抗體檢測試劑盒、PRV-gE 抗體檢測試劑盒，均由IDEXX提供。

1.3 凈化示范

1.3.1 凈化方案 選取A 縣進行PRV 凈化示范建設(shè)。根據(jù)前期問卷調(diào)研結(jié)果與gE 抗體檢測情況，將該縣豬場及散養(yǎng)戶分為8 類，在“臨床調(diào)查、實驗室檢測、免疫、淘汰、管控”的總體方案[6]下，選擇略有不同的凈化程序：（1）抽檢樣品gE 抗體全部陰性的規(guī)模場，對其種豬群逐頭檢測，所有血清樣品均為陰性，認(rèn)為種豬群為PRV 陰性群，實行“監(jiān)測-控制”方案。（2）抽檢血清樣品gE抗體陽性率低于10%的規(guī)模場，實行“檢測淘汰-監(jiān)測-控制”的方案。（3）抽檢血清樣品gE 抗體陽性率為 10%～20%的規(guī)模場，實行“強制免疫-檢測淘汰-監(jiān)測-控制”方案。（4）抽檢血清樣品gE 抗體陽性率為20%～30%的規(guī)模場，實施“強制免疫-部分清群-強制管控”的方案。（5）抽檢血清樣品gE 抗體陽性率大于30%的規(guī)模場，實行“全部清群”措施，并做好“強制管控”。（6）對全縣散養(yǎng)戶實行逐戶“強制免疫-檢測淘汰-監(jiān)測-控制”的凈化方案。（7）抽檢發(fā)現(xiàn)gE 抗體陽性的種豬群，實行逐頭采樣檢測，確認(rèn)為抗體陽性的直接淘汰，如種豬群抽檢gE 抗體陽性率在30%以上時，全部清群。（8）對擬選留的后備種豬，分別在進入后備舍前和配種前1 個月檢測gE 抗體，如出現(xiàn)1 次陽性或2 次可疑，作淘汰處理。

1.3.2 監(jiān)控措施 ①提倡自繁自養(yǎng)，如需引種和留種，嚴(yán)格檢疫隔離觀察；②嚴(yán)格控制人員和車輛流通，嚴(yán)把車輛、人員消毒關(guān)，對外來人員進行隔離消毒；③嚴(yán)格按照國家有關(guān)規(guī)定進行病死動物無害化處理；④對飼料、豬舍用具嚴(yán)格把關(guān)，對飼料進行檢疫，對豬舍進行嚴(yán)格消毒，并對環(huán)境樣品進行定期檢測，定期采取防鳥、滅鼠措施，控制PR野毒傳入。

1.3.3 免疫方案 母豬/公豬：每年普免4 次，每次1 頭份。后備母豬：配種前免疫2 次，每次1頭份。仔豬：出生后0～3 d 噴鼻，8～10 周肌注，首免3～4 周后二免，每次1 頭份[8]。免疫用疫苗為c 株P(guān)RVgE基因缺失疫苗，由金宇集團提供。

1.3.4 免疫效果評估 仔豬免疫21 d 后，隨機抽檢30%檢測gB、gE 抗體。當(dāng)gE 抗體陰性時，如果85%的樣品為gB 抗體陽性，即可認(rèn)為群體免疫合格；種豬、后備母豬免疫21 d 后，隨機抽檢30%，如果gE 抗體全為陰性，gB 抗體陽性率達(dá)到75%以上，認(rèn)為群體免疫合格，否則進行二次免疫。

1.3.5 臨床評估與清群 強化免疫后，對有流產(chǎn)以及產(chǎn)死胎和木乃伊胎等癥狀的種母豬全部采樣檢測，gE 抗體陽性或生產(chǎn)性狀較差的母豬立即淘汰；哺乳仔豬有腹瀉、尖叫、轉(zhuǎn)圈及死亡率增加等現(xiàn)象時，進行快速檢測并淘汰陽性豬群；一旦發(fā)現(xiàn)保育豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，育肥豬生長發(fā)育緩慢，以及PRV 相關(guān)呼吸道癥狀豬群，立即檢測并淘汰PRV抗體陽性者。

1.3.6 凈化效果評估 將2017—2020 年A 縣12個規(guī)模場每年所產(chǎn)死胎、木乃伊胎以及弱仔數(shù)進行統(tǒng)計，分別與2014—2016 的平均數(shù)據(jù)進行比較，計算死胎、木乃伊胎、弱仔數(shù)下降比率。

1.3.7 數(shù)據(jù)分析整理 對收集的數(shù)據(jù)，利用Excel軟件進行整理，采用Epi Info 軟件進行關(guān)聯(lián)分析。卡方（χ2）檢驗顯著性水平設(shè)為0.05，即P＜0.05 認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，采用描述性流行病學(xué)方法進行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 問卷調(diào)查

問卷調(diào)查結(jié)果顯示，132 個規(guī)模場中，有58 個規(guī)模場進行過PR 疫苗免疫，免疫豬場占43.94%，注射疫苗均為PRVgE基因缺失疫苗。根據(jù)全市流行病學(xué)調(diào)查結(jié)合檢測結(jié)果及臨床癥狀觀察情況，未免疫組的產(chǎn)死胎窩數(shù)較多，達(dá)到15%左右，流產(chǎn)占4%左右，全窩死胎占2%，免疫組死胎窩數(shù)占2%，流產(chǎn)占1.1%，無全窩死胎現(xiàn)象。

2.2 采樣檢測

2.2.1 總體情況 檢測結(jié)果（表1）顯示：免疫PRVgE基因缺失疫苗的被檢血清gB 抗體陽性率為75.34%，gE 抗體陽性率為8.46%，說明免疫豬群中依然存在PR 野毒感染；未免疫豬群的gB、gE 抗體陽性率分別為26.53%和29.06%，差異不顯著（P＞0.05）。免疫PRVgE基因缺失疫苗的豬群gB 抗體陽性率達(dá)75.34 %，明顯高于未免疫組（26.53%），兩者差異顯著（P＜0.05），說明疫苗免疫起到了一定效果。

表1 免疫與非免疫豬群PRV 抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計

2.2.2 不同生長階段 不同生長階段豬群的PRV-gE 抗體檢測結(jié)果（表2）顯示：仔豬、育肥豬的gE 抗體陽性率分別為34.36%和20.95%，母豬和種公豬的gE 抗體陽性率分別為7.06%和2.88%，仔豬、育肥豬抗體陽性率顯著高于母豬和種公豬（P＜0.05）。

表2 不同生長階段PRV-gE 抗體檢測結(jié)果

2.2.3 不同養(yǎng)殖規(guī)模 不同養(yǎng)殖規(guī)模檢測結(jié)果（表3）顯示：規(guī)模豬場PRV-gE 抗體陽性率為15.40%，散養(yǎng)戶為47.50%，差異顯著（P＜0.05）。

表3 規(guī)模場與散養(yǎng)戶豬群PRV-gE 抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計

2.3 凈化示范

2.3.1 凈化初抗體檢測 2016 年對A 縣所有的12 個規(guī)模場和306 個散養(yǎng)戶進行PRV-gE 抗體檢測，結(jié)果4 個規(guī)模場抽檢樣品gE 抗體全部為陰性，3 個場gE 抗體陽性率低于10%，1 個場gE 抗體陽性率為20%～30%，其余為10%～20%，散養(yǎng)戶gE抗體平均陽性率為38%。

2.3.2 凈化后抗體檢測 至2020 年底，榆林A縣12 個規(guī)模場PRV-gE 抗體陽性全部降為0，平均gB 抗體陽性率為90.00%；306 個散養(yǎng)戶PRV-gE平均抗體陽性降為3.20%，gB 抗體陽性率上升至75.00%。

2.3.3 凈化效果 與2014—2016 年相比，2017年以后，母豬流產(chǎn)率、產(chǎn)死胎率及仔豬死亡率明顯降低，306 個散養(yǎng)戶下降比率達(dá)到87.0%。規(guī)模場的具體數(shù)據(jù)見表4。

表4 2017—2020 年規(guī)模場死胎、木乃伊胎、弱仔數(shù)與凈化前對比情況

4 討論

4.1 總體情況

根據(jù)榆林市檢測數(shù)據(jù)，結(jié)合臨床調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，免疫了PRVgE基因缺失疫苗組的gB 抗體陽性率明顯高于未免疫組，但是已經(jīng)進行過免疫的一些規(guī)模豬場依然會有PR 野毒流行，說明疫苗免疫雖能起到一定的保護作用，卻不能完全抵御野毒感染。主要原因可能有以下幾方面：疫苗免疫不規(guī)范，疫苗接種次數(shù)少；豬場免疫不全面，不免疫育肥豬；豬場引種復(fù)雜，從PR 陽性場引種，引種之前未檢疫[7]，或是疫苗本身保護性有限等。

4.2 不同生長階段

不同生長階段豬群的感染情況不同，根據(jù)試驗結(jié)果，仔豬、育肥豬感染率比其他階段高。根據(jù)檢測數(shù)據(jù)，結(jié)合問卷調(diào)查分析，原因主要有以下幾方面：大多豬場比較重視母豬、后備母豬及種公豬的免疫，且免疫程序較為規(guī)范；仔豬和育肥豬免疫較少，或是不進行PR 免疫；部分豬場從其他場購買仔豬進行育肥，既不檢測也不進行PR 免疫。

4.3 不同養(yǎng)殖規(guī)模

榆林市不同區(qū)域均有PR 流行，其中主要在散養(yǎng)戶中流行。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，這些養(yǎng)殖戶主要進行豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合癥等疫病的免疫，均未進行過PR 免疫，說明散養(yǎng)戶防疫觀念不強，只對政府要求免疫或是政府提供疫苗的動物疫病進行免疫，而對PR 等非政府強制免疫病種不重視，因此散養(yǎng)戶的疫病防控與健康養(yǎng)殖觀念還需進一步加強[8]。

4.4 凈化示范

選取榆林A 縣進行PR 凈化示范建設(shè)研究，通過臨床調(diào)查、實驗室檢測，劃分場群類型，分類實施不同的凈化和免疫方案等有效措施，取得了較好效果，豬群PRV-gE 抗體陽性率大幅下降，母豬產(chǎn)死胎、木乃伊、弱仔數(shù)明顯下降，整個縣區(qū)的生豬產(chǎn)能穩(wěn)步提升。但想要取得PR 凈化成功，首先必須努力做好非洲豬瘟、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合癥、豬口蹄疫等疫病的防控，特別是防止豬流行性腹瀉等疾病發(fā)生與蔓延；其次需要監(jiān)管部門全力配合，政府加大資金投入。

就一定區(qū)域范圍而言，采用上述凈化方案，結(jié)合種豬群更新，可在 3～4 年內(nèi)實現(xiàn)PR 凈化。但是榆林市幅員遼闊，養(yǎng)殖量大，養(yǎng)殖環(huán)境復(fù)雜，市區(qū)間的豬群調(diào)運較為頻繁，做到整個地區(qū)的凈化壓力較大。目前榆林市發(fā)生的各類疫病與市區(qū)間販運豬只車輛攜帶病毒有很大關(guān)系[2]。因此，應(yīng)依靠管理部門協(xié)助，嚴(yán)格監(jiān)管生豬及飼料等的跨區(qū)域調(diào)運，有效阻斷病原傳播，建立并完善整個地區(qū)乃至全社會的養(yǎng)殖生物安全體系。

在凈化工作中，養(yǎng)殖場（戶）往往只考慮到眼前利潤，不愿淘汰帶毒豬群，這給凈化工作增加了難度，所以日后的推廣工作需要從長遠(yuǎn)考慮，不斷增加資金投入。

綜上所述，榆林市A 縣PR 凈化試點取得了較好成效，凈化經(jīng)驗可在全市推廣，但各地應(yīng)按照當(dāng)?shù)貙嶋H情況，在榆林市的統(tǒng)一指導(dǎo)下，制定更加合理、可控的凈化方案。